Способ определения риска развития артериальной гипертензии



Способ определения риска развития артериальной гипертензии
Способ определения риска развития артериальной гипертензии

 


Владельцы патента RU 2600442:

Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Научно-исследовательский институт медицины труда" (ФГБНУ "НИИ МТ") (RU)

Изобретение относится к области медицины и предназначено для определения риска развития артериальной гипертензии. Осуществляют забор венозной крови, выделение генетического материала, проведение полимеразной цепной реакции (ПЦР) в режиме реального времени и определение инсерции/делеции (I- и D-аллели) Alu-фрагмента гена ангиотензинпревращающего фермента. Риск развития артериальной гипертензии у работающих в условиях превышения уровня шума выше предельно допустимого при генотипе I/I гена ангиотензинпревращающего фермента оценивают ниже 50%, при генотипе I/D - 50-70%, а при генотипе D/D - выше 70%. Изобретение обеспечивает повышение скорости определения риска развития артериальной гипертензии у лиц, подвергающихся воздействию шума, и упрощение способа при одновременном повышении степени его достоверности. 3 ил., 3 пр.

 

Изобретение относится к медицине и может быть использовано для определения риска развития артериальной гипертензии.

Известен способ определения риска развития артериальной гипертензии, включающий забор венозной крови, выделение генетического материала, проведение полимеразной цепной реакции (ПЦР) со специфическими праймерами, анализ продуктов амплификации с помощью электрофореза на агарозном геле и на основании этого определение инсерции/делеции Alu-фрагмента гена ангиотензинпревращающего фермента (см. Гончарова Л.Н., Снеговский В.А., Кузовенкова О.Н. «Инсерционно-делеционный полиморфизм гена ангиотензинпревращающего фермента у лиц с эссенциальной артериальной гипертензией» // Казанский медицинский журнал. - 2009. - №4 (том 90). - С. 564-566).

Однако данный способ из-за использования метода ПЦР с электрофоретической детекцией продуктов амплификации имеет низкую пропускную способность ввиду сложности, трудоемкости и длительности (после проведения амплификации данный способ имеет дополнительный этап электрофореза). Также данный метод требует использования реагентов, являющихся вредными для медицинского персонала, проводящего их, и требует более высоких затрат при массовых исследованиях. Кроме того, известный способ имеет низкую надежность из-за высокого риска контаминации амплификационной смеси и продуктов амплификации. Все перечисленное затрудняет определение риска развития артериальной гипертензии у лиц, подвергающихся воздействию шума, например, при проведении диспансеризации или периодических медицинских осмотров большого количества работающих в условиях превышения уровня шума выше предельно допустимого за короткие (сжатые) сроки времени.

Задачей настоящего изобретения является упрощение способа определения риска развития артериальной гипертензии у лиц, подвергающихся воздействию шума, и повышение степени его достоверности при проведении предварительных или периодических медицинских осмотров большого количества работающих в условиях превышения уровня шума выше предельно допустимого за короткие (сжатые) сроки времени.

В настоящем изобретении используется метод ПЦР в режиме реального времени, который имеет ряд преимуществ перед методом ПЦР с электрофоретической детекцией продуктов амплификации, а именно: упрощение и повышение скорости получения результатов в связи с исключением дополнительного этапа электрофореза, повышение степени достоверности результатов в связи с автоматизацией процесса, исключение риска контаминации амплификационной смеси и продуктов амплификации, данный метод не требует использования реагентов, являющихся вредными для медицинского персонала, проводящего их.

Техническим результатом изобретения является упрощение способа и повышение скорости определения риска развития артериальной гипертензии у лиц, подвергающихся воздействию шума, при одновременном повышении степени его достоверности.

