Способ создания биоинженерного каркаса легкого крысы

Изобретение относится к медицине, а именно к созданию биоинженерного органа, и может быть использовано в трансплантологии. Способ создания биоинженерного каркаса легкого крысы включает перфузию легкого детергентно-энзиматическим методом, контроль качества каркаса гистологическим исследованием. На фоне постоянной соответствующей физиологическим параметрам вентиляции легких атмосферным воздухом через трахею в течение 24 часов осуществляют через легочную артерию перфузию легких путем последовательного воздействия децеллюляризирующих растворов. Для этого с равной продолжительностью воздействия используют фосфатный буфер, 1% водный раствор дезоксихолата натрия, свиную панкреатическую ДНКазу I, очищенную воду. После чего для обеспечения качества последующей рецеллюляризации с помощью колориметрического метода подтверждают биосовместимость созданного каркаса легкого, жизнеспособность, а также сохранность его архитектоники путем определения его биомеханической прочности на растяжение и сжатие, фиксируя легочный комплайнс. Способ обеспечивает сохранение структуры матрикса легкого и его качества, исключает риск контаминации. 1 табл.

 

Предлагаемое изобретение относится к медицине, а именно к регенеративной медицине, и может быть использовано в клеточной биологии, молекулярной биологии, торакальной хирургии для создания биоинженерного органа в качестве трансплантата.

Трансплантация органов является эффективным методом лечения пациентов, страдающих заболеваниями в терминальной стадии, но, к сожалению, она связана с постоянным недостатком донорских органов, необходимостью пожизненной иммуносупрессивной терапии, имеет высокий процент смертности, а также по этическим соображениям пересадка органов не проводится во многих странах [Fuchs J.R. et al., 2001]. Это вызывает потребность в новых способах лечения для восстановления или замещения поврежденных органов и тканей, что позволит избежать сложностей, связанных с аллогенной трансплантацией. Многообещающей стратегией в репарации или замещении поврежденных органов и тканей является тканевая инженерия [Ott Н.С.et al., 2008]. Тканевая инженерия включает в себя разработку и модификацию биологических (природных) или искусственных каркасов (носителей), а также оценку и поддержание жизнеспособности клеток или тканей, взаимодействующих с ними. С целью исключения иммунных реакций биологические каркасы должны быть децеллюляризированы, но при этом сохранять исходную структуру ткани и внеклеточного матрикса (ВКМ). Известно, что децеллюляризация - это процесс, направленный на удаление клеток из ткани с сохранением ВКМ и трехмерности структуры органа [Ott Н.С.et al., 2008; Badylak S.F. et al., 2011]. Исследования по созданию естественных каркасов методом децеллюляризации ведутся для следующих органов: трахеи, пищевода, сердца, легких, скелетной мышцы, диафрагмы и др. [Atala А., 2009; Ott Н.С.et al., 2008; Badylak S.F. et al., 2011; Conconi M.T. et al., 2005; Macchiarini P. et al., 2008].

С учетом высокой смертности от хронических заболеваний дыхательной системы, весьма актуальной является разработка способа создания биоинженерного легкого.

В частности, известен способ децеллюляризации органокомплекса легких мыши [Price А.Р., England К.А. et al. Development of a decellularized lung bioreactor system for bioengineering the lung: the matrix reloaded. Tissue Eng. Part A 2010; 16: 2581-91]. Протокол включает в себя перфузию легких мыши через трахею и сосудистое русло очищенной водой, детергентами и ферментами: 0,1% раствором тритона Х-100, 2% раствором содиумдодецилсульфата, хлоридом натрия, свиной панкреатической ДНКазой типа 1S в течение 63 часов. Контроль качества полученного каркаса определяли гистологическими методами и регистрацией эластических свойств.

