Способ прогнозирования эффективности лечения больных неходжкинскими лимфомами с поражением костного мозга


 


Владельцы патента RU 2526796:

Федеральное государственное бюджетное учреждение "Ростовский научно-исследовательский онкологический институт" Министерства здравоохранения Российской Федерации (RU)

Изобретение относится к медицине, а именно к онкогематологии, и может быть использовано для прогнозирования эффективности лечения больных неходжкинскими лимфомами с поражением костного мозга. Для этого в периферической крови больных до лечения и перед каждым последующим курсом химиотерапии определяют объем и электрическую проводимость лимфоцитов, вычисляя коэффициент отношения первого показателя ко второму. При снижении значений коэффициента в сравнении с исходными прогнозируют положительную эффективность лечения и отсутствие симптомов генерализации заболевания. При отсутствии снижения или при повышении значений коэффициента - отсутствие или низкую эффективность лечения и наличие симптомов продолженного роста злокачественного процесса. Использование данного способа позволяет определить чувствительность больных неходжкинскими лимфомами к химиотерапии и осуществлять ближайший и отдаленный прогноз течения заболевания. 1 табл., 3 пр.

 

Изобретение относится к медицине, а именно к онкогематологии, и может быть использовано при гематологическом скрининге у больных злокачественными лимфомами для оценки эффективности лечения и прогнозирования течения опухолевого процесса.

Известен способ определения эффективности противоопухолевой терапии (патент RU 2021620 С1, опубл. 15.10.1994 г.), заключающийся в определении в лимфоцитах периферической крови больных раком шейки матки коэффициента отношения активности супероксиддисмутазы к суммарной пероксидазной активности. При снижении коэффициента в сравнении с исходным значением констатируют эффект лечения. Увеличение коэффициента свидетельствует об отсутствии эффекта.

Однако применение известного способа ограничивает и затрудняет длительность и трудоемкость проведения исследования, связанные как с методом выделения суспензии лимфоцитов на градиенте плотности фиколл-верографин, так и с методами исследования СОД и СПА. По этой же причине он не может быть использован для коррекции применяемой специфической терапии. Кроме того, применение указанного метода требует большого количества оборудования, реактивов, что требует значительных материальных затрат.

В качестве прототипа выбран «Способ оценки эффективности лечения злокачественных лимфом» (RU 20021 11925/15), заключающийся в том, что в сыворотке крови и моче больных злокачественными лимфомами определяют концентрацию суммарных глюкозаминогликанов и их фракций и при концентрации суммарных глюкозаминогликанов более 50 мкмоль/л в сыворотке крови и более 30 мкмоль/л в суточном количестве мочи, а также доли гепаринсульфатов менее 17% в сыворотке крови и менее 30% в моче эффективность лечения оценивают как низкую.

Методика исследования уровня глюкозаминогликанов в сыворотке крови, используемая в анализируемом «Способе», технически сложный, продолжительный по времени, многоэтапный процесс, требующий высокой квалификации исследователя и специального оборудования.

Вместе с тем концентрация глюкозаминогликанов в крови и моче отражает интенсивность обмена веществ в соединительной ткани, в связи с чем увеличение их содержания более характерно для воспалительно-деструктивных заболеваний соединительной ткани, патологии суставов и почек, т.е. процессов, протекающих с дегенерацией тканевых протеогликанов, но не отражает механизмов опухолевой прогрессии.

Известен способ прогнозирования варианта течения неходжкинских лимфом (патент RU 2082976 С1, опубл. 27.06.1997) путем определения в периферической крови больного процентного содержания лимфоидных клеток с повышенным уровнем активности нуклеолярного аппарата и находящихся в стадии S/G2 клеточного цикла, отличающийся тем, что стандартные мазки крови окрашивают бензо[а]пиреном по известной методике и с помощью люминесцентного микроскопа определяют наличие клеток с флуоресцирующими ядрышками, при отсутствии которых прогнозируют первый вариант течения неходжкинских лимфом (НХЛ) (безрецидивный), а при их обнаружении проводят второй этап исследования, при котором другой мазок крови больного окрашивают по Фельгену и определяют долю клеток в стадиях S/G2 клеточного цикла, причем при отрицательном значении теста прогнозируют второй вариант (рецидивирующее медленно прогрессирующее течение), при положительном - третий вариант (быстропрогрессирующее течение).

