Способ определения сенсибилизации организма

 

Изобретение относится к медицине, а именно к иммунологии, и может быть использовано при обследовании различных групп населения, в частности при массовых профилактических осмотрах. Целью изобретения является повышение точности исследования . Поставленная цель достигается тем, что сыворотку крови человека инкубируют с лейкоцитами морской свинки, определяют индекс миграции лейкоцитов в РТМЛ и при его значениях в пределах 0,8- 1,0 диагносцируют отсутствие сенсибилизации, 0,5-0,79 - наличие умеренной сенсибилизации, менее 0,5 - наличие сильной сенсибилизации организма.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (я)л G 01 N 33/53

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ зом

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 4735486/14 (22) 12.07.89 (46) 30.03.92,Бюл. ¹ 12 (71) Донецкий медицинский институт им.

M.Ãoðüêîão

{72) Л.И.Слюсарь, В.Г.Курилова. М,В,Савченко, А;А.Сохин и Ю.Н.Талакин (53) 615.375 (088 82 (56) Авторское свидетельство СССР

N - 1603300, кл. G 01 N 33/53, 1988, (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ СЕНСИБИЛИЗАЦИИ ОРГАНИЗМА (57) Изобретение относится к медицине, а именно к иммунологии, и может быть исИзобретение относится к медицине, а именно к иммунологии, и может быть использовано при обследовании различных групп населения, в частности при массовых профилактических осмотрах.

Цель изобретения — повышение точности исследования, Способ осуществляют следующим обраГотовят гелевые блоки из 1 — 2%-ного раствора агара или агарозы с добавлением среды 199 и сыворотки крови крупного ро" гатого скота. Толщина слоя геля 1 — 3 мм. В нем проделывают лунки диаметром 2-5 мм.

Сыворотку крови обследуемого человека прогревают 30 — 40 мин при 56 — 58 С, после чего она может храниться в течение длительного времени. Из гепаринизированной крови морских свинок выделяют лейковзвесь, трижды отмывают клетки питательной средой, По 0,05-0,1 мл лейковэвеси морских свинок помещают в две пробирки. В

„„ АХ 1723523 А1 пользовано при обследовании различных групп населения, в частности при массовых профилактических осмотрах. Целью изобретения является повышение точности исследования. Поставленная цель достигается тем, что сыворотку крови человека инкубируют с лейкоцитами морской свинки, определяют индекс миграции лейкоцитов в

РТМЛ и при его значениях в пределах 0,8—

1,0 диагносцируют отсутствие сенсибилизации, 0,5 — 0,79 — наличие умеренной сенсибилизации, менее 0,5 — наличие сильной сенсибилизации организма. одну добавляют исследуемую сыворотку крови человека, в другую (контроль) — равный объем среды 199. По 2 — 5 мкл из каждой пробирки помещают в лунки гелевого блока.

Затем эти блоки во влажной камере инкубируют при 37 С в течение 18 — 24 ч, после чего лейкоциты фиксируют, удаляют гель, окрашивают зоны миграции лейкоцитов и определяют индекс миграции (ИМ) по формуле

ИМ= $, к где S<> — площадь зоны миграции лейкоцитов в опыте;

S» — площадь зоны миграции лейкоцитов в контроле, При величине ИМ в пределах 0,8 — 1,0 констатируют отсутствие сенсибилизации, при величине ИМ в пределах 0,5 — 0,79 диагносцируют наличие умеренной сенсибилизации и при величине менее 0,5 — наличие сильной сенсибилизации, 1723523

Пример 1. Беременная Б., 25 лет, история родов N 243, поступила в клинику с диагнозом, беременность II — 37 — 38 недель, сужение таза lстепени,,нефропатия I степени. В момент поступления АД=130/90, 140/80 (исходное АД до поступления беременности 110/70, 120/80}, постозность нижних конечностей, белок в моче в виде следов. Результаты исследования в РТМЛ сенсибилизации к плэцентарному антигену—

0,88, почечному — 0,75, печеночному — 0,81.

При исследовании сыворотки крови предлагаемым способом ИМ=0,70, что указывает на наличие умеренной сенсибилизации организма.

