Способ клонального микроразмножения хризантемы


 


Владельцы патента RU 2560592:

Общество с ограниченной ответственностью "Экобиотехнологии" (RU)

Изобретение относится к сельскохозяйственной биотехнологии. Изобретение представляет собой способ клонального микроразмножения хризантемы, включающий микрочеренкование растительных побегов, стерилизацию растительных эксплантов с последующей их высадкой на безгормональную питательную среду Мурасига и Скуга, размножение микроклонов, укоренение вновь образованных in vitro побегов и адаптацию растений-регенерантов к почвенным условиям, где на этапе стерилизации растительных эксплантов используют обработку микрочеренков водным раствором анолита нейтрального катодно-обработанного в концентрации 0,03% в течение 10 мин, без последующего промывания стерильной дистиллированной водой, на этапе микроразмножения проводят обработку микрочеренков раствором католита в течение 3 мин, на этапе адаптации почвенный субстрат обрабатывают водным раствором анолита нейтрального катодно-обработанного в концентрации 0,03%, а микрорастения обрабатывают раствором католита в течение 10 мин. Предлагаемый способ позволяет повысить эффективность клонального микроразмножения растений хризантемы: увеличить выход стерильных и жизнеспособных эксплантов 90-100%, улучшить жизненные показатели растений-регенерантов (количество и длину корней в 1,3 раза, длину побегов в 1,5 раза), а также повысить приживаемость микрорастений к почвенным условиям. 2 табл.

 

Область техники, к которой относится изобретение

Изобретение относится к области сельского хозяйства, в частности к способам размножения растений методом культуры тканей. Служит охране окружающей среды.

Уровень техники

Известен способ клонального микроразмножения хризантемы, включающий черенкование пробирочных растений на черенки длиной 10-15 мм с двумя узлами. Микрочеренки (растительные сегменты, экспланты) стерилизуют в 0,1% растворе сулемы (хлорид ртути) в течение 3-4 мин, затем промывают в стерильной дистиллированной воде. Стерильные микрочеренки высаживают в пробирки на твердую питательную среду, приготовленную по прописи Мурасига и Скуга (1962) в сочетании с агаром и сахарозой (15 г/л), дополненную регулятором роста - индолилуксусной кислотой в концентрации 0,5 мг/л. Растения культивируют при температуре +20-25°С и 16-часовом световом фотопериоде (см. автореферат дис…к.б.н. / Гранда Харамильо Роберто Карлос. - МСХА имени К.А.Тимирязева. - Москва, 2009. - 19 с.).

Недостатком данного способа является то, что на этапе введения в культуру тканей для стерилизации микрочеренков используется сулема (хлорид ртути), которая вызывает некроз (гибель) растительных тканей, а также создает остаточный фон токсичности опасный для человека и требует специальной утилизации.

Кроме того, длительное использование экзогенных регуляторов роста при клональном микроразмножении приводит к изменению эндогенного гормонального баланса у пробирочных растений и как следствие быстрому старению тканей и невозможности размножения культуры, что ограничивает эффективность метода при размножении растений микрочеренкованием.

Недостатком является также то, что в данном техническом решении не предложен способ адаптации микрорастений (растения-регенеранты) хризантемы к почвенным условиям.

Прототипом заявленного изобретения явился способ стерилизации первичных эксплантов хризантемы на этапе введения в культуру тканей. Проводят стерилизацию микрочеренков хризантемы водным раствором анолита нейтрального катодно-обработанного (анолит АНК) в концентрации 0,2 мг/л (0,02%) в течение 5 мин без последующего промывания в стерильной дистиллированной воде. Стерильные черенки высаживают на безгормональную питательную среду, приготовленную по прописи Мурасига и Скуга (1962) (см. Широносов В.Г., Широносов О.В., Минаков В.В., Аверкиев М.С., Казанцева С.Р., Пигалев С.А., Дедюхина О.Н., Яговкина О.В., Широносова Г.И., Егоркина С.Б., Зарипова Р.А. Водоочистка, водоподготовка, водоснабжение на основе конденсированных неравновесных сред // Водоочистка, водоподготовка, водоснабжение: производственно-технический и научно-производственный журнал. - 2012. - Вып.1(49). - С.20-26).

