Лечебно-профилактический биопрепарат против бактериальных и грибковых инфекций, обладающий антибиотикоустойчивостью
Изобретение относится к области ветеринарии и биотехнологии. Биопрепарат включает смесь биомассы двух штаммов бактерий Bacillus subtilis, стабилизатор или наполнитель, или носитель. Биопрепарат выполнен в сухой или жидкой форме и содержит смесь биомассы штамма В.subtilis 11В и биомассы штамма Bacillus subtilis 12B в равных соотношениях с титром соответственно не менее 1×108 КОЕ/г или 1×108 КОЕ/мл в количестве 25-50 или 91 мас.%, стабилизатор или наполнитель, или носитель - остальное. Биопрепарат обладает широким спектром антагонизма по отношению к различным патогенным видам бактерий и грибов, а также устойчивостью к широкому кругу антибиотиков. 2 з.п. ф-лы, 4 табл.
Изобретение относится к микробиологии, ветеринарии и биотехнологии и представляет собой новый препарат - пробиотик из двух штаммов бактерий рода Bacillus, обладающий широким спектром антагонизма по отношению к различным патогенным видам бактерий и грибов, а также устойчивостью к широкому кругу антибиотиков.
В настоящее время препараты - пробиотики из бактерий рода Bacillus - находят широкое применение в ветеринарии для лечения различных заболеваний птиц и сельскохозяйственных животных, поскольку подавляют развитие патогенных бактерий. Однако при тяжелых инфекционных заболеваниях иногда нельзя отказаться от назначения антибиотиков, поскольку они оказывают наиболее быстрый лечебный эффект. Применение антибиотиков приводит к негативным последствиям для организма животного: развитию дисбактериоза и снижению иммунитетета, а также к развитию антибиотикоустойчивости у патогенных штаммов. Для снятия негативных последствий антибиотикотерапии дополнительно применяют пробиотики, чем раньше используется пробиотик, тем меньше осложнений после антибиотикотерапии. Оптимально использование пробиотика одновременно с антибиотиком, но для этого штаммы, входящие в состав пробиотического препарата, должны обладать устойчивостью к антибиотикам.
Известен природный штамм Bacillus subtilis 11В, обладающий широким спектром антагонизма против бактериальных и грибных патогенов, вызывающих заболевания человека, животных и растений, что создает возможность создания на его основе препаратов-пробиотиков, способных лечить широкий круг заболеваний и использоваться в медицинской, ветеринарной и сельскохозяйственной практике (1).
Препарат на основе штамма Bacillus subtilis 11B (2) устойчив к действию антибиотиков пенициллинового ряда (b-лактамным антибиотикам: пенициллину, карбенициллину, ампициллину), полимиксину, а также малочувствителен к стрептомицину, гентамицину, тетрациклину. Поэтому назначать препарат для лечения людей и животных можно совместно с антибиотиками, к которым штамм Bacillus subtilis 11B имеет устойчивость, для предотвращения осложнений антибиотикотерапии (развития дисбиоза кишечника и снижения иммунитета).
Известен также природный Bacillus subtilis 12B (3) и препарат на его основе (4), используемый в качестве ветеринарного пробиотика. Штамм и препарат обладают антагонизмом в отношении патогенных ветеринарных штаммов патогенных бактерий и устойчивостью (или малой чувствительностью) к ряду антибиотиков, в том числе к тобрамицину, эритромицину, линкомицину, неомицину, рифампицину, т.е к тем антибиотикам, к которым чувствителен штамм Bacillus subtilis 11B.
Совмещение двух штаммов Bacillus subtilis 11B и Bacillus subtilis 12 в одном препарате позволяет расширить спектр антибиотикоустойчивости препарата и назначать препарат совместно с антибиотиками, без снижения его эффективности.
Для повышения эффективности действия препаратов - пробиотиков из бацилл - создаются комплексные препараты, включающие несколько штаммов бактерий. Наиболее близкими к изобретению являются штаммы Bacillus subtilis и Bacillus liheniformis, используемые в качестве компонентов препарата против вирусных и бактериальных инфекций, и препарат на основе этих штаммов (5).
