Применение активаторов растворимой гуанилатциклазы для лечения нарушений кровоснабжения

Настоящее изобретение относится к области фармацевтики и медицины и фармацевтической композиции для лечения реперфузионных нарушений, содержащей инертные вспомогательные вещества и в качестве активного компонента соединения общей формулы I-IVa.

 

Настоящее изобретение касается применения соединений для получения фармацевтического препарата/медикамента для профилактики и/или лечения реперфузионных нарушений.

Реперфузионные нарушения в общем проявляются по окончании продолжительного ишемического периода, например, как следствие проникающих накапливающихся токсических метаболитов после восстановления кровотока и/или массивного выделения свободных ионов кальция в возбудимых клетках. Эти нарушения часто проявляются после тромбоза сосудов, особенно после острых артериальных тромбозов, если отсутствует компенсирующее коллатеральное кровообращение (так называемые инфаркты). Наиболее известны инфаркт миокарда и инфаркт мозга (инсульт). В то время как раннее восстановление кровотока благодаря тромболизу после временной ишемии может уменьшить объем цитопатических нарушений (масштаб инфаркта) или предотвратить их, возобновление кровоснабжения несмотря на это может в определенной степени вызывать, например, сбои в работе сердца или гибель клетки (постперфузионный синдром). Поэтому большую клиническую ценность представляют медикаменты, которые позволяют сохранять нормальные функции, например, сердца во время реперфузии и при различных формах кардиохирургии.

Известно, что ишемические реперфузионные нарушения и связанные с этим клеточные повреждения проявляются, например, при инфаркте миокарда, замене артериальных коронарных сосудов сердца, особенно в кардиохирургии на открытой грудной клетке, при ангине, болезнях, вызванных тромбозом периферических сосудов, при инсульте, при трансплантации органов и тканей (например, сердца, печени, почек, легких), в общей хирургии, при острой почечной недостаточности и при недостаточном кровоснабжении органов (например, легких, сердца, печени, кишечника, поджелудочной железы, почек, конечностей или мозга).

Известно, что механизмы (например, при действии веществ, выделяющих NO), которые приводят к увеличению внутриклеточного транспортного материала для гуанозинмонофосфата (ГМФ), могут приводить также к уменьшению реперфузионных нарушений, если лечение этими препаратами начинается перед ишемическим периодом или в некоторых случаях во время его. Применение перед ишемическим периодом в общем известно как профилактика/защита и/или предварительная подготовка и включает клеточную защиту, особенно защиту возбудимых клеток (например, нервных и мышечных клеток). Лечение после ишемического периода называется соответственно последующим поддерживающим лечением.

Повышенные уровни ГМФ могут приводить к защите клеток, тканей и органов от реперфузионных нарушений. Активирование (агонистами, веществами, обладающими сродством к рецептору) растворимой гуанилатциклазы ведет к увеличению транспортного материала для ГМФ. Удивительным образом теперь обнаружено, что соединения согласно изобретению, активаторы растворимой гуанилатциклазы (соединения, отвечающие формулам от I до VI), особенно пригодны для получения фармацевтических препаратов / лекарственных средств для профилактики и/или лечения и ограничения реперфузионных нарушений у млекопитающих, особенно у людей.

Соединение (I) отвечает следующей формуле:

Соединение (I), его получение и применение в качестве лекарственного средства уже были опубликованы в международном патенте WO 01/19780.

Соединение (II) отвечает следующей формуле:

Соединение (II), его получение и применение в качестве лекарственного средства уже были опубликованы в международном патенте WO 00/06569.

Соединение (III) отвечает следующей формуле:

Соединение (III), его получение и применение в качестве лекарственного средства уже были опубликованы в международных патентах WO 00/06569 и WO 02/42301.

Соединение (IV) отвечает следующей формуле:

Соединение (IV), его получение и применение в качестве лекарственного средства уже были опубликованы в международных патентах WO 00/06569 и WO 3/095451.

Соединение (IVa) отвечает следующей формуле:

Соединение (IVa), его получение и применение в качестве лекарственного средства уже были опубликованы в международных патентах WO 00/06569 и WO 03/095451.

Соединение (V) отвечает следующей формуле:

Соединение (VI) отвечает следующей формуле:

Соединения (V) и (VI), их получение и применение в качестве лекарственных средств уже были опубликованы в международном патенте WO 00/02851.