Использование анолита АНК на этапе введения в культуру тканей значительно упрощает и ускоряет процесс стерилизации первичных эксплантов, поскольку после обработки эксплантов анолитом АНК не проводят промывание стерильной дистиллированной водой, так как продуктами деградации анолита АНК являются исходные вещества, т.е. слабоминерализованная вода. Данная особенность использования анолита АНК является существенным преимуществом по сравнению с другим известным аналогом, так как позволяет значительно сократить время (до 1 часа на каждый образец) при подготовке растительного материала для введения в культуру тканей.

Недостатком данного способа является то, что он обеспечивает 70%-ный выход стерильных и жизнеспособных эксплантов и разработан только для первого этапа клонального микроразмножения растений - стерилизации растительных эксплантов и его результаты нельзя перенести на весь процесс клонального микроразмножения хризантемы.

Раскрытие изобретения

Задачей настоящего изобретения является повышение эффективности клонального микроразмножения коммерческих сортов хризантемы, а также снижение негативного воздействия на окружающую среду.

Решение поставленной задачи достигается за счет того, что в предложенном способе на каждом этапе клонального микроразмножения используют электрохимически активированные водные растворы: анолит нейтральный катодно-обработанный (анолит АНК) и католит, которые не оказывают отрицательного воздействия на сложные биосистемы и являются экологически безопасными.

Католит обладает католитическими и биологическими стимулирующими свойствами, а анолит антисептическими и бактерицидными свойствами.

В отличие от прототипа в предложенном способе растительные сегменты на этапе введения в культуру тканей обрабатывают анолитом АНК в концентрации 0,03% в течение 10 мин., что обеспечивает выход 90-100% стерильных и жизнеспособных эксплантов.

На этапе собственно микроразмножения в качестве стимулятора роста и развития растений применяют католит, что позволяет избежать быстрого старения тканей, а также витрификации (гипергидратации) побегов, которая встречается в ходе микроразмножения. Механизм действия католита на живые системы похож на действие таких важнейших витаминов-антиоксидантов, как Е, С, Р, РР, являющихся иммунностимуляторами.

На этапе адаптации микрорастений к почвенным условиям используют совместную обработку анолитом АНК и католитом, что позволяет улучшить жизненные показатели микрорастений (длина побегов, длина и количество корней) и увеличить их приживаемость в почвенном субстрате.

Предложенный способ клонального микроразмножения хризантемы по сравнению с прототипом и другими известными техническими решениями имеет следующие преимущества:

- разработан для всех этапов клонального микроразмножения: стерилизация растительных эксплантов, собственно микроразмножение, адаптация растений-регенерантов к почвенным услвовиям;

- позволяет получить высокий выход - от 90 до 100% стерильных и жизнеспособных эксплантов;

- благодаря совокупной обработке микрочеренков анолитом АНК и католитом достигается положительный эффект: значительно сокращаются сроки развития первичных эксплантов за счет слабого поражения растительной ткани, ускоряются рост и развитие растений, улучшаются биометрические показатели корневой системы растений-регенерантов;

- исключает использование экзогенных регуляторов роста;

- использование электрохимически активированных водных растворов является безопасным для человека и окружающей среды и не требует специальной утилизации;

- электрохимически активированные водные растворы являются более дешевыми, по сравнению с традиционными средствами;

Осуществление изобретения.

Способ иллюстрируется следующим примером использования электрохимически активированных водных растворов в процессе клонального микроразмножения хризантемы.

В качестве первичных эксплантов для получения стерильных растений используют стеблевые микрочеренки сортов хризантемы длиной 1,2-1,8 см с одним междоузлием, которые выдерживают в 0,03% растворе анолита АНК в течение 10 минут без последующего промывания стерильной дистиллированной водой. В условиях ламинар-бокса стерильные микрочеренки помещают на агаризованную (0,7%), безгормональную питательную среду, приготовленную по прописи Мурасига и Скуга (1962). Культуру содержат при температуре воздуха 25±2°С, на свету белых люминесцентных ламп при 16-часовом фотопериоде.

