Способ прогнозирования возникновения гематогенных метастазов при плоскоклеточном раке легкого


 


Владельцы патента RU 2489718:

Федеральное государственное бюджетное учреждение "Научно-исследовательский институт онкологии" Сибирского отделения Российской академии медицинских наук (ФГБУ "НИИ онкологии" СО РАМН) (RU)

Изобретение относится к области медицины, конкретно к онкологии, и касается способов прогнозирования возникновения гематогенных метастазов при плоскоклеточном раке легкого. Сущность способа: проводят гистологическое исследование препаратов фрагментов ткани удаленного легкого с главным, долевым или сегментарным бронхами, находящимися на расстоянии 4-5 см от опухоли, и в респираторном эпителии бронхов, смежном с опухолью. Затем определяют различные варианты дисрегенераторных изменений: гиперплазию бокаловидных клеток (ГБК), базальноклеточную гиперплазию (БКГ), плоскоклеточную метаплазию (ПМ) и диспластических (Д) изменений. При наличии в пограничном с опухолью бронхиальном эпителии сочетания ПМ с неоплазией (ДII-III степени; (ПМ+Д+)) прогнозируют риск возникновения гематогенных метастазов. 1 табл., 3 пр.

 

Изобретение относится к области медицины, конкретно к онкологии, и касается способов прогнозирования возникновения гематогенных метастазов при плоскоклеточном раке легкого.

Плоскоклеточный рак составляет 60% от всех опухолей легкого. Для него характерна быстрая прогрессия, агрессивное течение заболевания и низкая выживаемость больных [8]. Статистические данные различных авторов показывают, что, несмотря на совершенствование хирургических и терапевтических методов лечения, 5-летний срок переживают лишь 20-30% больных [5, 6, 16]. В 45-75% случаев пациенты с плоскоклеточным раком легкого, даже если диагноз установлен на ранней стадии, в течение пяти лет после радикально выполненной операции, погибают от местных рецидивов или отдаленных метастазов [1, 8, 13, 16].

Поскольку плоскоклеточный рак относится к группе немелкоклеточных раков легкого (НМРЛ), в большинстве исследований изучение критериев опухолевой прогрессии касается группы в целом, без разделения опухоли по гистотипам. Так, по результатам работы R. Demicheli et. al. (2012) рост опасности возникновения отдаленных метастазов при НМРЛ наблюдается через 9 месяцев после операции, затем в конце второго и четвертого года. Основными факторами, связанными с лимфогенным и гематогенным метастазированием, являются распространенность опухоли, ее гистологическая структура, степень дифференцировки и биологическая агрессивность [9]. По данным ESMO (2009) отмечено, что при низкодифференцированных опухолях частота отдаленного метастазирования выше, чем при умеренно - или высокодифференцированных (р<0,01) [7].

Для определения прогноза опухолевого процесса изучаются молекулярно-генетические маркеры, влияющие на рост опухоли, ее дифференцировку и способность к метастазированию. С этой целью различными молекулярно-биологическими методами (иммуногистохимия, гибридизация in situ, полимеразная цепная реакция, лазерная микродиссекция, секвенирование, микрочиповые технологии), исследуются показатели пролиферативной активности, апоптоза, состояние молекул адгезии, различные факторы роста и их рецепторы, интерлейкины, цитокины и многие другие регуляторные системы клетки [2, 10, 11, 12, 14, 15, 17, 20, 21]. Однако данные показатели являются дополнительными параметрами, которые используют для выделения группы больных с повышенным риском прогрессирования заболевания, а панель иммуногистохимических маркеров, характеризующих биологическую агрессивность опухоли, не определена [4].

В исследованиях М.Р. Личиницера (2007) с применением многофакторного пропорционального анализ Кокса показано, что VEGF и р53 являются независимыми маркерами, предсказывающими появление метастазов. Совместная экспрессия VEGF и р53 имеет прогностическое значение для больных немелкоклеточным раком легкого 1-Й стадии. Группу повышенного риска метастазирования составляют p53+VEGF+, а низкого риска метастазирования - p53-VEGF- больные. Такие показатели как: пол, дифференцировка, клинико-анатомическая форма, распространенность опухоли, гистологическое строение не оказывают значимого влияния на развитие отдаленных метастазов [3].

Гиперэкспрессия эпидермального фактора роста - EGFR опухолевыми клетками ассоциируется с метастатическим фенотипом заболевания, коррелирует с плохим прогнозом, резистентностью к проводимой лекарственной и лучевой терапии [19].

