Противовирусное средство для профилактики и лечения клещевого энцефалита


 


Владельцы патента RU 2444363:

Общество с ограниченной ответственностью "Завод Медсинтез" (RU)

Настоящее изобретение относится к медицине, в частности к применению противовирусного средства натриевая соль 2-метилтио-6-нитро-1,2,4-триазоло[5,1-с]-1,2,4-триазин-7-она дигидрат (далее Средство) для профилактики и лечения вирусных заболеваний, вызванных вирусом клещевого энцефалита. Также описан способ профилактики и лечения состояний, вызванных вирусом клещевого энцефалита у человека или животного, включающий введение человеку или животному представленного выше лекарственного Средства. Технический результат - расширение ассортимента лекарственных средств, обладающих широким спектром действия и предназначенных для лечения и профилактики клещевого энцефалита. 2 н. и 18 з.п. ф-лы, 2 пр., 1 табл.

 

Заявляемое изобретение относится к медицине и фармации, в частности к лечению и профилактике вирусных заболеваний, преимущественно, вызванных вирусом клещевого энцефалита.

В последние годы в России и за рубежом проводятся интенсивные исследования по разработке химиопрепаратов для лечения и профилактики вирусных инфекций. Особое внимание уделяется инфекциям, протекающим с поражением центральной нервной системы (бешенство, клещевой энцефалит и др.), которые вызывают у человека острые заболевания с высоким уровнем летальности и тяжелыми постинфекционными осложнениями (см., например, И.Ф.Баринский, О.М.Попова, Г.А.Галегов и др. Антивирусные вещества. - Рига, 1982. - С.7-8; Ф.И.Ершов, И.Ф.Баринский. Вопросы вирусологии. - 1983. - №4. - С.74-78).

Проблема заболеваемости людей клещевым энцефалитом весьма актуальна в настоящее время для многих территорий Российской Федерации. Имеющиеся в настоящее время вакцины недостаточно эффективны. Клещевой энцефалит по эпидемиологической значимости, тяжести течения инфекции и летальности занимает существенное место среди природно-очаговых вирусных инфекций (см., например, Д.К.Львов, С.М.Клименко, С.Я.Гайдамович. Арбовирусы и арбовирусные инфекции. - М., 1989. - 336 с.; Н.П.Мишаева, И.К.Зубович, А.А.Згиревская и др. Антивирусные вещества при экспериментальной терапии вирусных инфекций. - Минск, 1986. - С.83-85; А.Б.Тарасенко, А.А.Згировская. Антивирусные вещества при экспериментальной терапии вирусных инфекций. - Минск, 1986. - С.85-89). В настоящее время насчитываются единицы эффективных и разрешенных к применению низкомолекулярных противовирусных соединений. За рубежом для лечения и профилактики вирусных инфекций используют такие соединения, как ацикловирин, рибовирин, амантадин, азидомидин и др., в нашей стране нашли широкое применение ремантадин, рибамидил, оксолон, метисазон, мекасин, полудан и др. Эти препараты чаще всего применяют при лечении паротита у детей, гриппозных пневмоний, генитального герпеса, опоясывающего лишая (см., например, Г.И.Фокина, Т.В.Фролова, В.М.Ройхель. Вопросы вирусологии. - М. - 1993. - №1. - С.18-21; F.I.Hayden, R.I.Douglas, R.Simons. Antimicrob Agents chemother. - 1980. - Vol.18 - P.536-541).

Одним из перспективных противовирусных лекарственных соединений для лечения клещевого энцефалита является натриевая соль 2-метилтио-6-нитро-1,2,4-триазоло[5,1-c]-1,2,4-триазин-7-она дигидрат (далее Средство).

К настоящему времени стратегия отбора эффективных неспецифических медицинских средств защиты для ряда вирусных инфекций описана в Руководствах по доклинической оценке лекарственных средств (см. Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ. - М., Минздрав РФ, 2005).

Техническим результатом, на достижение которого направлено заявляемое изобретение, является расширение ассортимента лекарственных средств, обладающих широким спектром действия и предназначенных для лечения и профилактики вируса клещевого энцефалита.

Указанный технический результат достигается тем, что согласно изобретению для лечения и профилактики клещевого энцефалита применяют противовоспалительное и противовирусное лекарственное Средство.