Указанная задача достигается тем, что в известном способе определения риска развития артериальной гипертензии, включающем забор венозной крови, выделение генетического материала, проведение полимеразной цепной реакции (ПЦР) со специфическими праймерами, анализ продуктов амплификации методом флюоресцентной детекции в режиме реального времени, и на основании этого определение инсерции/делеции Alu-фрагмента гена ангиотензинпревращающего фермента, при приготовлении амплификационной смеси используют специфические прямой и обратный праймеры по сторонам инсерции/делеции и два зонда типа TaqMan на I- и D-аллели, при этом прямой праймер - gga gac сас tec cat cct ttc, 14045-14067 по AF118569, 13351-13372 по EU 332840, обратный праймер - atg tgg cca tca cat tcg tca gat, 14499-14522 по AF 118569, 13515-13537 по EU 332840, зонд на I-аллель - (5′TAM) cca cag gcg ccc gec act ac (3′BHQ1), 14235-14252 по AF 118569 с флуорофором FAM, при этом зонд на I-аллель расположен внутри вставки (14094-14381 по AF 118569), зонд на D-аллель - (5′HEX) get gec tat аса gtc act ttt atg tgg t (3′BHQ1), 13391-13417 по EU 332840 с флуорофором HEX, после приготовления амплификационной смеси проводят полимеразную цепную реакцию в режиме реального времени с флуоресцентной детекцией накопления продуктов амплификации и по интенсивности полученных в результате ПЦР флуоресцентных сигналов определяют генотип гена ангиотензинпревращающего фермента: гомозигота по I-аллели (генотип I/I), гетерозигота (генотип I/D) или гомозигота по D-аллели (генотип D/D), при этом риск развития артериальной гипертензии у работающих в условиях превышения уровня шума выше предельно допустимого при генотипе I/I гена ангиотензинпревращающего фермента составляет ниже 50%, при генотипе I/D - 50-70%, а при генотипе D/D - выше 70%.

Проведенные исследования по патентным и научно-техническим информационным источникам показали, что предлагаемый способ неизвестен и не следует явным образом из изученного уровня техники, т.е. соответствует критериям "новизна" и "изобретательский уровень".

Предлагаемый способ может быть использован при проведении предварительных и периодических медицинских осмотров у промышленных рабочих в медсанчастях и диагностических лабораториях, укомплектованных типовым оборудованием, выпускаемым отечественной или зарубежной промышленностью. Следовательно, заявленный способ является доступным и практически применимым.

Артериальная гипертензия - мультифакториальное заболевание, где выявляется сложный механизм формирования фенотипа, который сопровождается взаимодействием генетических факторов с факторами окружающей среды. Хроническое воздействие шума может способствовать развитию артериальной гипертензии путем активации гипоталамо-гипофизарно-надпочечниковой и симпатической нервной систем. Другой системой регуляции артериального давления является ренин-ангиотензин-альдостероновая система, ключевым ферментом которой является ангиотензинпревращающий фермент, уровень и активность которого связаны с полиморфизмом инсерция/делеция Alu-фрагмента гена ангиотензинпревращающего фермента. В связи с чем хроническое воздействие шума совместно с наличием делеции Alu-фрагмента гена ангиотензинпревращающего фермента может значительно повышать риск развития артериальной гипертензии из-за одновременной активации различных систем, участвующих в механизмах развития артериальной гипертензии.

Предлагаемый способ пояснен на чертеже.

На фиг. 1 представлен пример графика накопления ДНК, полученного при использовании амплификатора «CFX 96» (фирма Bio Rad) в реакции ПЦР согласно предлагаемому способу, соответствующего гомозиготе по 1-аллели (генотип 1Л) гена ангиотензинпревращающего фермента.

На фиг. 2 представлен пример графика накопления ДНК, полученного при использовании амплификатора «CFX 96» (фирма Bio Rad) в реакции ПЦР согласно предлагаемому способу, соответствующего гетерозиготе (генотип I/D) гена ангиотензинпревращающего фермента.

На фиг. 3 представлен пример графика накопления ДНК, полученного при использовании амплификатора «CFX 96» (фирма Bio Rad) в реакции ПЦР согласно предлагаемому способу, соответствующего гомозиготе по D-аллели (генотип D/D) гена ангиотензинпревращающего фермента.