Основными недостатками данного способа являются повреждение гистологической структуры альвеол легких вследствие перфузии через дыхательные пути и воздействия высоких концентраций детергентов, а также длительность проведения децеллюляризации, повышающая риск бактериальной контаминации. Способ предусматривает контроль получаемого биоинженерного каркаса легкого только по данным гистологического исследования и по оценке эластических свойств каркаса. Также в данном протоколе децеллюляризацию проводят на модели легких мыши, что, в связи с физиологическими отличиями животных, не может транслироваться на модель крысы без изменений и дополнений.

За ближайший аналог принят способ проведения децеллюляризации легких крысы [Ott Н.С., Clippinger В., Conrad С.et al. Regeneration and orthotopic transplantation of a bioartificial lung. Nat. Med. 2010; 16: 927-33], заключающийся в проведении физиологической ретроградной перфузии легких через легочную артерию фосфатным буфером (PBS) с добавлением гепарина и антибиотиков, деионизированной водой и растворами детергентов: 0,1% содиумдодецилсульфата и тритона Х-100 в течение 72 часов. Контроль качества проводился путем гистологического исследования, анализа морфологической структуры и механических свойств полученного каркаса.

Основным недостатком данного способа является длительность проведения децеллюляризации, создающая угрозу бактериальной контаминации каркаса.

Задачи: максимальное сохранение гистологической структуры внеклеточного матрикса легкого, обеспечение щадящего режима обработки биологического материала, снижение концентраций детергентов, физиологическая вентиляция легких, снижение времени экспозиции растворов и вероятности бактериальной контаминации получаемого каркаса, т.е. повышение качества получаемого биоинженерного материала и обеспечение контроля его качества.

Сущностью предложенного изобретения является то, что на фоне постоянной соответствующей физиологическим параметрам вентиляции легких атмосферным воздухом через трахею перфузию легочной артерии в течение 24 часов осуществляют путем последовательного воздействия через легочную артерию децеллюляризирующих растворов: фосфатного буфера; 1% водного раствора дезоксихолата натрия; свиной панкреатической ДНКазы I; очищенной воды с равной продолжительностью приемов воздействия, после чего для обеспечения качества последующей рецеллюляризации с помощью колориметрического метода подтверждают биосовместимость созданного биоинженерного каркаса легкого крысы, жизнеспособность клеток на каркасе, сохранность архитектоники полученного каркаса путем использования методов рутинного гистологического исследования и определения его биомеханической прочности на растяжение и сжатие, фиксируя легочной комплайнс.

Технический результат способа состоит в повышении качества получаемого материала каркаса, отсутствии бактериальной контаминации каркаса, полном нивелировании негативных эффектов известных способов того же назначения. Для достижения указанного результата использовались сниженные концентрации и сокращенное время экспозиции перфузионных растворов, а также применение физиологической вентиляции легких при проведении децеллюляризации (параметры вентиляции соответствуют естественным у животных - крыс). Ранее использовавшиеся протоколы повреждали паренхиму легких и несли высокий риск развития бактериальной контаминации, что крайне неблагоприятно сказывается на качестве полученного каркаса легкого и возможности последующего создания биоинженерного органа. Кроме того, способ предусматривает контроль качества получаемого биоинженерного каркаса легкого на жизнеспособность, совместимость, адекватность трансплантата планируемому реципиенту.

