Штамм arthrospira platensis (nordst.) geitl. rsemsu t/05-117 - продуцент липидосодержащей биомассы


 


Владельцы патента RU 2539766:

Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Московский государственный университет имени М.В. Ломоносова" (МГУ) (RU)

Изобретение относится к биотехнологии. Штамм Arthrospira platensis (Nordst.) Geitl. rsemsu Т/05-117 обладает повышенным содержанием нейтральных липидов. Штамм хранится в коллекции НИЛ ВИЭ географического факультета МГУ имени М.В. Ломоносова. Изобретение позволяет повысить выход нейтральных липидов. 6 пр.

 

Изобретение относится к микроводорослевой биотехнологии и представляет собой новый ранее не описанный, стабильный по морфологическим признакам штамм сине-зеленой микроводоросли/цианобактерии Arthrospira platensis (Nordst.) Geitl. rsemsu T/05-117 (коллекция научно-исследовательской лаборатории возобновляемых источников энергии (НИЛ ВИЭ) географического факультета МГУ имени М.В.Ломоносова), который может быть использован для получения биомассы с повышенным содержанием липидов, имеющей значение для производства жидких биотоплив. Интерес к липидам микроводорослей в последние годы обусловлен их высоким потенциалом в качестве сырья для производства моторного топлива, а также для фармацевтической, химической и пищевой промышленности. Определяющим моментом использования водорослей для получения биотоплива является высокое содержание в них неполярных липидов, в основном триацилглицеридов (ТАГ), являющихся лучшим источником для получения биотоплива и возможность управлять их накоплением путем изменения условий культивирования. Общее содержание липидов в микроводорослях обычно варьирует от 1-85% сухого веса, причем выше 40% обычно получается в условиях дефицита биогенных питательных элементов [1]. Такие факторы как освещение и температура также оказывают влияние на липидное содержание и липидную композицию во многих водорослях [2].

Микроводоросли/цианобактерии Arthrospira/Spirulina platensis (Cyanophyceae) выращиваются в мире открытым способом в больших масштабах и их биомасса применяется как пищевая и кормовая добавка. Ценность биомассы различных штаммов A.platensis в указанных целях определяется высоким содержанием легко усвояемого белка, включающего все незаменимые аминокислоты, углеводов, общих липидов, в том числе полиненасыщенных жирных кислот (особенно большим количеством линолевой и γ-линоленовой кислот), широким спектром витаминов группы В, наличием β-каротина, фикоцианина, хлорофилла d и т.д. Преимуществами A.platensis является ее способность расти в открытых культиваторах без контаминации другими микроорганизмами вследствие высокой щелочности питательной среды для ее выращивания (рН>8) и дешевый способ сбора биомассы. Продуктивность биомассы артроспиры сравнима с таковой признанных микроводорослей-продуцентов липидов, поэтому проигрывая в количественном содержании липидов артроспира в целом по выходу липидов с учетом всех затрат на технологический цикл становится инвестиционно привлекательной наряду с другими микроводорослями [3, 4].

Задачей изобретения является получение Штамма Arthrospira platensis (Nordst.) Geitl. rsemsu Т/05-117, отличающегося от исходного штамма A. platensis rsemsu 1/02-Т/03-5 повышенным содержанием в биомассе липидов - не менее 30%.

Происхождение штамма.

Новый штамм A.platensis rsemsu Т/05-117 был выделен в процессе изучения естественной изменчивости известного штамма A.platensis rsemsu 1/02-1703-5 [5] путем рассева на твердой агаризованной среде Заррука [6]. Штамм A.platensis rsemsu Т/05-117 отличался повышенным содержанием липидов.

По морфологическим признакам полученный штамм A.platensis rsemsu Т/05-117 не отличался от исходного штамма A.platensis rsemsu 1/02-Т/03-5 и был стабилен при длительном культивировании и хранении в коллекции по морфологии трихома (три года наблюдений).

Морфологические признаки штамма.

При выращивании штамма A.platensis rsemsu Т/05-117 в конических колбах на жидкой питательной среде Заррука при температуре 26-28°С, освещенности 30 µЕ/(м2×с) и периодическом встряхивании культура представлена слабо спирализованными трихомами темно-зеленого цвета, гранулированными, без перетяжек или со слабо выраженными перетяжками у поперечных перегородок. Ширина клетки (трихома) - 8.0-10.5 мкм; длина клетки - 2.5-4.0 мкм; внутренний диаметр спирали - 7.0-8.7 мкм; внешний - 15.0-19.2 мкм; расстояние между витками спирали (высота спирали) - 36.0 -57.0 мкм. Длина трихома до 600 мкм, число оборотов спирали - 2.0-20.0, преимущественно 5-8 витков. На агаризованной среде Заррука (1.2% агар-агара) культура представлена как отдельными трихомами, так и в виде пучков.