Штаммы бактерий Bacillus Sabtilis ВКПМ В-7092, ВКПМ В-7048 и штамм бактерий Bacillus licheniformis ВКПМ В-7038 используются в качестве компонентов препарата Ветом против вирусных и бактериальных инфекций. Препарат содержит смесь биомассы указанных штаммов в споровой форме с титром не менее 3×1010 спор/г. В состав препарата входят также крахмал и сахар при определенном количественном соотношении компонентов. Комплексный бактериальный препарат обладает широким спектром антивирусной и антибактериальной активности.
Недостатком данного препарата является отсутствие у данного препарата антагонизма в отношении плесневых грибов родов Fusarium, Alternaria, Penicillium - источников опасных микотоксинов, споры которых попадают в корма для животных и могут являться причиной микотоксикозов. Нет указаний на возможность использования препарата совместно с антибиотиками, без которых нельзя обходиться при тяжелых формах инфекции.
Задачей предлагаемого изобретения является создание нового комплексного бактериального препарата - пробиотика на основе штаммов бактерий Bacillus subtilis 11B и Bacillus subtilis 12B, обладающего более широким спектром антагонистической активности, в том числе к штаммам родов Pseudomonas, Streptococcus, Escherihia coli, грибам родов Fusarium, Alternaria, Penicillium, и устойчивого к широкому кругу антибиотиков, что позволяет использовать его для лечения тяжелых форм инфекции при одновременной терапии с антибиотиком.
Для решения указанной задачи предлагаются:
- штамм бактерий Bacillus subtilis 11B, депонированый под номером ВКМ В-2218Д во Всероссийской коллекции микроорганизмов ИБФМ РАН 19.08.1999 г. Штамм выделен из здорового растения пшеницы в Уфимском районе. Идентификацию штамма проводили по «Определителю бактерий Берджи». - М.: Мир, 1997;
- штамм В. subtilis 12В, депонированный в коллекции микроорганизмов ВГНКИ под номером 12В-ДЕП. Штамм выделен из зоокомпоста в Уфимском районе республики Башкортостан. Идентификацию штамма проводили по «Определителю бактерий Берджи». - М.: Мир, 1997.
Технический результат заключается в том, что препарат содержит биомассы штаммов бактерий Bacillus subtilis 11B и бактерий Bacillus subtilis 12В в равных соотношениях.
Сухая форма препарата дополнительно содержит крахмал и сахар.
Препарат содержит в качестве основы живые клетки штамма Bacillus subtilis 12В и штамма Bacillus subtilis 11B в равных количествах и стабилизатор (или носитель) при следующем соотношении компонентов, мас %:
| Биомасса штаммов Bacillus subtilis, 1×108-10×109 живых микробных клеток в 1 мл препарата | 90-99 |
| Стабилизатор, наполнитель (носитель) | 1-10 |
В качестве стабилизатора для жидкой формы препарата можно использовать натрия хлорид в концентрации 0,9%. При получении сухих форм препарата (гранулирование, таблетирование или лиофильное высушивание) в биомассу вносят наполнитель (или носитель), что обусловлено его защитным действием для бактериальных клеток при высушивании.
При получении сухой биомассы штаммов (для получения порошка или гранул) в биомассу дополнительно вносят глюконат или стеарат кальция, крахмал, желатин и сахарозу и др. стабилизаторы в количестве от 1,0-10,0 мас.% с целью придания биомассе необходимых физических свойств. При необходимости можно смешивать готовую биомассу с сорбентом (например, активированным углем, карболонгом, лактулозой, ацетилфталилцеллюлозой, гелем фосфата алюминия) в соотношении 1:1 по сухому остатку, после чего жидкость отделяют фильтрацией и высушивают микрогранулы иммобилизованной биомассы вакуумной сушкой до остаточной влажности 5-10%.
После получения биомассы в сухом виде (порошок, гранулы) биомассу смешивают со вспомогательными веществами в соотношении 2:1 - 3:1 и таблетируют. В качестве вспомогательных веществ используют (мас.%.): стеарат кальция (0,5-1,0), тальк (2,5-3,0) и(или) крахмал (0,5-1,0) и(или) аэросил (0,5-0,8), глюкозу (5,0-20,0), сухое молоко (10,0-30,0) и(или) метилцеллюлозу (или поливинилпирролидон) (0,1-0,5). Получают таблетированную форму препарата, удобную в употреблении.