На этапе введения в культуру тканей при использовании в качестве стерилизующего вещества анолита АНК отмечается не только высокий выход стерильных и жизнеспособных эксплантов до 90-100%, но и их более быстрое развитие. Различие в регенерационных и биометрических показателях растений связано со сроком начала роста побегов. В результате быстрого развития эксплантов при указанных концентрации и времени обработки анолитом АНК растения получают небольшой забег в своем росте и развитии, что позволяет сократить продолжительность первого этапа клонального микроразмножения в среднем на 2 недели и как следствие повысить эффективность клонального микроразмножения хризантемы.

На этапе собственно микроразмножения в качестве экологически чистого стимулятора роста и развития растений применяют водный раствор католита. В работе используют стерильные микрочеренки хризантемы длиной 15-20 мм с 2 узлами. Обработку водным раствором католита и высадку микрочеренков на агаризованную (0,7%), безгормональную питательную среду, приготовленную по прописи Мурасига и Скуга (1962), проводят в условиях ламинар-бокса. Культуру содержат при температуре воздуха 25±2°С, на свету белых люминесцентных ламп при 16-часовом фотопериоде. Использование обработки микрочеренков раствором католита на этапе микроразмножения способствует получению растительного материала с высокими биометрическими показателями, что обеспечивает сокращение сроков получения стандартных растений-регенерантов, готовых для адаптации к почвенным условиям (табл.1).

Таблица 1 - Влияние обработки раствором католита на биометрические показатели микрорастений хризантемы (через 30 дней культивирования)

Таблица 1
Вариант опыта Средние биометрические показатели растений
Агент Экспозиция, мин Высота растений, см. Количество побегов, шт. Количество корней, шт. Длина корней, см
1 Католит 3 4,5 1,9 6,1 4,6
2 Контроль (без обработки) 2,6 1,6 4,3 3,1

Так, обработка микрорастений католитом оказывает влияние на образование и рост корней пробирочных растений: увеличивается в среднем в 1,3 раза на одно растение число корней, длина корня, что положительно сказывается на дальнейшей адаптации растений-регенерантов к почвенным условиям. Кроме того, отмечается увеличение длины побегов в среднем в 1,5 раза, что свидетельствует об увеличении потенциального микроразмножения хризантем. В конечном итоге это позволяет ускорить процесс клонирования растений и тем самым повысить эффективность клонального микроразмножения хризантемы при высоком качестве микрочеренков.

На этапе адаптации микрорастений к почвенным условиям используют субстрат, состоящий из торфа:вермикулита:перегноя в соотношении 1:1:1. Предварительно субстрат обрабатывают раствором анолита АНК в концентрации 0,03%. Для адаптации используются микрорастения, имеющие высоту побегов от 3,2 до 4,8 см, корневую систему, представленную из 3-6 шт. корней первого порядка длиной от 2,4 до 8,5 см. При переводе в почвенные условия микрорастения обрабатывают водным раствором католита в течение 10 мин.

Применение обработки растений-регенерантов водным раствором католита в течение 10 минут оказывает положительное влияние на биометрические параметры растений (высота побегов, количество и длина корней), а также процессы роста и развития растений в почвенных условиях, способствует сокращению периода адаптации, что сказывается на эффективности клонального микроразмножения хризантемы и повышению выхода посадочного материала (табл.2).

Таблица 2 - Влияние обработки водным раствором католита на приживаемость микрорастений хризантемы к почвенным условиям (через 30 дней культивирования)

Таблица 2
Вариант опыта Приживае-мость, % Средние биометрические показатели растений
Агент Экспозиция, мин Количество побегов, шт./растение Высота растений, см Количество корней, шт. Длина корней, см
1 Католит 10 87,5 1,5 5,7 7,4 5,7
2 Контроль (без обработки) - 75,0 1,3 5,6 7,2 4,9

Как видно из таблицы 2, применение католита на этапе адаптации способствует лучшей приживаемости растений, а также ускоряет рост и развитие регенерантов. Обработка растений-регенерантов католитом в течение 10 минут оказывает положительное влияние данного раствора на биометрические характеристики растений (высота побегов, количество и длина корней). Более быстрое развитие растений в почвенных условиях способствует сокращению периода адаптации, что повышает эффективность клонального микроразмножения хризантемы.

Использование заявляемого способа позволяет повысить эффективность клонального микроразмножения хризантемы: увеличить выход стерильных и жизнеспособных эксплантов на 20-30% по сравнению с прототипом, ускорить развитие первичных эксплантов, улучшить биометрические показатели растений-регенерантов, упростить процесс адаптации микрорастений к почвенным условиям, увеличить выход посадочного материала, снизить нагрузку на окружающую среду.

