Способ получения экстракта корня солодки голой
Использозэмие: п медицине, з именно о г.имико-фармгцевтнческой промышпгнности для получения экстракта корня сшюдш Судност.: эигушенное wp j i измельчают и го«огеиизио1/ют г течение ЯП - 30 мин прм 2000 об/мин гомогонаг экстрагируют физрзпмром Р нгмф&льной среде сначйлл при комнатной температуре, лечм прк пературп 4 - 8°С в течение 18 - 0 ч, да/iee тракт выдерживают Р течеиче 1,0 - 1,5 ч при 37 - J8°C и цсяечой продукт отдептт и мпл-фугир - ванирм не менее 0 мин npi 8000 оГ /мин. табп
ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
К ПАТЕНТУ
Комитет Российской Федерации по патентам и товарным знакам (21) 5061555/14 (22) 13.10.92 (46) 15.10.93 Бал. Иг 37-38 (71) Малое предприятие "Европа" (72) Терновой АП.; Дв триенко Н.В„Михалев В.>0, (73) Малое предприятие "Ьропа" (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕИИЯ SKCTPA)(TA КСРНЛ
СОЛОДКИ (57) Использозэиле: и медицине, 3 ииеиио и кимико-фарчгцевтичесня1 промышленности дпя попу(в) 3Ж (и) ЛЫ800. П (5Ц 5АЯКЯ 7ф чения экстракта корня со оуиз Гудность: выушениое сырье измельчают и гыпге иэиоувт и течение ?Π— 30 мин при 20% о6./мин, гомогпнат экстрагиялОт фнэрастщэом р нел1(алиой среде сначала при кпчиатиой температуре, эстам цж те лпературе 4 - 8 С в течение 18 -- 20 ч, далее экстракт аыдерн<иваат в течение 1,0 — 1,5 и прн 37—
30 г.; и цслевой продукт отдеплвт „=.нтгм угирп-ванием не менее 20 мин при 8000 оГ.,Ъин. 2 табл.
2000800
Изобретение относится к медицине, фармакологии и иммунологии и может быть использовано для приготовления препаратов, применяемых в качестве иммуностимуляторов при ослабленном иммунитете. 5
Известен ряд способов проведения экстрагирования фармакологически активных веществ для приготовления лекарственных препаратов. Сущность их заключается в выделени г" щ щрриэиновой кислоты путем 10 оса еЬ генеральными кислотами на воднЭ Ьифг6Мили водно-ацетоновых вытяжек кЩЭФйолодки„с последующей очисткой путем кристаллизации из уксусной кислоты и спирта. 15
Для приготовления препаратов на основе глицирретиновой кислоты полученную укаэанным способом глицирриэиновую кислоты подвергаю кирлотному гидролизу.
Фармакологическая активность препаратов 20 из глицирретиноюй и глицирризиновой кислоты, полученных указанным способом, существенно отличается от. нативных экстрактов корня солодки. В фармакопии приводится ряд способов приготовления лекарственных препаратов из корня солодки (сложный порошок солодкового корня, солодковый корень, сироп солодковбго корня, экстракт солодкового корня сухой, экстракт солодкового корня густой), однако все они 30 предполагают использование достаточно жестких условий выделения экстрагируемых соединений, направленных прежде всего на повышение выхода глицирризиновой кислоты, и не обеспечивают сохранения 35 нативных свойств остальных биологически активных веществ, входящих в состав экстракта.
Целью изобретения является разработка метода приготовления экстракта солодки, об- 40 ладающего выраженными иммуностимулирующими свойствами.
Указанная цель достигается тем, что для получения экстрактов солодки используются условия, позволяющие сохранить натив- 45 ные свойства биологически активных соединений, способствующие активации факторов неспецифического иммунитета, Сущность изобретения заключается в расширении спектра применения лекарст- 50 венных растений для профилактики и лечения.
Приготовление водного экстракта корня солодки производилось следующим образом, Высушенный до постоянной массы корень, неочищенный от наружного коркового слоя, измельчался сначала на мелкой металлической терке, а затем гомогенезировался в течение 20 мин при 2000 об./мин.
Полученная навеска гомогената из расчета
10% сухой массы переносилась в физиологический раствор (рН 7,0), экстрагирующая взвесь перемешивалась 30 мин при комнатной температуре на магнитной мешалке, а затем помещалась на 18 ч в рефрижератор (+4 С), На следующий день, по истечении 24 ч с начала экстрагирования, раствор термостатировали при 37 С 1 ч, после чего взвесь центрифугировали 20 мин при 8000 об,/мин. Осадок отбрасывался, а надосадочная жидкость использовалась в биологических экспериментах, Анализ содержания экстративных веществ, глицирризиновой кислоты и сопутствующих им других биологически активных соединений, выполненный согласно требованиям государственной фармакопеи и техническим условиям по производству глицирризиновой кислоты (ГОСТ 22840-77), показал, что в экстракт заявляемого способа приготовления переходит 70 — 80% содержащихся в корне солодки биологически активных веществ (см. табл. 1).