Известен способ прогнозировния метастазирования при раке легкого Москаленко Е.П Суть способа основывается на определении с помощью метода иммунодиагностики реакции пассивной гемагглютинации уровня антител к антигенам опухоли легкого. При показателе 1/8 и выше констатируют наличие метастаза и проводят противоопухолевую химиотерапию, а при уровне антител ¼ противоопухолевую химиотерапию отменяют [4].Недостатком известного способа является то, что прогнозируются уже имеющиеся, но клинически не проявившие себя метастазы. При этом, не уточняется гистотип опухоли при котором возникли метастазы, а также тип метастазирования-лимфогенное или гематогенное.

Таким образом, известные на сегодняшний день способы прогнозирования течения НМРЛ, его метастатического потенциала не многочисленны и связаны с поиском молекулярно-генетических маркеров опухолевой прогрессии. Используемые клинико-морфологические критерии прогноза риска гематогенного метастазирования относятся только к параметрам первичной опухоли и не дают значимого результата. Методы, позволяющие с высокой вероятностью прогнозировать возникновение гематогенных метастазов после радикально проведенной операции по поводу плоскоклеточного рака легкого, основанные на определении особенностей дисрегенерации респираторного эпителия в смежной с опухолью легочной ткани не обнаружены.

Новая техническая задача - создание способа прогнозирования возникновения гематогенных метастазов при плоскоклеточном раке легкого.

Для решения поставленной задачи в способе прогнозирования возникновения гематогенных метастазов при плоскоклеточном раке легкого проводят гистологическое исследование препаратов фрагментов ткани удаленного легкого с главным, долевым или сегментарным бронхами, находящимися на расстоянии 4-5 см от опухоли, в респираторном эпителии бронхов, смежном с опухолью, определяют различные варианты дисрегенераторных изменений: гиперплазию бокаловидных клеток (ГБК), базальноклеточную гиперплазию (БКГ), плоскоклеточную метаплазию (ПМ) и диспластических (Д) изменении и при наличии в пограничном с опухолью бронхиальном эпителии сочетания ПМ с неоплазией (ДII-III) степени; (ПМ+Д+)) прогнозируют риск возникновения гематогенных метастазов.

Способ осуществляют следующим образом. Материалом для морфологического исследования были опухоль и находящиеся от нее на расстоянии 4-5 см фрагменты ткани удаленного легкого с бронхом (главный, долевой, сегментарный). Ткань фиксируют в нейтральном формалине, проводят по стандартной методике и заливают в парафин. Срезы бронхов толщиной 5-6 мкм окрашивают гематоксилином и эозином. Морфологическое исследование осуществляют с помощью светового микроскопа «Axiostar plus» фирмы «К. Zeiss» Германия. Статистическую обработку результатов выполняют с помощью пакета программ «Statistica 6.0 for Windows».

Определяют спектр дисрегенераторных изменений, встречающихся в участках респираторного эпителия, смежного с опухолью: гиперплазию бокаловидных клеток (ГБК), базальноклеточную гиперплазию (БКГ), плоскоклеточную метаплазию (ПМ) и диспластических (Д) изменении и при наличии в пограничном с опухолью бронхиальном эпителии сочетания ПМ с неоплазией (ДII-III степени; (ПМ+Д+)) прогнозируют риск возникновения гематогенных метастазов.

Способ иллюстрируется следующими примерами.

Пример 1. Больной Р., 56 лет. Центральный рак левого легкого. Прооперирован в объеме пневмонэктомии слева, без предоперационной химиотерапии. Проведено исследование согласно предлагаемому способу. При гистологическом исследовании ткани первичной опухоли поставлен диагноз - плоскоклеточный умеренно-дифференцированный неороговевающий рак легкого, стадии T2N0M0. По результатам микроскопического исследования гистологического материала в респираторном эпителии бронхов, пограничном с опухолью, были выявлены участки эпителия с признаками ПМ и очаги ДIII степени (ПМ+ДIII+). При динамическом наблюдении за больным, спустя 21 месяц после операции на контрольном обследовании выявлен метастаз в кости таза (была взята трепан-биопсия, метастаз плоскоклеточного рака подтвержден при морфологическом исследовании).

