Способ повышения содержания алкалоида лаппаконитина в заготовленных корневищах aconitum septentrionale koelle



Способ повышения содержания алкалоида лаппаконитина в заготовленных корневищах aconitum septentrionale koelle
Способ повышения содержания алкалоида лаппаконитина в заготовленных корневищах aconitum septentrionale koelle

 


Владельцы патента RU 2580042:

Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Уфимский Институт биологии Российской академии наук (RU)

Изобретение относится к химико-фармацевтической промышленности. Изобретение представляет собой способ повышения содержания алкалоида лаппаконитина в заготовленных корневищах Aconitum septentrionale Koelle, включающий обработку заготовленных корневищ водной суспензией биопрепарата Бациспецин БМ в концентрации от 2 г/л до 25 г/л путем однократного их обмакивания, размещения в камеры с влажностью не менее 85% при комнатной температуре и инкубации при этих условиях от 1 до 3 суток. Изобретение позволяет увеличить содержание в сырье целевого продукта - лаппаконитина. 2 табл., 2 пр.

 

Способ повышения содержания алкалоида лаппаконитина в заготовленных корневищах Aconitum septentrionale Koelle

Уровень техники

Антиаритмический препарат Аллапинин получают из травы борца белоустого (Aconitum leucostomum Worosch) или из корней и корневищ борца северного {Aconitum septentrionale Koelle (A. excelsum Reichenb)) семейства лютиковых - Ranunculaceae Juss. Содержание алкалоида лаппаконитина - действующего вещества антиаритмического препарата Аллапинин, в корневищах А. septentrionale бывает наиболее высоким во время интенсивного роста растений в начале вегетации в течение всего 15-20 дней [1].

Известны различные способы повышения содержания биологически активных веществ в лекарственных растениях путем их обработки до сбора сырья специальными химическими реагентами (фитогормоны и их синтетические аналоги, ретарданты и микроэлементы), а также данные об увеличении содержания биологически активных веществ в растениях под действием факторов абиотической (температурный, световой и водный режим, УФ-облучение) и биотической (атака фитофагами, фитоалексины) природы. Например, обработка мачка желтого (Glaucium flavum Crantz.) ретардантом хлорхолинхлоридом, или действием УФ-облучения или созданием водного дефицита вызывает двух- трехкратное увеличение содержания алкалоида глауцина в надземной части растений [2]. Однако эти способы применимы лишь к плантационным культурам и культурам ткани и неприменимы для заготавливаемых дикорастущих лекарственных растений.

Способов повышения содержания алкалоида лаппаконитина в уже заготовленном сырье в доступных нам источниках информации не обнаружено.

Раскрытие

Целью настоящего изобретения является разработка способа повышения содержания лаппаконитина в уже заготовленном сырье - корневищах дикорастущего растения A. septentrionale (борца северного).

Заявленная цель достигается путем активации ростовых процессов в корневищах растений A. septentrionale, собранных на стадии цветения (самой длительной стадии сезонного развития), обработкой биопрепаратом Бациспецин БМ.

Биопрепарат Бациспецин БМ был разработан как стимулятор роста растений на основе штамма почвенных бактерий Bacillus sp. 739. Препарат способствует увеличению урожая, положительно влияет на рост и развитие растений и содержит в своем составе, помимо жизнеспособных бактериальных спор, различные биологически активные вещества, включая цитокинины. Представляет собой порошок влажностью не более 15%, содержащий не менее 2×106 КОЕ/г жизнеспособных спор. Препарат хранится без потери качества в условиях склада не менее пяти лет [3].

Позднее штамм Bacillus sp.739 был идентифицирован как Paenibacillus ehimensis IB-739 [4] и депонирован во Всероссийской коллекции микроорганизмов (ВКМ B-2680D). Штамм также известен как продуцент полисахарида [5] и циклодекстринглюканотрансферазы [6].

Изобретение характеризуется следующими примерами.

Пример 1. Эксперимент проводили на свежесобранных корневищах генеративных (стадия цветения) растений A. septentrionale. Для каждого варианта опыта использовали по 30 корневищ. Для обработки использовали биопрепарат Бациспецин БМ в виде сухого порошка с титром 2,4×106 КОЕ/г, из которого готовили водную суспензию в разведениях от 2,0 г/л до 100,0 г/л. Корневища обмакивали в приготовленную суспензию, раскладывали на поддоны и накрывали полиэтиленовой пленкой, где поддерживалась относительная влажность 85-90%, или же помещали в теплицу, где поддерживалась относительная влажность 70-80%. Более высокая относительная влажность (95% и более) приводит к переувлажнению и загниванию корневищ. В контрольном варианте корни обмакивали в дистиллированную воду и также помещали на поддоны под пленку. Через трое суток инкубации при комнатной температуре корневища извлекали и подвергали анализу на содержание в них суммы алкалоидов и лаппаконитина В качестве второго контроля использовали вариант с измельчением корней после их заготовки.