Для оценки влияния экстрактов корня солодки на клеточный игуморальный иммунитет крысам со средней массой тела 240 г препарат. вводился внутрижелудочно 4 раза из расчета 2 мл/кг при каждом введении.
Схема введения следующая. Первая два— ежедневно, по одному введению в день, затем двухдневный интервал между последующими двумя ежедневными введениями.
Контрольным животным вводился физиологический раствор. В каждой группе было по 12 животных, Через сутки после четвертого введения все крысы одновременно подвергались тестированию по следующим показателям; фагоцитарная активность нейтрофилов, определяемая по проценту фагоцитирующих клеток, тест-микробом служили Е,coll; активность комплемента сыворотки крови по 50% гемолизу; функциональная активность Т- и В-лимфоцитов, определяемая по проценту роаеткообразующих клеток; уровень естественных антител к "0"сальмонеллезному антигену реакций пассивной гемагглютинации, используя для этих целей стандартный диагностикум
МНИИ эпидемиологии и микробиологии им.
Т, Н. Габричевского.
Резул ьтаты исследований подвергались статической обработке методом критерия
Фишера-Стьюдента. Изменения показателей считали достоверным при P = 0,05. Полученные данные представлены в табл. 2.
Анализ представленных в табл. 2 результатов показывает. что введение животным экстрактов корня солодки оказывает
2000800 положительное влияние на большинство иэ используемых иммунологических тестов, причем занимающих наиболее важное место среди показателей неспецифической резистентности организма. 5
Пример 1. 1кг высушенного до постоянной массы корень, неочищенный от наружного коркового слоя. измельчают сначала на мелкой терке. а затем гомогенезируют в течение 20 мин при 2000 об./мин. 10
Далее полученный гомогенат экстрагируют
s физиологическом растворе при рН 7,0 в течение 30 мин при комнатной температуре при постоянном перемешивании на магнитной мешалке, затем при температуре +4 C 15
/ на 18 ч помещают в рефрижератор. Полученный раствор помещают в термостат при температуре 37 С в течение 1 ч, после чего взвесь центрифугируют не менее 20 мин при 8000 об/мин. 20
Пример 2. 1 кг высушенного корйя измельчают, как в примере 1, гомогениэируют в течение 30 мин при 2000 об./мин, flonученный гомогенат экстрагируют физраствором при рН 7,0 в течение 40 мин при комнатной температуре при постоянном помешивании на магнитной мешалке. далее при температуре +8 С в течение 20 ч. Раствор помещают в термостат . и температуре 38 С в течение t,5 ч, после чего взвесь центрифугируют не менее 20 мин при 8000 об,/мин.
Таким образом на основании полученных результатов следует, что введение заявляемого водного экстракта корня солодки оказывает стимулирующее влияние на факторы неспецифического иммунитета, что может быть использовано при неблагоприятной эпидемиологической обстановке для профилактики бактериальных и вирусных инфекций. (56) Экстракт солодкового корня. Технические условия приготовления, ГОСТ 2284077.
Таблица 1
Количественное содержание экстрактивных веществ и биологически активных соединений в корне солодки и в экстрактах заявленного способа приготовления
Содержание в корне со- Содержанйе в заявленлодки поданным литера- ном экстракте, от содерВещества ных источников, жани о ки
80 %
70 7, 90;
33 мг
Экстрактивные
Глицирриэиновая кислота
Флавоноиды
Сахароза
Аско биновая кислота
3,5
15 мг, Таблица 2
Воздействие водного экстракта корня солодки на иммунную систему при четырехкратном внутрижелудочном введении в дозе 1 мл/кг (аналиэ через сутки после ч
*Содержание экстрактивных веществ и биологически активных веществ в корне солодки приводятся по данным И.А.Муравьева и Соколова Б.С.
2000800
Продолжение табл, 2
*Наличие статистически достоверного различия между контролем и опытом.
Составитель Ю,Михалев
Техред M.Ìoðãåíòàë Корректор Е. Папп
Редактор
Тираж Подписное
НПО "Поиск" Роспатента
113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., 4/5
Заказ 3096
Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул,Гагарина, 101 формула изобретен и я
CnOCOS ПОЛУЧЕНИЯ ЭКСТРАКТА КОРНЯ СОЛОДКН ГОЛОЙ путем обработки измельченного сырья экстрагентом с последующим отделением целевого продукта, отличающийся 5 тем, что, с целью сохранения нативных свойств биологически активных соединений, способствующих активации факторов йеспЕцифичвского иммунитета, измельченное сырье гомогенизируют в течение 2030 мин при 2000 мин 1 и гомогенат экстрагируют физраствором в нейтральной среде сначала при комнатной температур в течение 30 - 40 мин, затем при 4 - 8 С в течение 18 - 20 ч, далее экстракт выдерживают в течение 1 - 1,5 ч при 37 - 38 С и целевой продукт отделяют центрифугированием не менее 20 мин при 8000 мин 1.
