Лечебно-профилактическое средство, обладающее детоксицирующей активностью

 

Изобретение относится к медицине, а именно к созданию лечебно-профилактического средства природного происхождения, обладающего детоксицирущей активностью. Предложенное средство содержит смесь "Ламинарида" и свекловичного пектина в массовом соотношении 2:1. Такая композиция наряду с высокой комплексообразующей способностью не обладает побочным действием (не вызывает жидкий стул или запор). 10 табл.

Изобретение относится к фармацевтической промышленности и касается получения лечебно-профилактического средства с высокой детоксицирующей способностью и может применяться при лечении острых и хронических интоксикаций тяжелыми металлами.

В настоящее время известны различные специфические антидоты, применяемые для связывания и выведения тяжелых металлов. К ним относятся препараты, содержащие тиоловые группы - унитиол, сукцимер, натрия тиосульфат, а также различные комплексообразующие соединения - тетацин-кальций, пентацин, динатриевая соль этилендиаминтетрауксусной кислоты, дефероксамин, пеницилламин (Машковский М.Д. Лекарственные средства: В 2-х томах. Т. 2. - М.: Медицина, 1986. - С. 181-188). Все перечисленные препараты являются синтетическими, они биологически несовместимы с организмом человека и удаляют не только ноны металлов, поступающие в организм в избытке и вызывающие интоксикации, но и ионы, являющиеся микроэлементами. Эти микроэлементы входят в состав важнейших ферментных систем организма (ферритин, гемосидерин и др.), и удаление таких необходимых для организма ионов, как железо (II), кальций и др., вызывает нарушение обменных процессов. При применении, особенно длительном, указанных препаратов возникают различные побочные эффекты: аллергические реакции, лейкопения, тромбоцитопения, агранулоцитоз, расстройства ЖКТ и др.

В литературе (Костенко Т.И., Нелина В.В., Донченко Л.В., Карпович Н.С. Пектин. Применение пектина. - Киев, 1992. С. 33-43) описано применение пектиновых веществ, полученных из яблочных, свекловичных и цитрусовых выжимок, в качестве эффективных детоксикантов тяжелых металлов. Деметоксилирование пектинов, происходящее в ободочной кишке при рН ~7,8, способствует превращению его в полигалактуроновую кислоту, которая и соединяется с тяжелыми металлами и радионуклидами, в результате чего образуются нерастворимые комплексы, не всасывающиеся через слизистую оболочку ЖКТ и выделяющиеся из организма вместе с калом. Защитное действие пектинов объясняется также их способностью вместе с другими пищевыми волокнами улучшать перистальтику кишечника, способствуя более быстрому выводу всех токсических веществ. При этом будучи веществами природного происхождения пектины биосовместимы и не оказывают побочного действия.

Пектин является эффективным антидотом для профилактики отравлений свинцом, ртутью, кадмием и др. Пектины оказывают благоприятное действие не только в условиях острого и подострого воздействия металлов, но и при длительном поступлении их в организм (Чайка И.О. О защитном действии пектинов при затравке животных аэрозолем свинца // Гигиена труда и профзаболеваний. - 1966. - 10. - С. 47-49).

Недостатками применения пектинов как антидотов при отравлении металлами являются недостаточна высокая комплексообразующая способность (для свекловичного пектина 190 мг Рb²⁺/г, для яблочного пектина 58,47 мг Рb²⁺/г, для цитрусового пектина 37,92 мг Рb²⁺/г) (Компанцев В.А., Кайшева Н.Ш., Гокжаева Л.П., Сизова Н.М. Определение комплексообразующей способности пектинов и пектинсодержащих препаратов /Охрана окружающей среды. - М.: НИИТЭХИМ, 1991. - С. 25-27), загрязненность пектинов различными веществами (метанолом, флавоноидами, гемицеллюлозами и др.), что снижает детоксические свойства пектинов и, как следствие, возможность их применения в медицине в качестве антидотов.

Описан способ получения медицинского очищенного пектина из промышленных пектиновых образцов. Данный способ позволяет получить пектин, очищенный от флавоноидов, ионов металлов, что значительно повышает комплексообразующую способность полиуронндов: она составляет для свекловичного пектина 1525 мг Рb²⁺/г, для цитрусового пектина 1215 мг Рb²⁺/г, для яблочного пектина 1078 мг Рb²⁺/г (Патент РФ 2116075 "Способ получения медицинского очищенного пектина" от 27.07.98).