Способ создания биоинженерного легкого крысы осуществляют следующим образом: проводят забор органокомплекса «сердце-легкие» после эвтаназии крысы с соблюдением этических норм, фиксируют органокомплекс в биореакторе, выполняют децеллюляризацию легких детергентно-энзиматическим методом в течение 24 часов на фоне постоянной вентиляции трахеи атмосферным воздухом путем последовательного воздействия децеллюляризирующих растворов: фосфатного буфера; 1% водного раствора дезоксихолата натрия (неионного детергента щадящего действия, разрушающего клеточные мембраны и способствующего лизису клеток для получения каркаса легкого); свиной панкреатической ДНКазы I; очищенной воды с равной продолжительностью воздействия. Контроль качества полученного биоинженерного каркаса осуществляют методами рутинного гистологического исследования и определения предельных биомеханических параметров на растяжение и сжатие для подтверждения сохранности архитектоники внеклеточного матрикса легких и отсутствия клеточных элементов на легочном каркасе, а также использованием регистрации биомеханических данных с целью обеспечения соответствия биомеханических свойств имплантата реципиенту дополнительной регистрацией легочного комплайнса при моделировании физиологических условий для установления сохранной способности легких к растяжению и сжатию. Определение легочного комплайнса включает в себя регистрацию величин дыхательного объема, давления плато, пикового дыхательного объема легких, давление в легочной артерии и грудной полости. Жизнеспособность клеток на полученном каркасе определяют путем колориметрического анализа с использованием ХТТ-реагента в целях установления биосовместимости полученного каркаса и проведения последующих экспериментов по рецеллюляризации. Колориметрический анализ проводится согласно рекомендациям в инструкции производителя.

Способ апробирован в течение 2 лет на биологическом материале (органокомплекс «сердце-легкие») экспериментальных животных (крысах). Результаты полностью подтвердили решаемые задачи. Получены естественные матриксы органов с сохранным внеклеточным матриксом и отсутствием клеточных структур.

Данный способ создания биоинженерного легкого использован в эксперименте на 30 крысах-самцах линии Lewis. Выполнены забор и фиксация в биореакторе органокомплекса «сердце-легкие» с последующей децеллюляризацией легких по предлагаемому способу. Пример: забор органокомплекса «сердце-легкие» проведен у крысы-самца линии Lewis весом 200 г после проведенной эвтаназии передозировкой наркотических средств в соответствии с этическими требованиями. Органокомплекс фиксирован в биореакторе. Начата децеллюляризация легких: на фоне постоянной вентиляции трахеи атмосферным воздухом в течение 24 часов проводили последовательную перфузию легочной артерии децеллюляризирующими растворами: фосфатным буфером; 1% водным раствором дезоксихолата натрия; свиной панкреатической ДНКазой I; очищенной водой с равной продолжительностью приемов воздействия. Контроль качества полученного биоинженерного каркаса осуществляли методами рутинного гистологического исследования (окрашивание гематоксилин-эозином, трихромом по Массону, окрашивание по Ван Гизон), а также путем определения предельных биомеханических параметров на растяжение и сжатие с дополнительной регистрацией легочного комплайнса при моделировании физиологических условий. Определение легочного комплайнса включает в себя регистрацию величин дыхательного объема, давления плато, пикового дыхательного объема легких, давление в легочной артерии и грудной полости на всем протяжении децеллюляризации во время моделирования вдоха и выдоха у животного. Жизнеспособность клеток на полученном каркасе определяли путем колориметрического анализа с использованием ХТТ-реагента с целью определения биосовместимости полученного каркаса и проведения последующих экспериментов по рецеллюляризации. Колориметрический анализ проводится согласно рекомендациям в инструкции производителя. В результате экспериментов по децеллюляризации получен каркас легких с сохранением гистологической архитектоники и белков внеклеточного матрикса. Вышеуказанный каркас при проведении колориметрического анализа продемонстрировал биосовместимость и нетоксичность по отношению к клеткам, которым он был засеян.

Способ создания биоинженерного каркаса легкого крысы, включающий перфузию легкого детергентно-энзиматическим методом, контроль качества каркаса гистологическим исследованием, отличающийся тем, что на фоне постоянной соответствующей физиологическим параметрам вентиляции легких атмосферным воздухом через трахею перфузию легочной артерии в течение 24 часов осуществляют путем последовательного воздействия через легочную артерию децеллюляризирующих растворов: фосфатного буфера; 1% водного раствора дезоксихолата натрия; свиной панкреатической ДНКазы I; очищенной воды с равной продолжительностью воздействия, после чего для обеспечения качества последующей рецеллюляризации с помощью колориметрического метода подтверждают биосовместимость созданного биоинженерного каркаса легкого крысы, жизнеспособность, сохранность архитектоники полученного каркаса путем определения его биомеханической прочности на растяжение и сжатие, фиксируя легочный комплайнс.



