Способ получения средства, обладающего антимикробной, противовоспалительной и противоожоговой активностью из плодового тела гриба трутовика (fomitopsis officinalis bond.)



Способ получения средства, обладающего антимикробной, противовоспалительной и противоожоговой активностью из плодового тела гриба трутовика (fomitopsis officinalis bond.)
Способ получения средства, обладающего антимикробной, противовоспалительной и противоожоговой активностью из плодового тела гриба трутовика (fomitopsis officinalis bond.)
Способ получения средства, обладающего антимикробной, противовоспалительной и противоожоговой активностью из плодового тела гриба трутовика (fomitopsis officinalis bond.)
Способ получения средства, обладающего антимикробной, противовоспалительной и противоожоговой активностью из плодового тела гриба трутовика (fomitopsis officinalis bond.)
Способ получения средства, обладающего антимикробной, противовоспалительной и противоожоговой активностью из плодового тела гриба трутовика (fomitopsis officinalis bond.)
Способ получения средства, обладающего антимикробной, противовоспалительной и противоожоговой активностью из плодового тела гриба трутовика (fomitopsis officinalis bond.)
Способ получения средства, обладающего антимикробной, противовоспалительной и противоожоговой активностью из плодового тела гриба трутовика (fomitopsis officinalis bond.)

 


Владельцы патента RU 2409378:

Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Пятигорская государственная фармацевтическая академия" (RU)

Изобретение относится к медицине. Сырьем является плодовое тело гриба трутовика, которое измельчают до размера частиц не более 0,25 мм, экстрагируют смесью хлороформ - спирт этиловый 96% (1:2) при соотношении сырья и экстрагента 1:40 в течение 120-ти часов, упаривают при температуре 50-60°С до остаточной влажности 5%, высушивают при температуре 60°С и давлении 0,5 атм до полного удаления хлороформа и спирта этилового, полученную массу растворяют в спирте этиловом 70% в соотношении 1:10. Изобретение позволяет реализовать указанное назначение. 2 табл., 6 ил.

 

Изобретение относится к медицине и касается способов получения препаратов из природного сырья (грибов), которое может быть использовано в качестве наружного антимикробного, противовоспалительного, противоожогового средства.

Известны антимикробные, противоожоговые, противовоспалительные средства, полученные на основе природного сырья (растений): настойка календулы [Регистр лекарственных средств России / Под ред. Ю.Ф.Крылова.- М., 1993. - С.446.], галеновые препараты алоэ [Соколов С.Я. Фитотерапия и фитофармакология. - М., 2000.- С.203] и другие. Наиболее близким прототипом является настойка календулы, характеризующаяся противовоспалительным, противоожоговым, антимикробным (по отношению к стафилококкам, стрептококкам) действием.

Способ получения настойки календулы заключается в следующем:

цветки и цветочные корзинки календулы (ноготков) экстрагируют 70% спиртом этиловым, из одной весовой части сырья получают 10 объемных частей готовой продукции. Сырье заливают 70% спиртом этиловым и настаивают в течение 7 суток. По истечении этого срока вытяжку сливают, остаток отжимают на прессе и присоединяют к вытяжке. Измеряют объем настойки. В случае необходимости остаток промывают небольшим количеством спирта этилового 70%, отжимают, отжатую вытяжку присоединяют к слитому извлечению. Полученное извлечение отстаивают при температуре не выше 10°C не менее 2 суток и фильтруют [Государственная фармакопея СССР. - М., Медицина, 1989.- Вып.2. - С. 148-149; Муравьев И.А. Технология лекарств: В 2-х Т. - М., 1980. - Т.1- С.174].

Недостатком настойки календулы является низкая антибактериальная активность. По этой причине при инфицированных поражениях кожи обычно практикуют комбинированное применение настойки календулы и антибиотиков. Использование антибиотиков часто сопровождается дерматитами, аллергией, кандидамикозами [Машковский М.Д. Лекарственные средства: В 2-х Т. - М., Медицина, 1988. - Т.2 - С.199-222].