Пример 1. На основе штамма B.subtilis 11В с типичными морфологическими, культуральными, биохимическими свойствами приготовлены 5 вариантов жидкого препарата с различным содержанием микробных клеток в составе 1 дозы препарата.
Вариант 1. Препарат, содержащий, мас.%:
биомасса B.subtilis 11В, 0,5×108 живых микробных клеток или колониеобразующих единиц (КОЕ);
| биомасса B.subtilis 12В, 0,5×108 живых микробных клеток или колониеобразующих единиц (КОЕ) | |
| в 1 мл препарата | 91; |
| стабилизатор (натрия хлорид) | 9. |
Вариант 2.
Препарат, содержащий, мас.%:
биомасса B.subtilis 11В, 2×108 живых микробных клеток (КОЕ);
| биомасса B.subtilis 12В, 2×108 живых микробных клеток (КОЕ) | |
| в 1 мл препарата | 91, |
| стабилизатор (натрия хлорид) | 9. |
Вариант 3. Препарат, содержащий, мас.%:
биомасса B.subtilis 11В, 5×108 живых микробных клеток (КОЕ);
| биомасса B.subtilis 12В, 5×108 живых микробных клеток (КОЕ) | |
| в 1 мл препарата | 91; |
| стабилизатор (натрия жлорид) | 9. |
Вариант 4.
Препарат, содержащий, мас.%:
биомасса B.subtilis 11В, 1,0×109 живых микробных клеток (КОЕ);
| биомасса B.subtilis 12B, 1,0×109 живых микробных клеток (КОЕ) | |
| в 1 мл препарата | 91; |
| стабилизатор (натрия хлорид) | 9. |
Изготовленные варианты препарата разливали в стерильные флаконы, укупоривали резиновыми пробками и обкатывали алюминиевыми колпачками.
Пример 2. Штамм В. subtilis 11В культивируют в жидкой питательной среде, обеспечивающей спорообразование в течение 16 часов.
Штамм В. subtilis 12В культивируют в жидкой питательной среде, обеспечивающей спорообразование в течение 16 часов.
Полученные биомассы смешивают в равных соотношениях (при необходимости концентрируют с помощью микрофильтрации до содержания микробных клеток 100×109 кл/мл по ОСО на 10 ЕД). К биомассе добавляют стабилизатор на основе крахмала и лактозы или сахарозо-желатиновой среды, смешивают, гранулируют и подсушивают до остаточной влажности не более 5%. Далее порошок измельчают до получения однородной массы и дозировано расфасовывают во флаконы (или пакеты).
Вариант 5. Препарат, содержащий, мас.%.:
| биомасса | 25,0 |
| крахмал | 31,1 |
| лактоза | 42,6 |
| метилцеллюлоза (или поливинилпирроллидон) | 1,3 |
Готовый порошок белого или бежевого цвета, сладковатый на вкус. Остаточная влажность не более 5%. Порошок растворяется в воде, 0,1 н. HCl и нейтральных растворах в течение 15 мин с образованием рыхлого комковатого осадка. Готовый порошок содержат биомассу В. subtilis в количестве не менее (1,5±0,5)×108 КОЕ/г.
Пример 3. Штамм В. subtilis 11В культивируют в жидкой питательной среде, обеспечивающей спорообразование в течение 16 часов.
Штамм В. subtilis 12В культивируют в жидкой питательной среде, обеспечивающей спорообразование в течение 16 часов.
Полученные биомассы смешивают в равных соотношениях (при необходимости концентрируют с помощью микрофильтрации до содержания микробных клеток 100×109 кл/мл по ОСО на 10 ЕД). К биомассе добавляют стабилизатор на основе крахмала и лактозы или сахарозо-желатиновой среды и вносят глюконат кальция в количестве 2,0 мас.%, перемешивают и досушивают открытым способом (или лиофильно в кассетах). По окончании сушки порошок измельчают до получения однородной массы, добавляют вспомогательные вещества и таблетируют.