При этом заболевание или состояние представляет собой клещевой энцефалит, вызвано вирусом клещевого энцефалита, лекарственное средство предназначается для системного введения с использованием дозированного количества лекарственного средства, например 30-100 мг/кг - для лечения и профилактики заболевания.

Лекарственное средство выполнено в виде раствора, таблеток или капсул и предназначено для введения человеку, домашним и сельскохозяйственным животным перорально или в виде инъекций.

Технических решений, совпадающих с совокупностью существенных признаков заявляемого изобретения, не выявлено, что позволяет сделать вывод о соответствии заявляемого изобретения такому условию патентоспособности как «новизна».

Заявляемые существенные признаки, предопределяющие получение указанного технического результата, явным образом не следуют из уровня техники, что позволяет сделать вывод о соответствии заявляемого изобретения такому условию патентоспособности как «изобретательский уровень».

Условие патентоспособности «промышленная применимость» подтверждено на примерах конкретного выполнения.

Исследования противовирусной активности Средства проводили в экспериментах на клеточных культурах и на модели экспериментальной инфекции мышей клещевого энцефалита.

Статистическую обработку полученных результатов проводили общепринятыми методами (см. Г.Ф.Лакин. Биометрия. - М. - 1990).

Пример 1.

Для изучения противовирусной активности Средства в культуре клеток СПЭВ использовали 24-луночные планшеты с применением методов ЦПД и бляшкообразования по следующим схемам.

Схема 1. 1.1. Монослой клеток во флаконах Т-25 заражали вирусом клещевого энцефалита с множественностью 0,01 БОЕ/кл.

1.2. После адсорбции вируса в течение 60 мин монослой клеток тщательно отмывали раствором Хенкса и заливали по 6 мл среды поддержки с Средством в концентрации 0,5 мкг/мл.

1.3. Ежедневный отбор проб для дальнейших исследований.

1.4. Исследование проб методом бляшкообразования.

Схема 2. 2.1. 20 мышам массой 18-20 г вводили внутрибрюшинно по 12 мг на 1 животное.

2.2. Через 18 часов у мышей забирали тотально кровь и получали сыворотку по общепринятой методике.

2.3. Сыворотку инактивировали при 56°C в течение 30 мин.

2.4. Вирус титровали десятикратными разведениями от 10-1 до 10-9 и вносили в 24-луночные планшеты (1 разведение в 4 лунки). Вирус адсорбировали в течение 60 мин.

2.5. После адсорбции вносили агаровое покрытие, при этом сыворотку плодов коров заменяли на сыворотку мышей, содержащую Средство.

2.6. Учет опыта проводили на 4-5 сутки.

В опытах отрабатывали 2 схемы экспериментов с постоянной дозой Средства 0,5 мкг/мл (что составляет 1/16 от дозы острой токсичности в культуре клеток). Для экспериментальной инфекции готовили 10-кратные разведения вируса на среде поддержки (рабочая среда 199 + 2% сыворотки плодов коров). При выявлении противовирусной активности Средства методом ЦПД с использованием дозы 0,5 мкг/мл и 1 мкг/мл цитопатический эффект наступал одновременно на 4-7 сутки в зависимости от дозы вируса в опыте и в контроле. Дальнейшее изучение противовирусной активности Средства проводили методом бляшкообразования.

2-3-суточную культуру клеток СПЭВ, выращенную в 24-луночных планшетах, заражали 10-кратными разведениями вируса. После адсорбции вируса в течение 60 минут в планшеты вносили по 1 мл агарового покрытия с содержанием 1 мкг/мл Средства в конечном объеме. На 4-5 сутки монослой клеток фиксировали, после чего окрашивали кристаллическим фиолетовым и проводили подсчет бляшек. В экспериментах с использованием схемы №1 отмечено снижение репродукции вируса в 10 раз.

В опытах, поставленных по схеме 2, отмечали снижение репродукции вируса в 100 раз. Для постановки этих экспериментов сыворотку от мышей получали и использовали в день постановки опыта. При проведении опытов с использованием сыворотки, хранящейся при температуре -70°C, снижения репродукции вируса не отмечено.