Вместе с тем перечень вытяжек, получаемых из растительного сырья и обладающих антимикробным, противовоспалительным и противоожоговым действием, ограничен. Следовательно, расширение арсенала препаратов для наружного применения, характеризующихся антимикробным и противоожоговым действием, является актуальной задачей.

Технической задачей предлагаемого изобретения является разработка способа получения средства из плодового тела гриба трутовика (Fomitopsis officinalis Bond, et Sing. сем. Polyporaceae), обладающего антимикробной, противовоспалительной, противоожоговой активностью.

Поставленная задача достигается тем, что для получения средства плодовое тело трутовика, измельченное до размера частиц не более 0,25 мм, экстрагируют смесью хлороформ - спирт этиловый 96% (1:2) до полного истощения сырья. Полученное извлечение упаривают при температуре 50-60°C до состояния густой массы, затем высушивают при температуре 100°C до остаточной влажности 5%. Массу растворяют в спирте этиловом 70% в соотношении 1:10.

В литературе отсутствуют данные о возможности применения извлечения из плодового тела гриба трутовика в качестве противовоспалительного и противомикробного средства. Извлечение из плодового тела гриба трутовика можно использовать в медицинской практике для лечения ран, сопровождающихся инфицированием кожи. Данные свойства явным образом не вытекают для специалиста из уровня техники. Таким образом, предлагаемые решения соответствуют критериям изобретения - «новизна», «изобретательский уровень», «промышленно применимо».

Применение в качестве экстрагента смеси хлороформ-спирт этиловый 96% гарантирует максимальную экстракцию липофильных веществ из плодового тела гриба трутовика. Температурный режим, продолжительность экстракции выявлены экспериментально и гарантируют оптимальность технологического процесса.

Пример конкретного выполнения способа

Около 100 г плодового тела трутовика измельчают до размера частиц не более 0,25 мм, экстрагируют смесью хлороформ - спирт этиловый 96% (1:2) при суммарном соотношении сырья и экстрагента 1:40 в течение 120-ти часов до полного истощения сырья. Параллельно определяют влажность сырья. Все измерения проводят с точностью до 0,0002 г.

Полноту извлечения липофильных веществ контролируют методом тонкослойной хроматографии на пластинках «Сорбфил ПТСХ-П-А-УФ». Для этого используют две системы растворителей: №1 (хлороформ:уксуснаякислота:вода 13:2,5:1) и №2 (уксусная кислота - н-гексан - диэтиловый эфир 2:1:4). Хроматограммы, полученные с использованием системы №1, детектировали раствором бромкрезолового зеленого 0,4% [Лурье Ю.Ю. Справочник по аналитической химии. - М: Химия, 1971. - С.108; Кейтс М. Техника липидологии.- М.: Мир, 1975.- 322 с.]. При полном извлечении насыщенных жирных кислот отсутствуют пятна желтого цвета. Хроматограммы, полученные с использованием системы №2, детектировали УФ-светом при длине волны 365 нм. При полном извлечении ненасыщенных жирных кислот отсутствуют пятна с ярко-голубой флуоресценцией.

Полученное извлечение упаривают при температуре 50-60°С достаточной влажности 5%, а затем высушивают при температуре 60°С и давлении 0,5 атм до полного удаления хлороформа и спирта этилового. Выход сухого извлечения составляет 62-64% от массы воздушно-сухого сырья. Выделенное извлечение исследовали на наличие высших жирных кислот методом газожидкостной хроматографии. Массовые доли жирных кислот определяли методом внутренней нормализации после ацетилирования смолистой фракции с метиловым спиртом и ацетилхлоридом при нагревании с обратным холодильником. После отгона избытка спирта остаток растворяли в н-гексане. Идентифицированы пальмитиновая, олеиновая, линолевая, линоленовая и арахидоновая кислоты. Количество агарициновой кислоты в составе липидной фракции определяли методом внешнего стандарта (Sigma Ol.) с содержанием 96% с концентрацией 34,15 мг/мл в метиловом спирте. Содержание агарициновой кислоты в липидной фракции исследуемого образца трутовика лекарственного составило 14,7%.