Из всех пектинов чаще всего в качестве детоксиканта используется свекловичный пектин. Описано лечебное и профилактическое действие свекловичного пектина как при острых, так и при хронических интоксикациях различными салями металлов (свинцом, ртутью, медью и др.) (Применение пектинов в медицине /З. Ж. Ашубаева, А. М. Молдошев, А.Д. Джумалиев и др. - Фрунзе, 1989. - С. 7-20). Использован свекловичный пектин производства Краснодарского пектинового завода. Данное средство наиболее близко к заявляемому и выбрано за прототип. Недостатками применения свекловичного пектина как детоксиканта являются: а) невозможность длительного использования пектинов при хронических интоксикациях вследствие того, что пектины при применении в течение более двух недель вызывают диспепсические явления (запоры) (Применение пектинов в медицине /Ашубаева З.Ж., Молдошев А.М., Джумалиев А.Д. и др. - Фрунзе: Илим, 1989. - 65 с.); б) невысокая комплексообразующая способность по сравнению с полиуронидами из группы альгинатов и в связи с невысокой степенью очистки пектинов; в) низкая растворимость в воде, что ухудшает всасываемость средства (растворимость свекловичного пектина составляет не более 2 г в 100 мл воды при температуре 25^oС).

Применение альгинатов в качестве детоксикантов металлов эффективно, но при продолжительном использовании они оказывают раздражающее действие на слизистую оболочку ЖКТ, вызывая слабительный эффект. Наиболее известным препаратом этой группы является лекарственный препарат слабительного действия "Ламинарид". Это суммарный препарат, полученный из морской капусты, он содержит смесь полисахаридов с белковым компонентом и соли альгиновых кислот. Препарат в ЖКТ набухает, раздражает рецепторы кишечника, оказывая слабительное действие (Машковский М.Д. Лекарственные средства: В 2-х томах. Т. 1. - М. Медицина, 1986. - С. 378). Препарат обладает лучшей растворимостью и комплексообразующей способностью (1920 мг Рb²⁺/г), чем пектин.

Цель изобретения - создание лечебно-профилактического средства выраженного детоксицирующего действия для применения как при острых (непродолжительное использование), так и при хронических отравлениях (длительное использование) при отсутствии диспепсических явлений (запоров, поносов) и с улучшенной растворимостью в воде.

Поставленная цель достигается тем, что получают лечебно-профилактическое средство с выраженным защитным действием для применения при острых и хронических отравлениях путем смешивания субстанций препарата "Ламинарид" и свекловичного пектина в массовом соотношении 2:1. Смесь обладает выраженной КС (2018 мг Рb²⁺/г, 2054 мг Сu²⁺/г) при отсутствии диспепсических явлений. При этом смесь обладает лучшей растворимостью в воде (до 3 г смеси в 100 мл воды), чем пектин.

Для оценки эффективности связывания полисахаридами ионов металлов используется показатель - комплексообразующая способность (КС), который характеризует число мг ионов металла, связанное 1 г полиуронида (Бюллетень гос. Никитского ботан. сада. - Ялта: ГНБС, 1981. - Вып. 3(46). - С. 98-101).

На модельных опытах методом in vitro нами проведено сравнительное изучение способности пектиновых веществ, полученных из различных растительных источников (свекловичный пектин (СП), цитрусовый пектин (ЦП), яблочный пектин (ЯП)), и субстанции препарата "Ламинарид" связывать ионы свинца (II) из водных растворов, использованы пектины, очищенные по известному способу (патент РФ 2116075 "Способ получения медицинского очищенного пектина"). Опыты проведены в слабощелочной среде (рН ~7,8), что приближенно соответствует значению рН (7,8-8,0) среды толстого кишечника человека, где и осуществляется деградация молекул полиуронидов (Костенко Т.Н., Нелина В.В., Донченко Л. В. , Карпович И. О. Пектин. Применение пектина. - Киев, 1992. - С. 33). Количество связанного полисахаридами катиона металла определено методом обратного комплексоно-метрического титрования (Компанцев В.А., Кайшева Н.Ш., Гокжаева Л. П. , Сизова Н. М. Определение комплексообразующей способности пектинов и пектинсодержащих препаратов /Охрана окружающей среды. - М.: НИИТЭХИМ, 1991. - С. 25-27). Определение растворимости в воде проведено в соответствии с общей статьей "Растворимость" в соответствии с государственной фармакопеей СССР XI изд. (ГФ СССР XI изд. - М.: Медицина, 1987. - Вып. 1. - С. 175-176). Полученные результаты КС и растворимости в воде приведены в табл. 1.