Характерным признаком штамма A.platensis rsemsu Т/05-117, как и родительского штамма, является то, что геометрия спирали трихома не меняется при многочисленных пересевах при длительном культивировании в жидкой питательной среде и длительном хранении на жидких и агаризованных питательных средах в течение 3-х лет (время наблюдения), т.е. культура была стабильна по морфологическому признаку. Культура хранится в жидкой и на агаризованной среде Заррука в холодильнике со стеклянной дверью (шкаф-витрина ШВУ-0.4-1.3-ХХ «Атлант») при внутреннем (люминесцентная лампа TL-D 18W/33) и внешнем освещении (лампа OSRAM L-36 W/ 640) интенсивностью 5-10 цЕ/(м2хс), в постоянном световом режиме и температуре 9-10°С и подлежит пересеву не реже, чем через 5 месяцев. Размножение.

Вегетативное, делением клеток и последующей фрагментацией трихомов путем разрыва, в т.ч. в области некридиальных клеток. В оптимальных условиях относительная скорость роста равна 0.20 ч"1, что соответствует минимальному времени удвоения 5.0 час.

Физиологические свойства штамма.

Штамм A.platensis rsemsu Т/05-117 является автотрофом, источником углерода служат карбонаты и гидрокарбонаты натрия и калия, усваивает азот в нитратной (натрий азотнокислый и калий азотнокислый) и аммиачной (мочевина, аммиачная селитра) формах. Мезофил: оптимальная температура выращивания 26-32°С. Оптимум рН составляет 8.5-10,5. Подщелачивание питательной среды рН>11.0 тормозит рост и накопление биомассы.

Для культивирования используется среда Заррука [6] и ее модификации. Состав среды, обеспечивающий продуктивность штамма Т/05-117 на уровне 0.9 - 1.5 г/л сухой биомассы включает (в г/л):

- Na НСО3 - 8.0-32.0,

- KNO3-1.0-6.0,

- K2НРО·3Н2O - 0.5-2.0,

- K2SO4 - 0.5-2.0,

- MgSO4·7H2O - 0.1-0.4,

- NaCl - 0.5-2.0,

- СаСl2- 0.02 -0.04

- FeSO4·7H20 - 0.01-0.04,

- трилон Б - 0.04-0.16,

- микроэлементы (растворы А и Б по 1 мл/л среды).

Раствор А (г/л):

- Н3ВО3 - 2.86,

- MnCl2·4Н2O - 1.81,

- ZnSO4·7Н2О - 0.22,

- CuSO4·5Н2О - 0 08,

- МоO3 - 0.015.

Раствор Б (г/л):

- K2Cr2(SO4)4·24 Н2O - 0.096,

- NH4VO3 - 0.023,

- NiSO4·7H2O - 0.048,

- Na2WO4·2H2O - 0.018,

- Ti2(SO4)3 - 0.04,

- Co(NO3)2·6H2O - 0.044.

Известно, что накопление нейтральных липидов, в частности триацилглицеридов (ТАГ), клетками микроводорослей является двухстадийным процессом. При наличии в среде необходимых для роста культуры питательных элементов клетки микроводорослей быстро делятся и в них преобладает биосинтез мембранных, в том числе хлоропластных липидов. При лимите одного из факторов роста, например азота, при продолжающейся фиксации СO2 в процессе фотосинтеза наступает так называемая липогенная фаза, которая характеризуется замедлением или остановкой клеточного деления, нередко редукцией фотосинтетического аппарата и накоплением ТАГ, которые откладываются в виде цитоплазматических включений сферической формы в олеосомах или липидных глобулах (oil bodies). В некоторых случаях наблюдается образование липидных глобул в межтилакоидном пространстве [7, 8, 9].

На фоне дефицита элементов минерального питания наиболее интенсивно ТАГ синтезируются на сильном свету, запасаясь в цитоплазматических олеосомах [8, 10, 11].