Массу растворяют в спирте этиловом 70% в соотношении 1:10 и получают настойку с концентрацией сухого остатка 6,4%.

При изучении антимикробных свойств целевого продукта изучали: извлечение из плодового тела трутовика, настойку календулы. При исследовании антимикробной активности целевого продукта использовали метод, основанный на способности лекарственных веществ диффундировать в агар, зараженный тест-культурами микроорганизмов, и подавлять рост последних [Справочник по микробиологическим и вирусологическим методам исследования / Под ред. Биргера М.О. - М.: Медицина, 1982. - С.172-177]. Определение активности изучаемых настоек проводили в 3-х чашках Петри одинакового диаметра с плоским дном. В чашки, устанавливаемые горизонтально, наливали по 15 мл расплавленного питательного агара. Слой агара в чашке Петри заливали 1 - 2 мл взвеси испытуемого микроба в физиологическом растворе. Затем излишек взвеси полностью удаляли, подсушивали поверхность агара в течение 30 минут. Затем сверлом (6 мм диаметром) пробуравливали 6 отверстий («колодцев») на расстоянии 2,5 см от центра и на одинаковом расстоянии друг от друга «колодцы» заполняли образцами настоек календулы и плодового тела гриба трутовика и растворителем в соответствующей концентрации (контроль). Чашки оставляли при комнатной температуре на 30 минут, после чего их ставили в термостат при температуре 37°C, не переворачивая, строго горизонтально, чтобы получить круглые зоны. Под крышки чашки Петри помещали стерильный фильтр во избежание попадания конденсата на лунки. Зоны угнетения измеряли через 16 часов. Оценка результатов проводилась по диаметру зон задержки роста вокруг «колодца», включая диаметр самого «колодца»:

- отсутствие зоны задержки роста - испытуемая культура не чувствительна к данной концентрации препарата;

- диаметр зоны задержки роста 10 мм - умеренная чувствительность культуры к данной концентрации препарата;

- диаметр зоны задержки роста более 10 мм - высокая чувствительность испытуемой культуры к данной концентрации препарата.

Результаты эксперимента представлены в табл.1 и примерах 1-3.

Пример 1

Настойка плодового тела гриба трутовика обладает:

1) выраженным антимикробным действием в отношении грамположительных кокков рода Staphylococcus: Staphylococcus aureus (209) 25,0±2,0; Staphylococcus aureus (Type) 21,0±1,0; Staphylococcus epidermidis Wood-46 22,0±1,0;

2) выраженным антимикробным действием в отношении грамотрицательных микроорганизмов Shigella sonnei 3d 14,0±2,0;

3) выраженным антимикробным действием в отношении спорообразующих микроорганизмов рода Bacillus: Bacillus subtilis L217,0±1,0; Bacillus anthracoides - 1 17,0±1,0;

4) умеренным антимикробным действием в отношении Salmonella typhimurium - 9,0±1,0 и Escherichia coli - 9,0±1,0 (табл.1).

Пример 2

Настойка календулы обладает:

1) умеренным антимикробным действием в отношении грамположительных кокков рода Staphylococcus: Staphylococcus aureus (209) 8,0±2,0; Staphylococcus aureus (Type) 7,0±1,0; Staphylococcus epidermidis Wood-46 8,0±1,0;

2) выраженным антимикробным действием в отношении грамотрицательных микроорганизмов Shigella sonnei 3d 10,0±2,0;

3) выраженным антимикробным действием в отношении спорообразующих микроорганизмов рода Bacillus: Bacillus subtilis L2 10,0±1,0; Bacillus anthracoides - 1 10,0±1,0;

4) умеренным антибактериальным действием в отношении Salmonella typhimurium - 9,0±1,0 и Escherichia coli - 9,0±1,0 (табл.1).

