Способ получения препарата желчегонного действия

 

Изобретение относится к медицине, а именно к химико-фармацевтической промышленности , и касается способа получения препарата желчегонного действия Целью является увеличение выхода и упрощение технологии. Сущность изобретения заключается в экстракции травы ландыша 80%-ным этанолом, упаривании экстракта обработке его смесью галогенпроизводного углеводорода с этанолом, разбавлении водой до соотношения 1.2-2,4 растительно о сырья к воде, очистке посредством экстракции бутанолом при соотношении фаз 1.0,6- 0,8, промывании бутанольного извлечения водой и упаривании Положительный эффект заключается в повышении выхода от 0,4% по прототипу до 2,2-2,4% от массы растительного сырья 5 табл. (Л С

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (5 )5 А 61 К 35/78

ГОСУДАРСТВЕННОЕ ПАТЕНТНОЕ

ВЕДОМСТВО СССР (ГОСПАТЕНТ СССР) l.

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

О (гд

4 ,О (21) 4919547/14 (22) 18.03,91 (46) 07.12.92. Бюл. ¹ 45 (71) Всесоюзный научно-исследовательский институт химии и технологии лекарственных средств (72) В.В.Зинченко, Н.Ф.Комиссаренко, . В.А.Мдгварели, А.И.Деркач, Э.П.Ступакова, Э.А,Зборовская, Л.Я.Сиренко, Н.С.Никитина и Е .В.Винник (56) Опытно-промышленный регламент производства препарата "Конвафлавин", утвержденн 03.10,80 г, о пытн ый завод

ВНИИХТЛС, г. Харьков. (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ПРЕПАРАТА

ЖЕЛЧЕГОННОГО ДЕЙСТВИЯ

Изобретение относится к медицинской промышленности и касается способа получения из травы ландыша лекарственного средства желчегонного действия, содержащего очищенную сумму флавоноидов.

Известны способы получения препаратов желчегонного деиствия из ландыша дальневосточного.

Наиболее близким является способ получения лекарственного средства желчегонного действия "Конвафлввин", внедренный на опытном заводе ВНИИХТЛС (опытнопромышленный регламент производства препарата "Конвафлавин". Утвержден

3.10.80), Согласно этому способу сухое измельченное растительное сырье экстрагируют

80 этанолом, экстракт упаривают до водного остаткв и обрвбатывают хлороформенно-спиртовой смесью 8:2. Водную фазу

5U,,; 1779379 Al (57) Изобретение относится к медицине. в именно к химико-фармацевтической промышленности, и касается способа получения препарата желчегонного действия.

Целью является увеличение выходэ и упрощение технологии. Сущность изобретения заключается в экстракции травы ландыша

80%-ным этанолом, упаривании экстракта, обработке его смесью галогенпроизводного углеводорода с этанолом, разббввлении водой до соотношения 1:2 — 2,4 растительного сырья к воде, очистке посредством экстракции бутанолом при соотношении фаз ":0,6—

0,8. промывании бутанольного извлечения водой и упаривании. Положительный эффект заключается в повышении выхода от

0,4% по прототипу до 2,2 — 2,4 !, от массы растительного сырья. 5 табл. отделяют, упаривают, смешивэют с пэлиамидным сорбентом и наносят на хроматографическую колонку, заполненную полиамидным сорбентом и дистиллированной водой, После нанесения на колонку сопутствующие вещества элюируют дистиллированной водой, а при появлении положительной пробы нв флавоноиды действующие вещества десорбируют этанольно-водной смесью, элюаты упаривают, высушивают и измельчают. Выход сухого продукта соглэсно регламенту — 0,4 от массы сухого растительного сырья, содержание суммы флавоноидов — 17-29%.

Недостатками известного способа я вляются низкий выход готового продукта из-за больших потерь на стадиях очистки и выделения на полиамидном сорбенте и сложность технологии, требующей больших затрат времени, энергоресурсов, сырья..1779379

Целью предполагаемого изобретения является увеличение выхода готового продукта и упрощение технологии.