Предметом настоящего изобретения является применение соединений, отвечающих формулам (I-VI), их солей, гидратов, а также гидратов солей для получения лекарств для лечения нарушений кровоснабжения.

Дополнительный вариант выполнения настоящего изобретения включает процедуру для профилактики и/или лечения нарушений кровоснабжения с использованием по меньшей мере одного из соединений, отвечающих формулам (I-VI).

Следующим предметом настоящего изобретения является лекарственное средство, содержащее по меньшей мере одно соединение согласно изобретению и по меньшей мере одно или несколько других биологически активных веществ, особенно для лечения и/или профилактики вышеназванных заболеваний.

Соединения согласно изобретению могут действовать системно и/или локально. С этой целью их можно применять подходящим способом, как например: оральным, парентеральным, внутрилегочным, назальным, в подъязычную область (под язык), лингвальным (на язык), буккальным (в щечную область), ректальным, а также накожно, подкожно, конъюнктивально (в конъюнктиву), внутрь уха (внутриушное применение) или в качестве имплантата или стента (устройства для реконструкции просвета органа).

Для этих способов применения соединения согласно изобретению можно выпускать в удобных для применения формах.

Для орального применения на современном уровне техники пригодны такие лекарственные формы, которые действуют быстро и/или модифицируют дозирование соединений согласно изобретению, содержащихся в кристаллическом и/или аморфном состоянии и/или в виде раствора, как например: таблетки (без покрытия или с покрытием, например с покрытием, устойчивым к желудочному соку, или медленно растворяющимся, или нерастворимым, которое позволяет контролировать высвобождение соединения согласно изобретению), таблетки, быстро разрушающиеся в полости рта, или облатки/лекарства в оболочке, лиофилизаты / продукты, полученные сублимационным способом, капсулы (например, твердые или мягкие желатиновые капсулы), драже, гранулированные продукты (гранулы), порошки, эмульсии, суспензии, аэрозоли или растворы.

Парентеральное применение может происходить с обходом стадии всасывания (например, при введении внутривенно, внутриартериально, внутрисердечно или в поясничный отдел, а также при спинномозговом / интраспинальном введении) или с включением всасывания (например, внутримышечное, внутрикожное, чрескожное, подкожное или внутрибрюшинное введение). Для парентерального применения в качестве лекарственных форм пригодны в том числе препараты для инъекций и вливаний в форме растворов, суспензий, эмульсий, лиофилизатов (продуктов, полученных сублимационным способом) или стерильных порошков.

Для других способов применения пригодны, например, ингаляционные лекарственные формы (в том числе ингаляторы для порошков, распылители для лекарств), капли, растворы и спреи для носа; таблетки, которые следует принимать на язык, под язык или за щеку; лекарства в оболочке/облатки или капсулы; суппозитории, ушные или глазные препараты, вагинальные капсулы, водные суспензии (лосьоны, встряхиваемые смеси), лиофильные суспензии, мази, кремы, трансдермальные терапевтические системы (как например, пластыри), молочко, пасты, пены, присыпки, имплантаты или стенты.

Соединения согласно изобретению можно превратить в вышеприведенные лекарственные формы. Это может происходить известным способом путем смешивания с инертными нетоксичными добавками с подходящими фармацевтическими свойствами. Такими вспомогательными веществами считаются в том числе носители (например, микрокристаллическая целлюлоза, лактоза, маннит), растворители (например, жидкие полиэтиленгликоли), эмульгаторы и диспергирующие или смачивающие агенты (например, додецилсульфат натрия, полиоксиэтиленсорбитанолеат), связующие вещества (например, поливинилпирролидон), синтетические и природные полимеры (например, альбумин), стабилизаторы (например, антиоксиданты, как аскорбиновая кислота), красители (например, неорганические пигменты, как окись железа) и вещества, улучшающие вкус и/или запах лекарства.

Следующим предметом настоящего изобретения являются лекарственные средства, которые содержат по меньшей мере одно соединение согласно изобретению вместе с одним или несколькими инертными, нетоксичными добавками с подходящими фармацевтическими свойствами, а также их применение для вышеназванных целей.

В общем для достижения эффективного результата удобной (полезной) оказалась суточная доза приблизительно от 0,01 до 5000 мг/кг, предпочтительно от 0,5 до 1000 мг/кг массы тела.