Способ клонального микроразмножения хризантемы, включающий микрочеренкование растительных побегов, стерилизацию растительных эксплантов с последующей их высадкой на безгормональную питательную среду Мурасига и Скуга, размножение микроклонов, укоренение вновь образованных in vitro побегов и адаптацию растений-регенерантов к почвенным условиям, отличающийся тем, что на этапе стерилизации растительных эксплантов используют обработку микрочеренков водным раствором анолита нейтрального катодно-обработанного в концентрации 0,03% в течение 10 мин, без последующего промывания стерильной дистиллированной водой, на этапе микроразмножения проводят обработку микрочеренков раствором католита в течение 3 мин, на этапе адаптации почвенный субстрат обрабатывают водным раствором анолита нейтрального катодно-обработанного в концентрации 0,03%, а микрорастения обрабатывают раствором католита в течение 10 мин.



 

Похожие патенты:

Изобретение относится к области сельскохозяйственной биотехнологии. Изобретение представляет собой способ получения дигаплоидных растений ячменя из культивируемых микроспор in vitro, включающий: - выращивание растений-доноров при пониженной температуре воздуха 15-20°C, световом режиме: 16 ч день/8 ч ночь, влажности воздуха 60-70%, интенсивности освещения 10000-15000 люкс, с проведением фитосанитарной обработки, при этом выращивание растений-доноров осуществляют до стадии от открытия влагалища флагового листа, когда соцветие находится внутри флагового листа, - стрессовую обработку колосьев при 4°C, в пробирках с бедной средой, содержащей KCl - 1,5 г/л, MgSO4×7H2O - 0,25 г/л, CaCl2×2Н2О - 0,1 г/л, маннитол - 60 г/л, калий-фосфатный буфер - 1 мл/л, pH 7,0, в течение 7 дней для переключения из гаметофитного пути развития микроспоры на спорофитный путь, - выделение микроспор из колосков в стерильных условиях, - культивирование выделенных микроспор на модифицированной среде для индукции эмбриогенеза, включающей 6% мальтозу, 10 завязей на 1,5 мл культуры и регуляторы роста растений в количестве 1 мг/л 2,4-Д, 0,2 мг/л зеатина, причем добавление вышеуказанных компонентов осуществляется перед добавлением микроспор, - регенерацию растений из эмбриоидов путем культивирования на твердой питательной среде Мурашига и Скуга без добавления регуляторов роста растений, - обработку гаплоидных растений ячменя антимитотическим препаратом N-диацетил-N-(β,γ-эпоксипропил) аминоколхицином для удвоения хромосом и получения дигаплоидых растений.

Изобретение относится к сельскохозяйственной биотехнологии. Изобретение представляет собой способ клонального микроразмножения подвоев яблони ММ 106, СК 2, СК 3, СК 4, СК 7, где на этапах введения в культуру в среду Мурасиге-Скуга добавляется в качестве санирующего агента антибиотик гризеофульвин 500 мг/л.

Изобретение относится к области садоводства и может быть использовано для микроразмножения растений гвоздики in vitro. Изобретение представляет собой способ размножения гвоздики in vitro, включающий отделение эксплантов, стерилизацию, посадку на питательную среду Мурасиге-Скуга, дополненную сахарозой 30 г/л и регуляторами роста 1 мг/л 6-бензиламинопурина и 0,2 мг/л нафтилуксусной кислоты, микроразмножение путем отделения побегов от эксплантов, их укоренение на питательной среде Мурасиге-Скуга и дальнейшее укоренение в грунте, отличающийся тем, что при микроразмножении экспланты укореняют на агаризованную питательную среду Мурасиге-Скуга, дополненную Рибав-Экстра 0,01-0,1 мг/л, и укореняют в условиях ex vitro в грунте, состоящем из смеси дерновой земли - 50%, торфа низинного с перегноем - 30% и песка 20%.