Поставленная цель достигается тем, что водное извлечение после обработки смесью галогенпроизводного углеводорода с этанолом упаривают до удаления примеси экстрагентов, разбавляют водой до объема соотношением 1:(2-2,4) к массе растительного сырья и экстрагируют сумму действующих веществ бутанолом при соотношении фаз 1:(0,6 — 0,8), а бутанольное извлечение промывают водой.

Предлагаемый способ заключается в следующем.

Сухую измельченную траву ландыша экстрагируют 80 этанолом, экстракт упа- ривают до водного остатка и обрабатывают смесью галогенпроизводного углеводорода с этанолом. Водную фазу отделяют, упаривают до удаления экстрагентов, разбавляют водой до объема соотношением 1:(2 — 2,4) к массе проэкстрагированного растительного сырья и обрабатывают бутанолом при общем соотношении фаз 1:(0,6 — 0,8). Бутанольные извлечения отделяют, промывают водой, упаривают, высушивают и измельчают. Выход сухого продукта 2,2 — 2,4% от массы сухого растительного сырья, содержание флавоноидов в препарате 22-27, Пример 1. 100 г сухой измельченной травы ландыша экстрагируют 80 -ным этанолом, экстракт упаривают до водного остатка 50 л и обрабатывают 3 раза равным объемом смеси хлористый метилен — этанол

3:1. Водную фазу отделяют, упаривают до удаления экстрагента, разбавляют водой до

200 л и обрабатывают бутанолом при общем соотношении фаз 1;0,6, Бутанольные извлечения отделяют, объединяют и промывают

120 л воды. Водный слой отделяют, а промытое бутанольное извлечение упаривают, высушивают и измельчают, Выход сухого продукта 2,2 кг, т.е, 2,2 от массы сухого растительного сырья.

Пример 2, 100 кг сухой измельченной травы ландыша экстрагируют 80 / -ным этанолом, экстракт упаривают до водного остатка 50 л и обрабатывают 3 раза равным объемом смеси хлористый метилен — этанол

3:1: Водную фазу отделяют, упарива от до удаления экстрагента, разбавляют водой до

220 л и обрабатывают бутанолом при общем соотношении фаз 1,0,7, Бутанольные извлечения отделяют, объединяют и промывают

140 л воды, Водный слой отделяют, а промытое бутанольное извлечение упаривают, высушивают и измельчают. Выход сухого продукта 2,3 кг, т.е, 2,3 от массы сухого растительного сырья.

Пример 3. 100 кг сухой измельченной травы ландыша экстрагируют 80%-ным этанолом, экстракт упаривают до водного остатка 50 л и обрабатывают 3 раза равным

5 обьемом смеси хлористый метилен — зтанол

3:1. Водную фазу отделяют, упаривают до удаления экстрагента, разбавляют водой до

240 л и обрабатывают бутанолом при общем соотношении фаз 1:0,8. Бутанольные извле10 чения отделяют, обьединяют и промывают

150 л воды. Водный слой отделяют, а промытое бутанольное извлечение упаривают, высушивают и измельчают. Выход сухого продукта 2,3 кг, т.е, 2,4 от массы сухого растительного сырья.

Соотношение водной и спиртовой фаз при жидкостной экстракции действующих веществ определено исходя из данных табл. 1.

Из данных табл, 1 следует, что оптимальным соотношением водной и спиртовой фаз при жидкостной экстракции действующих веществ препарата является

1:(0 6 — 0,8), так как эти соотношения дают наиболее высокие выходы сухого продукта.

Соотношение выше 1:0,8 практически не увеличивает выход продукта, а при соотношении ниже 1: 0,6 выход резко снижается.