Пример 2. Больной П., 51 года. Центральный рак правого легкого. Прооперирован в объеме пневмонэктомии справа. Проведено исследование согласно предлагаемому способу В предоперационном периоде проведена неоадъювантная химиотерапия по схеме: паклитаксел 175 мг/м2 в/в 1 день + карбоплатин AUC 6 в/в 1 день, 2 курса с интервалом в 3 недели. При гистологическом исследовании ткани первичной опухоли поставлен диагноз - плоскоклеточный умеренно-дифференцированный неороговевающий рак легкого, стадии T3N1M0. При микроскопическом исследовании гистологического материала в респираторном эпителии бронхов, смежном с опухолью, было выявлено сочетание ПМ и ДII степени (ПМ+ДIII+). На очередном контрольном обследовании, через 15 месяцев после операции выявлен метастаз в головной мозг.

Пример 3. Больной Ш., 58 лет. Рак верхнедолевого бронха справа. Прооперирован в объеме пульмонэктомии справа, без предоперационной химиотерапии. Проведено исследование согласно предлагаемому способу. При гистологическом исследовании ткани первичной опухоли поставлен диагноз - плоскоклеточный умеренно-дифференцированный неороговевающий рак легкого с участками низкой степени дифференцировки, стадии T3N2M0. По результатам микроскопического исследования гистологического материала в респираторном эпителии бронхов, пограничном с опухолью, наблюдалась диффузная базальноклеточная гиперплазия. При динамическом наблюдении за больным в течение 32 месяцев признаков прогрессирования заболевания не найдено.

Критерии предлагаемого способа подобраны на основании анализа данных клинических исследований Изучался операционный материал от 72 больных, прооперированные по поводу плоскоклеточного рака легкого T1-4N0-x М0 стадии, в возрасте от 41 до 73 лет.

В предоперационном периоде 32 пациента (44,4%) получили НАХТ по схеме: паклитаксел 175 мг/м2 в/в 1 день + карбоплатин AUC 6 в/в 1 день, 2-3 курса с интервалом в 3 недели. Во время проведения радикальной операции 30 пациентов (27,5%) однократно получали ИОЛТ в дозе 10-15 Гр, из них 18 больным (60%) перед облучением вводили радиосенсибилизатор цисплатин/гемзар.

Морфологический диагноз рака легкого устанавливался согласно «Гистологической классификации опухолей легкого» (ВОЗ, Женева, 2003). Пренеопластические (ДI степени) и неопластические процессы (ДII-III степени) оценивались согласно критериям, изложенным S. Lantue' joul et. al. [18].

Материалом для морфологического исследования были опухоль и находящиеся от нее на расстоянии 4-5 см фрагменты ткани удаленного легкого с бронхом (главный, долевой, сегментарный). Ткань фиксировалась в нейтральном формалине, проводилась по стандартной методике и заливалась в парафин. Срезы бронхов толщиной 5-6 мкм окрашивались гематоксилином и эозином. Морфологическое исследование осуществлялось с помощью светового микроскопа «Axiostar plus» фирмы «К. Zeiss» -Германия.

Статистическая обработка результатов выполнялась с помощью пакета программ «Statistica 6.0 for Windows».

Определялся спектр дисрегенераторных изменений, встречающихся в участках респираторного эпителия, смежного с опухолью. По результатам микроскопического исследования гистологического материала в респираторном эпителии бронхов, пограничном с опухолью, наблюдались разные варианты дисрегенераторных изменений - ГБК, БКГ, ПМ и дисплазия (Д) различной степени выраженности. Данные дисрегенераторные изменения встречались как самостоятельные процессы, так и в различных сочетаниях в пределах исследуемого фрагмента ткани. В нашем наблюдении дисплазии крайне редко встречались в респираторном эпителии у больных при изолированной БКГ (БКГ+ПМ-) или ее сочетании с ПМ (БКГ+ПМ+), но с высокой частотой возникали на фоне диффузной ПМ (БКГ-ПМ+Д+).

Из 72 больных с плоскоклеточным раком легкого, у 33 (45,8%) отмечалась плоскоклеточная метаплазия. В 23 (69,7%) случаях она сочеталась с БКГ (БКГ+ПМ+), а в 10 (30,3%) - нет (БКГ-ПМ+). Из данных 10 пациентов у 9 (90%) - ПМ сочеталась с дисплазией различной степени тяжести (ПМ+Д+).

Оценивалась взаимосвязь характера дисрегенераторных изменений, наблюдаемых в смежных с опухолью участках слизистой бронха, с частотой возникновения гематогенных метастазов. Обнаружено, что высокая частота возникновения гематогенных метастазов при плоскоклеточном раке легкого находится в опосредованной связи с характером дисрегенерации.