Предлагаемый способ осуществляют следующим образом.

У пациентов осуществляют забор венозной крови. Кровь исследуют заявленным образом: из 100 мкл цельной крови выделяют ДНК сорбент однопробирочным методом с использованием комплекта для выделения "ДНК-сорб-В" (ТУ9398-071-01897593-2008) в соответствии с инструкцией к используемому комплекту.

Из полученного препарата ДНК (объемом 50 мкл) готовят серии разведений в TE-буфере до конечной концентрации (1÷3) нг/мкл. Данный раствор ДНК используют для постановки реакции амплификации со специфическими праймерами.

Затем готовят амплификационную смесь для выявления инсерции/делеции Alu-фрагмента гена ангиотензинпревращающего фермента. Объем амплификационной смеси - 20 мкл, при этом используют стандартный буфер для полимеразной цепной реакции, содержащий 1 единицу активности Taq-полимеразы. Для амплификации исследуемого генетического локуса используют специфические олигонуклеотидные праймеры с зондами типа TaqMan на I- и D-аллели гена ангиотензинпревращающего фермента.

Реакцию амплификации проводят по следующей программе:

Согласно предлагаемому способу пробирки с амплификационной смесью выдерживают при +95°C - 5 мин, затем 40 циклов: при 95°C - 20 с, при 64°C - 30 с. Детекцию продуктов амплификации производят по каналам FAM и HEX. При этом используют, например, амплификатор «CFX 96» (фирма Bio Rad). Детекцию продуктов амплификации осуществляют на каждом цикле амплификации. На основании этих данных амплификатор строит кривые накопления флуоресцентного сигнала по заданному для образцов сигналу.

Результаты проведенной ПЦР согласно предлагаемому способу представлены на фиг. 1÷3.

При этом при генотипе I/I гена ангиотензинпревращающего фермента у работающих в условиях превышения уровня шума выше предельно допустимого риск развития артериальной гипертензии составляет менее 50%, при генотипе I/D гена ангиотензинпревращающего фермента у работающих в условиях превышения уровня шума выше предельно допустимого риск развития артериальной гипертензии составляет 50-70%, при генотипе D/D гена ангиотензинпревращающего фермента у работающих в условиях превышения уровня шума выше предельно допустимого риск развития артериальной гипертензии составляет выше 70%.

Пример 1.

Пациент П., 56 лет. Профессия - командир воздушного судна, летный стаж - 35 лет, общее летное время - 15 108 часов 28 минут. Работал в условиях воздействия интенсивного шума, помесячные эквивалентные уровни шума превышали ПДУ от 1,75 до 31,02 дБА (см. СН 2.2.4/2.1.8.562-96 «Шум на рабочих местах, в помещениях, жилых, общественных зданий и на территории жилой застройки»). Ежегодно проводились периодические медицинские осмотры, у работника П. не выявлено развития артериальной гипертензии.

Кровь больного исследовалась заявленным способом: из 100 мкл цельной крови выделяют ДНК сорбент однопробирочным методом с использованием комплекта для выделения "ДНК-сорб-В" (ТУ9398-071-01897593-2008), в соответствии с инструкцией к используемому комплекту.

Из полученного препарата ДНК (объемом 50 мкл) готовили серии разведений в TE-буфере до конечной концентрации (1÷3) нг/мкл. Данный раствор ДНК использовали для постановки реакции амплификации со специфическими праймерами.

Затем готовили амплификационную смесь для выявления инсерции/делеции Alu-фрагмента гена ангиотензинпревращающего фермента. Объем амплификационной смеси - 20 мкл, при этом использовали стандартный буфер для полимеразной цепной реакции, содержащий 1 единицу активности Taq-полимеразы. Для амплификации исследуемого генетического локуса использовали специфические олигонуклеотидные праймеры с зондами типа TaqMan на I- и D-аллели гена ангиотензинпревращающего фермента.