Сумму алкалоидов из корневищ A. septentrionale извлекали методом исчерпывающей экстракции [7]. Для анализа на содержание суммы алкалоидов брали навеску измельченных образцов 50 г, взвешенную с точностью до третьего знака после запятой. В качестве экстрагента использовали 70%-ный водный ацетон. Экстракцию повторяли до полного извлечения алкалоидов. Полнота экстракции проверялась качественной реакцией на третичный азот в молекуле алкалоидов с кремневольфрамовой кислотой. Объединенные вытяжки фильтровали на воронке Бюхнера, затем ацетон отгоняли на роторном испарителе, остаток подкисляли 3%-ным раствором серной кислоты до pH=1-3, экстрагировали из них дихлорэтаном органические соединения неалкалоидного характера. Водный раствор, содержащий алкалоиды, подщелачивали до pH=9-12 карбонатом натрия или аммиаком. Далее алкалоиды исчерпывающе экстрагировали дихлорэтаном и высушивали с помощью безводного сульфата натрия. Органический растворитель отгоняли сначала на роторном испарителе, затем его остатки откачивали в глубоком вакууме и вспенивали. Доведенный до постоянной массы остаток взвешивали на аналитических весах. Различие по массе суммы алкалоидов в повторностях не превышало 5%.

Содержание лаппаконитина в корневищах A. septentrionale определяли методом ВЭЖХ на хроматографе Waters Breeze с двухволновым спектрофотометрическим детектором. Для анализа применялась колонка Excil Amino (250×4,6 мм, размер частиц 5 мк). В качестве подвижной фазы использовался 100% изопропиловый спирт, скорость потока 1 мл/мин. Детектирование проводилось при длине волны 254 нм. Во всех случаях рассчитывали средние значения из трех биологических и трех аналитических повторностей. Различие между повторностями было менее 5%. Результаты анализов представлены в таблице 1.

Пример 2. Эксперимент проводили на свежесобранных корневищах генеративных (стадия цветения) растений A. septentrionale. Для каждого варианта опыта использовали по 30 корневищ. Для обработки использовали биопрепарат Бациспецин БМ в виде сухого порошка с титром 2,4×106 КОЕ/г, из которого готовили водную суспензию в разведении 2,0 г/л. Корневища обмакивали в приготовленную суспензию, раскладывали на поддоны и накрывали полиэтиленовой пленкой где поддерживалась относительная влажность 85-90%. После инкубации при комнатной температуре корневища извлекали и подвергали анализу на содержание в них суммы алкалоидов и лаппаконитина по выше описанной методике. Инкубацию проводили в течении 1, 12, 24 часов и трех суток (72 часов). В качестве контроля использовали вариант с измельчением корней после их заготовки.

Результаты анализов представлены в таблице 2.

Таким образом, приведенные примеры свидетельствуют, что обработка собранных корневищ борца северного A. septentrionale биопрепартом Бациспецин БМ (до определенной дозы), вызывает увеличение содержания в них целевого продукта - лаппаконитина. Оптимальные условия обработки - обмакивание корневищ в раствор бациспецина в концентрации, от 2 до 25 г/л и размещения их в камеры с относительной влажностью не менее 85% при комнатной температуре и инкубации при этих условиях от 1 до 3 суток.

Источники информации

1. Федоров Н.И., Мартьянов Н.А., Никитина B.C., Ишбирдина Л.М. Содержание алкалоида лаппаконитина в подземной и надземной частях Aconitum septentrionale Koelle в растительных сообществах Башкирии // Растительные ресурсы. 1996. Т. 32. Вып. 3. С. 96-101.

2. Шаин С.С. Биорегуляция продуктивности растений. М., 2005. 218 с.

3. http://www.expo.ras.ru/base/prod_data.asp?prod_id=3284

4. http://www.ncbi.nlm.nih.gov/nuccore/FN582329.1

5. Патент РФ №2460780, кл. C12N 1/20,2012.

6. Федорова П.Ю., Гильванова Е.А., Актуганов Г.Э., Усанов Н.Г. Новая циклодекстринглюканотрансфераза бактерий Paenibacillus ehimensis ВКМ B-2680D // Биотехнология. - 2012. - №4. - С. 31-38.

7. Степаненко Б.Н. Органическая химия. М.: Медгиз, 1957. 415 с.