Таким образом, при введении Средства в дозе 0,5 мкг/мл и 1 мкг/мл в среду поддержки и агаровое покрытие, а также при использовании сыворотки крови мышей, содержащей Средство, отмечено снижение репродукции вируса от 10 до 100 раз.

Пример 2.

Для исследования противовирусной активности Средства на модели экспериментальной инфекции мышей клещевого энцефалита использовали белых мышей массой 18-20 г. Животных инфицировали внутрибрюшинно по 0,5 мл десятикратными разведениями вируса - по 4 животных на одно разведение. Средство вводили в различные сроки по 3 и 12 мг на 1 животное. Титр вируса высчитывали по методу Рида и Менча.

В работе применяли следующие схемы введения Средства лабораторным животным.

Схема 1. 1.1. Вирус вводили внутрибрюшинно по 0,5 мл двум группам животных.

1.2. Через 6 дней опытной группе животных вводили Средство по 12 мг на 1 животное.

1.3. Через 24 ч этой же группе животных вводили по 3 мг Средства на 1 животное до окончания клинических проявлений инфекции в контрольной группе животных.

Схема 2. 2.1. Средство вводили за 6 дней до введения вируса в дозе 12 мг на 1 животное через каждые 24 ч.

2.2. На седьмой день одновременно вводили 12 мг Средства и 0,5 мл вируса в рабочей дозе одному животному.

Схема 3. 3.1. Средство в дозе 3 мг на 1 животное вводили за сутки до введения вируса.

3.2. Через 2 ч после заражения вводили Средство в дозе 3 мг.

3.3. В дальнейшем проводили ежедневную инъекцию Средства в дозе 3 мг до окончания клинических проявлений в контрольной группе.

Схема 4. 4.1. 12 мг на 1 животное вводили в день введения вируса.

4.2. Через каждые 24 ч вводили по 3 мг Средства до окончания клинических проявлений инфекции в контрольной группе животных.

За всеми группами животных наблюдали в течение 30 суток. Учет опытов проводили ежедневно по клиническим проявлениям и гибели животных.

Оценку противовирусного действия Средства проводили по трем параметрам: проявлению клинических признаков инфекции, выживаемости животных и увеличению средней продолжительности жизни.

Основные результаты исследований представлены в таблице. Из полученных данных следует, что Средство обладает противовирусной активностью. Внутрибрюшинное введение Средства создает определенную защиту животных от экспериментальной инфекции. Противовирусную активность отмечали по тесту выживаемости животных, а также по увеличению средней продолжительности жизни (СПЖ) от 17 до 25 дней. Снижение дозы вводимого Средства до 3 мг на 1 животное (что составило 1/32 от дозы острой токсичности) вызывало защиту животных от экспериментальной инфекции до 70%.

Результаты изучения эффективность экстренно-профилактического действия Средства на белых мышей, инфицированных вирусом клещевого энцефалита, представлены в таблице 1.

Таблица 1
Эффективность экстренно-профилактического действия Средства на белых мышей, инфицированных вирусом клещевого энцефалита
Группа животных Способ введения вируса Доза Средства, способ введения Количество инъекций вируса Количество инъекций Средства СПЖ Гибель животных в %
острый контроль п/к по 0,5 мл - 1 - 16,67 65
схема 1 п/к по 0,5 мл 12 мг/кг и 3 мг/кг в/бр по 0,5 мл 1 8 16,6 50
схема 2 п/к по 0,5 мл 12 мг/кг в/бр по 0,5 мл 1 4 25,0 30
схема 3 п/к по 0,5 мл 3 мг/кг в/бр по 0,5 мл 1 6 16,67 60
схема 4 п/к по 0,5 мл 12 мг/кг и 3 мг/кг в/бр по 0,5 мл 1 12 20,0 30
Примечание: п/к - подкожное; в/бр - внутрибрюшинно

Таким образом, введение Средства с целью профилактического предупреждения развития инфекции защищало от гибели до 70% животных. Средняя продолжительность жизни летально инфицированных животных в результате действия Средства возрастала на 8,3 суток.

Заявляемое изобретение способствует расширению ассортимента лекарственных средств, обладающих широким спектром действия и предназначенных для лечения и профилактики вируса клещевого энцефалита.