Из табл. 1 следует, что наибольшей КС обладает "Ламинарид", а из пектинов - СП. Поэтому дальнейшие исследования по созданию композиции "Ламинарида" с пектином проведены с использованием СП. По растворимости все вещества относятся к группе умеренно растворимых: количество воды (мл), необходимое для растворения 1 г веществ, находится в пределах 30-100 мл: для СП - 56 мл, для ЦП - 52 мл, для ЯП - 51 мл, для "Ламинарида" - 35 мл, т.е. лучшей растворимостью обладает "Ламинарид".

Подбор определенного сочетания "Ламинарида" и СП в смеси позволил добиться максимального повышения КС (по иону свинца (II) и достижения слабительного действия смеси на уровне контрольных опытов. Изучение слабительного действия по величине массы фекалий проведено на белых крысах линии Вистар методом, описанным в литературе (Гацура В.В. Методы первичного фармакологического исследования биологически активных веществ. - М.: Медицина, 1974. - 143 с. ). Для исследований было приготовлено 5 смесей, состоящих из "Ламинарида" и СП (очищенного по технологии, описанной в патенте РФ 2116075) в следующих массовых соотношениях - 3:1, 2:1, 1:1, 1:2, 1:3. Веществами сравнения служили "Ламинарид" и СП. Результаты химических и биологических испытаний приведены (из 7 определений) в табл. 2. Представленные в табл. 2 результаты определения КС показывают, что наиболее выраженной детоксицирующей способностью обладает смесь, состоящая из "Ламинарида" и СП в соотношении 3: 1. Но эта смесь вызывает наиболее сильное и слабительное действие, превосходящее уровень контроля. Самой оптимальной смесью является смесь 2:1, т.к. при применении такого сочетания достигается выраженное детоксицирующее действие (незначительно уступающее смеси 3:1, ΔКС=2035-2018=17 мг); при этом слабительный эффект на протяжении всего периода исследований оставался на уровне контрольных опытов. Снижение содержания "Ламинарида" и повышение содержания СП в смесях ведет к понижению КС и слабительного действия, вызывая даже запоры. Увеличение содержания "Ламинарида" и снижение содержания СП приводит к обратным результатам. Изучение слабительного действия показало изменение как консистенции, так и веса фекалий. Наибольшие изменения наблюдались после введения "Ламинарида": к седьмому дню появился жидкий стул и это состояние держалось до конца наблюдаемого периода (до 30 суток). При применении смеси 3:1 жидкий стул появился через 14 дней и также это состояние длилось до конца наблюдаемого периода. На фоне введения смесей "Ламинарид": СП в соотношениях 1:2, 1:3 регистрировали запор уже к 7-ому дню наблюдения, что отразилось в уменьшении количества фекалий.

Таким образом, проведенные химические и биологические испытания смесей позволили выбрать соотношение "Ламинарид": СП 2:1 для назначения лечения этой смесью, т. к. указанное сочетание, проявляя выраженную КС (2018 мг Рb²⁺/г), не оказывает побочного действия (в виде жидкого стула и запоров) при применении до 30 дней. Такая смесь может быть использована для лечения как острых, так и хронических отравлений.

