Концентрированный раствор стабилизированного озона для лечения воспалительных процессов
Владельцы патента RU 2324468:
Житков Михаил Юрьевич (RU)
ФГУ ЦНИИС Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию (RU)
Григорьян Алексей Суренович (RU)
Григорьянц Леон Андроникович (RU)
Изобретение относится к области медицины и может быть использовано для лечения воспалительных процессов. Концентрированный раствор стабилизированного озона для лечения воспалительных процессов содержит носитель озона, включающий изотонический солевой раствор и озон, дополнительно он содержит перфторуглерод или смесь перфторуглеродов и поверхностно-активное вещество. Компоненты берут в определенном количественном содержании. Концентрированный раствор стабилизированного озона позволяет длительно сохранить антимикробную активность и повысить срок хранения раствора, содержащего озон. 3 ил.
Изобретение относится к области медицины и может быть использовано для лечения воспалительных процессов.
Известно, что озон широко используется в медицине [Мирошин С.И., Семенов С.В. Санация брюшной полости при разлитом перитоните с помощью озона // Нижегородский медицинский журнал. - 1996. - №2. - С.46-48]. В стоматологии использование обдувания озоном противопоказано, так как значительная часть поражений находится в ротовой полости. Поэтому в стоматологии вместо газообразного озона широко используют растворы озона в изотоническом солевом растворе и дистиллированной воде.
Однако эти лекарственные формы неустойчивы и должны использоваться в течение нескольких минут после насыщения озоном, что создает большие неудобства для использования [Жанбаев А.К., Мирошин С.И., Перетягин С.П. Применение озона при обработке ран глаза в условиях боевых действий // Нижегородский медицинский журнал. - 1996. - №1. - С.57-58].
Известен способ получения препарата, получаемого путем озонирования триглицеридов жирных кислот, в частности оливкового масла. Эффективность данного препарата обусловлена содержащимися в нем озонидами ненасыщенных жирных кислот. Однако при использовании в медицине эмульсии озонидов оливкового масла, такие важные биологические эффекты препаратов озона как бактерицидное действие и стимуляция регенерации тканей в рекомендуемых концентрациях крайне незначительны. В то же время при высоких концентрациях озонидов оливкового масла проявляются их неблагоприятное побочное действие - повреждение тканей и угнетение их регенерации [Сорокина С.Р., Конторщикова К.Н., Петрикас А.Ж. Влияние озонированных растворов, применяемых в стоматологической практике, на кислотообразующую микрофлору полости рта // Нижегородский медицинский журнал. - 1997. - №2. - С.66-67].
Наиболее близким к предложенному препарату, содержащему озон, является раствор озона в изотоническом солевом растворе с концентрацией озона от 1 до 20 мг/л (0,0001-0,002%) [Жанбаев А.Н., Мирошин С.И., Перетягин С.П. Применение озона при обработке ран глаза в условиях боевых действий // Нижегородский медицинский журнал. - 1996. - №1. - С.57-58].
Техническим результатом данного изобретения является повышение срока хранения препарата, содержащего озон.
Технический результат достигается тем, что в препарате стабилизированного озона, содержащем носитель озона, включающий изотонический солевой раствор и озон, отличительной особенностью является то, что носитель озона содержит перфторуглерод или смесь перфторуглеродов и поверхностно-активное вещество при следующем соотношении компонентов (мас.%):
| перфторуглерод или смесь перфторуглеродов | 1-90 |
| поверхностно-активное вещество | 0,01-50 |
| озон | 0,0001-0,03 |
| изотонический солевой раствор | остальное |
Предложенный препарат отличается высокой временной стабильностью и возможностью достижения высоких концентраций озона.