Пример 2. Беременная 3., 33-х лет, история родов N 126, поступила в клинику с диагнозом: беременность I — 36-37 недель, нефропатия Ill степени, возрастная первородящая. В момент поступления

АД=170/110, 180/100. Выраженные отеки нижних конечностей и передней брюшной стенки, белок в моче 1,15 г/л, Резульгаты исследования B PTMJl сенсибилизации к плацентарному антигену — 0,65, почечному—

0,49, печеночному — 0,49.

При исследовании сыворотки крови предлагаемым способом ИМ=0,27, что позволяет диагносцировать наличие сильной сенсибилизэции организма.

Пример 3. Обследование во время профилактического осмотра сотрудницы КБ завода "Красный химик" С-ой, 27 лет, хроническими заболеваниями не страдает, жалоб нет, диагноз; здорова.

При исследовании сыворотки крови предлагаемым способом ИМ=0,87, что указывает на отсутствие сенсибилизации организма.

Точность результатов исследований в предлагаемом способе определяли в серии опытов. Объектом исследования были сыворотки крови женщин с нормальным течением беременности и беременных с токсикозом I — II степени второй половины беременности, поступивших в родильный дом N 1 г.Донецка, а также сыворотки кройи сотрудников Ленинградского завода "Красный химик", подвергавшихся воздействию профессиональных вредностей, в частности связанных с производством марганца и кобальта (стаж работы более 5 лет), и ИТР этого предприятия„не связаннь х с производственными вредностями, не состоящих на диспансерном учете по поводу какого-либо заболевания и на момент обследования клинически здоровых (контрольная группа).

При нормальном течении беременности (отсутствие клиники осложнений) у 11 женщин (73,3 ) с помощью предлагаемого спо5

55 соба выявлялась умеренная сенсибилизация (ИМ=0,5-0,8) и только у четырех беременных (26,7 ь) определялась сильная сенсибилизация (ИМ < 0,5). При исследовании специфической сенсибилизации у женщин с

ИМ < 0,5 к антигенам плаценты, печени и почек в PTMfl отмечалась сенсибилизация к исследуемым антигенам (ИМ < 0,8), Полученные результаты позволяют сделать вывод о возможности использования предлагаемого способа для диагностики осложнений беременности доклинической стадии. Умеренная сенсибилизация у женщин с нормальным течением беременности, выявляемая предлагаемым способом, объясняется тем, что беременность сопровождается сенсибилизацией организма женщины изоантигенами плода.

У беременных с клиникой токсикоза сильная сенсибилизация определялась. в

72,7 случаев, а у остальных женщин — в пределах умеренной. При исследовании в

РТМЛ сенсибилизация к антигенам плаценты, печени и почек у всех этих женщин отмечалась умеренная и сильная сенсибилизация к исследуемым антигенам.

Обследование рабочих, связанных с профессиональными вредностями, позволило выявить сильную степень сенсибилизации организма у 56 и умеренную 44 рабочих, связанных с производством марганца, среди рабочих, связанных с производством кобальта, сильная сенсибилизация организма выявлена в 3,7 случаев, умеренная в7,,4 .

При исследовании контрольной группы сенсибилизация не выявлялась ни в одном случае, что свидетельствует о специфичности метода (до 100 ) и его пригодности для определения сенсибилизации одновременно к нескольким антигенам или неизвестному (неизвестным) антигенам.

При использовании предлагаемого способа по сравнению с прототипом повышается точность исследований, в частности если способ-прототип позволяет выявлять сенсибилизацию лишь в 85о случаев, то предлагаемый способ позволяет выявлять сенсибилизированных лиц с точностью до

100, кроме того, предлагаемый способ позволяет не только выявлять сенсибилизацию организма, но и определять уровень сенсибилизации (умеренная, сильная), что значительно расширяет возможность его использования в практике.

Формула изобретения

Способ определения сенсибилизации организма, включающий забор крови, выделение сыворотки с последующей ее инкубацией, отличающийся тем, что, с целью

1723523

Составитель В,Литовченко

Техред М.Моргентал Корректор Н.Король

Редактор Н,Шитев

Заказ 1062 Тираж Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб„4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул.Гагарина, 101 повышения точности способа. сыворотку ин кубируют с лейкоцитами морской свинки, ставят реакцию торможения миграции лейкоцитов, вычисляют индекс миграции и при его значении 0,5 — 0,79 определяют умеренную сенсибилизацию организма, при значении ниже 0,5 — выраженную сенсибилизацию.