Изобретение относится к сельскохозяйственной биотехнологии. Изобретение представляет собой способ размножения копеечника чайного, где вызревшие простерилизованные семена копеечника чайного (Hedysarum theinum Krasnob.) высаживают на питательные среды Мурасиге-Скуга для введения в культуру ткани, через 20-30 суток развившиеся побеги пересаживают на среды размножения MS, затем образовавшиеся конгломераты микропобегов делят и пересаживают на среды, содержащие 1,0 БАП+L-глютамин и аденин сульфат 100 мг/л.
Изобретение относится к сельскохозяйственной биотехнологии. Изобретение представляет собой способ клонального микроразмножения винограда in vitro с деконтаминацией от микоплазменной инфекции, включающий микрочеренкование пробирочных растений, высадку их на твердую питательную среду Мурасиге и Скуга без ростовых веществ и с уменьшенным количеством макроэлементов.

Изобретение относится к биотехнологии. Изобретение представляет собой способ клонального микроразмножения винограда in vitro, включающий микрочеренкование пробирочных растений, высадку их на питательную среду в присутствии ростовых веществ и культивирование, где высадку и культивирование осуществляют на твердой питательной среде Мурасиге и Скуга, содержащей в качестве росторегулирующего вещества препарат Мелафен в концентрации 10-7-10-11%.
Изобретение относится к сельскохозяйственной биотехнологии. Изобретение представляет собой способ размножения гречихи in vitro, включающий размножение гречихи из асептических проростков семян.
Изобретение относится к области сельского хозяйства, в частности к селекции. Изобретение представляет собой способ повышения коэффициента размножения капусты белокочанной в условиях in vitro, включающий выращивание эксплантов, культирование их на питательной среде Мурасиге-Скуга, внесение в нее регуляторов роста тидиазурон в концентрации 1 мг/л в сочетании с индолил-3-уксусной кислотой - 0,5 мг/л, при использовании цветолож размером 0,2-0,3 мм, изолированных из бутонов длиной 0,5-0,7 мм, где цветоложе используют за 1-2 дня до распускания цветков и после выращивания их на питательных средах культивируют до образования почек в течение 14-21 суток.
Способ регенерации адвентивных микропобегов Hyssopus officinalis L. в условиях in vitro включает отделение листьевых дисков от микропобегов после 4-5 пассажа, полученных в культуре in vitro, дальнейшее культивирование их на модифицированной питательной среде Мурасиге и Скуга с половинной концентрацией макроэлементов и дополненной веществом цитокининового типа действия, а именно тидиазуроном, при этом культивирование проводят при пониженной интенсивности освещения.

Изобретение относится к сельскохозяйственной биотехнологии. Изобретение представляет собой способ размножения растений лапчатки белой (Potentilla alba) методом культуры in vitro, включающий отделение вегетативных почек от корневища, стерилизацию, высаживание на питательные среды, микроразмножение побегов, укоренение побегов, адаптацию растений-регенерантов к нестерильным условиям.

Изобретение относится к биотехнологии. Изобретение представляет собой способ размножения пеперомии in vitro, включающий отделение эксплантов, стерилизацию, посадку на питательную среду Мурасиге-Скуга, микроразмножение путем отделения побегов от эксплантов, их укоренение на питательной среде Мурасиге-Скуга и дальнейшее укоренение в грунте, где при микроразмножении экспланты высаживают на агаризованную питательную среду Мурасиге-Скуга, дополненную 10 г/л глюкозы и 0,1 мг/л Рибав-Экстра и культивируют в течение 4 недель, затем сформировавшиеся растения-регенераты с корнями замачивают в растворе 3 мг/л индолилуксусной кислоты в течение 15 минут и укореняют в условиях ex vitro в грунте, состоящем из смеси торфа и песка 1:1. Изобретение позволяет упростить способ микроразмножения за счет образования корневой системы у формирующихся in vitro побегов уже на этапе микроразмножения. 2 ил., 1 табл.