1. Применение противовирусного средства - натриевой соли 2-метилтио-6-нитро-1,2,4-триазоло[5,1-с]-1,2,4-триазин-7-она дигидрата (далее Средство) для профилактики и лечения вирусных заболеваний, вызванных вирусом клещевого энцефалита.

2. Применение по п.1, отличающееся тем, что заболевание или состояние представляет собой клещевой энцефалит.

3. Применение по п.1, отличающееся тем, что лекарственное Средство предназначается для системного введения.

4. Применение по п.1, отличающееся тем, что используют дозированное количество лекарственного Средства.

5. Применение по п.1, отличающееся тем, что указанное Средство предназначено для введения человеку, домашним и сельскохозяйственным животным.

6. Применение по п.1, отличающееся тем, что лекарственное Средство вводят перорально.

7. Применение по п.1, отличающееся тем, что лекарственное Средство вводят в виде инъекций.

8. Применение по п.6, отличающееся тем, что для лечения и профилактики заболевания количество лекарственного Средства в каждом дозированном количестве составляет 30-100 мг/кг.

9. Применение по п.1, отличающееся тем, что лекарственное Средство выполнено в виде таблеток.

10. Применение по п.1, отличающееся тем, что лекарственное Средство выполнено в виде капсул.

11. Применение по п.1, отличающееся тем, что лекарственное Средство выполнено в виде инъекционной формы.

12. Способ профилактики и лечения состояний, вызванных вирусом клещевого энцефалита, у человека или животного, отличающийся тем, что включает введение человеку или животному, страдающему от заболевания или состояния, лекарственного средства - натриевой соли 2-метилтио-6-нитро-1,2,4-триазоло[5,1-с]-1,2,4-триазин-7-она дигидрата.

13. Способ по п.12, отличающийся тем, что осуществляют лечение и профилактику заболеваний.

14. Способ по п.12, отличающийся тем, что заболевание представляет собой клещевой энцефалит.

15. Способ по п.12, отличающийся тем, что введение лекарственного Средства осуществляют дозированным количеством.

16. Способ по п.12, отличающийся тем, что лекарственное Средство вводят перорально.

17. Способ по п.12, отличающийся тем, что для лечения и профилактики заболевания количество лекарственного Средства в каждом дозированном количестве составляет 30-100 мг/кг.

18. Способ по п.16, лекарственное Средство выполнено в виде таблеток или в виде капсул.

19. Способ по п.12, отличающийся тем, что лекарственное Средство вводят в виде инъекций.

20. Способ по п.12, отличающийся тем, что лекарственное средство выполнено в виде инъекционной формы.



 

Похожие патенты:

Изобретение относится к новым химическим соединениям ряда пирроло-[1,2-а]бензимидазола, а именно к сульфатам 2-арил-4-диалкиламиноэтил-3-фенилпирроло[1,2-а]бензимидазолов общей формулы I: где NR2 принимает значения морфолино или диэтиламино, а Ar - 4-метоксифенил или 4-хлорфенил, которые обладают антиоксидантными и антирадикальными свойствами и могут найти применение в медицине.