 

Похожие патенты:
Изобретение относится к медицине, а именно к травматологии и ортопедии, и может быть использовано при экспериментальном иммобилизационном остеопорозе для улучшения структуры суставного хряща, снижения выраженности остеоартроза.
Изобретение относится к медицине, в частности к экспериментальной хирургии и фармакологии, и может быть использовано для увеличения выживаемости кожного лоскута в условиях редуцированного кровообращения.

Изобретение относится к экспериментальной медицине. Способ механического моделирования наружной ротационной контрактуры тазобедренного сустава в экспериментальном модуле эндопротеза тазобедренного сустава состоит в том, что используют экспериментальный модуль эндопротеза тазобедренного сустава, состоящий из головки, фиксированной на держателе, полиэтиленового вкладыша металлической чашки или полиэтиленовой чашки и устройства для фиксации чашки.

Изобретение относится к моделированию в медицине и может быть применимо для анатомо-хирургического моделирования угла горизонтальной инклинации в тазобедренном суставе человека в эксперименте.

Изобретение относится к медицине, в частности к экспериментальной хирургии, и может быть использовано для моделирования острого деструктивного инфицированного панкреонекроза.

Изобретение относится к экспериментальной медицине. Способ экспресс-моделирования износа полиэтиленового вкладыша металлической чашки или полиэтиленовой чашки экспериментального модуля эндопротеза тазобедренного сустава заключается в использовании экспериментального модуля эндопротеза тазобедренного сустава, который имеет головку с ножкой, полиэтиленовый вкладыш металлической чашки или полиэтиленовую чашку и устройство для фиксации чашки.
Изобретение относится к медицине, в частности к экспериментальной хирургии и фармакологии, и может быть использовано для коррекции ишемии скелетной мыщцы. Для этого лабораторным животным на вторые сутки эксперимента моделируют ишемию мышц голени оперативным удалением участка магистральных сосудов, включающего бедренную, подколенную, переднюю и заднюю большеберцовые артерии.

Изобретение относится к медицинской технике и может быть использовано в медицинских тренажерах. Привод содержит устройства линейного перемещения и вращательного движений удлиненного инструмента с устройствами регулируемого торможения и датчики слежения за перемещениями удлиненного инструмента.

Изобретение относится к области медицины и предназначено для обучения операционной бригады, работающей в команде, в условиях, максимально приближенных к реальным.
Изобретение относится к экспериментальной биологии и медицине и дает возможность изучения патогенеза силикоза. Для моделирования этой патологии проводят затравку лабораторных животных пылью промышленного происхождения путем ингаляционного запыления углем в течение 4 часов в сутки.

Изобретение относится к средствам обучения и информирования населения, а именно для подготовки населения в области гражданской обороны и защиты от чрезвычайных ситуаций в отдаленных районах. Мобильный компьютерный тренажер по подготовке населения в области гражданской защиты содержит транспортное средство, мобильный энергетический агрегат с блоком электропроводов, встроенный кабинет с учебными местами для обучения населения, тренажеры, роботы-тренажеры и средства для размещения обучающегося населения. В транспортном средстве компактно размещено три учебных места. Первое - лекционный зал для проведения теоретических занятий и тестирования на базе выносной пневмокаркасной палатки МЧС. Второе учебное место - тренажерный комплекс для отработки практических навыков населения по действиям в чрезвычайных ситуациях, с роботом-тренажером для обработки упражнений по оказанию первой медицинской помощи в условиях чрезвычайной ситуации. Третье учебное место - тренажерный комплекс с наборами различных средств защиты органов дыхания. С помощью оборудования и видеоматериалов для проведения практических занятий осуществляют отработку практических навыков оказания первой медицинской помощи и транспортировку пострадавших. Достигается повышение эффективности в системе обучения населения и повышение морально-психологического состояния населения в условиях угрозы. 2 з.п. ф-лы, 4 ил.
Изобретение относится к экспериментальной медицине и касается моделирования укушенной раны. Для этого у подопытного животного раны покрова тела образуют инструментом по механизму укуса зубами верхней и нижней челюстей мелкого млекопитающего. В каждую ранку вносят смесь свежей слюны с микрофлорой полости рта, взятой от нескольких доноров млекопитающих. При этом слюну берут в равном объеме у каждого донора и вводят смесь слюны в укушенную рану в одинаковой дозе животным всех групп экспериментов. Способ обеспечивает повышение достоверности сравнительного анализа результатов экспериментального исследования путем более точного формирования моделированной укушенной раны, одинаковой по величине, глубине и загрязненности микрофлорой в разных группах экспериментов на животных.