Изобретение относится к области биотехнологии и растениеводства. Изобретение представляет собой способ сохранения in vitro растений земляники (Fragaria L.), заключающийся в том, что растения помещают в пробирки на питательную среду Мурасиге-Скуга, модифицированную 6% сахарозы, 10-12 г/л агар-агара, 0,2 мг/л 6-бензиламинопурина, 0,1-0,5 мг/л паклобутразола, 6 мМ глюконата кальция, а на ее поверхность выкладывают гранулы альгината кальция с тиосульфатом серебра, закрывают пробирки и переносят их в условия при температуре от 1 до 10°С, 6-часовом световом дне и освещенности 0,5-0,8 клк. Заявленное изобретение обеспечивает долговременное сохранение in vitro коллекций растений земляники в состоянии ингибированного роста без смены питательной среды в течение двух и более и позволяет увеличить продолжительность хранения в жизнеспособном состоянии 65-69% растений земляники, а также 100% клонов этой культуры до двух и более лет и использовать его для научных и промышленных целей. 3 ил., 4 табл., 2 пр.

Изобретение относится к области биотехнологии растений и лесному хозяйству. Изобретение представляет собой способ криоконсервации пазушных почек in vitro растений осины, заключающийся в изоляции пазушных почек, предварительном их обезвоживании в средах, содержащих осмолитики, переносе почек в криопробирки, криоконсервации криопробирок с почками в жидком азоте, оттаивании почек и посткриогенной регенерации из них растений, отличающийся тем, что на этапе обезвоживания перед быстрым замораживанием сначала почки помещают в раствор I, содержащий питательную среду и осмолитики (WPM с добавлением к сахарозе (0,2-0,5М) глицерола (1,7-2,5М)), затем почки переносят в раствор II, содержащий питательную среду и осмолитики (WPM, сахароза (0,2-0,5М), глицерол (2,5-3,5М), этиленгликоль (1-1,5М), диметилсульфоксид (1,5-2М)), с последующим переносом в жидкость для замораживания (WPM, содержащая сахарозу (0,2-0,5М), глицерол (3,5-4М), этиленгликоль (1,5-2,5М), диметилсульфоксид (1,5-2М)). Изобретение позволяет проводить прямую регенерацию из почек, обеспечивая генетическую сохранность in vitro культур ценных селекционных генотипов и генетически модифицированных клонов осины и выживаемость до 80% после криохранения в течение года. 1 з.п. ф-лы, 3 ил., 1 табл.

Изобретение относится к области биотехнологии растений и лесному хозяйстве. Изобретение представляет собой способ подготовки микропобегов in vitro ясеня, осины, ивы для последующего укоренения в условиях ex vitro, включающий перенос растений после стадии мультипликации на питательную среду WPM для элонгации, с добавлением сахарозы 30 г/л, агар-агара 9 г/л, инозитола 100 мг/л, пиридоксина 0,1 мг/л, тиамина 0,1 мг/л и никотиновой кислоты 0,5 мг/л, где в среду для элонгации добавляют глутамин в концентрации 0,5 или 1,0 ммоль/л, при этом культивирование растений осуществляется при повышенной освещенности - от 5 до 8 тыс. люкс. Изобретение позволяет получать физиологически и морфологически выровненные побеги осины, ясеня и ивы, что обеспечивает значительное повышение эффективности их укоренения ex vitro. 4 табл.

Изобретение относится к области сельского хозяйства, в частности картофелеводства. В способе выращивают мини-клубни оздоровленного картофеля в защищенном грунте, полученные от пробирочных растений. При этом после проверки исходных растений на вирусную инфекцию проводят черенкование здоровых растений, в конце мая - начале июня подготовленные растения высаживают в марлево-пленочный изолятор с повышенной густотой посадки. Растения высаживают непосредственно в пластиковые ящики с торфогрунтом, выстланные изнутри агриловой пленкой. Перед посадкой растения в торфогрунт вносят удобрения. Способ позволяет получать безвирусные мини-клубни картофеля. 1 ил., 1 табл.