Вариант 6. Препарат, содержащий, мас.%:
| биомасса | 50,0 |
| стеарат кальция | 0,8 |
| сахарозо-желатиновая среда | 29,6 |
| глюконат кальция | 2,0 |
| тальк | 2,5 |
| глюкоза | 5,0 |
| сухое молоко | 10,0 |
| метилцеллюлоза | 0,1 |
Готовые таблетки имеют круглую форму диаметром 0,8-12 мм с гладкой твердой поверхностью беловато-серого или желтоватого цвета, сладковатые на вкус, со специфическим запахом. Средняя масса таблетки составляет от 0,75±0,05 г с остаточной влажностью не более 5%. Таблетки растворяются в 0,1 н. HCl и нейтральных растворах в течение 30-45 мин с образованием рыхлого комковатого осадка. Готовые таблетки содержат биомассу штамма В. subtilis в количестве (2,5±0,5)×108 KOE.
Проверяли безвредность полученных вариантов препарата на лабораторных животных, специфическую антагонистическую активность в отношении тест-культур - представителей различных групп патогенных и условно-патогенных микроорганизмов и устойчивость к антибиотикам.
Препарат характеризуется безвредностью (см. таблицу 1).
Для определения безвредности содержимое флакона с жидким препаратом использовали без разведения, порошок или таблетку разводили в 10 мл физиологического раствора и вводили 0,5 мл препарата перорально мышам. Для каждого варианта опыта использовали не менее 10 мышей массой 15-16 г. Препарат считали безвредным, если все мыши оставались живыми в течение пяти суток наблюдения и ни у одной из них не выявлено заболевания.
| Таблица 1 | ||||||
| Изучение безвредности препарата | ||||||
| № | Варианты препарата (кол-во клеток в 1 дозе) | Количество животных (штук) | Средняя масса животных, г | |||
| Было | Выжило | До введения | Через 1 сутки | Через 5 суток | ||
| 1 | 0,5×108 | 10 | 10 | 15,4±0,3 | 15,6±0,3 | 16,9±0,3 |
| 2 | 2,0×108 | 10 | 10 | 15,7±0,2 | 15,9±0,3 | 17,0±0,2 |
| 3 | 5,0×108 | 10 | 10 | 15,82±0,2 | 16,0±0,2 | 17,08±0,2 |
| 4 | 1,0×109 | 10 | 10 | 15,65±0,2 | 15,7±0,2 | 17,1±0,2 |
| 5 | 1,5×108 | 10 | 10 | 16,0±0,2 | 16,1±0,2 | 17,2±0,2 |
| 6 | 2,5×108 | 10 | 10 | 15,6±0,2 | 15,8±0,2 | 17,1±0,2 |
Испытание показало, что все животные остались живыми, их первоначальная масса увеличилась, отсутствовали какие-либо признаки заболевания.
Препарат характеризуется широким спектром антагонистической активности в отношении тест-штаммов культур патогенных микроорганизмов (таблица 2).
Для определения специфической активности исследовали антагонистическую активность вариантов препарата в отношении тест-культур. Исследование осуществляли методом отсроченного антагонизма. Для этого содержимое флакона с порошком (или таблетку) растворяли в 2-5 мл физиологического раствора. Полученную взвесь высевали штрихом по диаметру чашки Петри с агаризованной средой Гаузе N 2. Посевы инкубировали в термостате при 37°С в течение 72 ч. Затем к выросшей культуре подсевали штрихом тест-микроорганизмы (500-миллионные суспензии суточных культур в физиологическом растворе). Учет результатов проводили через 18 часов инкубирования при 37°С по величине зон отсутствия роста тест-культур.