Изобретение относится к соединениям формулы I: или к их фармацевтически приемлемым солям, в которых Q представляет собой двухвалентный или трехвалентный радикал, выбранный из С6-10арила и гетероарила; где указанный арил или гетероарил в Q необязательно замещен вплоть до 3 раз радикалами, независимо выбранными из галогена, С 1-6алкила, С1-6алкила замещенного галогеном, С1-6алкоксигруппы, С1-6алкоксигруппы замещенной галогеном, -C(O)R20 и -C(O)OR20; где R 20 выбран из водорода и С1-6алкила; и где необязательно атом углерода, соседний с W2, может быть связан через CR31 или О с атомом углерода Q, с образованием 5-членного кольца, конденсированного с кольцами А и Q; где R31 выбран из водорода и С1-6алкила; W1 и W2 независимо выбраны из СR21 и N; где R21 выбран из водорода и -C(O)OR25; где R25 представляет собой водород; кольцо А может содержать вплоть до 2 кольцевых атомов углерода, замененных группой, выбранной из -С(O)-, -C(S)- и -C(=NOR30)-, и может быть частично ненасыщенным, содержащим до 2 двойных связей; где R30 представляет собой водород; L выбран из С1-6алкилена, С2-6алкенилена, -OC(O)(CH2)n -, -NR26(CH2)n- и -O(СН 2)n-; где R26 выбран из водорода и С1-6алкила; где n выбран из 0, 1, 2, 3 и 4; q выбран из 0 и 1; t1, t2,t3 и t 4 каждый независимо выбран из 0, 1 и 2; R1 выбран из -X1S(O)0-2X2R6a , -X1S(O)0-2Х2OR6a , -X1S(O)0-2X2C(O)R6a , -X1S(O)0-2X2C(O)OR6a , -X1S(O)0-2X2OC(O)R6a и -X1S(O)0-2NR6aR6b ; где X1 выбран из связи, О, NR7a и С 1-4алкилена; где R7a выбран из водорода и С 1-6алкила; Х2 выбран из связи и С1-4 алкилена; R6a выбран из водорода, цианогруппы, галогена, C1-6алкила, С2-6алкенила, С6-10 арила, гетероарила, гетероциклоалкила и С3-8циклоалкила; где указанный арил, гетероарил, циклоалкил и гетероциклоалкил в R6a необязательно замещен 1-3 радикалами, независимо выбранными из гидроксигруппы, галогена, С1-6алкила, С1-6алкила замещенного цианогруппой, C1-6 алкоксигруппы и С6-10арил-C1-4алкоксигруппы; и R6b выбран из водорода и С1-6алкила; R3 выбран из водорода, галогена, гидроксигруппы, С 1-6алкила, С1-6алкила замещенного галогеном, C1-6алкила замещенного гидроксигруппой, С1-6 алкоксигруппы, С1-6алкоксигруппы замещенной галогеном, -С(O)R23 и -С(O)OR23; где R23 выбран из водорода и C1-6алкила; R4 выбран из R8 и -C(O)OR8; где R8 выбран из С1-6алкила, гетероарила, С3-8циклоалкила и гетероциклоалкила; где указанный гетероарил, циклоалкил или гетероциклоалкил в R8 необязательно замещен 1-3 радикалами, независимо выбранными из галогена, С1-6алкила, С 3-8циклоалкила и С1-6алкила замещенного галогеном; R5 выбран из водорода, С1-6алкила замещенного гидроксигруппой, и С1-6алкоксигруппы; гетероарил означает моноциклический или конденсированный бициклический ароматический кольцевой комплекс, содержащий от 5 до 9 атомов углерода в кольце, где один или несколько членов кольца являются гетероатомами, выбранными из азота, кислорода и серы, и гетероциклоалкил означает насыщенное моноциклическое 4-6-членное кольцо, в котором один или несколько указанных атомов углерода в кольце заменены группой, выбранной из -O-, -S- и -NR-, где R означает связь, водород или C1-6алкил.

Изобретение относится к соединениям выбранным из группы, состоящей из соединений формулы: и или к их фармацевтически приемлемым солям. .

Изобретение относится к соединению формулы (I): его фармацевтически приемлемой соли или сольвату, которые обладают свойствами ингибитора Syk киназы. .

Изобретение относится к способу получения 2,4,6,8-тетраазабицикло[3.3.0]октан-3,7-диона (гликолурила), реакцию ведут при 80°С, в течение 60 мин, причем используют концентрированную серную кислоту в водной среде и реагенты берут в следующих мольных соотношениях: глиоксаль 2,0; мочевина 4,0; серная кислота 0,4; вода 12, а водный раствор свежеприготовленного глиоксаля прикапывают при перемешивании в течение 20 минут, после чего смесь перемешивают еще 40 минут.

Изобретение относится к соединению формулы (I), где R1 выбран из Н, F, Сl, Вr, СF3, C 1-С6 алкокси и ОН; R2 выбран из Н и C1-С6 алкил; n является 1-5; m является 0 или 1; и Y выбран из CH2, NR3, (NR 3R4)+X-, О и S; R 3 и R4 независимо выбраны из Н и C1 -C4 алкил; и X- выбран из фармацевтически приемлемых анионов.