Следует подчеркнуть, что условия, благоприятствующие накоплению ТАГ, являются стрессовыми: они препятствуют делению клеток и замедляют рост культуры, снижая продуктивность, что входит в противоречие с задачей получения максимального накопления биомассы с максимальным содержанием целевого продукта (в данном случае ТАГ). Одним из возможных путей решения этой задачи явилось разобщение двух процессов: 1 стадия - накопление биомассы на полной питательной среде, обеспечивающей высокую продуктивность по биомассе и 2 стадия - перевод полученной биомассы для индукции синтеза нейтральных липидов (ТАГ) в стрессовые условия, создаваемые дефицитом элементов минерального питания и условиями культивирования, в частности, манипулируя освещением.

Все вышесказанное в полной мере относится и к микроводоросли/цианобактерии Arthrospira/Spirulina platensis [12].

Изобретение может быть проиллюстрировано следующими примерами:

Пример 1.

Исходный штамм A.platensis rsemsu 1/02-Т/03-5 выращивали по следующей схеме: наращивание инокулята производили в стерильных пробирках размером (20×2) см с объемом среды Заррук'а 15 мл на основе дистиллированной воды при освещении 30 µmol photons/m2/sec, температуре 26-28°C и периодическом встряхивании. Освещение колб обеспечивается лампами ДРЛФ-400. Полученным инокулятом засевали конические колбы объемом 250 мл, заполненные средой того же состава объемом 100 мл, до начальной оптической плотности OD=0,15-0,20 при λ=670 нм, определяемой на КФК-2-УХЛ 4,2. Колбы помещали на перемешивающее устройство с частотой орбитального вращения платформы 120-130 оборотов в минуту при температуре 26-28°С. Освещенность культур составляла 60 µmol photons/m2/sec; световой режим постоянный. Продолжительность культивирования составляла 14 суток. Биомасса микроводоросли отделялась от культуральной жидкости гравитационным методом на ситах из нержавеющей и низкоуглеродистой проволоки с размером ячеек 150-200 мкм. Влажность полученной биомассы составляла не более 90%. Определение массовой доли влаги проводилось по ГОСТ 15113.4.-77 для пересчета результатов анализов по сухому весу. Содержание нейтральных липидов в полученной биомассе определяли следующим методом:

Перед экстракцией липидов влажную биомассу микроводорослей подвергали термообработке на водяной бане при 100°С в течение 10 мин. Экстракцию липидов из предобработанной биомассы осуществляли по методу Фолына [13]. Определение липидов в биомассе проводили спектрофлуорометрическим методом по их взаимодействию с флуоресцентным красителем Нильским красным - специфическим для нейтральных липидов [14]. Содержание нейтральных липидов в полученной биомассе исходного штамма A.platensis rsemsu 1/02- Т/03- 5 составило 8.4%.

Пример 2.

Заявленный штамм A.platensis rsemsu Т/05-117 выращивали аналогично описанному в Примере 1. Определение липидов в биомассе заявленного штамма A.platensis rsemsu Т/05-117, проведенное методом описанным в примере 1, составило 13.5%.

Пример 3.

Исходный штамм A.platensis rsemsu 1/02- Т/03-5 выращивали по следующей схеме: Аналогично описанному в Примере 1 получали инокулюм исходного штамма A.platensis rsemsu 1/02-Т/03-5, в количестве необходимом для засева трех литровых колб с объемом питательной среды в колбе 0,5 л. Исходная OD должна быть не менее 0,15-0,20 при λ=670 нм. В качестве источника углерода дополнительно к NaHCO3 основной среды Зарукк'а использовался СO2 (содержание углекислого газа в газо-воздушной смеси - 2% (объемных)). Барботаж углекислым газом служил также и способом перемешивания в колбах. Контроль за составом газо-воздушной смеси осуществляется с помощью газоанализатора Drager X-am 7000 с диапазоном измерения 0,03-5%. Освещение колб обеспечивается лампами ДРЛФ-400 (освещенность 60 µmol photons/m2/sec); световой режим - день:ночь=16:8. Температура питательной среды 26-28°С; продолжительность культивирования - 10 суток.

Содержание нейтральных липидов в полученной биомассе, определенное методом, описанным в Примере 1, составило 12,5%.

Пример 4.