Способ повышения содержания алкалоида лаппаконитина в заготовленных корневищах Aconitum septentrionale Koelle, включающий обработку заготовленных корневищ водной суспензией биопрепарата Бациспецин БМ в концентрации от 2 г/л до 25 г/л путем однократного их обмакивания, размещения в камеры с влажностью не менее 85% при комнатной температуре и инкубации при этих условиях от 1 до 3 суток.



 

Похожие патенты:

Группа изобретений относится к вариантам композиции, способной увеличивать образование масляной кислоты в толстом кишечнике. Предложена неферментированная композиция, включающая по меньшей мере один злак и по меньшей мере один изолированный пробиотический штамм Lactobacillus rhamnosus.
Группа изобретений относится к биотехнологии. Предложены композиция для использования в качестве физиологически активного соединения, содержащая высушенные дрожжи Saccharomyces, включающие S-аденозил-L-метионин, и загуститель, и способ ее получения.

Изобретение относится к сиропу пижмы обыкновенной, обладающему калийсберегающим эффектом. Указанный сироп включает 10,0 мас.% настойки из цветков пижмы обыкновенной, 55,8 мас.% сорбита или фруктозы и 34,2 мас.% воды очищенной.

Изобретение относится к композиции для ухода за полостью рта. Предлагаемая композиция содержит: a) источник ионов олова(II) и источник ионов цинка; b) фитиновую кислоту, или соль фитиновой кислоты, или их смеси, причем упомянутая фитиновая кислота или соль фитиновой кислоты имеет среднее количество фосфатных групп на инозите (IPn) более чем 5,2 и уровень растворимого иона олова(II) в супернатанте при разбавлении композиции 1:3 водой находится в диапазоне от 200 до 6000 м.д.
Изобретение относится к фармацевтической промышленности и представляет собой пленкообразующую композицию для лечения герпеса, в частности губного герпеса, содержащую в фармацевтически пригодной среде от 5 до 30 масс.
Группа изобретений относится к области композиций для ухода за полостью рта и способам их применения. Предлагаемая композиция для ухода за полостью рта для уменьшения гиперчувствительности зубов содержит: от 0,1 до 20% масс.

Изобретение относится к фармацевтической промышленности, а именно к средству для ухода за кожей ног и профилактики трещин ног, включающему жировую основу и биологически активные вещества, в качестве биологически активных веществ содержит комплекс продуктов глубокой переработки биомассы леса: живицу сосновую, хвойную хлорофилло-каротиновую пасту, воск хвойный, в качестве жировой основы содержит вазелин, масло оливковое рафинированное и глицерин, при определенном соотношении компонентов.
Изобретение относится к фармацевтической промышленности и представляет собой жидкую композицию, предназначенную для нанесения на кожу с целью обеспечения защиты от незначительных ожогов, поверхностных ран и шрамов, содержащую нитроцеллюлозу в качестве производного целлюлозы, касторовое масло в качестве растительного масла и смесь этанола и этилацетата в качестве летучего растворителя для указанного производного целлюлозы, характеризующуюся тем, что содержание производного целлюлозы составляет 6-13 мас.% в пересчете на сухой остаток от общей массы композиции, содержание растительного масла составляет 5-15 мас.% от общей массы композиции, а массовое отношение масло/целлюлоза в пересчете на сухой остаток составляет 0,8-1,5.

Изобретение относится к композиции для ухода за полостью рта, содержащей: a) компонент увлажнителя в количестве от 40% до 77%, по массе композиции, при этом компонент увлажнителя содержит: i) от 0,25% до 7%, по массе композиции, структурирующего увлажнителя, выбранного из полиэтиленгликолей, имеющих среднюю молекулярную массу от 3000 до 8000, и их смесей; и ii) по меньшей мере один вторичный увлажнитель, при этом вторичный увлажнитель выбран из глицерина, глицеролов, сорбита, полипропиленгликоля, низкомолекулярных полиэтиленгликолей, пищевых многоатомных спиртов и их смесей; b) осажденный кремнезем в качестве абразива в количестве от 5% до 35%, по массе композиции; c) от 0% до 1,5%, по массе композиции, модификатора вязкости, выбранного из камедей, связывающих агентов, целлюлозных загустителей и их смесей; d) общее содержание твердых веществ 50% или менее, по массе композиции; e) воду в количестве от 5% до 12%, по массе композиции; при этом композиция характеризуется значением активности воды от 0,25 до 0,46 согласно измерениям при 22°С, и причем структурирующий увлажнитель добавляют к композиции в растворе с растворителем или добавляют контролируемым образом в виде расплавленного материала к композиции при температуре менее чем 35°С и при турбулентном перемешивании или интенсивном встряхивании.