Нами проведено изучение детоксицирующего действия смеси "Ламинарид": СП и методом in vivo на белых крысах линии Вистар. С этой целью ежедневно в течение недели перорально вводили крысам раствор ацетата свинца (II) из расчета 75 мг/кг веса животного или по 9 мг иона свинца (II) в 1 мл раствора каждой крысе, что составляет половину от смертельной дозе для человека при неингаляционном способе поступления свинца (Вредные химические вещества неорганических соединений элементов I-IV групп. - Л.: Химия, Ленинградское отд., 1988). Затем в течение недели ежедневно вводили крысам перорально по 1 мл 2% раствора смеси "Ламинарид": СП (в соотношении 2:1). За сутки до забоя животным давали воду и собирали мочу, после чего животных забивали и определяли содержание свинца s разных тканях и органах: трубчатой бедренной кости, эпифизарной области бедренной кости, печени, почках, коже и шерсти, бедренной мышце, а также в крови, моче. Для свинца характерно образование двух обменных пулов: быстрый - кровь, мягкие ткани, и медленный - скелет (Ершов Ю. А. , Плетенева Т.В. Механизмы токсического действия неорганических соединений. М. : Медицина, 1989. - 272 с.). Определение свинца в физиологических системах и органах основано на озолении проб мочи, крови, органов с помощью смеси конц. серной и азотной кислот, а для крови - дополнительно смесью азотной и соляной кислот с последующим растворением образовавшейся золы (сульфата свинца (II) в 30% растворе ацетата аммония, фильтровании раствора и обратном комплексонометрическом титровании иона свинца (II) титрованным раствором сульфата магния при рН 8 в присутствии индикатора эриохрома черного (Методы исследований в профпатологии. Под ред. О.Г. Архиповой. - М.: Медицина, 1988. - С. 163-166; Шварценбах Г., Флашка Г. Комплексонометрическое титрование. - М.: Химия, 1970. - С. 237-298).

Контролем служили крысы, перорально получавшие ежедневно в течение недели сначала по 1 мл раствора ацетата свинца (II), а затем аналогично по 1 мл физиологического раствора. Для сравнения также использовали интактных крыс. Полученные результаты приведены в табл. 3. В этой таблице и в последующих верхняя строка означает среднее содержание ионов свинца (II) и отклонение от него (мкмоль/г), т. е. М±m; Р₁ - вероятность различия по отношению к интактным животным; Р₂ - вероятность различия по отношению к контролю; Р₃ - вероятность различия по отношению к СП. Статистическая обработка результатов исследований проведена по методу И.А. Ойвина (Ойвин И.А. Статистическая обработка результатов экспериментальных исследований /Патологическая физиология и экспериментальная терапия, 1960. - Т. 4, 4. - С. 76-85).

Как видно из представленных в табл. 3 результатов, наиболее эффективное лечение свинцовых интоксикаций осуществляется при использовании смеси "Ламинарид": СП (2:1): при этом ионы свинца (II) выводятся из всех органов, особенно из мягких тканей; содержание ионов свинца (II) приближается или даже снижается в сравнении с уровнем контроля. В костной ткани это снижение немного не достигает контрольного уровня, что, по-видимому, объясняется непродолжительным (в течение одной недели) курсом приема лекарственной смеси. Введение СП также приводит к снижению содержания свинца (II) в сравнении с приемом физиологического раствора, но снижение уровня свинца пектином несколько хуже, чем смесью "Ламинарид": СП. Повышение содержания ионов свинца (II) в крови и моче при использовании как смеси, так и самого СИ объясняется выведением ионов металла из костной ткани в указанные физиологические жидкости.

Повышенное содержание свинца в костной ткани при лечении в сравнении с интактными крысами объясняется непродолжительном для лечения курсом (1 неделя). Поэтому нами проведены исследования по изучению более длительного приема смеси "Ламинарид": СП (до одного месяца). Как и в предыдущих случаях, перорально крысам вводили ежедневно в течение недели по 1 мл раствора ацетата свинца (II), а затем ежедневно по 1 мл 2% раствора смеси "Ламинарид": СП (2: 1) или 2% раствора СП. Результаты статистически обработаны и приведены в табл. 4.

Как следует из табл. 4, при длительном лечении (4 недели) смесью "Ламинарид": СП (2: 1) наблюдается резкое снижение содержания ионов свинца (II) во всех органах и системах, вплоть до отсутствия ионов металла. По-видимому, лекарственная смесь выводит свинец, не только поступивший в организм животных в условиях опыта, но и депонированный ранее, даже из скелетной ткани, что свидетельствует о мощном антидотной в течение длительного периода, также снижает содержание свинца в различных органах и тканях, но менее выраженно по сравнению со смесью "Ламинарид": СП (2:1).

Для расширения области применения смеси "Ламинарид": СП с целью лечения интоксикаций другими металлами изучено влияние указанной смеси на выведение ионов меди (II). Определение содержания ионов меди (II) проведено методом обратного комплексонометрического титрования (Шварценбах Г., Флашка Г. Комплекснометрическое титрование. - М.: Химия, 1970. - C. 255-256). В опытах in vitro установлена наиболее выраженная КС смеси "Ламинарид": СП в соотношениях 3: 1 и 2:1 по отношению к ионам меди (II). Однако повышение содержания "Ламинарида" может оказать слабительное действие смеси (табл. 2), поэтому нами выбрано соотношение 2:1.