Контролем роста тест-культур служило параллельное выращивание их на чашках с агаризованной средой Гаузе N 2 без исследуемой культуры.
| Таблица 2 | |||||||
| Антагонистическая активность вариантов препарата | |||||||
| № | Тест-культуры | Варианты препарата (кол-во клеток в 1 дозе) | |||||
| 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | ||
| 0,5×108 | 2,0×109 | 5,0×109 | 1,0×109 | 1,5×109 | 2,5×108 | ||
| 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 |
| 2 | Staphylococcus | 10-15 | 15-20 | 15-20 | 15-20 | 18-20 | 18-20 |
| aureus (Филиппов) | |||||||
| 3 | Staphylococcus | 10-15 | 15-20 | 15-20 | 15-20 | 18-20 | 18-20 |
| aureus (Никифоров) | |||||||
| 4 | St. aureus 66 | 10-12 | 15-16 | 15-16 | 15-16 | 15-16 | 15-16 |
| 5 | St. aureus 67 | 8-10 | 10-12 | 10-12 | 10-12 | 10-12 | 10-12 |
| 7 | St. aureus 80 | 10-12 | 12-15 | 12-15 | 12-15 | 12-15 | 12-15 |
| 8 | Proteus vulgaris 177 | 10-15 | 15-20 | 15-20 | 15-20 | 15-20 | 15-20 |
| 9 | Pr. vulgaris 12 | 8-10 | 10-12 | 12-15 | 12-15 | 12-15 | 12-15 |
| 10 | P. vulgaris 48 | 8-10 | 12-15 | 12-15 | 12-15 | 12-15 | 12-15 |
| 11 | Pr. vulgaris 41 | 8-10 | 10-12 | 12-15 | 12-15 | 12-15 | 12-15 |
| 12 | Proteus mirabilis 237 | 15-18 | 18-20 | 18-20 | 18-20 | 18-20 | 18-20 |
| 13 | Pr. mirabilis 40 | 12-15 | 15-20 | 15-20 | 15-20 | 15-20 | 15-20 |
| 14 | Pr. mirabilis 36 | 12-15 | 15-18 | 15-18 | 15-18 | 15-18 | 15-18 |
| 15 | Pr. mirabilis 35 | 15-18 | 18-20 | 18-20 | 18-20 | 18-20 | 18-20 |
| 16 | Candida albicans | 25-30 | 25-30 | 25-30 | 25-30 | 25-30 | 25-30 |
| 17 | Escherihia coli 177 | 20-22 | 22-25 | 22-25 | 22-25 | 22-25 | 22-25 |
| 18 | E.coli 154 | 10-12 | 12-15 | 12-15 | 12-15 | 12-15 | 12-15 |
| 19 | E.coli 140 | 10-12 | 12-15 | 12-15 | 12-15 | 12-15 | 12-15 |
| 20 | Shigella sonne 2586 | 10-12 | 12-15 | 12-15 | 12-15 | 12-15 | 12-15 |
| 21 | Shigella HK | 20-22 | 22-25 | 22-25 | 22-25 | 22-25 | 22-25 |
| 22 | Pseudomonas | 12-15 | 15-20 | 15-20 | 15-20 | 15-20 | 15-20 |
| aeruginosa 8 | |||||||
| 23 | P. aeruginosa 126 | 10-12 | 12-15 | 12-15 | 12-15 | 12-15 | 12-15 |
| 24 | Streptococcus 321 | 10-12 | 12-15 | 12-15 | 12-15 | 12-15 | 12-15 |
| 25 | Streptococcus 325 | 10-12 | 12-15 | 12-15 | 12-15 | 12-15 | 12-15 |
| 26 | Streptococcus 191 | 10-12 | 12-15 | 12-15 | 12-15 | 12-15 | 12-15 |
| 27 | Paratyhv 269 | 10-12 | 12-15 | 12-15 | 12-15 | 12-15 | 12-15 |
| 28 | Paratyhv 15 | 12-15 | 15-20 | 15-20 | 15-20 | 15-20 | 15-20 |
| 29 | Hexaere II 1230 | 12-15 | 15-20 | 15-20 | 15-20 | 15-20 | 15-20 |
Из данных таблицы 1 следует, что оптимальным количеством живых микробных клеток в одной дозе препарата является 2-5×108. Снижение количества микробных клеток до 0,5×108 снижает уровень антагонистической активности, а увеличение количества микробных клеток до 10×108 и выше не изменяет существенным образом антагонистическую активность препарата в отношении тест-культур микроорганизмов. Использование препарата в таблетках (вариант 6) не снижает уровень антагонистической активности.
Препарат обладает устойчивостью к целому ряду антибиотиков (таблица 3).