Недостатком данного способа является сложность реализации в связи с использованием метода люминесцентной микроскопии, субъективизм при оценке флюоресцирующих клеток, продолжительность исследования, состоящего из двух этапов. Не проведен анализ изменения активности нуклеолярного аппарата лимфоцитов в зависимости от эффективности лечения.

Таким образом, представленные способы прогнозирования, хотя и достаточно эффективны, но разработаны для больных при других методах лечения.

Целью изобретения является прогноз эффективности лечения и течения заболевания у больных неходжкинскими лимфомами с поражением костного мозга.

Поставленная цель достигается тем, что у больных до начала и в динамике химиотерапии определяют в крови объем лимфоцитов - VLy, проводимость лимфоцитов в токе высокой частоты - CLy, отношение среднего объема лимфоцитов к их электрической проводимости - VLy/CLy, и при снижении значений индекса VLy/CLy уже после первого и второго курсов химиотерапии прогнозируют выраженную регрессию опухолевого процесса и благоприятный прогноз, а при отсутствии изменений индекса VLy/CLy или его увеличении в сравнении с фоновым уровнем в ответ на проводимую специфическую терапию прогнозируют отсутствие или низкую эффективность лечения и плохой прогноз течения заболевания.

Изобретение «Способ прогнозирования эффективности лечения больных неходжкинскими лимфомами с поражением костного мозга» является новым, так как оно неизвестно из уровня медицины в области гематологических исследований в онкогематологии в качестве прогностического критерия.

Новизна изобретения заключается в том, что в периферической крови больных определяют коэффициент отношения VLy/CLy и при отсутствии изменений значений коэффициента или его повышении (в отличие от фоновых) прогнозируют отсутствие или низкую эффективность лечения и неблагоприятный прогноз, а при снижении значения индекса VLy/СLу до уровня у здоровых прогнозируют выраженную регрессию процесса и благоприятный прогноз течения заболевания.

Используемый подход к поиску ранних критериев эффективности лечения определяется тем, что последние достижения в лечении гемобластозов и, в частности, НХЛ связаны с использованием интенсивной полихимиотерапии. Однако повышение эффективности терапии за счет ее интенсификации приводит к усилению токсичности проводимого лечения.

Известны побочные влияния противоопухолевых препаратов на многие органы и системы, приводящие к усилению иммунодепрессии, развитию анемического синдрома и других осложнений (Воробьев А.И. Руководство по гематологии. М.: Медицина. - 2003. - Т. 2; Поспелова Т.И., Лямкина А.С., Ковынев И.Б., Лосева М.И., Дьячкова Н.Ю. Клиническое значение и патогенез анемического синдрома у больных неходжкинскими лимфомами / Клиническая лабораторная диагностика. - «Медицина». - 2010. - №1. - Стр. 10-14).

Вместе с тем в патогенезе НХЛ большая роль отводится иммунокомпетентным клеткам. Принимая во внимание, что основным объектом современных программ лечения являются лимфоциты, мы сочли, что компьютерный анализ структурно-функциональных характеристик лимфоцитов позволит получить полезную как в теоретическом, так и в практическом плане информацию об ответе больных НХЛ на лечение.

Полагаем, что для оценки активации или деградации лимфоцитов при НХЛ недостаточно применение только цитологических критериев при анализе эффективности тех или иных методов химиотерапии.

В этой связи, на наш взгляд, общая картина гематологических нарушений, выявленных при обследовании больных НХЛ, может быть существенно дополнена результатами исследования VCS-параметров лимфоцитов, отражающих структурно-функциональное состояние клеток, что может быть полезным в оценке эффекторных механизмов иммунитета, тем более что в доступной нам литературе информации об аналогичных исследованиях нет.

Параметрами, в большей степени ассоциируемыми с течением и исходом заболевания у больных НХЛ, считаем объем лимфоцитов (VLy) и их электропроводимость (CLy), так как отмечено их достоверное изменение в процессе лечения.

Изобретение является промышленно применимым, так как может быть использовано в здравоохранении, медицинских учреждениях, занимающихся лечением онкогематологических больных, НИИ онкологии и онкодиспансерах, поскольку оно легко в исполнении и не требует отдельных материальных затрат.

Изобретение «Способ прогнозирования эффективности лечения больных неходжкинскими лимфомами с поражением костного мозга» выполняется следующим образом.