При анализе частоты возникновения гематогенных метастазов плоскоклеточного рака легкого оказалось, что в 33,3% случаев они возникали, когда в смежных с опухолью участках бронхиального эпителия встречалось сочетание ПМ и неоплазии (ПМ+ДII-III+; χ2=21,6; р=0,0000). При других типах сочетаний дисрегенераторных изменений, встречающихся в бронхиальном эпителии, пограничном с опухолью, связи с гематогенным метастазированием выявлено не было (табл.1). Чувствительность - 100%; Специфичность - 91%.

Таким образом, предлагаемый способ позволяет с большей точностью информативностью прогнозировать возникновение гематогенных метастазов при плоскоклеточном раке легкого и оптимизировать тактику ведения больных.

Источники информации, использованные при составлении описания:

1. Горбунова В.А., Маренич А.Ф., Голубев А.В.. Современные подходы к лечению больных с местно-распространенным и метастатическим немелкоклеточным раком легкого (НМРЛ)//Сб. «Новое в терапии рака легкого», п/р Н.И. Переводчиковой - М.,2003.

2. Завалишина Л.Э. Молекулярно-биологические факторы инвазивного роста и метастазирования рака при морфологическом исследовании// автореф. доктор, диссертации. - М., 2006.

3. Личиницер М.Р. Разработка панели маркеров белкового происхождения для прогнозирования течения злокачественных новообразований легкого, молочной железы, толстой кишки и эффективности их лечения// Электронное издание «Наука и технологии России». - 16.11.2007.

4. Снеговой А.В., Манзюк Л.В.. Значение биомаркеров для определения тактики лечения и прогноза злокаческтвенных опухолей// Практическая онкология. - 2011. - Т. 12, №4. - С.166-170.

5. Степанова Е.А.. Экспрессия молекулярно-биологических маркеров при немелкоклеточном раке легкого// Автореф. канд. диссертации. - М., 2002.

6. Черных А.В. Современные варианты лечения немелкоклеточного рака легкого// Вестник Санкт-Петербуг. университета. - 2009. - cep.11, №2. - С.150-163.

7. D'Addario G., Felip Е. Non-small-cell lung cancer: ESMO Clinical Recommendations for diagnosis, treatment and follow-up// Ann. Oncol. - 2009. Vol.20. - P.68-70.

8. Boukovinas I. Predicting Metastatic Behaviour in Lung Adenocarcinoma// Lung cancer Int. - 2008; 890576.

9. Demicheli R., Fornili M., Ambrogi F., et. al. Recurrence dynamics for non-small-cell lung cancer: effect of surgery on the development of metastases// Ann. Oncol. - 2010. Vol.21. - P.116-119.

10. Duffy M.J. Use of molecular markers for predicting therapy response in cancer patients // J. Cancer Treatment Reviews - 2011. Vol.24. - P.151-159.

11. Ferreira С, Tolis С, Giaccone G. p53 and chemosensitivity //Ann. Oncol. 1999. - Vol.9. - P.1011-1021.

12. Ganti K.A. Update on Non Small Cell Lung Cancer: Current State of Knowledge Regarding Diagnosis, Staging and Treatment // Abeloff' s Clinical. Oncology. - 2011. Vol.4. - P.1-18.

13. Guo N.L., Wan Y.W. Confirmation of gene expression-based prediction of survival in non-small cell lung cancer// Clin. Cancer Res. - 2008. Vol.14(24). - P.8213-8220.

14. Han H. Vascular Endothelial Growth Factor Expression in Stage I Non-Small Cell Lung Cancer Correlates With Neoangiogenesis and a Poor Prognosis// Annals, of Surgical Oncology. - 2001. Vol.8. - P.72-79.

15. Hung J., Jeng W., Hsu W., et al. Prognostic factors in pathological stage IB non-small cell lung cancer greater than 3 cm // Eur. Respir. J. - 2010. Vol.36. - P.1355-1361.

16. Kratz J., He J., Stephen K. International, Large-Scale Validation of a Practical Molecular Assay Prognostic of Survival in Resected Non-Squamous, Non-Small Cell Lung Cancer // The Lancet Int. - 2012; 5698231.

17. Kwak E.L. Anaplastic Lymphoma Kinase Inhibition in Non Small Cell Lung Cancer //N.E.J.M. - 2010. Vol.363(18). - P.1693-1703.

18. Lantue'joul S., Salameire D., Salon C, Brambilla E. Pulmonary preneoplasia - sequential molecular carcinogenetic events // Histopathology. - 2009. Vol.54. - P.43-54.