Противоспалительную активность настойки календулы и настойки плодового тела гриба трутовика изучали на модели термического ожога кожи спины крыс. Термический ожог кожи спины у белых крыс вызывали контактным высокотемпературным способом с помощью лабораторной пробирки с водой, нагретой до 100°C. Данный способ позволяет получить стандартные по площади (2 см) и глубине ожоги всей толщи кожи. Время экспозиции пробирки, нагретой до 100°C, составляло 20 секунд. Ожог наносили животным под эфирным наркозом. При соблюдении этих условий у всех подопытных животных ожоги кожи соответствовали IIIА степени по клинической классификации ожогов. Динамику ожогового повреждения оценивали на 14 сутки по площади раны весовым методом [Гублер Е.В. и др. Термические ожоги и ожоговая болезнь /Моделирование заболеваний. - М., 1973. - С.59-78].

В качестве лечения на ожоговую поверхность наносили настойку календулы (в опытной группе) и извлечение из плодового тела гриба трутовика в группе сравнения. В контрольной группе наносили спирт этиловый 70%. Процедуру проводили ежедневно, 1 раз в сутки, на протяжении 14 дней. Результаты исследования представлены в табл.2, примерах 4-6, фото 1-6. На фото 1-6 документировано состояние ожоговых ран на 1 и 14 день от нанесения ожога. На фото 1 (группа 1), 2 (группа 2), 3 (группа 3) видно, что цвет, размер, форма ожоговых ран во всех экспериментальных группах животных практически идентична, что говорит о правильном и адекватном моделировании ожоговой патологии.

Пример 4. На фоне лечения спиртом этиловым 70% площадь раны на коже спины крыс (группа 1) на 14 день составила 168,8±6,2 мг (табл.2), в группе наблюдается начало отторжения струпа с раневой поверхности (фото 4).

Пример 5. На фоне лечения извлечением из плодового тела гриба трутовика площадь раны на коже спины крыс (группа 2) на 14 день составила 59,6±5,9 мг или 35,27% по отношению к контролю (табл.2), струп сохранен лишь на небольшом участке ожоговой поверхности (фото 5), более активно, чем в группах 1 и 3, восстанавливается волосяной покров (см. фото 4, 5, 6).

Пример 6. На фоне лечения настойкой календулы (группа 3) площадь раны на коже спины крыс на 14 день составила 67,3±5,3 мг или 59,20% по отношению к контролю (табл.2), струп сохранен лишь на небольшом участке ожоговой поверхности (фото 6).

Таблица 2
Влияние настойки календулы и извлечение из плодового тела гриба трутовика на процесс заживления ожоговой раны (14 сутки)
Группы животных Площадь раны в весовых единицах, мг Размер раны в % к контролю
Контроль 168,8±6,2 - 100%
Настойка календулы 67,3±5,3 Р<0,05 59,20
Извлечение из плодового тела гриба трутовика 59,6±5,9 Р<0,05 35,27
Р1>0,05
Примечание:
Р - по отношению к контролю;
Р1 - по отношению к настойке календулы

Способ получения средства, обладающего противовоспалительной, антимикробной, противоожоговой активностью, отличающийся тем, что сырьем является плодовое тело гриба трутовика, которое измельчают до размера частиц не более 0,25 мм, экстрагируют смесью хлороформ:спирт этиловый 96% (1:2) при соотношении сырья и экстрагента 1:40 в течение 120 ч, упаривают при температуре 50-60°С до остаточной влажности 5%, высушивают при температуре 60°С и давлении 0,5 атм до полного удаления хлороформа и спирта этилового, полученную массу растворяют в спирте этиловом 70% в соотношении 1:10.



 

Похожие патенты:
Изобретение относится к профилактическому средству для кожи, обладающему противотуберкулезным эффектом, которое включает в качестве активных субстанций 0,50-0,75 мас.% стрептомицина и 7,0-10,0 мас.% стабилизированного золя наночастиц серебра, а также полиэтиленоксиды (ПЭО) марок 400 и 1500 в качестве основы.

Изобретение относится к соединениям формулы (Ia) или их фармацевтически приемлемым солям, таутомерам, или N-оксидам, для применения в профилактике или лечении болезненных состояний или заболеваний, опосредуемых циклин-зависимой киназой и гликоген синтаз киназой-3, таких, как раковые заболевания.