Больным НХЛ с поражением костного мозга (40 человек) до начала и в динамике химиотерапии проводили исследование стандартных показателей периферической крови: количественную оценку объема - V (Volume) и электропроводности - C (Conductivity) лимфоцитов с использованием VCS-технологии на автоматическом гематологическом анализаторе LH500 BeckmanCoulter (США). Затем вычисляли отношение объема к показателю проводимости - VLy/CLy (коэффициент). Результаты исследования отношения объема лимфоцитов к показателю их проводимости у больных НХЛ с поражением костного мозга представлены в таблице 1.

Таблица 1
Значения VLy/CLy y больных с регрессией (I группа) и стабилизацией (II группа) злокачественного процесса, (М±m)
Группы VLy/CLy (n)
Здоровые (контроль) 0,73±0,014(24)
Группа I (больные с регрессией) до лечения (фон) 0,79±0,041(24)
р=0,0001
p1,2=0,00132
Группа II (больные со стабилизацией) до лечения (фон) 0,78±0,52 (8)
р=0,0001
Группа I (больные с регрессией) после лечения 0,73±0,046 (24)
р=0,06
p1=0,00017
p1,2=0,000001
Группа II (больные со стабилизацией) после лечения 0.79±0,12 (8)
р=0,00014
Примечание: указаны значения p только для достоверных изменений и тенденции к достоверности (0,05<p<0,1);
p - достоверность различий по сравнению с донорами;
p1 - достоверность различий по сравнению со значениями до лечения;
p1,2 - достоверность различий между I и II группами.

Предлагаемый коэффициент (VLy/CLy) позволяет судить об эффективности проводимой терапии. Из таблицы видно, что после проведения химиотерапии для больных с высокой эффективностью лечения - при 100%-ной регрессии процесса характерно снижение значений индекса до уровня у здоровых (в отличие от фонового уровня анализируемого коэффициента), в то время как у больных с низкой эффективностью специфического лечения - стабилизацией процесса после проведенной химиотерапии наблюдается отсутствие нормализации значений коэффициента VLy/CLy. Больные с частичной регрессией процесса занимают промежуточное положение по значению отношения объема лимфоцитов к их проводимости (VLy/CLy).

Примеры конкретного применения «Способа прогнозирования эффективности лечения больных неходжкинскими лимфомами с поражением костного мозга».

Пример 1. Пациент Я., 34 лет (амб.к. №1913/а) обратился в РНИОИ 02.02.2011 г. с жалобами на боли в горле при глотании, кровотечение из ротовой полости. Из анамнеза: данные жалобы появились в течение месяца, к специалистам не обращался. При осмотре: опухолевый инфильтрат с изъязвлением, с выраженным некротическим компонентом, зловонием, тотально поражает мягкое небо (экзофитный компонент опухоли спускается от uvula почти до корня языка), небные дужки с обеих сторон; опухоль кровоточит при прикосновении, периферические лимфоузлы не увеличены. Проведено комплексное обследование: биопсия левой небной миндалины 4.02.20011 г., гистологический анализ №6280-282/11 «неходжкинская лимфома». Иммуногистохимическое исследование: диффузная В-крупноклеточная лимфома, центробластный вариант, герминогенного происхождения, индекс пролиферативной активности Ki-67 позитивен в 80% опухолевых клеток; в миелограмме (22.03.2011 г.) - лимфоцитарное поражение костного мозга (лф-70%). По данным дополнительных методов исследования поражения других органов и систем не выявлено. Больному установлен диагноз: неходжкинская лимфома (диффузная В-крупноклеточная) с поражением ротоглотки, костного мозга, St.IVA, кл.гр.2. До начала лечения больному был определен объем лимфоцитов - Vly, который составил 95fl, а также показатель проводимости - CLy, составивший 116. Соответственно отношение VLy/CLy составило 0,82.

С 22.03.2011 г. начато лечение - первый курс полихимиотерапии в режиме CHOP.

На 22-й день - второй курс ПХТ. Объективно: общее состояние улучшилось, при осмотре ротовой полости отмечена регрессия опухолевого субстрата на 70%. Перед 2-м и 3-м курсами коэффициент VLy/CLy был равен 0,78 (при значениях Vly - 92fl, CLy - 117) и 0,74 (Vly -85 fl, CLy - 115) соответственно.

На четвертый курс повторили эксфузию КМВ и введение химиопрепаратов в аналогичных дозах. Биохимические показатели крови, общий анализ крови в пределах нормы. VLy/CLy составил 0,73 (Vly -82fl, CLy - 112).