Изобретение относится к экспериментальной медицине, фармакологии и касается разработки способов коррекции процессов перекисного окисления липидов биомембран и повышения антиоксидантного статуса теплокровного организма в условиях ультрафиолетового облучения. Для этого лабораторным животным за 20 минут до облучения в ультрафиолетовой камере в течение 14 дней ежедневно перорально вводят настой травы звездчатки из расчета 5 мл/кг массы. Способ обеспечивает стойкий фармакологический эффект в условиях сокращения длительности курса фитокоррекции. 3 табл.

Изобретение относится к медицине, а именно к экспериментальной хирургии, патологической анатомии и патологической физиологии. Проводят общее обезболивание, разрез тканей, скелетирование нижней челюсти, создание дефекта, ушивание раны. При этом производят разрез кожи в проекции нижнего края нижней челюсти, в области сосудистой вырезки, отступя 5 мм от края нижней челюсти. Тупо проходят в область нижнего края нижней челюсти, отводя лицевую вену и артерию в направлении угла нижней челюсти; производят скелетирование нижнего края нижней челюсти в области сосудистой вырезки. Формируют слепое костное ложе в области сосудистой вырезки или отступя на 1-5 мм кпереди от сосудистой вырезки, под углом 40-75° по отношению к нижнему краю нижней челюсти, параллельно нижнечелюстному каналу; в костное ложе устанавливают бикортикально имплантат изучаемого материала до первичной стабильности. Способ обеспечивает минимальную травматичность при создании раны, уменьшает риск повреждения животными послеоперационной раны, создает возможность проведения операции одновременно на противоположных сторонах скелета, обеспечивает достаточный объем и качество костной ткани в оперируемой зоне, уменьшает риск повреждения жизненно важных анатомических областей, сохраяет функциональную и анатомическую целостность жевательных мышц. 2 пр., 6 ил.

Изобретение относится к медицине, а именно к экспериментальной хирургии, патологической анатомии и патологической физиологии. Проводят общее обезболивание. Выполняют разрез кожи длиной 1,5-2 см в проекции ости лопаточной кости, рассечение кожи, подкожно-жировой клетчатки, фасций; скелетирование мышц в области ости лопаточной кости. Помещение в костное ложе имплантата изучаемого материала и ушивание раны. При этом производят скелетирование мышц ости лопаточной кости в вентральном направлении, в сторону суставной впадины лопаточной кости. Скелетируют область шейки лопаточной кости; формируют костное ложе в области шейки лопатки лопаточной кости под углом 30°-45° по отношению к поверхности шейки лопаточной кости, глубиной не доходя до стенки суставной впадины. В костное ложе шейки лопаточной кости устанавливают имплантат изучаемого материала до первичной стабильности. Способ обеспечивает минимальную травматичность при создании раны, уменьшает риск повреждения животными послеоперационной раны, создает возможности проведения операции одновременно на противоположных лопаточных костях, обеспечивает достаточный объем и качество костной ткани в оперируемой зоне для изучения остеоинтеграции, обеспечивает достаточную фиксацию имплантата. 2 пр., 1 ил.