Заявленный штамм A.platensis rsemsu Т/05-117 выращивали по следующей схеме: аналогично описанному в Примере 1 получали инокулюм заявленного штамма A.platensis rsemsu Т/05-117, в количестве необходимом для засева трех литровых колб с объемом питательной среды в каждой колбе 0,5 л. Исходная OD должна быть не менее 0,15-0,20 при λ=670 нм. В качестве источника углерода дополнительно к NaHCO3 основной среды Зарукк'а использовался СO2 (содержание углекислого газа в газо-воздушной смеси - 2% (объемных)). Барботаж углекислым газом служил также и способом перемешивания в колбах. Контроль за составом газово-воздушной смеси осуществляется с помощью газоанализатора Drager X-am 7000 с диапазоном измерения 0,03-5%. Освещение колб обеспечивается лампами ДРЛФ-400 (освещенность 60 µmol photons/m2/sec); световой режим - день:ночь=16:8. Температура питательной среды 26-28°С; продолжительность культивирования - 10 суток.

Содержание нейтральных липидов в полученной биомассе, определенное методом, описанным в Примере 1, составило 17,1%.

Пример 5.

Часть полученной в Примере 3 биомассы исходного штамма A.platensis rsemsu 1/02-Т/03-5 отделялась от культуральной жидкости, промывалась физраствором и концентрировалась до пастообразного состояния на ситах из нержавеющей и низкоуглеродистой проволоки с размером ячеек 150-200 мкм. Отмытую биомассу помещали в три стеклянных кристаллизатора диаметром 17 см, наполненных 0,5 л среды Зарукк'а каждый без азота и фосфора. Кристаллизаторы устанавливали на магнитную мешалку типа ESP фирмы VELP (скорость вращения магнита 800 оборотов/мин). Освещение культиваторов обеспечивали белыми светодиодами фирмы Edison Opto EDEW-3LS6-FR с цветовой температурой 6000К и световой интенсивностью до 180 люмен. Светодиодные светильники располагались на высоте 70 см над поверхностью кристаллизатора. Для получения максимальной и равномерной освещенности всей площади кристаллизатора использовались рассеивающие линзы 9B30DF Turlens с углом 30°. С помощью прибора Flux Apogee (MQ-200) осуществлялись измерения освещенности поверхности кристаллизатора. Освещенность составляла 450 µmol photons/m2/sec; световой режим постоянный. Температура питательной среды 26-28°С. Продолжительность культивирования составляла 2 суток. Содержание нейтральных липидов в образцах полученной биомассы, определенное методом, описанным в Примере 1, составило для исходного штамма A.platensis шт.1/02-Т/03-5 - 21,3%.

Пример 6.

Часть полученной в примере 4 биомассы заявленного штамма A.platensis rsemsu Т/05-117 отделялась от культуральной жидкости, промывалась физраствором и концентрировалась до пастообразного состояния на ситах из нержавеющей и низкоуглеродистой проволоки с размером ячеек 150-200 мкм. Отмытую биомассу помещали в три стеклянных кристаллизатора диаметром 17 см, наполненных 0,5 л среды Зарукк'а каждый без азота и фосфора. Кристаллизаторы устанавливали на магнитную мешалку типа ESP фирмы VELP (скорость вращения магнита 800 оборотов/мин). Освещение культиваторов обеспечивали белыми светодиодами фирмы Edison Opto EDEW-3LS6-FR с цветовой температурой 6000К и световой интенсивностью до 180 люмен. Светодиодные светильники располагались на высоте 70 см над поверхностью кристаллизатора. Для получения максимальной и равномерной освещенности всей площади кристаллизатора использовались рассеивающие линзы 9B30DF Turlens с углом 30°. С помощью прибора Flux Apogee (MQ-200) осуществлялись измерения освещенности поверхности кристаллизатора. Освещенность составляла 450 µmol photons/m /sec; световой режим постоянный; температура питательной среды 26-28°С.

Продолжительность культивирования составляла 2 суток. Содержание нейтральных липидов в образцах полученной биомассы, определенное методом, описанным в Примере 1, составило для заявленного штамма A.platensis rsemsu Т/05-117 - 32,8%.

Источники информации

1. Borowitzka М.А. 1988. Fats, oils and hydrocarbons // In: Borowitzka M.A, Borowitzka L.J., editors. Micro-algal biotechnology. Cambridge: Cambridge University Press, 1988. P.257-287.

2. Guschina I.A., Harwood J.L. Algal lipids and Effect of the Environment on Their Biochemistry // Lipids in Aquatic Ecosystems / Eds. Kainz M., Brett M., Arts M. Dordrecht, Heidelberg, London, New York: Springer-Verlag, 2009. P.1-24.