Непосредственный результат оценивали после проведения 4 курса химиотерапии. Отмечена 100% регрессия опухоли: в ротоглотке опухолевый субстрат не определяется; по данным СРКТ головного мозга патологических объемных образований в ротоглотке не выявлено, в миелограмме - опухолевой инфильтрации нет. Значения индекса VLy/CLy оставались на уровне нормы (доноров) и составили 0,74 (Vly - 83 fl, CLy - 112). Всего больному проведено 6 курсов ПХТ в режиме CHOP, наблюдается в течение 20 месяцев, рецидива не отмечено.

Пример 2. Пациентка X. 1968 г.р. амб.к.№4034/а, обратилась в РНИОИ в марте 2011 г. с жалобами на боли в левом подреберье, общую слабость. При осмотре: кожные покровы бледные без геморрагии, периферические лимфоузлы не увеличены, при пальпации - левый фланк живота занят больших размеров селезенкой. Комплексно обследована: выполнено иммунофенотипирование клеток периферической крови - лейкемизация зрелоклеточной В-клеточной лимфомы (лимфома маргинальной зоны селезенки); в миелограмме (от 15.03.2011 г.) - лимфоцитарное поражение костного мозга (лимфоциты составляют 41%). По данным УЗИ органов брюшной полости (9.03.2011 г.) выраженная спленомегалия (25,0×10,0 см), без очаговых изменений. Больной установлен диагноз: неходжкинская лимфома (маргинальной зоны селезенки) с поражением костного мозга, селезенки, St.IVA, кл.гр.2. Образцы периферической крови исследовали до лечения и в динамике (перед началом каждого последующего курса). До лечения в общем анализе крови тромфоцитопения (73×109/л), лимфоцитоз 74%. Исходное значение отношения VLy/CLy составило 0,80 (Vly - 94fl, CLy - 117).

С 17.03.2011 г. проведена полихимиотерапия в режиме CHOP с применением аутомиелохимиотерапии. Непосредственный результат оценивали после проведения 4 курса химиотерапии: в общем анализе крови тромбоцитопения легкой степени (100x10%), содержание лимфоцитов - 18%; в миелограмме - опухолевой инфильтрации нет, по данным УЗИ органов брюшной полости (от 14.06.2011 г.) - уменьшение размеров селезенки (13×9×19 см), что расценивалось как 80% регрессия. Всего пациентке проведено 6 курсов полихимиотерапии в режиме CHOP, далее лучевая терапия на область селезенки. Находится в ремиссии 14 месяцев. Гематологические исследования, проведенные на этапах лечения, выявили стойкую тенденцию к снижению значений индекса VLy/CLy уже перед 2-м и 3-м курсами вплоть до нормальных величин (у доноров): 0,77 (Vly - 89fl, CLy - 115); 0,75 (Vly - 85fl, CLy - 113); 0,74 (Vly - 84fl, CLy - 113); 0,73 (Vly - 82 fl, CLy - 112) и 0,73(Vly - 81 fl, CLy - 111) соответственно.

И в первый, и во второй примеры продемонстрировали, что изменения значений индекса VLy/CLy отражают чувствительность больных НХЛк проводимой специфической терапии.

Пример 3.

Больной О. 1954 г.р., амб.к.№10414/я, обратился в РНИОИ в июне 2010 г. с жалобами на опухолевидное образование правой орбиты, затрудненное носовое дыхание, общую слабость, похудание на 10 кг в течение 6 месяцев.

При осмотре увеличены л/у шеи с 2-х сторон, аксиллярные и паховые л/у с 2-х сторон до 1 см, небные миндалины увеличены в размерах. Был обследован: выполнена биопсия опухоли небных миндалин (01.06.2010 г.), ГА №34815 - 16/10: «неходжкинская лимфома», иммуногистохимическое исследование №39796-39804: «лимфома из клеток мантийной зоны (CD20+), модулярный вариант роста». По данным СРКТ головного мозга (от 09.07.2010 г.): в области глоточного кольца с обеих сторон л/у до 3 см, углочелюстные л/у слева до 3 см, справа до 1 см, опухолевые массы в носоглотке слева с распространением в ротоглотку 6×4×6,5 см; при УЗИ органов брюшной полости (от 08.07.2010 г.) выявлена умеренная спленомегалия (16,8×5,1 см); в миелограмме (от 07.07.10 г.) - лимфоцитарное поражение костного мозга (содержание лимфоцитов - 25%). Больному установлен диагноз: неходжкинская лимфома (мантийноклеточная) с поражением периферических лимфоузлов всех групп, небных миндалин, правой орбиты, костного мозга, St.IVA, кл.гр.2. До начала лечения отношение VLy/CLy по результатам гематологического исследования составило 0,79 (Vly - 94fl, CLy - 119).