19. Moiseyenko V.M., Procenko S.A., Ivantsov A.O., et al. High efficacy of first-line gefitinib in non-Asian patients with EGFR-mutated lung adenocarcinoma // Onkologie. -2010. - №33. - P.231-8.

20. Varlotto J., Recht A., Nikolov M., et al. Extent of lymphadenectomy and outcome for patients with stage I nonsmall cell lung cancer// Cancer. - 2009. Vol.115. - P.851-858.

21. Wong D.W. The EML4 ALK fusion gene is involved in various histologic types of lung cancers from nonsmokers with wild type EGFR and KRAS //J. Cancer. - 2009.-Vol.115. - P.1723-1733.

Таблица 1
Частота возникновения гематогенных метастазов в зависимости от характера дисрегенерации при плоскоклеточном раке легкого
Тип дисрегенерации Гематогенные метастазы Итого
есть нет
ПМ+Д+ 3 6 9
Другие типы дисрегенерации 0 62 62
итого 3 68 71
χ2=21,6; р=0,0000

Способ прогнозирования возникновения гематогенных метастазов при плоскоклеточном раке легкого, характеризующийся тем, что проводят гистологическое исследование препаратов фрагментов ткани удаленного легкого с главным, долевым или сегментарным бронхами, находящимися на расстоянии 4-5 см от опухоли и в респираторном эпителии бронхов, смежном с опухолью, определяют различные варианты дисрегенераторных изменений: гиперплазию бокаловидных клеток (ГБК), базальноклеточную гиперплазию (БКГ), плоскоклеточную метаплазию (ПМ) и диспластических (Д) изменений, и при наличии в пограничном с опухолью бронхиальном эпителии сочетания ПМ с неоплазией (ДII-III степени; (ПМ+Д+)) прогнозируют риск возникновения гематогенных метастазов.



 

Похожие патенты:
Изобретение относится к области биотехнологии. .
Изобретение относится к области медицины, в частности к терапевтической стоматологии, а именно к способу диагностики хронического генерализованного пародонтита. .
Изобретение относится к области медицины, конкретно к методам диагностики аутоиммунных заболеваний крови человека. .
Изобретение относится к медицине и предназначено для прогнозирования печеночной недостаточности после выполнения обширных резекций печени. .
Изобретение относится к области медицины, а именно к способу оценки устойчивости мембран эритроцитов новорожденного на фоне обострения у беременной герпес-вирусной инфекции в третьем триместре беременности.

Изобретение относится к области медицины, а именно к кардиологии. .
Изобретение относится к медицине, в частности к хирургии, гастроэнтерологии, и может быть использовано для прогнозирования развития осложнений гастродуоденальных язв.
Изобретение относится к диагностике, а именно к способу определения показаний к выбору тактики консервативной терапии пациентов, перенесших повторный инфаркт миокарда.
Изобретение относится к области медицины, а именно к способу экспресс-диагностики антигенов энтеровирусов в цереброспинальной жидкости. .

Изобретение относится к медицине, а именно к экспериментальной медицине и лабораторной диагностике, и касается моделирования дисфункции эндотелия in vitro
Изобретение относится к области медицины и биологии, в частности к пульмонологии, и касается способа морфологического и физиологического исследования ультраструктурных характеристик суспензий клеток при воздействии на организм здоровых людей антиоксидантов

Изобретение относится к ветеринарии
Изобретение относится к области медицины, а именно к лабораторной диагностике, и может быть использовано для приготовления препаратов фиксированных клеток для флуоресцентной in situ гибридизации нуклеиновых кислот (fluorescent in situ hybridization - FISH)

Изобретение относится к медицине, конкретно к кардиологии, также может использоваться в терапии, нефрологии и лабораторной диагностике
Изобретение относится к медицине, в частности, к экспериментальной гематологии, а именно к способу оценки развития сингенного перевивного миелобластного лейкоза у мышей линии AKR/JY
Изобретение относится к медицине, в частности к пульмонологии, и может быть использовано для прогнозирования эффективности и оценки показаний к терапии системными глюкокортикоидами у больных с обострением хронической обструктивной болезни легких (ХОБЛ)
Изобретение относится к медицине, а именно к лабораторной диагностике, и может быть использовано для оценки нарушения процессов адаптации у детей в условиях внешнесредового воздействия тяжелых металлов

Изобретение относится к медицине, диагностике, может быть использовано в спорте и восстановительной терапии
Наверх