Показано, что в смесях перфторуглеродов, поверхностно-активных веществ и изотонического солевого раствора, в частности выпускаемой отечественной медицинской промышленностью под названием "Перфторан", растворимость озона в десятки раз выше, чем в изотоническом солевом растворе или воде. Также существенно выше временная стабильность озона, растворенного в подобных смесях, по сравнению с растворами озона в воде и изотоническом солевом растворе: концентрация озона в эмульсии перфторуглеродов уменьшается вдвое через 5-7 сут, а не через 3-5 мин как в воде и изотоническом солевом растворе. Поэтому озонированные эмульсии перфторуглеродов, в частности озонированный "Перфторан", могут быть использованы для медицинских целей в течение 5-7 сут после приготовления.
Предлагаемый состав обладает выраженными антимикробными свойствами, сохраняющимися вплоть до концентрации озона 1,6 мг/л (0,00016%).
Пример 1.
Озонирование смеси перфтордекалина (16 мас.%), поверхностно-активного вещества проксанола (0,05 мас.%) и изотонического солевого раствора (83,95 мас.%). Смесь доводят до состояния однородной эмульсии путем механического встряхивания.
Озонирование испытуемого раствора в этом, как и в остальных примерах, проводят с помощью промышленного аппарата для получения озона фирмы "Медозон".
Выходящую из аппарата озонокислородную смесь пропускают над поверхностью озонируемой жидкости, налитой на дно бутыли для инъекционных растворов объемом 500 мл. В резиновую пробку вставляют 2 металлические иглы для отсасывания плазмы (с запаянным острым концом и перфорацией в стенках вокруг конца). Одну из этих игл силиконовой трубкой соединяют с выходным патрубком озонатора. Она должна доходить почти до дна бутыли. Вторую, доходящую только до середины бутыли, соединяют с всасывающим патрубком системы обезвреживания озона этого же прибора.
Озон, не поглощенный жидкостью, отсасывают обратно в тот же аппарат с целью обезвреживания оставшегося озона.
Объем озонируемой жидкости - 50,0 мл. Скорость подачи кислорода 0,35 л/мин, концентрация озона в выходящем из аппарата озонированном кислороде 70 мг/л, время озонирования 15 мин. Температура раствора 23°С.
Концентрацию озона в растворе определяют йодометрическим методом.
К пробе раствора от 1 до 10,0 мл (в зависимости от концентрации озона) добавляют 1,0 мл 10% раствора йодида калия, 1,0 мл 3-5% раствора соляной кислоты и 1-2 капли 1% раствора крахмала. Через 10 мин пробу титруют 0,05-0,1 н. раствором тиосульфата с точно определенным титром до обесцвечивания крахмала. Объем пробы и концентрацию раствора тиосульфата выбирают так, чтобы объем тиосульфата, пошедшего на титрование пробы, можно было измерить с точностью не менее 5%.
Расчет:
Концентрация озона, мг/л
где:
где Vs - объем пробы, мл (или масса навески пробы, г);
Vt - объем тиосульфата натрия, пошедшего на титрование, мл;
2400 - количество мкг озона, соответствующее 1 мл 0,1 н. раствора тиосульфата;
К - отношение титра использованного раствора тиосульфата к титру точно 0,1 н. раствора тиосульфата.
Концентрация озона в эмульсии после озонирования составляет по результатам трех измерений (М±σ):
К=1,002; Vs=2,0 мл; Vt=0,202±0,035 мл.
Х=243±42 мг/л (0,0243±0,0042 мас.%)
Пример 2.
Озонирование препарата "Перфторан" и определение концентрации озона проводят, как описано в примере 1.
Полученный препарат стабилизированного озона разделяют на 2 порции по 25,0 мл, которые сохраняют при температуре +4°С и при -20°С.
Результаты определения концентрации озона в озонированном препарате в течение 14 сут для определения стабильности озона приведены на фиг.1.
Пример 3 (сравнительный).
Озонирование изотонического солевого раствора и определение концентрации озона проводят, как описано в примере 1. Температура жидкости 23°С.
Сразу после озонирования изотонического солевого раствора концентрация озона в нем составила по результатам трех измерений (М±σ): 6,5±1,0 мг/л.
Результаты определения концентрации озона через различные промежутки времени после озонирования приведены на фиг.2.
Пример 4.