Изобретение относится к фармацевтической промышленности, а именно к применению жидкого спиртового экстракта плодов рябины обыкновенной в качестве средства, обладающего противоопухолевой, противометастатической активностью и одновременно повышающего противометастатическую активность циклофосфана.

Изобретение относится к биотехнологии, может быть использовано при производстве биологически активных добавок пищевого, кормового и медицинского назначения. Осуществляют двухстадийную обработку мицелиальной биомассы гриба Aspergillus oryzae 12-84 (RCAM 01134) при естественном значении pH под действием внутриклеточных ферментов. Получают целевой продукт в виде ферментолизата. На 1-й стадии поддерживают температуру 48-50°C в течение 1 ч 45 мин - 2 ч 15 мин, на 2-й стадии температуру снижают до 38-40°C в течение 2 ч 45 мин - 3 ч 15 мин и в качестве источника экзо-β-глюканазы дополнительно используют целловиридин. Затем температуру снижают до 30-32°C и выдерживают продукт при этой температуре в течение 5-6 ч. Изобретение позволяет повысить качество получаемой биологически активной добавки, обеспечить повышение глубины гидролиза полимеров клетки и получить биологически активную добавку с широким спектром функциональных свойств. 2 з.п. ф-лы, 4 табл., 2 пр.
Изобретение относится к медицине, а именно к акушерству и гинекологии. Вводят мифепристон 200 мкг. При этом через 24 часа после введения мифепристона пациентке осуществляют введение интрацервикально ламинарий. Через 24 часа после введения ламинарий оценивают зрелость шейки матки по Бишопу и осуществляют амниотомию. Далее, руководствуясь результатами оценки зрелости шейки матки, пациентке вводят мизопростол 200 мкг или 400 мкг сублингвально под контролем врача. При этом мизопростол в дозе 200 мкг назначают в случае оценки зрелости шейки матки по Бишопу 7 баллов и выше, а в дозе 400 мкг мизопростол назначают в случае оценки зрелости шейки матки от 4 до 6 баллов. Способ позволяет сократить время проведения индуцированного выкидыша, минимизировать риск возникновения осложнений, сократить период реабилитации женщин в сравнении с общепринятыми схемами. 1 пр.
Изобретение относится к фармацевтической промышленности и представляет собой композицию для местного применения для снижения или снятия болевого синдрома, содержащую биологически активное вещество и вспомогательные вещества, характеризующуюся тем, что в качестве биологически активного вещества используют нитроксисукцинат 2-этил-6-метил-3-оксипиридин в концентрации 1-3 мас.%, а в качестве вспомогательных веществ бета-циклодекстрин и природное масло, выбранное из группы: оливковое масло, кедровое масло, подсолнечное масло, рапсовое масло. Изобретение обеспечивает снижение или полное снятие болевого синдрома. 7 пр.

Изобретение относится к фармацевтической промышленности, а именно к средству для профилактики и лечения мочекаменной болезни. Средство для профилактики и лечения мочекаменной болезни, состоящее из двух сборов лекарственных трав и растительного сырья, которые применяются двумя последовательными этапами: на первом этапе применяют первый сбор, включающий траву зверобоя, почки березовые, соцветия бессмертника, цветки ромашки, семена расторопши, корни бедренеца, траву горца птичьего, корни лапчатки прямостоячей, в виде экстракта по 1 столовой ложке 2 раза в день до еды в течение 7-12 дней, в качестве экстрагента используется кипяток; а на втором этапе применяют второй сбор, включающий корни лапчатки прямостоячей, корни бедренеца, корни любистока, траву полевого хвоща, корни марены красильной, листья крапивы, в виде экстракта по 1 столовой ложке 3 раза в день до еды в течение 10-15 дней, в качестве экстрагента используется кипяток. Применение вышеописанного средства обеспечивает усиление клинического действия сбора лекарственных трав и получение терапевтического эффекта, выражающегося в растворении и выведении конкрементов из почек, при отсутствии побочных реакций и токсического воздействия. 1 табл., 3 пр.
Группа изобретений относится к медицине. Описана фармацевтическая композиция лекарственного средства седативного и спазмолитического действия в форме мягких желатиновых капсул, содержащая этиловый эфир альфа-бромизовалериановой кислоты и раствор ментола в ментиловом эфире изовалериановой кислоты при следующем соотношении компонентов, масс.%: этиловый эфир альфа-бромизовалериановой кислоты 2,0-6,0; раствор ментола в ментиловом эфире изовалериановой кислоты 31,0-81,2; дополнительные компоненты - остальное. Дополнительным компонентом является вещество, выбранное из ряда: жирный компонент, глицин, таурин, жирный компонент с глицином, жирный компонент с таурином, жирный компонент с глицином и таурином, а жирным компонентом является мятное масло, оливковое масло, масло хмеля, кукурузное масло или любая комбинация указанных веществ. Технический результат: обеспечение комплексного фармакологического действия седативного, спазмолитического, успокоительного, сосудорасширяющего и противоболевого характера, повышение кардиологического действия препарата, достижение высокой точности дозировки действующих веществ и быстрого их высвобождения при применении. 2 н.п. ф-лы, 11 пр.