Результаты определений приведены в табл. 5.

Далее нами проведены биологические испытания на крысах линии Вистар путем перорального введения крысам раствора, содержащего ионы меди (II) в дозе 13,5 мг ионов меди (II) в 1 мл раствора (каждой крысе), или из расчета 1,775 ммоль гидрата ацетата меди (II) на 1 кг веса животного, что составляет половину от смертельной дозы для человека (Ершов Ю.А., Плетенева Т.В. Механизмы токсического действия неорганических соединений. - М.: Медицина, 1989. - С. 142). После интоксикации солями меди (II) животным давали 2% раствор смеси "Ламинарид": СП (2:1), а также только 2% раствор СП в дозе 1 мл ежедневно в течение всего периода наблюдения. За сутки до забоя животным давали воду и собирали мочу, после чего животных забивали и определяли содержание меди в различных органах и тканях, где возможно наибольшее кумулирование меди (Ершов Ю. А. , Плетенева Т.В. Механизмы токсического действия неорганических соединений. - М.: Медицина, 1989. - С. 142). Определение содержания меди (II) в биологических объектах проведено после предварительного озоления объектов при 550^oС, растворения сухого остатка в разбавленной азотной кислоте и дальнейшего количественного определения содержания ионов меди (II) методом прямого комплексонометрического титрования (Методы исследований в профпатологии (биохимические). Под ред. О.Г. Архиповой. - М.: Медицина. 1988. - С. 121-123; Шварценбах Г., Флашка Г. Комплексонометрическое титрование. - М. : Химия, 1970. - С. 255-256. Статистически обработанные результаты приведены в табл. 6.

Как следует из табл. 6, лечение, особенно длительное, смесью "Ламинарид": СП (2:1), как и самим СП, полностью или значительно устраняет медь из желудка, двенадцатиперстной кишки и тонкого кишечника и существенно снижает содержание меди (II) в желчи. В крови и моче животных после лечения по сравнению с нелечеными животными значительного уменьшения содержания меди не наблюдается.

Параллельно с лечением нами изучено профилактическое действие смеси "Ламинарид": СП (2:1) при интоксикациях свинцом и медью. Для этого группам крыс перорально вводили в течение 1 недели ежедневно по 1 мл 2% раствора СП или 2% раствора смеси "Ламинарид": СП (2:1), а затем ежедневно в течение недели по 1 мл раствора ацетата свинца (II) или меди (II) в концентрациях, использованных для лечения. Полученные результаты приведены в табл. 7 и 8.

При сравнении результатов лечения (табл. 3) и профилактики (табл. 7) свинцовых интоксикаций можно отметить преимущественный эффект профилактического действия перед лечебным как при использовании смеси "Ламинарид": СП (2:1), так и самого пектина. Повышенное содержание свинца в крови и моче при профилактике объясняется выведением свинца из скелетной ткани.

Сравнивая результаты лечения (табл. 6) и профилактики (табл. 8) медных интоксикаций, можно отметить лучший эффект профилактического использования перед лечебным как смеси "Ламинарид": СП (2:1), так и СП.

Заявляемый способ поясняется следующими примерами.

Пример 1. Лечение свинцовых интоксикаций смесью "Ламинарид": СП.

В фарфоровой ступке смешивают 1,33 г субстанции препарата "Ламинарид" с 0,67 г свекловичного пектина, очищенного по известному способу (патент РФ 2116075) (соотношение 2:1). Смесь растворяют в 100 мл воды путем перемешивания на магнитной мешалке. Образуется коллоидный раствор.

Навеску ацетата свинца (II) массой 3,5313 г растворяют в воде (примерно 100 мл), затем раствор количественно переносят в мерную колбу емкостью 250 мл. Для подавления гидролиза к полученному раствору прибавляют несколько капель 0,1 н. раствора уксусной кислоты до исчезновения мути. Затем раствор доводят водой до метки. 1 мл приготовленного раствора содержит 9 мг иона свинца (II).