Определение антимикробной активности раствора озона в препарате "Перфторан" проводят по ширине зоны лизиса культуры E.coli LE 392 на поверхности агара, от концентрации озона.
Объем озонируемой эмульсии - 50,0 мл. Скорость подачи кислорода 0,35 л/мин., концентрация озона 70 мг/л, время озонирования 15 мин. Температура 21°С.
Концентрацию озона в растворе определяют йодометрическим методом.
Подробно методика озонирования и определения концентрации озона описана в примере 1.
Через 20 мин после озонирования в эмульсии определяют концентрацию озона. Эмульсию разводят неозонированным препаратом "Перфторан" для получения различных концентраций озона и используют в тесте на антимикробную активность по ширине зоны лизиса культуры E.coli LE 392 на поверхности агара.
Исследуемый раствор вносят в лунки на поверхности агара, засеянного газоном суточной культурой тестового микроорганизма.
Инкубацию проводят в течение 24 ч при 37°С.
Результаты приведены на фиг.3.
Как видно из сравнения данных, приведенных на фиг.1 и 2, концентрация озона в озонированном "Перфторане" в десятки раз превысила концентрацию озона в озонированном изотоническом солевом растворе. Концентрация озона в озонированном изотоническом солевом растворе снизилась вдвое через 8 мин. В озонированном "Перфторане" снижение концентрации озона вдвое произошло только через 5 сут.
Таким образом, стабильность озона в смеси перфторуглеродов, поверхностно-активного вещества и изотонического солевого раствора в сотни раз выше, чем в изотоническом солевом растворе.
Как следует из этих данных, приведенных на фиг.3, антимикробная активность препарата стабилизированного озона сохраняется вплоть до концентрации озона 1,6 мг/л (0,00016 мас.%).
Пример 5.
Озонирование смеси, содержащей 5,0 г перфторана (20% смеси перфторуглеродов); 50,0 г поверхностно-активного вещества проксанола 268; 45,0 г воды бидистиллированной. Смесь получают последовательным смешением компонентов в указанном порядке при постоянном перемешивании до получения гомогенной эмульсии.
Озонирование полученной эмульсии, содержащей по массе 1% перфторированных углеводородов и 50% ПАВ, и определение концентрации озона проводят как описано в примере 1. Температура жидкости 22°С. Концентрация озона по результатам трех параллельных измерений сразу после озонирования составляет 18,2±3,7 мг/л. Озонированную смесь сохраняют при +4°С в течение 5 сут (7500 мин). Концентрация озона по результатам трех параллельных измерений после хранения составляет 5,4±2,9 мг/л (30% исходной).
Пример 6.
Озонирование смеси, содержащей перфтордекалина - 90 г, поверхностно-активного вещества проксанола - 0,01 г, воды бидистиллированной - 9,99 г. Смесь получают последовательным смешением компонентов в указанном порядке при постоянном перемешивании до получения гомогенной эмульсии.
Озонирование полученной эмульсии, содержащей по массе 90% перфторированных углеводородов и 0,01% ПАВ, и определение концентрации озона проводят как описано в примере 1. Температура жидкости 22°С. Концентрация озона по результатам трех параллельных измерений сразу после озонирования составляет 288±21 мг/л. Озонированную смесь сохраняют при +4°С в течение 5 сут (7500 мин). Концентрация озона по результатам трех параллельных измерений после хранения составляет 108±14 мг/л (44% исходной).
Как показано в примерах 5 и 6, стабильность и концентрация озона в смеси возрастают с увеличением концентрации перфторуглеродов.
Концентрированный раствор стабилизированного озона для лечения воспалительных процессов, содержащий носитель озона, включающий изотонический солевой раствор и озон, отличающийся тем, что носитель озона дополнительно содержит перфторуглерод или смесь перфторуглеродов и поверхностно-активное вещество при следующем соотношении компонентов, мас.%:
| перфторуглерод или смесь перфторуглеродов | 1,0-90,0 |
| поверхностно-активное вещество | 0,01-50,0 |
| озон | 0,0001-0,03 |
| изотонический солевой раствор | остальное |