Несмотря на это, в случае необходимости может потребоваться отойти от названных количеств, а именно, в зависимости от массы тела, способа применения, индивидуальных особенностей по отношению к биологически активному веществу, от вида препарата и момента времени или интервала, с которым принимается препарат. Таким образом, в некоторых случаях может оказаться достаточным обойтись меньшими количествами (препарата), чем вышеуказанные минимальные, тогда как в других случаях необходимо превысить указанную верхнюю границу. В случае применения сравнительно больших количеств (препарата) можно порекомендовать распределить суточную дозу на несколько отдельных приемов в течение дня.

При этом в соответствии с характером действия препарата рецептура может содержать от 0,1 до 99% действующего вещества, в благоприятном случае 25-95% для таблеток и капсул и 1-50% для жидких составов, то есть действующее вещество должно присутствовать в количествах, достаточных для того, чтобы достичь указанного диапазона дозировки.

Дополнительным вариантом исполнения настоящего изобретения является применение комбинации одного или нескольких соединений согласно изобретению вместе с одним или несколькими другими веществами. Подходящими комбинациями веществ являются, например, вещества, которые применяются для профилактики и/или лечения инфарктов и нарушений кровоснабжения. Образцом и предпочтительным вариантом в связи с этим становятся вещества, повышающие содержание гуанозинмонофосфата (ГМФ), как например соединения, выделяющие NO, ингибиторы фосфодиэстеразы, тромболитики и вещества, обладающие сродством к аденозину (аденозинагонисты).

Экспериментальная часть

Ограничение масштаба инфаркта и дальнейших нарушений кровоснабжения на изолированном сердце с помощью дозы NO-независимого активатора растворимой гуанилатциклазы

При определении масштаба инфаркта и проведении эксперимента следуют методу, описанному Zhang et al. in J. Cardiovasc. Pharmacol., 42, 764-771, 2003.

Кроликов породы "Новозеландский белый" обоего пола (масса тела 2-3 кг) анестезировали с помощью натрий-пентобарбитала (-нембутала; 30 мг/кг внутривенно) и подключили к аппарату искусственного дыхания. После хирургического вмешательства изолированное сердце быстро переносили в установку Лангендорфа. Изолированное сердце фиксировалось при этом у корня аорты и ретроградным током заполнялось буфером Кребса, состоящим (в ммоль) из: NaCl 118,5; KCl 4,7; MgSO₄ 1,2; KH₂PO₄ 1,2; NaHCO₃ 24,8; CaCl₂ 2,5 и глюкозы 10. Буфер газировали смесью из 95% О₂ и 5% СО₂ с показателем рН 7,35-7,45 и температурой 38°С. Все сердца можно было привести к равновесию по меньшей мере на 30 минут перед началом протокола испытаний.

Масштаб инфаркта определялся в конце эксперимента, причем изолированное сердце быстро извлекалось из установки Лангендорфа. После стадии промывания физиологическим раствором коронарную артерию снова зажимали и в сердце вводили флуоресцирующие микросферы, чтобы представить зону риска, или ишемический ареал, в виде не флуоресцирующей ткани. После этого сердце взвешивали и подвергали глубокой заморозке, чтобы можно было нарезать пластины толщиной 2 мм. Эти пластины инкубировали в течение 20 минут при 37°С в 1% растворе трифенилтетразолхлорида (ТТХ) в фосфатном буфере. Жизнеспособная ткань при этом окрашивается в темнокрасный цвет, некротизированная ткань, напротив, не окрашивается и имеет коричневатый (бурый) цвет.

Все сердца (группа с n=6) подвергали 30-минутной ишемии путем наложения коронарной лигатуры и 120-минутной фазе кровоснабжения (реперфузии). Контрольные образцы подвергали только одной ишемии и реперфузии. В лечебной группе в сердца вводили NO-независимый активатор растворимой гунилатциклазы. Результаты можно подытожить выводом, что активаторы растворимой гуанилатциклазы пригодны для того, чтобы ограничить масштаб инфаркта и уменьшить нарушения кровоснабжения.

Фармацевтическая композиция для лечения реперфузионных нарушений, содержащая активное вещество и инертные, нетоксичные, фармацевтически приемлемые вспомогательные вещества, отличающаяся тем, что в качестве активного вещества она содержит, по меньшей мере, одно вещество из группы, включающей соединения формул (I-IVa)


их соли, гидраты и гидраты солей.