С 07.07.2010 г. начата полихимиотерапия в режиме CHOP с применением аутомиелохимиотерапии. Непосредственный результат оценивали после проведения 4 курса химиотерапии: по данным СРКТ головного мозга (от 01.10.2010 г.) сохраняется увеличение небных миндалин справа до 2,4×2 см, слева до 3,4×2,7 см, инфильтрация мягких тканей правого века, увеличенные л/у шеи с обеих до 1,8 см; в миелограмме сохраняется опухолевая инфильтрация (содержание лимфоцитов - 17%). Резюме: стабилизация процесса на фоне 3-4 курсов химиотерапии и дальнейшее прогрессирование после 5-го курса, сопровождающееся ухудшением и общего соматического состояния. Всего больному проведено 6 курсов полихимиотерапии в режиме CHOP, а в марте 2011 г. зарегистрирована активация опухолевого процесса в правой орбите, миндалинах. Переведен на химиотерапию второй линии.

Гематологические исследования, проведенные в динамике терапии, не выявили достоверных отличий VLy/CLy соотношения в сравнении с исходным его значением: показатель VLy/CLy на каждом из этапов обследования (перед 2-м, 3-м, 4-м, 5-м и 6-м курсами лечения) был больше нормы: 0,78 (Vly - 91 fl, CLy - 117); 0,80 (Vly - 92 fl, CLy - 115); 0,79 (Vly - 92 fl, CLy - 116); 0,82 (Vly - 94 fl, CLy - 114); 0,80(Vly - 94fl, CLy - 117) соответственно. Таким образом, значения индекса VLy/CLy, превышающие нормальные показатели (у доноров) и остающиеся практически неизменными в процессе химиотерапии, сочетаются с низкой эффективностью лечения.

Технико-экономическая эффективность «Способа прогнозирования эффективности лечения больных неходжкинскими лимфомами с поражением костного мозга» заключается в том, что гематологические исследования при лечении неходжкинских лимфом позволяют прогнозировать индивидуальную чувствительность больных к химиотерапии уже после первого и второго курсов химиотерапии, осуществить выбор наиболее рационального лечения, избежать малоэффективных методов терапии и, тем самым, сократить затраты на лечение. Предлагаемое исследование легко выполнимо, не требует больших временных и материальных затрат.

Способ прогнозирования эффективности лечения больных неходжкинскими лимфомами с поражением костного мозга, отличающийся тем, что у больных до лечения и перед каждым последующим курсом химиотерапии в периферической крови определяют объем и электрическую проводимость лимфоцитов, вычисляют коэффициент отношения первого показателя ко второму и при снижении значений коэффициента в сравнении с исходными прогнозируют положительную эффективность лечения и отсутствие симптомов генерализации заболевания, а при отсутствии снижения или при повышении значений коэффициента - отсутствие или низкую эффективность лечения и наличие симптомов продолженного роста злокачественного процесса.



 

Похожие патенты:
Изобретение относится к медицине, а именно к дерматологии, и может быть использовано для дифференциальной морфометрической диагностики эритродермической формы грибовидного микоза и синдрома псевдолимфомы кожи.

Изобретение относится к биохимии и может быть использовано для управления биохимическими реакциями in vitro и in vivo. Управление осуществляется посредством воздействия на магнитную наносуспензию, содержащую биоактивную макромолекулу, прикрепленную непосредственно или через лиганд к однодоменным магнитным наночастицам, внешним низкоинтенсивным низкочастотным переменным магнитным полем, обеспечивающим деформацию и/или изменение конформации участвующих в реакции биоактивных макромолекул.
Изобретение относится к медицине и может быть использовано в нефрологии при заместительной почечной терапии у пациентов с терминальной стадией хронической болезни почек.

Изобретение относится к медицине и может быть использовано для прогноза развития бактериальных осложнений у больных с острой респираторной вирусной инфекции до появления их клинической картины.

Группа изобретений относится к области медицинского приборостроения. На кожу и калибровочный образец посылают световое излучение не менее чем в Nλ≥3 узких или широких спектральных участках Λk (k=1,…,N).

Изобретение относится к биотехнологии и представляет собой прибор и систему для обнаружения и выборочного изменения нужной субпопуляции клеток в популяции с клеточными образцами.