Изобретение относится к соединению формулы (I), или его таутомеру (Iа), или энантиомеру, или его физиологически приемлемой соли, где R1 представляет собой о-бром, R2 представляет собой п-фтор, R3 представляет собой C1-C4 алкил, R6 представляет собой тиазолил-2-ил, Х представляет собой метилен и Z представляет собой морфолинил.
Изобретение относится к медицине, а именно к урологии, и может быть использовано для лечения хронического инфекционного простатита. .

Изобретение относится к соединениям, отвечающим формуле в которой X представляет собой одну из следующих групп: - фенильную группу, необязательно замещенную одной или несколькими группами, независимо выбранными из следующих атомов или групп: галогена, (С1-С6)алкокси, (С1-С6)алкила, (С3-С7 )циклоалкил(С1-С6)алкила, (С3 -С7)циклоалкил(С1-С6)алкокси, NRaRb, R1 представляет собой атом водорода, галоген, (С1-С6)алкокси, (С1-С6 )алкил, (С3-С7)циклоалкил(С1- С6)алкил, (С3-С7)циклоалкил(С 1-С6)алкокси, амино, группу NRcRd; причем алкильные и алкоксигруппы могут быть необязательно замещены одним или несколькими галогенами, гидрокси, амино или (С1-С6)алкокси, R2 представляет собой одну из следующих групп: атом водорода, (С1-С6)алкильиую группу, необязательно замещенную одной или несколькими группами, независимо выбранными из гидрокси, галогена, амино, группы NRaRb, фенильной группы, - (С1-С6)алкоксигруппу, необязательно замещенную одной или несколькими группами, независимо выбранными из гидрокси, галогена, амино, группы NRaRb, - (С2-С7 )циклоалкил(С1-С6)алкил, - (С3 -С7)циклоалкил(С1-С6)алкокси, - (С2-С6)алкенил, - (С1-С 6)алкинил, - группу -CO-R5, - группу -CO-NR 6R7, - группу -СО-О-R8, - группу -NR9-CO-R10, - группу -NR11R 12, - атом галогена, - цианогруппу, - фенильную группу, необязательно замещенную одной или несколькими группами, независимо выбранными из следующих атомов или групп: галогена, (С1- С6)алкокси, NRaRb, -CO-R5, -CO-NR6 R7, -CO-O-R8, (С3-С7 )циклоалкил(С1-С6)алкила, (С3 -С7)циклоалкил(С1-С6)алкокси, (С1-С6)алкильной группы, необязательно замещенной одной или несколькими гидроксигруппами или NRaRb, R3 представляет собой атом водорода, (С1 -С6)алкил, (C1-С6)алкокси или атом галогена, R4 представляет собой атом водорода, (С1-С4)алкил, (С1-С4 )алкокси или атом фтора, R5 представляет собой атом водорода, фенильную группу или (С1-С6)алкил, R6 и R7, одинаковые или различные, представляют собой атом водорода или (С1-С6)алкил, или вместе с атомом азота образуют 4-7-членный цикл, необязательно включающий другой гетероатом, выбранный из N, О или S, R 8 представляет собой (С1-С6)алкил, R9 и R10, одинаковые или различные, представляют собой атом водорода или (С1-С6)алкил, R 11 и R12, одинаковые или различные, представляют собой (С1-С6)алкил, или вместе с атомом азота образуют 4-7-членный цикл, необязательно включающий другой гетероатом, выбранный из N, О или S, Ra и Rb независимо друг от друга представляют собой атом водорода, (С1-С 6)алкил или вместе с атомом азота образуют 4-7-членный цикл, Rc представляет собой атом водорода, и Rd представляет собой (С1-С6)алкил и, по меньшей мере, один из заместителей R1, R2, R3 и R4 отличен от водорода; и когда R3 означает метил, X является незамещенным; когда R1 означает метил, X является незамещенным; когда R2 означает хлор, X не является парафторфенилом; в форме основания или соли присоединения кислоты.

Изобретение относится к новым соединениям Формулы I, обладающим свойствами ингибитора аспарагиновой протеазы, в частности ингибитора ренина. .
Изобретение относится к медицине, а именно к гастроэнтерологии, физиотерапии, рефлексотерапии. .
Наверх