Согласно требованиям нормативнотехнической документации препарат не должен содержать сердечных гликозидов. С

35

55 этой целью перед жидкостной экстракцией проводится разбавление исходного водного раствора, а полученное бутанольное извлечение промывается водой. Данные по определению соотношения для разбавления водного раствора приведены в табл, 2, из которой следует, что оптимальным разбавлением водного раствора по отношению к массе проэкстрагированного растительного сырья является 1:(2-2,4).

Более низкое соотношение приводит к ухудшению качественных показателей продукта, а более высокое значительно уменьшает выход продукта.

Желчегон ное действие.

Желчегонное действие препарата, полученного по известной и предлагаемой технологии, изучали на крысах обоего пола массой 280-320 г. Животным под нембуталовым наркозом вскрывали брюшную полость, отсепаровывали желчный проток, вводили в него полиэтиленовый катетер, через который желчь оттекала наружу в стаканчик, Регистрацию оттекающей желчи производили каждый час, принимали за исходную величину, а время обозначали "контрольным часом". Для выяснения влияния препаратов на желчеотделительную функцию печени крысам в двенадцатиперстную

1779379 кишку после "контрольного часа" вводили конвафлавин в дозе 80 мг/кг(доза конвафлавина.по предварительным нашим данным вызывающая максимальный желчегонный эффект у крыс). О желчегîííîM действии препарата судили по разнице в объеме желчи, выделенной в каждый последующий час после введения препаратов, по сравнению с "контрольным часом", а также по общему количеству желчи, выделен ному животными за 4 ч. Кроме того, была поставлена контрольная группа опытов. Животным после

"контрольного часа" в 12-перстную кишку вводили 17 раствор бикарбоната натрия в том же объеме, в котором растворяли препарат. На каждую серию поставлено по 8—

11 опытов, Результаты обрабатывали статистически методом вариационной статистики. Полученные результаты приведены s табл. 3.

После введения препаратов желчеотделение у крыс, по сравнению с интактной группой, увеличивается. Максимальное увеличение желчеотделения отмечается, в основном, в первые два часа после введения препаратов и составляетдля конвафлавина, полученного по известной технологии 30,6+

+2,86 . Предлагаемая технология конвафлавина, улучшая его очистку, существенно не изменяет желчегонной активности препарата, После введения всех серий препарата, по сравнению с интактной группой в одинаковой степени увеличивается и общее количество желчи.

Токсичность препарата.

Определение токсичности конвафлавина, полученного по известной и предлагаемой технологии, проводилось в острых опытах на мышах и крысах при однократном введении внутрь в дозе; максимально допустимой по объему (10 r/êã). Полученные данные представлены в табл. 4.

Проведенные исследования показали, что по токсичности препараты, полученные по разным технологиям, не отличаются друг от друга и относятся к нетоксичным веществам.

Сравнительная характеристика технико-экономических показателей известного и предлагаемого способов представлена в табл. 5, из которой следует, что предлагаемый способ уменьшает общее количество технологических операций за счет исключения хроматографического разделения, что,в свою очередь, исключает параллельное целевое производство и стандартизацию полиамидного сорбента (в табл. 3 не отражено), так как в СССР он централизованно не производится, 5

Замена хроматографирования жидкостной экстракцией бутанолом позволяет значительно увеличить выход препарата, упростить технологический процесс за счет сокращения числа стадий и времени его осуществления. а также уменьшить трудозатраты на единицу продукта.

Повышение выхода достигается за счет более полного выделения его жидкостной экстракцией из водного раствора и уменьшения потерь в процессе очистки и выделения в сравнении с хроматографированием.

По предлагаемому способу процесс очистки и выделения действующих веществ сводится к легковоспроизводимой технологической операции жидкостной экстракции вместо хроматографирования, предусматривающего: — использование полиамидного сорбента, полученного из различного исходного сырья и разными методами и из-за этого имеющего колебания в показателях качества, влияющих на содержание суммы флавоноидов в препарате и его выход; — подготовку хроматографических колонн; — отделения водорастворимой фракции; — десорбцию действующих веществ этанолом.