Реакцию амплификации проводили по следующей программе:

Согласно предлагаемому способу пробирки с амплификационной смесью выдерживали при +95°C - 5 мин, затем 40 циклов: при 95°C - 20 с, при 64°C - 30 с. Использовали амплификатор «CFX 96» (фирма Bio Rad), детекцию продуктов амплификации производили по каналам FAM и HEX. Детекцию продуктов амплификации осуществляли на каждом цикле амплификации. На основании этих данных амплификатор строил кривые накопления флуоресцентного сигнала по заданному для образцов сигналу. График накопления ДНК с праймерами для определения инсерции/делеции Alu-фрагмента гена ангиотензинпревращающего фермента представлен на фиг. 1.

Вывод:

У пациента П. выявлен гомозиготный I/I генотип гена ангиотензинпревращающего фермента, свидетельствующий о наличии менее 50% риска развития артериальной гипертензии в условиях воздействия уровня шума выше предельно допустимого. Это подтверждено тем, что у данного работника после 35 лет работы в условиях воздействия уровня шума выше предельно допустимого не была диагностирована артериальная гипертензия.

Пример 2.

Пациент Ш., 41 год. Профессия - формовщика ручной (и машинной) формовки участка литейного производства, стаж - 17 лет. Работал в условиях воздействия интенсивного шума в течение 8-и часового рабочего дня, превышающего ПДУ от 10,15 до 22,3 дБА (см. СН 2.2.4/2.1.8.562-96 «Шум на рабочих местах, в помещениях, жилых, общественных зданий и на территории жилой застройки»). Ежегодно проводились периодические медицинские осмотры, артериальная гипертензия 2 степени была диагностирована после 17 лет работы. Постоянно принимает антигипертензивные препараты.

Кровь больного исследовалась заявленным способом: из 100 мкл цельной крови выделяют ДНК сорбент однопробирочным методом с использованием комплекта для выделения "ДНК-сорб-В" (ТУ9398-071-01897593-2008), в соответствии с инструкцией к используемому комплекту.

Из полученного препарата ДНК (объемом 50 мкл) готовили серии разведений в TE-буфере до конечной концентрации (1÷3) нг/мкл. Данный раствор ДНК использовали для постановки реакции амплификации со специфическими праймерами.

Затем готовили амплификационную смесь для выявления инсерции/делеции Alu-фрагмента гена ангиотензинпревращающего фермента. Объем амплификационной смеси - 20 мкл, при этом использовали стандартный буфер для полимеразной цепной реакции, содержащий 1 единицу активности Taq-полимеразы. Для амплификации исследуемого генетического локуса использовали специфические олигонуклеотидные праймеры с зондами типа TaqMan на I- и D-аллели гена ангиотензинпревращающего фермента.

Реакцию амплификации проводили по следующей программе:

Согласно предлагаемому способу пробирки с амплификационной смесью выдерживали при +95°C - 5 мин, затем 40 циклов: при 95°C - 20 с, при 64°C - 30 с. Использовали амплификатор «CFX 96» (фирма Bio Rad), детекцию продуктов амплификации производили по каналам FAM и HEX. Детекцию продуктов амплификации осуществляли на каждом цикле амплификации. На основании этих данных амплификатор строил кривые накопления флуоресцентного сигнала по заданному для образцов сигналу. График накопления ДНК с праймерами для определения инсерции/делеции Alu-фрагмента гена ангиотензинпревращающего фермента представлен на фиг. 2.

Вывод:

У пациента Ш. выявлен гетерозиготный I/D генотип гена ангиотензинпревращающего фермента, свидетельствующий о наличии 50-70% риска развития артериальной гипертензии в условиях воздействия уровня шума выше предельно допустимого. Это подтверждено тем, что у данного работника после 17 лет работы в условиях воздействия уровня шума выше предельно допустимого была диагностирована артериальная гипертензия 2 степени.

Пример 3.