Чувствительность препарата к антибиотикам определяли с помощью стандартных дисков, пропитанных антибиотиками. В чашку Петри с МПА наливали 1 мл клеточной суспензии препарата в 0,9%-ном растворе натрия хлорида и равномерно распределяли по поверхности агара. Избыток удаляли пастеровской пипеткой. На поверхности засеянного агара пинцетом раскладывали диски с антибиотиками, по 5 дисков на каждую чашку. Чашки выдерживали в термостате при температуре (37±1)°С в течение (18±2) ч, после чего измеряли зоны задержки роста вокруг дисков, включая диаметр самого диска.
| Таблица 3 | |||||||
| Антибиотикоустойчивость вариантов препарата | |||||||
| № | Антибиотики | Зоны торможения роста, мм | |||||
| Варианты препарата | |||||||
| 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | ||
| 1 | Ампициллин | 0-6 | 0-6 | 0-6 | 0-6 | 0-6 | 0-6 |
| 2 | Бензилпенициллин | 0 | 0 | 6 | 8 | 6 | 6-8 |
| 3 | Карбенициллин | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 |
| 4 | Полимиксин | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 |
| 5 | Стрептомицин | 0-8 | 0-8 | 0-8 | 0-8 | 0-8 | 0-8 |
| 6 | Рифампицин | 0-6 | 0-6 | 6 | 6 | 6-8 | 6-8 |
| 7 | Гентамицин | 0-7 | 0-7 | 0-6 | 0-6 | 0-6 | 0-6 |
| 8 | Клотримазол | 8-10 | 8-10 | 8-10 | 10 | 10 | 10 |
| 9 | Левомицитин | 18-20 | 18-20 | 18-20 | 18-20 | 18-20 | 18-20 |
| 10 | Тетрациклин | 6-8 | 6-8 | 6-8 | 6-8 | 6-8 | 6-8 |
| 11 | Мономицин | 6-8 | 6 | 6 | 6-8 | 6-8 | 8 |
| 12 | Гептомицин | 10-15 | 10-15 | 10-15 | 10-15 | 10-15 | 10-15 |
| 13 | Клотримазол | 10-12 | 10-12 | 10-12 | 10-12 | 10-12 | 10-12 |
| 14 | Неомицин | 6 | 6 | 0 | 6-8 | 6-8 | 6-8 |
| 15 | Цепарин | 15-20 | 15-20 | 15-20 | 15-20 | 15-20 | 15-20 |
| 16 | Канамицин | 10-15 | 10-15 | 10-15 | 10-15 | 10-15 | 10-15 |
| 17 | Новограмон | 20-25 | 20-25 | 20-25 | 20-25 | 20-25 | 20-25 |
| 18 | Бисенгиол | 10-15 | 10-15 | 10-15 | 10-15 | 10-15 | 10-15 |
| 19 | Тобрамицин | 6-8 | 0-8 | 0 | 6 | 6-9 | 6 |
| 20 | Эритромицин | 6-8 | 0 | 6 | 6 | 6-9 | 6-8 |
Из полученных данных следует, что препарат устойчив к действию антибиотиков пенициллинового ряда (b-лактамным антибиотикам: пенициллину, карбенициллину, ампициллину), полимиксину, а также малочувствителен к стрептомицину, гентамицину, тетрациклину, тобрамицину, эритромицину, мономицину, рифампицину.
Эффективность заявляемого препарата в оптимальных концентрациях микробных клеток (2-10)×108 для нормализации микробиоценоза кишечника оценена при лечении 10 больных телят с выраженной диспепсией. Препарат назначали по 1 дозе два раза в день в течение 10 суток. Результаты исследования микрофлоры кишечника у больных телят до начала лечения и через 7-10 дней после окончания лечения представлены в таблице 4.
После назначения препарата симптомы диспепсии и диареи были купированы в течение 3-7 дней, препарат давали в течение 10 дней.