Изобретение относится к медицине и биологии, касается способа активизации роста лейкоцитарной массы и комплексной коррекции состава крови в акустическом поле in vitro.

Изобретение относится к области медицинского приборостроения и применяется для определения оптических и биофизических параметров биоткани. Сущность способа: посылку излучения на ткань в одну или несколько точек осуществляют на длинах волн λ из диапазона 350-1600 нм, измеряют диффузное отражение P(L, λ) на длинах волн посылаемого излучения для каждой из точек освещения, определяют абсолютный R(L, λ) или нормированный r(L, λ) спектрально-пространственный профиль коэффициента диффузного отражения ткани, а оптические и биофизические параметры (X) определяют на основе аналитических выражений, представляющих собой множественные регрессии между Х и R(L, λ) или между Х и r(L, λ), которые получают путем измерения или расчета методом Монте-Карло R(L, λ), r(L, λ) для множества образцов биоткани или моделирующих ее фантомов с известными оптическими и биофизическими параметрами, накопления ансамбля реализации оптических и биофизических параметров биоткани и соответствующих им спектрально-пространственных профилей R(L, λ), r(L, λ) для возможных диапазонов вариаций оптических и биофизических параметров ткани.
Изобретение относится к медицине, а именно к дерматологии, и может быть использовано для дифференциальной диагностики синдрома Сезари от эритродермий. Для этого проводят гистологическое исследование биоптатов пораженной кожи путем световой микроскопии, иммунофенотипирование клеток инфильтрата.

Изобретение относится к медицине, в частности к гинекологии, и касается диагностики мужских и женских форм бесплодия путем оценки нарушений микроциркуляции. .

Изобретение относится к медицине, в частности к экспериментальной фармакологии и биофармации, и описывает способ количественного определения углеродных наноструктур, в частности наноалмазов и нанотрубок, в биологических образцах и их распределение в организме ex vivo, основанное на использовании метода масс-спектрометрии с индуктивно-связанной плазмой. Способ характеризуется тем, что поверхность углеродных наноструктур модифицируют (2,4,5-трийодфенил)-метанолом, определяют количество йода в модифицированных углеродных наноструктурах, полученные модифицированные углеродные наноструктуры вводят в организм экспериментального животного с последующим изъятием органов и тканей, их гомогенизацией в 0,5-2 М растворе NaOH, отбором пробы гомогената, разбавлением ее водой, обработкой разбавленной пробы ультразвуком до температуры 40-70°C, определением в полученной пробе количества йода методом масс-спектрометрии с индуктивно-связанной плазмой и расчетом содержания углеродных наноструктур в пробе по разности содержания йода в пробе до введения модифицированных углеродных наноструктур и после их введения в организм и пересчетом этого количества йода в содержание углеродных наноструктур в образце, используя исходное содержание йода в модифицированной углеродной наноструктуре. Способ обеспечивает мониторинг распределения углеродных наноносителей в организме in vivo. 1 з.п. ф-лы, 6 ил., 3 пр., 2 табл.
Изобретение относится к медицине. Сущность способа ранней диагностики хронической болезни почек состоит в том, что используют диапазон доз Допамина от 1 до 3 мкг/кг массы тела и стандартную водную нагрузку в количестве 200 мл. По отсутствию нарастания скорости клубочковой фильтрации судят о наличии ранних признаков хронической болезни почек. Использование заявленного способа позволяет максимально стандартизировать исследование за счет точного дозирования препарата. 2 табл., 2 пр.

Изобретение относится к медицине, в частности к области лечения гнойных ран, и описывает способ определения эффективности лечения воспалительного процесса гнойных ран под физиотерапевтическим воздействием, а именно под воздействием низкочастотной ультразвуковой кавитации. Способ включает цитологическое исследование мазков материала, отобранного из гнойных ран после лечения, определение клеточного состава, в том числе нейтрофильных гранулоцитов и тканевых элементов - клеток фибробластов и фиброцитов, при этом по материалу, отобранному из гнойной раны на 3-и сутки от начала лечения в процессе цитологических исследований, определяют дополнительные признаки лечебного патоморфоза, а именно морфологию нейтрофильных гранулоцитов, фибробластов и фиброцитов и наличие оксифильного межуточного вещества, и при выявлении фрагментации ядер и вакуолизации цитоплазмы в нейтрофильных гранулоцитах, многоядерности, дольчатости ядер, наличия ядрышек в ядрах, базофилии, зернистости и вакуолизации цитоплазмы в фибробластах и фиброцитах, а также наличие оксифильного межуточного вещества определяют лечение как эффективное. Изобретение обеспечивает объективную клиническую картину состояния раневого процесса уже на третьи сутки после лечения и может быть использовано для достоверного определения эффективности лечения гнойных ран. 1 пр., 5 ил.