Изобретение относится к средствам для обучения медицинского персонала и населения приемам первой помощи человеку при тяжелой обструкции верхних дыхательных путей инородным телом. Интерактивный тренажер содержит полномасштабный муляж торса человека, включающий в себя блок головы с ротовой полостью и открытым ртом, снабженный имитатором инородного тела, блок шеи, блок туловища с упругодеформированной передней поверхностью, связанный с блоком головы через блок шеи, и устройство удаления инородного тела из верхних дыхательных путей. Муляж выполнен из жесткого пластического материала и снабжен блоком электроники, имитатором закупорки верхних дыхательных путей, датчиком наклона головы вперед и назад, датчиком смещения передней поверхности туловища, датчиком положения рук спасателя на поверхности грудной клетки при проведении наружного массажа сердца, датчиком положения рук спасателя на поверхности живота, датчиком ударов по спине, датчиком наклона туловища вперед, соединенными с блоком электроники, к которому подключены также пульт управления, динамики и встроенный аккумулятор. Тренажер позволяет моделировать патологические состояния поперхнувшегося человека, расширить круг отрабатываемых приемов спасения, повысить удобство пользования и обеспечить возможность самостоятельного освоения навыков спасения.7 з. п. ф-лы, 3 ил.

Изобретение относится к экспериментальной медицине. Способ экспресс-моделирования износа полиэтиленового вкладыша металлической чашки или полиэтиленовой чашки в динамических условиях при разных углах горизонтальной инклинации в экспериментальном модуле эндопротеза тазобедренного сустава заключается в проведении в условиях эксперимента долговременных и многократных циклических движений в модуле эндопротеза тазобедренного сустава. В способе используют экспериментальный модуль эндопротеза тазобедренного сустава, имеющий ножку, полиэтиленовый вкладыш металлической чашки или полиэтиленовую чашку и головку, состоящую из керамики, металла, металлических сплавов и других материалов с шероховатой поверхностью. Экспериментальный модуль эндопротеза тазобедренного сустава фиксируют в устройстве таким образом, чтобы головка находилась в полиэтиленовой чашке или в полиэтиленовом вкладыше металлической чашки модуля эндопротеза, после чего устройство с полиэтиленовым вкладышем металлической чашки или полиэтиленовой чашкой устанавливают так, чтобы продольная ось головки и шейки модуля была отклонена по отношению к плоскости входа в полиэтиленовый вкладыш металлической чашки или в полиэтиленовую чашку на 10 градусов, после чего проводят динамические испытания на совместное сжатие и циклическое кручение в паре трения. Затем производят замену изношенных полиэтиленовой чашки или полиэтиленового вкладыша и головки с шероховатой поверхностью на новые, при этом устройство с новыми полиэтиленовым вкладышем металлической чашки или полиэтиленовой чашкой устанавливают так, чтобы продольная ось головки и шейки модуля была отклонена по отношению к плоскости входа в полиэтиленовый вкладыш металлической чашки или в полиэтиленовую чашку на 20 градусов, после чего проводят динамические испытания на совместное сжатие и циклическое кручение в паре трения, затем производят замену изношенных полиэтиленовой чашки или полиэтиленового вкладыша и головки с шероховатой поверхностью на новые. Затем устройство с новыми полиэтиленовым вкладышем металлической чашки или полиэтиленовой чашкой устанавливают так, чтобы продольная ось головки и шейки модуля была отклонена по отношению к плоскости входа в полиэтиленовый вкладыш металлической чашки или в полиэтиленовую чашку на 30 градусов, и проводят динамические испытания на совместное сжатие и циклическое кручение в паре трения, затем исследуют износ полиэтиленового вкладыша чашки или полиэтиленовой чашки экспериментального модуля эндопротеза тазобедренного сустава. Изобретение обеспечивает эффективность в динамических условиях. 16 ил.