Изобретение относится к биотехнологии. Изобретение представляет собой способ получения растений-регенерантов лапчатки белой (Potentilla alba L.) в условиях гидропоники, включающий использование черенков материнских растений, размножение и выращивание, где в качестве эксплантов используются черенки материнских растений, которые высаживают на питательную среду по прописи Мурасиге-Скуга (MS), содержащую 0,5 мкМ БАП для введения в культуру ткани, через 20-30 суток развившиеся побеги пересаживают для микроразмножения на питательную среду Мурасиге-Скуга (MS), содержащую 0,5 мкМ БАП+0,25 мкМ ИМК+0,05 мкМ ГК, укореняют побеги на агаризированной среде Мурасиге-Скуга, дополненной 1 мкМ НУК, затем растения-регенеранты вынимают из культуральных сосудов, отмывают корни в дистиллированной воде от агара, закрепляют в кассетах и помещают в гидропонную установку на 90 суток для адаптации и выращивания растительного лекарственного сырья на питательной среде Мурасиге-Скуга, содержащей 1/4 состава макросолей, 1/4 состава микросолей, полный набор витаминов, хелата железа и кальция хлористого, при температуре 24-26°C, режим освещения: 16 часов день, 8 часов ночь. Изобретение позволяет увеличить выход лекарственного растительного сырья лапчатки белой по сырой массе за 1 год в условиях круглогодичных теплиц с содержанием экстрактивных веществ, идентичных в растительном сырье лапчатки белой, выращенной в полевых условиях. 3 ил., 1 табл.

Изобретение относится к области биохимии. Предложена система контроля фотосинтетического и дыхательного СО2-газообмена в культуре in vitro. Система герметичным образом через типовой уплотнитель сопрягается с прозрачным технологическим объемом in vitro с культивируемыми полноценными растениями на различных этапах онтогенеза, регенерантами, изолированными органами и тканями. Система образует вместе с подключенным технологическим объемом общий замкнутый герметичный воздушный контур. Контур состоит из последовательно соединенных между собой указанного технологического объема и воздушного насоса, ротаметра, воздушного осушителя и CO2-газоанализатора. Контур между CO2-газоанализатором и технологическим объемом in vitro дополнительно оборудован двухпозиционным газовым переключателем. Изобретение обеспечивает многократную воспроизводимость процедуры измерения. 1 з.п. ф-лы, 3 ил., 1 табл.

Изобретение относится к биотехнологии. Представлен способ получения моноклональной линии растительных клеток от гетерологичной популяции растительных клеток, включающий следующие стадии. Способ включает получение гетерологичной популяции растительных клеток и получение протопластов от указанной гетерологичной популяции растительных клеток. Затем осуществляют разделение единичных протопластов путем подвергания получения протопластов проточно-цитометрическому сортингу. После этого осуществляют регенерацию отделенного единичного протопласта до образования микроколонии посредством совместного культивирования в присутствии материала фидерных клеток. Полученные микроколонии выделяют из материала фидерных клеток и культивируют до образования моноклональной линии растительных клеток. 4 з.п. ф-лы, 1 ил., 2 пр.

Изобретение относится к сельскохозяйственной биотехнологии. Изобретение представляет собой способ культивирования лимона in vitro, заключающийся в том, что стерильные пазушные почки предварительно культивируют до появления микропобегов на питательной среде МС с добавлением БАП 0,1 мг/л, НУК 0,5 мг/л, агар 0,7%, затем вычленяют из них меристемы размером 0,4-0,6 мм с 2-3 примордиями и прививают их на подвой, выращенный in vitro на среде WPM, дополненной БАП 1 мг/л, ГК 2 мг/л, агар 0,7%, микропривитые растения культивируют на среде WPM с добавлением БАП 1 мг/л, ГК 2 мг/л, агар 7 г/л, сахарозы 20 г/л. Изобретение позволяет сохранять в коллекции in vitro ценные генотипы цитрусовых культур с высокой степенью генетической стабильности и однородности растительного материала. 3 табл.
Изобретение относится к области декоративного садоводства. Изобретение представляет собой способ размножения растений фритиллярий методом in vitro, включающий стерилизацию эксплантов, разделение их на части, посадку на питательную среду Данстена и Шорта, отделение микролуковиц от эксплантов, их укоренение и адаптацию, отличающийся тем, что после разделения эксплантов их помещают на питательную среду Данстена и Шорта, содержащую 6 г/л агара с добавлением - 5 мкМ 6-бензиламинопурина и 2 мкМ α-нафтилуксусной кислоты, после культивирования на данной среде микролуковицы размножают на безгормональной среде Данстена и Шорта в течение 4 недель при освещении 3 клк 16 ч свет/ 8 ч темнота при температуре 24°C, укореняют и адаптируют в контейнерах со сфагновым мхом, в темноте, при температуре 7°C, в течение 2 месяцев. Изобретение позволяет получить высокий выход посадочного материала представителей рода фритиллярия при минимальных затратах регуляторов роста. 2 табл.
Наверх