3. Коробкова Т.П., Чернова Н.И., Киселева С.В. Артроспира (спирулина) как объект микробиологической промышленности для получения нетрадиционных продуктов природного происхождения // Нетрадиционные природные ресурсы, инновационные технологии и продукты: Сборник научных трудов. Вып.13. М., РАЕН, 2005. С.3-26).

4. Чернова Н.И., Киселева С.В., Коробкова Т.П., Зайцев С.И. Микроводоросли в качестве сырья для получения биотоплива//Альтернативная энергетика и экология. 2008. №9. С.68-74.

5. Патент RU 2322489 С1 Российская Федерация, МПК6 C12N 1/12, C12R 1/89. Штамм Arthrospira platensis (Nordst.) Geitl. 1/02-T/03-5 - продуцент белковой биомассы / Коробкова Т.П., Чернова Н.И., Киселева С.В., Зайцев С.И. заявл. 27.06.2006; опубл. 20.04.2008, Бюл. №11. - 7 с.: 3 ил., 3 табл.

6. Каталог культур микроводорослей в коллекциях СССР. М.: Институт физиологии растений им. К.А.Тимирязева РАН, 1991. С.

7. Leman J. Oleaginous Microorganisms: An Assessment of the Potential // Adv. Appl. Microbiol. 1997. V.43. P.195-244.

8. Hu Q., Sommerfeld M., Jarvis E., Ghirardi M., et al. Micralgal triacylglycerols as feedstocks for biofuel production: perspectives and advances // Plant J. 2008. V.54. P.621-639.

9. Соловченко A.E. Физиологическая роль накопления нейтральных липидов эукариотическими микроводорослями при стрессах. // Ж. Физиология растений. 2012. Т.59. С.192-202

10. Roessler P.G. 1990. Environmental control of glycerolipd metabolism in microalgae: Commercial implications and future research direction. // J. Phycol. 1990. V.26. P.393-399.

11. Tompson G. Lipids and Membrane Function in Green Algae // Biochim. Biophys. Acta / Lipids Lipid Metabolism 1996. V.1302. P.17-45.

12. Uslu Leyla, Isik Oya, Кос Kemal, Goksan. The effect of nitrogen deficiencies on the lipid and protein contents of Spirulina platensis // African Journal of Biotechnology. 17 January, 2011. Vol.10(3), pp.386-389.

13. Folch J, Lees M, Sloane-Stanley GH (1957) a simple method for the isolation and purification of total lipids from animal tissues. J Biol Chem 226(1): 497-509.

14. Chen W, Sommerfeld M, Hu Q (2011) Microwave-assisted Nile red method for in vivo quantification of neutral lipids in microalgae. Bioresour. Technol. 102(1): 135-141.

Штамм Arthrospira platensis (Nordst.) Geitl. rsemsu Т/05-117 (коллекция НИЛ ВИЭ географического факультета МГУ) - продуцент липидосодержащей биомассы.



 

Похожие патенты:

Группа изобретений относится к биотехнологии. Предложен штамм бактерий Bacillus subtilis ВКПМ В-11353, обладающий способностью к расщеплению широкого спектра моно- и дисахаров и широким спектром антагонистического действия в отношении патогенных и условно-патогенных бактерий и грибов, вызывающих заболевания у растений и сельскохозяйственных животных.
Изобретение относится к сельскохозяйственной микробиологии. Штамм бактерий Paenibacillus sp.
Изобретение относится к области биотехнологии защиты окружающей среды, в частности к способам очистки почв от нефтяных загрязнений в сокращенные сроки в условиях низких положительных температур.
Изобретение относится к биотехнологии. Штамм Bacillus subtilis - И5-12/23 обладает антагонистической активностью в отношении фитопатогенных грибов и бактерий.
Изобретение относится к биотехнологии и может быть использовано для подавления жизнеспособности патогенных лептоспир. Способ предусматривает выращивание штаммов бактерий «Bacillus subtilis ТНП-3-ДЕП» и «Bacillus subtilis ТНП-5-ДЕП».