Пациент И., 38 лет. Профессия - второй пилот воздушного судна, летный стаж - 7 лет, общее летное время - 7765 часов 40 минут. Работал в условиях воздействия интенсивного шума, превышающего ПДУ в течение всего периода летной работы от 1,15 до 16,49 дБА (см. СН 2.2.4/2.1.8.562-96 «Шум на рабочих местах, в помещениях, жилых, общественных зданий и на территории жилой застройки»). Ежегодно проводились периодические медицинские осмотры, артериальная гипертензия 2 степени диагностирована после 7 лет работы. Постоянно принимает антигипертензивные препараты, но уровень АД плохо контролируется.

Кровь больного исследовалась заявленным способом: из 100 мкл цельной крови выделяют ДНК сорбент однопробирочным методом с использованием комплекта для выделения "ДНК-сорб-В" (ТУ9398-071-01897593-2008), в соответствии с инструкцией к используемому комплекту.

Из полученного препарата ДНК (объемом 50 мкл) готовили серии разведений в TE-буфере до конечной концентрации (1÷3) нг/мкл. Данный раствор ДНК использовали для постановки реакции амплификации со специфическими праймерами.

Затем готовили амплификационную смесь для выявления инсерции/делеции Alu-фрагмента гена ангиотензинпревращающего фермента. Объем амплификационной смеси - 20 мкл, при этом использовали стандартный буфер для полимеразной цепной реакции, содержащий 1 единицу активности Taq-полимеразы. Для амплификации исследуемого генетического локуса использовали специфические олигонуклеотидные праймеры с зондами типа TaqMan на I- и D-аллели гена ангиотензинпревращающего фермента.

Реакцию амплификации проводили по следующей программе: Согласно предлагаемому способу пробирки с амплификационной смесью выдерживали при +95°C - 5 мин, затем 40 циклов: при 95°C - 20 с, при 64°C - 30 с. Использовали амплификатор «CFX 96» (фирма Bio Rad), детекцию продуктов амплификации производили по каналам FAM и HEX. Детекцию продуктов амплификации осуществляли на каждом цикле амплификации. На основании этих данных амплификатор строил кривые накопления флуоресцентного сигнала по заданному для образцов сигналу. График накопления ДНК с праймерами для определения инсерции/делеции Alu-фрагмента гена ангиотензинпревращающего фермента представлен на фиг. 3.

Вывод:

У пациента И. выявлен гомозиготный D/D генотип гена ангиотензинпревращающего фермента, свидетельствующий о наличии более 70% риска развития артериальной гипертензии в условиях воздействия уровня шума выше предельно допустимого. Это подтверждено тем, что у данного работника после 7 лет работы в условиях воздействия уровня шума выше предельно допустимого была диагностирована артериальная гипертензия 2 степени.

Таким образом, предложенный способ обеспечивает повышение скорости и воспроизводимости определения риска развития артериальной гипертензии при проведении предварительных или периодических медицинских осмотров большого количества работающих в условиях превышения уровня шума выше предельно допустимого. Он также позволяет упростить процесс определения риска развития артериальной гипертензии у лиц, подвергающихся воздействию шума, повысить степень его достоверности.

Использование предлагаемого способа позволит разрабатывать профилактические мероприятия по предупреждению развития артериальной гипертензии с учетом индивидуальных особенностей организма, своевременно оценивать значение различных факторов внешней среды на здоровье отдельного человека. Он может найти широкое применение в медицине труда, терапии, кардиологии и экологии человека.