При отсутствии дополнительных капитальных вложений экономический эффект на 1 кг порошка конвафлавина. получаемого по заявленной технологии, составляет

2588,7 руб.

Зкономический эффект на 100 тыс. упаковок конвафлавина составляет 132023,7 руб.

Предлагаемый способ апробирован в промышленных условиях и внедрен в производство на опытном заводе ВНИИХТЛС в

1991 г.

Формула изобретения

Способ получения препарата желчегонного действия, включающий экстракцию травы ландыша 807,,-ным этанолом, упаривание экстракта, обработку его смесью галогенопроизводного углеводорода с этанолом, упаривание водной фазы, выделение целевого продукта и высушивание, отличающийся тем, что, с целью увеличения выхода целевого продукта и упрощения технологии, водное извлечение после обработки его смесью галогенопроизводного углеводорода с этанолом разбавляют водой до соотношения 1:2,0-2,4, а выделение целевого продукта проводят экстракцией бутанолом при соотношении фаз

1:0,6 — 0 .8 с последующей промывкой бутанольного извлечения водой.

1779379

Таблица1

Таблица 2

Зависимость выхода готового продукта и его качества от разбавления водного раствора

Таблица 3

Серия препарата

Количество оттекающей желчи, мл после введения препарата через

Общее количество

Максимальное увеличение, контроль желчи

0, 55 -

»0,02

Интактная группа

О, 59+ О, 59+ 0,61»

+0,02 »0,02 »0,1

2,95»

+0,79

0,82+ О, 71

«0,068 -0,043

0,67»

»0,043

О, 71»

-O, 037

0,19»

»0,011 "

3.70»

»0124

30,6 86ê х

0,62»

0,04

0,66 01075

0,72»

0,059

О, 78 0,052

О, 71»

О, 087

3,49»

0,30

0,18»

0,024"

29,6»

3,44""

0,63+

0,05

0,77» О 77»

0,042" 0,055

0,67 +

0,045

0,71»

О, 038

3, 55 0,02 "

0>20+

0,03""

35,3„»

7, 43""

0,78 - 0,710,052 0,037

0,67»

0,056

0,84 - 0,84»

0,044" 0,052"

3,83+

О 21с4

0,21»

0,029 кк

35,2"

6,34™ различия, статистически достоверные по сравнению с "контрольным часом".

- различия, статистически достоверные по сравнению с интактной группой, 10286 (Известный способ) 40589 (Предлагаемый способ) 71189 (Предлагаемый способ) 81189 (Предлагаемый способ), 0,61»

»0,02

0,65»

»0,059

1779379

Таблица4

Таблица5

По прототипу (согласно регламенту про- По предлагаемому способу изводства конвафлавина, без учета целевого получения полиамидного сорбента) В п/и

I, Технологические операции

Обработка хлористометиленово.-сгирТ0ВоН смесью

Упаривание водного раствора

Приготовление хроматографической колонки

Промывка бутанольного извлечения

Упаривание бутанольного извлечения

9 Приготовление элюента

Высушивание, измельчение

Элюирование действующих веществ

11

149

2,2-2,4 в среднем 0,4

IV, Содержание суммы флавоноидов в Ф

22-27

17-28

Составитель В.Зинченко

Техред М.Моргентал Корректор В.Петраш

Редактор С.Кулакова

Заказ 4401 Тираж Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", r. Ужгород, ул.Гагарина, 101 .г

1 Измельчение растительного сырья

2 Эстракция 80.ь этанолом

3 Упаривание экстракта

4 0бработка хлороформенно-спиртовой смесью

Приготовление смеси водного концентрата с сорбентом

Нанесение на колонку и элюирование водорастворимой фракции

Упаривание элюатом

Высушивание, измельчение

II. Трудозатраты, в

III. Выход продукта, Иэмельчение растительного сырья

Экстракция. 80.ь этанолом

Упаривание экстракта

Упаривание водного раствора

Жидкостная экстракция бутанолом н/ч на 1 кг продукта

45,8 в Ф от массы растительного сырья