Изобретение относится к области лабораторной диагностики и может быть использовано для определения присутствия патогенных микроорганизмов в биологических образцах. Устройство для микробиологического анализа образцов жидкостей тела содержит зону инкубации для контейнеров, содержащих указанные образцы, анализатор для анализа внутренней атмосферы указанных контейнеров и систему сортировки для сортировки контейнеров в соответствии с содержанием диоксида углерода, обнаруженным указанным анализатором. При этом система сортировки сортирует контейнеры, приходящие из указанной зоны инкубации, для подразделения указанных контейнеров на положительные контейнеры, предназначенные для анализа для идентификации микроорганизмов, присутствующих в соответствующих образцах; отрицательные контейнеры, на которых не требуется выполнение анализа для идентификации микроорганизмов; неопределенные контейнеры, которые подвергаются второй инкубации. Изобретение обеспечивает упрощение и ускорение анализа биологических образцов на присутствие патогенных микроорганизмов. 9 з.п. ф-лы, 8 ил.

Изобретение относится к медицине, а именно к патологической анатомии и судебно-медицинской экспертизе, и может быть использовано для верификации смерти больного от фибрилляции желудочков при инфаркте миокарда. Для этого у больных, умерших от инфаркта миокарда, во время аутопсии на основании макроскопической картины определяют давность патологического процесса. В зависимости от этого выбирают зоны исследования в сердце на одном уровне с очагом некроза. В поле зрения на увеличении х600 с применением окраски гематоксилином и эозином подсчитывают абсолютные значения (AЗ) следующих клеточных популяций: лимфоциты в пограничной с некрозом зоне (Lfп) при инфаркте миокарда давностью 1-2 дня, нейтрофильные гранулоциты (NGн) и фибробласты в зоне некроза (Fbн) при инфаркте миокарда давностью 3-5 дней. Сравнивают полученные абсолютные значения с пороговыми значениями (ПЗ), при этом ПЗ Lfп=2, ПЗ NGн=38, ПЗ Fbн=1. Для каждого поля зрения присваивают диагностический коэффициент (ДК), который при давности инфаркта миокарда 1-2 дня равен 1,9, если AЗ Lfп<2 или -3,9, если AЗ Lfп>2; при давности инфаркта миокарда 3-5 дней равен -2,1, если AFbн<1 или 7,2 если AЗ Fbн>1, равен 1,36, если AЗ NGн<38 или -11, если AЗ NGн>38. Затем подсчитывают сумму (ΣДК), двигаясь от поля зрения к полю зрения в исследуемой зоне, и, если ΣДК>12,78, то смерть больного наступила от фибрилляции желудочков, если ΣДК<-12,78, то смерть от других причин. Изобретение обеспечивает информативность и достоверность исследования при проведения судебно-медицинской экспертизы. 1 табл., 3 пр.

Изобретение относится к области агропромышленных технологий и может быть использовано для анализа выноса с луговой травой биохимических веществ. Для этого проводят учет колебаний урожайности в зависимости от структуры фитоценоза в виде травяного покрова. Проведение статистической обработки данных испытаний проб травы с пробных площадок на прирусловых, центральных и притеррасных поймах, а также на лугах с неравномерным и мозаичным размещением видов трав. Причем до закладки пробных площадок проводят рекогносцировку местности с выбранным для измерений травяным покровом, составляют карту-схему расположения компонент травяного покрова, после этого на каждой компоненте травяного покрова в виде делянки закладывают, по крайней мере, одну временную пробную площадку, по срезанной пробе травы взвешиванием определяют сырую и воздушно-сухую массу пробы. При этом дополнительно на высушенных пробах травы проводят испытания по биохимическому анализу для определения концентрации, по крайней мере, у трех химических питательных веществ в виде азота подвижного, оксидов калия и фосфора, затем суммированием концентраций этих трех веществ вычисляют общий суммарный вынос веществ из надземной части травы на всех пробных площадках. Изобретение позволяет определить продуктивность лугов. 8 з.п. ф-лы, 12 ил., 4 табл., 1 пр.