Способ определения риска развития артериальной гипертензии, включающий забор венозной крови, выделение генетического материала, проведение полимеразной цепной реакции (ПЦР) со специфическими праймерами, анализ продуктов амплификации методом флюоресцентной детекции в режиме реального времени, и на основании этого определение инсерции/делеции Alu-фрагмента гена ангиотензинпревращающего фермента, отличающийся тем, что при приготовлении амплификационной смеси используют специфические прямой и обратный праймеры по сторонам инсерции/делеции и два зонда типа TaqMan на I- и D-аллели, при этом прямой праймер - gga gac сас tcc cat cct ttc, 14045-14067 по AF118569, 13351-13372 по EU332840, обратный праймер - atg tgg cca tca cat tcg tca gat, 14499-14522 по AF118569, 13515-13537 по EU332840, зонд на I-аллель - (5′FAM) cca cag gcg ccc gcc act ac (3′BHQ1), 14235-14252 по AF118569 с флуорофором FAM, при этом зонд на I-аллель расположен внутри вставки (14094-14381 по AF118569), зонд на D-аллель - (5′HEX) gct gcc tat аса gtc act ttt atg tgg t (3′BHQ1), 13391-13417 по EU332840 с флуорофором HEX, после приготовления амплификационной смеси проводят полимеразную цепную реакцию в режиме реального времени с флуоресцентной детекцией накопления продуктов амплификации и по интенсивности полученных в результате ПЦР флуоресцентных сигналов определяют генотип гена ангиотензинпревращающего фермента: гомозигота по I-аллели (генотип I/I), гетерозигота (генотип I/D) или гомозигота по D-аллели (генотип D/D), при этом риск развития артериальной гипертензии у работающих в условиях превышения уровня шума выше предельно допустимого при генотипе I/I гена ангиотензинпревращающего фермента составляет ниже 50%, при генотипе I/D - 50-70%, а при генотипе D/D - выше 70%.



 

Похожие патенты:

Изобретение относится к области медицины, а именно к способу диагностики острого лимфобластного лейкоза у пациента, включающий выявление признаков лейкоза, тестирование клеток крови на лейкоз, инкубирование клеток крови фактором, идуцирующим лейкоз, с тем, чтобы индуцировать экспрессию клеточных поверхностных маркеров, которые являются признаком лейкоза, где фактор, индуцирующий лейкоз - это супернатант Aspergillus flavus, EBV-инфицированный CCL87 супернатант, очищенная EBV культура или их комбинации.

Изобретение относится к биологи и медицине, а именно к иммуноанализу, в частности к электрохимическим способам определения содержания вирусов/антигенов вирусов кори.

Изобретение относится к медицине и описывает способ идентификации модуляторов активности фермента катехол-O-метилтрансферазы (СОМТ), включающий а) получение 4-нитрокатехола, ковалентно связанного с Alexa Fluor® 488, б) приведение в контакт молекулы из этапа а) с ферментом катехол-O-метилтрансферазой (COMT), S-аденозилметионином (SAM) и соединением-кандидатом и в) измерение показателей флуоресценции смеси из этапа б), в котором измененные показатели флуоресценции в присутствии соединения-кандидата по сравнению с контролем являются признаком наличия модулятора фермента катехол-O-метилтрансферазы (COMT).

Изобретение относится к области молекулярной биологии и медицины и предназначено для обнаружения модифицированных нуклеотидов в составе РНК. Осуществляют подбор подходящей для исследуемой области РНК пары олигонуклеотидных зондов, подбор пары донора и тушителя флуоресценции с подходящими оптическими свойствами.

Изобретение относится к способам определения эффективности лиганда ионного канала. Ex vivo способ определения эффективности лиганда ионного канала in vivo в зависимости от присутствия плазмы, включает стадии: a) приведение клетки, экспрессирующей ионный канал, в контакт с i) плазмой животного и ii) лигандом ионного канала и b) определение эффекта лиганда ионного канала на клетку, или a) приведение клетки, экспрессирующей ионный канал, в контакт с i) плазмой животного и ii) соединением, которое определяют как лиганд ионного канала, и b) определение эффекта соединения на клетку, или a) приведение клетки, экспрессирующей ионный канал, в контакт с плазмой животного, которому был введен лиганд ионного канала, и b) определение эффекта лиганда ионного канала на клетку.