Крысам линии Вистар (7 штук) ежедневно перорально вводят по 1 мл приготовленного раствора ацетата свинца (II) из расчета 75 мг/кг веса в течение одной недели. Затем также в течение недели ежедневно перорально вводят по 1 мл 2% раствора смеси, состоящей из "Ламинарида" и СП (2:1). Далее в течение суток собирают фекалии и отдельно мочу в мочесборнике, запаивая крыс только водой, после чего крыс декапитируют. Содержание свинца определяют в моче, крови, трубчатой бедренной кости, эпифизарной области бедренной кости, печени, почках, бедренной мышце, коже и шерсти. Для этого указанные жидкости и органы озоляют в фарфоровых ступках на электроплите; на поверхность плиты кладут асбестовые сетки, озоление объектов проводят путем добавления к каждому объекту смеси, состоящей из 0,5 мл конц. азотной и 0,5 мл конц. серной кислот. После образования сухого остатка из крови к нему добавляют дополнительно 0,5 мл конц. азотной кислоты и 2 мл 3,6% раствора соляной кислоты, смесь выпаривают досуха на кипящей водяной бане. Сухие остатки, полученные после озоления всех биологических объектов, сжигают в муфельной печи при 400^oС. Затем тигли с золой охлаждают в эксикаторе. Содержимое каждого тигля растворяют в 5 мл 30% раствора ацетата аммония, полученные растворы фильтруют через крупнопористые бумажные фильтры ("красная лента") и далее комплексонометрически определяют содержание свинца (II): к фильтрату приливают 100 мл воды, 5 мл 0,1 н. раствора комплексона III, примерно 7 мл аммиачного буферного раствора до рН около 8; на кончике шпателя вносят сухую смесь индикатора эриохрома черного с хлоридом натрия (1:100) и титруют 0,1 н. раствором сульфата магния до перехода окраски от синей к фиолетовой. Содержание свинца (, г) вычисляют по формуле где N_k.III, V_k.III - нормальность и объем (мл) раствора комплексона III, - нормальность и объем (мл) раствора сульфата магния, израсходованного на титрование, - молярная масса эквивалента свинца =А/2=207,2 г/моль/2=103,6 г/моль).

Для пересчета содержания свинца в мкмоль/г (X) используют формулу где А(Рb²⁺) - атомная масса свинца, г/моль, а - навеска объекта, взятая на анализ, г.

Массу фекалий (при изучении слабительного действия) взвешивают на весах.

Полученные результаты определений приведены в табл. 2 и 3.

Пример 2. Лечение свинцовых интоксикаций смесью "Ламинарид": СП.

В фарфоровой ступке смешивают 1,33 г свекловичного пектина, очищенного по известному способу (патент РФ 2116075), с 0,67 г субстанции препарата "Ламинарид" (соотношение "Ламинарид": СП 1:2). Смесь растворяют в 100 мл воды путем перемешивания на магнитной мешалке.

Раствор ацетата свинца (II) готовят, как описано в примере 1.

Лечение крыс смесью "Ламинарид": СП (1:2) после интоксикации их свинцом и определение остаточного содержания свинца в различных органах проведено аналогично примеру 1.

Содержание свинца (мкмоль/г) составило: в крови 29,5; моче 27,26; трубчатой бедренной кости 303,15; в эпифизарной области 205,16; в печени 5,21; почках 3,86; бедренной мышце 2,85; коже и шерсти 2,73. Масса фекалий составила 0,76±0,05 г.

Пример 3. Лечение свинцовых интоксикаций смесью "Ламинарид": СП.

В ступке смешивают 1,50 г субстанции препарата "Ламинарид" с 0,5 г свекловичного пектина, очищенного по известному способу (соотношение "Ламинарид": СП 3:1). Смесь растворяют в 100 мл воды путем перемешивания на магнитной мешалке.

Приготовление раствора ацетата свинца (II), лечение крыс смесью "Ламинарид": СП (3:1) после интоксикации их свинцом и определение остаточного содержания свинца (II) проведено аналогично примеру 1.

Содержание свинца (мкмоль/г) составило: в крови 29,1, в моче 27,31, трубчатой бедренной кости 278,36; в эпифизарной области трубчатой кости 176,15; в печени 3,38; в почках 2,02, в бедренной мышце 2,11, коже с шерстью 2,11. Результаты детоксицирующего действия смеси "Ламинарид": СП 3:1 незначительно лучше по сравнению со смесью "Ламинарид": СП 2:1 (пример 1), но при этом смесь 3:1 вызывает в течение продолжительного применения нежелательный слабительный эффект (табл. 2), в то время как смесь 2:1 не проявляет подобного побочного действия.