Изобретение относится к медицине, а именно к экспериментальной хирургии, патологической анатомии и патологической физиологии. Выполняют общее обезболивание. Наносят разрез кожи длиной 1,5-2 см, рассекают кожу, подкожно-жировую клетчатку, фасцию. Производят скелетирование мышц, прикрепляющихся к подостной ямке лопаточной кости, в направлении ости; скелетируют каудальную поверхность ости лопаточной кости; формируют слепое костное ложе в области ости лопаточной кости под углом 45° к поверхности подостной ямки лопаточной кости. В костное ложе устанавливают имплантат изучаемого материала до первичной стабильности. Ушивают рану. Способ обеспечивает минимальную травматичность при создании раны, уменьшает риск повреждения животными послеоперационной раны, создает возможности проведения операции одновременно на противоположных лопаточных костях, обеспечивает достаточный объем и качество костной ткани в оперируемой зоне, предупреждает нарушение непрерывности мышц на протяжении и потерю не более 1 точки прикрепления мышц. 2 ил., 2 пр.

Изобретение относится к медицине, а именно к экспериментальной хирургии, патологической анатомии, патологической физиологии и может быть использовано для оценки остеоинтеграции пористых проволочных материалов в эксперименте. Способ включает забор костных блоков с изучаемым пористым проволочным материалом, фиксацию костной ткани с пористым проволочным материалом, декальцинирование, обезжиривание, обезвоживание, заливку этой ткани, изготовление срезов, окрашивание и гистоморфометрию. При этом до или после фиксации костной ткани с изучаемым пористым проволочным материалом и до или после декальцинации производят поиск и фиксацию краевого проволочного элемента пористого проволочного материала в костном блоке. Производят расплетание пористого проволочного материала из костного блока методом вытягивания краевого проволочного элемента. Анализ макропрепаратов производят при освобождении поровых пространств пористого проволочного материала. Далее производят забор тканей из освобождающихся поровых пространств, в т.ч. производят забор и анализ внутрипоровых фрагментов. Способ обеспечивает возможность качественной и количественной оценки гистоморфометрических параметров внутрипоровых тканей во всем объеме имплантата, в т.ч. за счет обеспечения сохранения структуры внутрипоровой архитектоники. 3 пр., 1 ил.

Изобретение относится к области медицины, а именно к физиологии поведения животных. Ориентировочно-исследовательское и двигательное поведение крыс исследуют на фоне выработки пищедобывательного навыка посредством дифференциации траектории движения животных в Ж-образном лабиринте. Оценку осуществляют по следующим формам двигательных действий: движения к локусам лабиринта без пищевого подкрепления; целенаправленные движения к локусу с пищевым подкреплением; исследовательские обходы всех площадок лабиринта; движения к локусу, зеркально противоположному локусу с пищевым подкреплением; многократно повторяющиеся движения между двумя локусами лабиринта; замирание на стартовой площадке. Способ позволяет повысить достоверность исследования, что достигается за счет многофакторной оценки функций центральной нервной системы. 1 з.п. ф-лы, 1 табл., 1 пр., 6 ил.

Изобретение относится к медицине, а именно к созданию биоинженерного органа, и может быть использовано в трансплантологии. Способ создания биоинженерного каркаса легкого крысы включает перфузию легкого детергентно-энзиматическим методом, контроль качества каркаса гистологическим исследованием. На фоне постоянной соответствующей физиологическим параметрам вентиляции легких атмосферным воздухом через трахею в течение 24 часов осуществляют через легочную артерию перфузию легких путем последовательного воздействия децеллюляризирующих растворов. Для этого с равной продолжительностью воздействия используют фосфатный буфер, 1 водный раствор дезоксихолата натрия, свиную панкреатическую ДНКазу I, очищенную воду. После чего для обеспечения качества последующей рецеллюляризации с помощью колориметрического метода подтверждают биосовместимость созданного каркаса легкого, жизнеспособность, а также сохранность его архитектоники путем определения его биомеханической прочности на растяжение и сжатие, фиксируя легочный комплайнс. Способ обеспечивает сохранение структуры матрикса легкого и его качества, исключает риск контаминации. 1 табл.

Наверх