Изобретение относится к соединениям формулы (Ia) или их фармацевтически приемлемым солям, таутомерам, или N-оксидам, для применения в профилактике или лечении болезненных состояний или заболеваний, опосредуемых циклин-зависимой киназой и гликоген синтаз киназой-3, таких, как раковые заболевания.

Изобретение относится к применению октенидина дигидрохлорида для получения полутвердых фармацевтических композиций для лечения ран, атопических дерматитов, инфицированных экзем, дерматомикозов, вагинальных инфекций, угрей, герпеса и/или борьбы с патогенными микроорганизмами, резистентными ко многим лекарственным препаратам.
Изобретение относится к медицине, а именно к акушерству, и касается определения тактики ведения при недоношенной беременности, осложненной преждевременным разрывом околоплодных оболочек (ПРПО).
Изобретение относится к медицине и может быть использовано для лечения абсцедирующего фурункула. .

Изобретение относится к области химии и медицины и касается новых производных 4,4,7-триметил-2-фенил-4а,5,8,8а-тетрагидро-4Н-бензо[1,3]диоксин-8-ола в качестве анальгезирующих средств, обладающих высокой активностью, низкой токсичностью, которые могут быть получены из доступного природного соединения -пинена.

Изобретение относится к новым соединениям, представленным следующей общей формулой (1), или к их солям: где R10 представляет собой циклогексил, необязательно замещенный заместителем, выбранным из группы А1, или циклогексенил, необязательно замещенный заместителем, выбранным из группы А1, R30, R31 и R 32 представляют собой водород, R40 представляет собой С1-10алкил, необязательно замещенный заместителем, выбранным из группы D1, n равно целому числу 0 или 1, X1 представляет собой азот, и R20, R21, R 22 и R23 независимо представляют собой водород, за исключением случая, когда R20, R21, R22 и R23 все представляют собой водород, С1-6 алкилтио, необязательно замещенный заместителем, выбранным из группы F1, C2-7 алкоксикарбонил, C 1-6 алкил, замещенный заместителем, выбранным из группы W1, C1-6 алкил, замещенный заместителем, выбранным из группы К1, C1-6 алкокси, замещенный заместителем, выбранным из группы W1, 5-6-членную гетероциклическую группу, которая представляет собой неароматическое насыщенное кольцо, содержащее один или два гетероатома, выбранных из атомов N или S, замещенную заместителем, выбранным из группы W1, 6-членную гетероциклическую группу, которая представляет собой неароматическое насыщенное кольцо, содержащее один или два гетероатома, выбранных из атомов N или S, замещенную заместителем, выбранным из группы V1, пиридил, замещенный заместителем, выбранным из группы W1, фенил, необязательно замещенный заместителем, выбранным из группы W1, C2-7 алкенил, необязательно замещенный заместителем, выбранным из группы W1, C2-7 алкинил, необязательно замещенный заместителем, выбранным из группы W1, 3-6-членный циклоалкил, необязательно замещенный заместителем, выбранным из группы W1, 5-6-членный циклоалкенил, необязательно замещенный заместителем, выбранным из группы W1, -NR1XR2X , -CO-R1X, -CO-NR1XR2X, -NR 1X-CO-R2X, -SO2-R3X или -O-SO2-R3X,где R 1X представляет собой водород или 6-членную гетероциклическую группу, которая представляет собой неароматическое насыщенное кольцо, содержащее один или два гетероатома, выбранных из атомов N или О, R2X представляет собой 6-членную гетероциклическую группу, которая представляет собой неароматическое насыщенное кольцо, содержащее один или два гетероатома, выбранных из атомов N или О, и R3X представляет собой C1-6 алкил, необязательно замещенный заместителем, выбранным из группы F1; или R21 и R22 вместе образуют кольцо, выбранное из группы Z1, где группа А1 состоит из С1-6 алкила, группа D1 состоит из циклопропила и тетрагидропиранила, группа F1 состоит из галогена, группа W1 состоит из гидроксила, C2-7 алкоксиалкила, фенокси, С2-7 алкоксикарбонила, -NR6XR7X и -CO-NR6XR7X , где R6X и R7X независимо представляют собой водород или С1-6 алкил, группа V1 состоит из оксо (=O) и этилендиокси(-O-СН2СН2-O-), где этилендиокси допустим только в том случае, если образуется соединение двух колец с одним общим атомом вместе с замещенной 6-членной гетероциклической группой, группа К1 состоит из 6-членной гетероциклической группы, которая представляет собой неароматическое насыщенное кольцо, содержащее один или два гетероатома, выбранных из атомов N или О, группа U1 состоит из карбоксила, C1-6 алкокси, фенила и -CO-NR8XR9X, где R 8X и R9X представляют собой водород, и группа Z1 состоит из и где R1Z представляет собой C1-6 алкил или бензил.