Пример 4. Длительное лечение свинцовых интоксикаций смесью "Ламинарид": СП.

В ступке смешивают 3,33 г субстанции препарата "Ламинарид" с 1,67 г свекловичного пектина, очищенного по известному способу. Смесь растворяют в 250 мл воды путем перемешивания на магнитной мешалке.

Приготовление раствора ацетата свинца (II) проводят, как описано в примере 1.

Крысам (7 штук) ежедневно перорально вводят по 1 мл приготовленного раствора ацетата свинца (II) из расчета 75 мг/кг веса в течение одной недели. Затем в течение 4-х недель ежедневно перорально вводят по 1 мл 2% р-ра смеси "Ламинарид": СП (2:1). Далее определение содержания свинца в биологических объектах проводят, как описано в примере 1. Результаты определений приведены в табл. 4.

Результаты изучения слабительного действия приведены в табл. 2.

Пример 5. Лечение свинцовых интоксикаций пектином.

2 г СП, очищенного по известному способу (патент РФ 2116075), заливают 100 мл воды (температура 70^oС) и оставляют для настаивания в течение 4-6 ч, затем перемешивают на магнитной мешалке с подогревом до растворения.

Раствор анетата свинца (II) готовят, как описано в примере 1.

Крысам линии Вистар (7 штук) ежедневно перорально вводят по 1 мл приготовленного раствора ацетата свинца (II) в течение одной недели. Затем в течение неделя ежедневно перорально вводят по 1 мл приготовленного р-ра СП.

Определение содержания свинца в объектах исследования проводят, как описано в примере 1. Результаты изучения детоксицирующей способности СП приведены в табл. 3.

Результаты изучения слабительного действия СП представлены в табл. 2.

Пример 6. Длительное лечение свинцовых интоксикации пектином.

Раствор СП готовят, как описано в примере 5, а раствор ацетата свинца (II), как в примере 1.

Крысам ежедневно в течение недели перорально вводят по 1 мл раствора ацетата свинца (II), а затем в течение 4-х недель ежедневно перорально вводят раствор СП. Определение содержания свинца в биологических объектах проводят аналогично примеру 1. Результата исследований представлены в табл. 4. Результаты изучения слабительного действия (по массе фекалий) приведены в табл. 2.

Пример 7. Профилактика свинцовых интоксикаций смесью "Ламинарид": СП (2: 1.

Раствор смеси "Ламинарид": СП (2:1) и раствор ацетата свинца (II) готовят, как в примере 1.

Крысам ежедневно вводят перорально в течение недели по 1 мл раствора смеси "Ламинарид": СП (2: 1), а затем аналогично по 1 мл раствора ацетата свинца (II). Определение содержания свинца (II) в биологических объектах проводят аналогично примеру 1. Результаты исследований приведены в табл. 7.

Пример 8. Профилактика свинцовых интоксикаций пектином.

Раствор СП готовят, как описано в примере 5, а раствор ацетата свинца (II), как в примере 1.

Сначала крысам ежедневно в течение недели вводят по 1 мл раствора СП, а затем аналогично по 1 мл раствора ацетата свинца (II). Определение содержания свинца (II) в объектах исследования проводят аналогично примеру 1. Результаты исследований приведены в табл. 7.

Пример 9. Лечение медных интоксикаций смесью "Ламинарид": СП (2:1.

Отвешивают 4,25 г гидрата ацетата меди (II), заливает 100 мл воды и перемешивают до растворения. В 1 мл такого раствора содержится 13,5 мг иона меди (II).

Раствор смеси "Ламинарид": СП (2:1) готовят, как описано в примере 1.

Крысам (7 штук) ежедневно перорально вводят по 1 мл приготовленного раствора ацетата меди (II) из расчета 1,775 ммоль ацетата меди (II) на 1 кг веса животного в течение одной недели. Затем также в течение недели ежедневно перорально вводят по 1 мл 2% раствора смеси "Ламинарид": СП (2:1), Далее в течение суток собирают мочу в мочесборнике, запаивая крыс только водой, после чего крыс декапитируют. Содержание меди определяют в желудке, двенадцатиперстной кишке, тонком кишечнике, крови, желчи, моче. Для этого указанные биологические объекты озоляют при 550^oС в муфельной печи. Сухие остатки, полученные после озоления, растворяют в разбавленной азотной кислоте, растворы фильтруют через крупнопористые бумажные фильтры ("красная лента") и далее комплексонометрически определяют содержание меди: к фильтрату приливают 100 мл воды, 1 моль/л раствора аммиака до рН 8; 10 мл 1 моль/л раствора хлорида аммония и на кончике шпателя индикатор мурексид, титруют 0,1 н. раствором комплексона III до перехода окраски от желтой в фиолетовую. Содержание меди определяют по формуле где - молярная масса эквивалента меди (=А(Cu²⁺)
(2=63,54/2=31,77 г/моль).