Изобретение относится к биологии и медицине, а именно к молекулярной биологии, микробиологии и хирургии, и может быть использовано в диагностических целях для идентификации синегнойной палочки Pseudomonas aeruginosa в клиническом биоматериале. Способ идентификации синегнойной палочки Pseudomonas aeruginosa включает посев исследуемого материала на твердую питательную среду, инкубирование посева в аэробных условиях при 37°С в течение 16-18 часов. Полученную бактериальную массу в количестве одной бактериологической петли помещают в 300 мкл физиологического раствора и прогревают при 98-99°С в течение 20-30 минут, центрифугируют при 12000 об/мин в течение 30 секунд. В супернатант добавляют краситель для электрофоретической детекции в количестве 0,5 мкл и 20 мкл вносят в лунку размером 4×1 мм 1,2% агарозного геля на ТАЕ-буфере с 10 мкл 1% бромистого этидия. Параллельно в контрольную лунку вносят 3 мкл раствора стандартного ДНК-маркера 1 kb, содержащего фрагменты ДНК в диапазоне 250-10000 bp. Проводят горизонтальный электрофорез в течение 15-20 минут, и при выявлении на полученной электрофореграмме исследуемой бактериальной массы трех светящихся в ультрафиолетовом свете полос, одна из которых соответствует фрагментам стандартного ДНК-маркера размером 10000 bp, вторая соответствует фрагментам стандартного ДНК-маркера размером 6000-8000 bp и третьей полосы в конце трека в форме «метелки», соответствующей фрагментам стандартного ДНК-маркера размером менее 750 bp, идентифицируют Pseudomonas aeruginosa в исследуемой бактериальной массе. Способ позволяет быстро и полно идентифицировать пигментообразующие и беспигментные штаммы Pseudomonas aeruginosa в исследуемой бактерийной массе. 5 ил., 2 пр.

Изобретение относится к способу идентификации живых и мертвых организмов мезозоопланктона в морских пробах, который включает отбор пробы, крашение организмов соответствующими красителями, визуальную оценку интенсивности окраски особей под микроскопом, которую выполняют одновременно с микрофотосъемкой организмов, используя настройки фотокамеры в ручном режиме, сохраняя эти настройки неизменными на протяжении фотосъемки по крайней мере одной пробы, после чего в полученных изображениях, применяя редактор растровой графики, например программный пакет Adobe Photoshop, измеряют средние для каждой особи цветовые и яркостные характеристики и относят особи к классу живых или мертвых, осуществляя дискриминантный анализ измеренных цифровых величин.
Изобретение относится к измерительной технике и представляет собой способ определения нано-микропримесей, включающий использование эмульсии из капель жидкого кристалла, диспергированных в воде, способной изменять конфигурацию капель жидкого кристалла при наличии в составе эмульсии посторонних примесей, измерение изменения интенсивности света, рассеянного эмульсией, по которому судят о наличии и концентрации искомых примесей, отличающийся тем что в качестве жидкого кристалла выбирают соединения, способные к транс-цис-переходу под действием актиничного света, и перед измерением изменения интенсивности света дополнительно освещают эмульсию актиничным светом, обеспечивая тем самым изменение конфигурации в каплях жидкого кристалла за счет транс-цис-перехода в молекулах жидкого кристалла. Изобретение обеспечивает повышение чувствительности способа определения нано-микропримесей.

Изобретение относится к экспериментальной фармакологии и представляет собой способ доклинических исследований кардиотропных антиаритмических средств, включающий определение биоэлектрических параметров в изолированных многоклеточных перфузируемых препаратах и оценку изменения длительности потенциалов действия, отличающийся тем, что в качестве изолированных многоклеточных перфузируемых препаратов используют миокард легочных вен крысы, причем изменения параметров получают в трех режимах работы многоклеточных препаратов, дополнительно оценивают потенциал покоя и по изменениям ДПД 90%, отношения ДПД 50%/ДПД 90%, скорости спонтанного сдвига потенциала покоя, наиболее положительного значения мембранного потенциала в покоящемся препарате, частоты следования пачек спонтанной активности, частоты и вариабельности следования спонтанных ПД в пачке, количества и интенсивности постдеполяризаций, а также по смещению мембранного потенциала, соответствующего началу пачечной активности, оценивают признаки антиаритмического или аритмогенного действия. Изобретение обеспечивает повышение надежности прогнозирования антиаритмического действия потенциальных фармакологических средств и сокращение длительности экспериментальной фазы. 3 ил.
Наверх