Изобретение относится к области медицины, а именно к химико-фармацевтической промышленности, в частности к болеутоляющим композициям N,2,3-триметил-2-изопропилбутамида местного действия и способам их применения.

Изобретение относится к новым соединениям, имеющим формулу (1a): где R1 представляет собой водород, (С1-С4)алкил или галоген; R2 представляет собой водород, галоген, амино, (С1-С 4)алкил, гетероциклил, (С6-С10)арил-(С 1-С4)алкилгетероциклил, (С3-С 6)циклоалкилгетероциклил, -NR11R12 ; NHR16; R3 представляет собой водород, NR11R12 или NHR16; R4 и R5 каждый независимо выбраны из: водорода, галогена, (С1-С4)алкила; R6 и R8 каждый независимо выбраны из: водорода, (С1-С 4)алкила и галогена; R7 - это гидрокси-(С 1-С4)алкил, формил, -(CH2)n C(O)OR10 или CONHR16; R10 - это водород, (С1-С4)алкил; R11 и R12 каждый независимо выбраны из водорода, (С 1-С4)алкила, гидрокси-(С1-С4 )алкила, галоген-(С1-С4)алкила, амино-(С 1-С4)алкила; или R11 и R12 , вместе с атомом N, к которому они присоединены, образуют 6- или 7-членный гетероцикл, необязательно имеющий один или более дополнительных гетероатомов N или О; R16 - это формил, (С1-С4)алкил, галоген-(С1-С 4)алкил, гидрокси-(С1-С4)алкил, (C 1-С4)алкилкарбонил, галоген-(С1-С 4)алкилкарбонил, гидрокси-(С1-С4)алкилкарбонил, (C1-С4)алкилкарбонилокси-(С1 -С4)алкилкарбонил или гетероциклил-(С1-С 4)алкилкарбонил; n - это 0, 1 или 2; где (С1 -С4)алкил не замещен или замещен одной или двумя одинаковыми или разными группами, выбранными из: галогена, гидроксигруппы, и (С6-С10)арила; гетероциклил представляет собой 6- или 7-членное насыщенное моноциклическое кольцо, содержащее один или два гетероатома, выбранных из азота и кислорода, и которое не замещено или замещено одной или двумя одинаковыми или разными группами, которые выбраны из оксогруппы, (С1-С 4)алкила, (С3-С6)циклоалкила, (С 6-С10)арила, гидрокси-(C1-С4 )алкила, (С6-С10)арил-(С1-С 4)алкила, формила, (С1-С4)алкилкарбонила, (С6-С10)арил-(С1-С4 )алкоксикарбонила, (С6-С10)арилкарбонила, (С3-С6)циклоалкилкарбонила, -SH, -S-(C 1-С4)алкила и -S(O)2-(С1 -С4)алкила; (С6-С10)арил не замещен или замещен (С1-С4)алкилом; W представляет собой S(O)m; m равно 0, 1 или 2; и к их фармацевтически приемлемым солям.
Изобретение относится к фармацевтической промышленности, в частности к противовоспалительной композиции. .

Изобретение относится к области медицины, а именно к разработке новых лекарственных средств для лечения воспалительных заболеваний, в частности астмы. .
Изобретение относится к области фармацевтической промышленности и медицины и предназначено для лечения ран и ожогов. .
Наверх