Изобретение относится к способу маркировки парных спиральных филаментов (PHF), включающему взаимодействие PHF с соединением и детектирование присутствия указанного соединения, где соединение имеет формулу , в которой -R- означает , -Q- выбран из: -NHC(O)-, -N=N-, -CH=CH-; -P выбран из: ; -T выбран из: ; X представляет собой N или CH; -W1-6, -G1-4, -Р1-5 являются такими, как указано в формуле изобретения.

Изобретение относится к области молекулярной биологии и медицинской диагностики. Предложен способ детекции белков в амилоидном состоянии, в котором получают образец лизата культуры дрожжей или ткани млекопитающего, добавляют к образцу ионный детергент, концентрируют белки в амилоидной форме на ацетатцеллюлозной мембране и детектируют их с использованием аптамеров, их конъюгатов или антител, специфичных к амилоидной форме белков.

Изобретение относится к визуализирующим агентам, подходящим для оптической визуализации in vivo организма млекопитающего. .

Изобретение относится к области медицины и предназначено для определения степени гетероплазмии мутаций митохондриального генома. Проводят полимеразную цепную реакцию в режиме реального времени, вычисляют значение ΔCt, определяют коэффициент эффективности амплификации и рассчитывают степень гетероплазмии мутаций митохондриального генома по формуле.

Изобретение относится к области медицины, в частности к медицинской генетике и онкогинекологии, и предназначено для прогнозирования риска развития рака яичников.

Изобретение относится к биохимии. Предоставлена композиция для осуществления реакции замещения цепей нуклеиновых кислот, содержащая первый и второй комплексы нуклеиновых кислот, каждый из которых содержит первую, вторую, третью и четвертую цепи нуклеиновых кислот, где каждая из цепей содержит последовательно первый, второй и третий фрагменты.

Изобретение относится к области биотехнологии. Описаны способ и система для определения того, существует ли аномалия генома.

Изобретение относится к биохимии. Описаны выделенные моноклональные антитела, которые специфически связываются с PD-1 с высокой аффинностью.

Изобретение относится к области медицины, в частности к молекулярной биологии и онкологии, и предназначено для прогнозирования развития острой почечной недостаточности (ОПН) после кратковременной ишемии почки.

Изобретение относится к области медицинской диагностики и касается прогнозирования интенсивности болевого синдрома в раннем послеоперационном периоде у больных хроническим калькулезным холециститом, русской национальности, являющихся уроженцами Центрального Черноземья России.

Изобретение относится к области биотехнологии и представляет собой способ сайт-специфического гидролиза С5-метилированной последовательности ДНК. Готовят реакционную смесь, содержащую буферный раствор и образец С5-метилированной ДНК, добавляют к смеси диметилсульфоксид до конечной концентрации 15-25%, а затем MD-эндонуклеазу, смесь инкубируют в течение часа при 30-37°C с последующим анализом результата гидролиза ДНК методом гель-электрофореза, при этом в качестве MD-эндонуклеазы используют GlaI с концентрацией 4-8 е.а./мкл или PcsI с концентрацией 1-2 е.а./мкл.

Изобретение относится к области биотехнологии. Способ предусматривает приготовление реакционной смеси, содержащей буферный раствор и исследуемый образец ДНК.

Группа изобретений относится к области биотехнологии. Предложены способ и система для определения нуклеотидной последовательности в заданной области генома плода.
Изобретение относится к области медицины и предназначено для диагностики предрасположенности к посттравматическому остеоартрозу коленного сустава. У пациентов существляют генотипирование полиморфизма rs2276109 (A-82G) гена ММР-12. При выявлении генотипа GG диагностируют генетическую предрасположенность к развитию посттравматического остеоартроза коленного сустава. Изобретение обеспечивает увеличение достоверности выявления генетической предрасположенности человека к развитию остеоартроза коленного сустава после травматического повреждения за счет определения полиморфизма в гене матриксной металлопротеиназы 12. 1 з.п. ф-лы, 3 пр.
Наверх