Для пересчета содержания меди в мг/г (X) используют формулу

где а - навеска объекта, взятая на анализ, г.

Полученные результаты определений приведены в табл. 6.

Пример 10. Длительное лечение медных интоксикаций смесью "Ламинарид": СП (2:1).

Готовят раствор ацетата меди (II), как описано в примере 5. Раствор смеси "Ламинарид": СП (2:1) готовят, как описано в примере 1.

Крысам (7 штук) ежедневно перорально вводят по 1 мл приготовленного раствора ацетата меди (II) в течение одной недели. Затем ежедневно перорально в течение 4-х недель вводят по 1 мл 2% раствора смеси "Ламинарид": СП (2:1).

Подготовку биологических объектов к анализу и определение содержания меди проводят, как описано в примере 9. Полученные результаты приведены в табл. 6.

Пример 11. Лечение медных интоксикаций свекловичные пектином.

Раствор СП готовят, как описано в примере 5, раствор ацетата меди (II), как описано в примере 9.

Крысам (7 штук) ежедневно перорально вводят по 1 мл приготовленного раствора ацетата меди (II) в течение одной недели. Затем в течение недели также вводят по 1 мл приготовленного раствора СП.

Подготовку биологических объектов к анализу и определение содержания меди (II) в них проводят как описано в примере 5. Полученные результаты приведены в табл. 6.

Пример 12. Длительное лечение медных интоксикаций свекловичным пектином.

Проводят аналогично примеру 11, но только раствор СП вводят животным в течение 4 недель. Полученные результаты представлены в табл. 6.

Пример 13. Профилактика медных интоксикаций смесью "Ламинарид": СП (2: 1).

Готовят раствор ацетата меди (II), как описано вдетоксицирующего действия в отношении тяжелых металлов обладает:
1) выраженным лечебным действием - выводит ионы тяжелых металлов (ионы свинца (II), меди (II) из различных органов и систем. Лечебное действие смеси "Ламинарид": СП (2:1) в отношении связывания ионов свинца (II) и ионов меди (II) превосходит действие СП (по способу-прототипу) при использовании в течение одной и четырех недель в несколько раз (табл. 3 и 10). По-видимому, это объясняется кумулятивным действием альгинатов, входящих в состав "Ламинарида".

2) выраженным профилактическим действием - предупреждает адсорбцию ионов тяжелых металлов в различных органах и системах. Профилактическое действие смеси "Ламинарид": СП (2:1) в отношении связывания ионов свинца (II) и ионов меди (II) превосходит действие СП при использовании в течение одной недели в несколько раз (табл. 9 и 10).

Таким образам, смесь "Ламинарид": СП (2:1) эффективна для лечебно-профилактического использования как при острых, так и при хронических интоксикациях солями тяжелых металлов.

3) Смесь "Ламинарид": СП (2:1) не обладает побочным действием в виде диспепсических явлений (слабительное действие, запоры), в то время как применение только "Ламинарида" оказывает раздражающее действие на слизистую оболочку ЖКТ, вызывая жидкий стул, а применение СП вызывает запоры, особенно при длительном использовании.

4) Сочетание "Ламинарида" с СП улучшает растворимость СП в 1,7 раза (растворимость смеси составляет 3 г, а СП - 1,80 г в 100 мл воды).

Формула изобретения

Средство для лечения и профилактики острых и хронических интоксикаций тяжелыми металлами, содержащее свекловичный пектин, отличающееся тем, что в качестве активного компонента содержит "Ламинарид" в массовом соотношении "Ламинарид":свекловичный пектин 2:1.

РИСУНКИ

Рисунок 1, Рисунок 2, Рисунок 3, Рисунок 4, Рисунок 5, Рисунок 6, Рисунок 7, Рисунок 8, Рисунок 9