Показатели состояния микробиоценоза кишечника показывают, что терапевтическое действие препарата заключается в эффективном устранении УПМ (98,0%) и восстановлении нормофлоры (90%). Показана его абсолютная безвредность и хорошая переносимость.
| Таблица 4 | ||||
| Состояние микрофлоры кишечника у больных телят на фоне лечения комплексным препаратом | ||||
| Представители микрофлоры кишечника | Количество больных (n-30) |
|||
| До лечения | После лечения | |||
| Абс. | % | Абс. | % | |
| Снижение бифидобактерий (104-105) | 30 | 100 | 4 | 13,3 |
| Снижение лактобактерий (104-105) | 22 | 73,3 | 2 | 6,6 |
| Снижение споровых анаэробов (103-104) | 18 | 60 | 4 | 13,3 |
| Повышение УПФ (106), в том числе: | ||||
| Протей | 14 | 46,7 | 0 | 0 |
| Клибсиелла | 9 | 30,0 | 0 | 0 |
| Гемолитические эшерихии | 14 | 46,7 | 0 | 0 |
| Стафилококки | 18 | 60 | 3 | 1,0 |
| Псевдомонады | 6 | 20,0 | 0 | 0 |
| Стрептококки | 12 | 40,0 | 0 | 0 |
| Лактозонегативные энтеробактерии | 9 | 30,0 | 3 | 1,0 |
| Грибки кандида | 6 | 20,0 | 0 | 0 |
| Сальмонеллы | 4 | 13,3 | 0 | 0 |
| Эффективность элиминации УПМ | 98,0% | |||
| Эффективность восстановления нормофлоры | 90% |
Источники информации
1. Патент №2182172 «Штамм бактерий Bacillus subtilis, обладающий широким спектром антагонистической активности», опубл. 13.10.2002, бюл. №13.
2. Патент №2181596 «Лекарственный препарат из бактерий рода Bacillus», опубл. 27.04.2002, бюл. №12.
3. Патент №2169767 «Штамм бактерий Bacillus subtilis, обладающий широким спектром антагонистической активности и устойчивостью к антибиотикам», опубл. 27.06.2001, бюл. №18.
4. Патент №2172175 «Лечебно-профилактический биопрепарат», опубл. 20.08.2001, бюл. №23.
5. Патент №2142287 «Штаммы бактерий Bacillus subtilis и Bacillus licheniformis, используемые в качестве компонентов препарата против вирусных и бактериальных инфекций, и препарат на основе этих штаммов», опубл. 10.12.1999.
1. Лечебно-профилактический биопрепарат против бактериальных и грибковых инфекций, обладающий антибиотикоустойчивостью, включающий смесь биомассы двух штаммов бактерий Bacillus subtilis, стабилизатор, или наполнитель, или носитель, отличающийся тем, что он выполнен в сухой или жидкой форме и содержит смесь биомассы штамма В.subtilis 11В и биомассы штамма Bacillus subtilis 12B в равных соотношениях с титром соответственно не менее 1×108 КОЕ/г или 1×108 КОЕ/мл в количестве 25-50 или 91 мас.%, стабилизатор, или наполнитель, или носитель - остальное.
2. Лечебно-профилактический биопрепарат по п.1, отличающийся тем, что он выполнен в сухой форме, содержит смесь биомассы штамма В. subtilis 11В и Bacillus subtilis 12B в равных соотношениях с титром не менее 1×108 КОЕ/г и стабилизатор? или наполнитель, или носитель при следующем соотношении компонентов, мас.%:
| Смесь биомассы бактерий штамма | |
| В. subtilis 11В и Bacillus subtilis 12B | |
| в равных соотношениях | |
| с титром не менее 1×108 КОЕ/г | 25-50 |
| Стабилизатор, или наполнитель, или носитель | остальное |
3. Лечебно-профилактический биопрепарат по п.1, отличающийся тем, что он выполнен в жидкой форме, содержит смесь биомассы бактерий штамма В.subtilis 11В и Bacillus subtilis 12B в равных соотношениях с титром не менее 1×108 КОЕ/мл, а в качестве стабилизатора содержит натрия хлорид при следующем соотношении компонентов, мас.%:
| Смесь биомассы бактерий штамма | |
| B.subtilis 11В и Bacillus subtilis 12B | |
| в равных соотношениях | |
| с титром не менее 1×108 КОЕ | 91 |
| Натрия хлорид | 9 |