Изобретение относится к фармацевтической промышленности, а именно к противовирусному средству на основе экстракта ксилотрофного базидиомицета Bjerkandera adusta (Willd.) P. Karst, представляющему собой сухой экстракт гриба, приготовленный методом высушивания водного извлечения биологически активных веществ из измельченного и гомогенизированного сырья, при определенном содержании компонентов в сухом экстракте. Вышеописанное средство обладает противовирусной активностью в отношении РНК-геномного вируса гриппа А субтипов H1N1, H3N2 и H5N1. 6 табл., 4 пр.
Изобретение относится к фармацевтической промышленности, а именно к композиции для повышения адаптации организма человека в Арктической зоне. Композиция для повышения адаптации организма человека в Арктической зоне в виде мармелада, содержащая настойку родиолы розовой, порошок медуницы, пектин, смесь из сушеного меда с пергой, в определенном количестве. Вышеописанная композиция эффективно оптимизирует и коррелирует обменные процессы в организме человека, повышает работоспособность и резистентность во время адаптационного напряжения. 1 пр.
Изобретение относится к фармацевтической промышленности, в частности к средству для повышения адаптационного потенциала человека в экстремальных условиях. Средство для повышения адаптационного потенциала человека в экстремальных условиях, содержащее семена плодов лимонника, сныть, пектин, смесь сушеного меда с пыльцой, взятые в определенном количестве. Вышеописанное средство эффективно для повышения адаптационного потенциала человека в экстремальных условиях.

Группа изобретений относится к области противобактериальных средств, эффективных против обычных бактерий ротовой полости, и способов их использования. Предлагается композиция, содержащая противобактериально эффективное количество соединения формулы , где указанное соединение представлено в концентрации приблизительно от 0,001% до приблизительно 10% по массе; и орально приемлемый носитель. При этом форма композиции для ухода за полостью рта выбрана из группы, состоящей из зубной пасты, геля, мусса, порошка, кондитерского изделия, полоски, спрея для ротовой полости и зубного эликсира. Предлагаются также способы, включающие контактирование поверхности ротовой полости субъекта с указанной композицией, а именно способ ингибирования бактериального роста в ротовой полости, способ ингибирования образования зубного налета и зубного камня на зубной поверхности, способ лечения или профилактики состояния ротовой полости, такого как воспаление десен, заболевание периодонта, неприятный запах изо рта или комбинации двух или нескольких из перечисленного. Использование вышеуказанного соединения обеспечивает дополнительно противовоспалительный эффект. 4 н. и 9 з.п. ф-лы, 11 табл., 8 пр.

Изобретение относится к фармацевтической промышленности, а именно к применению суммы флавоноидов из корней или надземной части Alchemilla vulgaris L. в качестве противовирусного средства в отношении РНК-содержащего вируса гриппа А и ДНК-содержащих ортопоксвирусов и вируса простого герпеса 2-го типа. Применение суммы флавоноидов из корней или надземной части Alchemilla vulgaris L. (манжетки обыкновенной), полученных путем экстракции корней этилацетатом, объединения этилацетатного экстракта, концентрирования его упариванием и осаждения концентрата в хлороформе или экстракции надземной части манжетки обыкновенной, собранной в начале цветения, этиловым спиртом с последующим объединением и упариванием экстракта, разведения его дистиллированной водой, очистки водного экстракта хлороформом, экстракции очищенного водного остатка этилацетатом, упаривания полученного экстракта и осаждения продукта хлороформом при определенных условиях, в качестве противовирусного средства в отношении РНК-содержащего вируса гриппа А и ДНК-содержащих ортопоксвирусов и вируса простого герпеса 2-го типа. Вышеописанная сумма флавоноидов эффективна в качестве противовирусного средства в отношении РНК-содержащего вируса гриппа А и ДНК-содержащих ортопоксвирусов и вируса простого герпеса 2-го типа. 7 табл., 7 пр.
Наверх