Изобретение относится к биотехнологии и может быть использовано для получения полисахаридов, а именно бактериальной целлюлозы. Способ предусматривает культивирование штамма бактерий Gluconacetobacter sucrofermentans H-110 (ВКПМ В-11267) в жидкой фазе послеспиртовой зерновой барды, полученной после механического отделения твердой фазы, в течение 3-5 суток при температуре 28±2°C и рН 3,9-4,4, а также отделение полученной бактериальной целлюлозы от культуральной среды и высушивание при 800С до постоянной массы.
Изобретение относится к области медицинской микробиологии и биотехнологии, в частности к микробиологической лабораторной диагностике инфекционных болезней. Питательная среда содержит триптон, дрожжевой экстракт, глюкозу, хлорид натрия, эритроциты человека 0(I) группы Rh(+), сульфат железа(II), агар «Дифко» и дистиллированную воду при заданных соотношениях компонентов.

Изобретение относится к области микробиологического получения полисахаридов, а именно бактериальной целлюлозы, и может быть использовано в медицине, промышленности.
Изобретение относится к биотехнологии и может быть использовано в микробиологии. Питательная среда содержит дигидрофосфат калия, гидрофосфат калия, сульфат магния гептагидрат, хлорид натрия, сульфат кальция дигидрат, молибдат натрия, сульфат железа(II), сахарозу, бентонит и воду.

Изобретение относится к области биотехнологии. Предложен способ приготовления модифицированного природного каучука.

Изобретение относится к технологии получения биосилифицированных наноматериалов. Предложен способ получения биосилифицированных нанотрубок.

Группа изобретений, включающая штамм одноклеточных зеленых водорослей Parachlorella nurekis и его применение для уничтожения цианобактерий, относится к биотехнологии. Штамм Parachlorella nurekis 1904 KIEG депонирован в Коллекции Культур Водорослей и Протозоа (Culture Collection of Algae and Protozoa, CCAP), Морской институт Шотландии, Данбег, ОБАН, Аргайл, РАЗУ 1QA, Шотландия, Соединенное Королевство (Scottish Marine Institute, Dunbeg, OBAN, Argyll, PA37 1QA, Scotland, UK) под регистрационным номером CCAP №259/1 и может быть применен для уничтожения цианобактерий.

Изобретение относится к области биохимии. Предложен штамм микроводоросли Chlorella vulgaris IPPAS C-616 для получения липидов в качестве сырья для производства моторного топлива.

Изобретение относится к области биотехнологии, фармацевтической промышленности, в частности к оборудованию для культивиротвания фотосинтезирующих микроорганизмов, преимущественно микроводорослей.

Изобретение относится к фотобиотехнологии и микробиологии. Инокулят миуроводоросли Desmodesmus sp.штамм 2С166Е вносят в минеральную среду BG-11 до конечной концентрации хлорофилла в смеси 4-6 мкг/мл.

Изобретение относится к способу обогащения фотосинтезирующего микроорганизма, выбранного из зеленых водорослей и сине-зеленых водорослей органическим селеном. При этом фотосинтезирующий микроорганизм культивируют в среде, содержащей соединение типа селенсодержащей гидроксикислоты общей формулы (I), солью, сложноэфирным или амидным производным этой кислоты.
Изобретение относится к микробиологии. Способ культивирования микроводорослей биотопливного назначения включает две стадии альголизации.

Изобретение относится к биотехнологии, а именно к технологии выращивания планктонных водорослей, в частности хлореллы. .

Изобретение относится к культивированию сине-зеленых микроскопических водорослей рода Spirulina с образованием водорослей желто-золотистого цвета с высоким содержанием каротиноидов.
Изобретение относится к микробиологической промышленности и позволяет извлекать биологически активные вещества из биомассы одноклеточной водоросли рода Chlorella. .

Способ культивирования одноклеточной зеленой микроводоросли Dunaliella salina для получения биомассы с использованием квазинепрерывного режима культивирования. Культуру, выращенную на модифицированной питательной среде Тренкеншу методом накопительных культур до плотности 1,5-3 г ОР·л-1 переводят в квазинепрерывный режим культивирования. Дальнейшее выращивание осуществляют при удельной скорости протока среды около 0,3 сут-1, при круглосуточном освещении с поверхностной освещенностью 80 Вт·м-2, непрерывной продувке газовоздушной смесью со скоростью 1 л смеси·мин-1·л-1 культуры, которая содержит 3 % СО2, и температуре 26-28°С, на модифицированной питательной среде Тренкеншу. Полученная биомасса составляла около 0,5 г ОВ с 1 л культуры в сутки при относительном содержании каротиноидов в биомассе не менее 0,9 % ОВ, хлорофилла а - 2,8% ОВ и белка - 55% ОВ.
Наверх