7β-метил-3,17αβ-дисульфамоилокси-d-гомо-6-окса-эстра-1,3,5(10),8,14-пентаен в качестве ингибитора роста клеток рака молочной железы mcf-7

Изобретение относится к 7β-метил-3,17αβ-дисульфамоилокси-D-гомо-6-окса-эстра-1,3,5(10),8,14-пентаену формулы

в качестве ингибитора роста клеток рака молочной железы МСF-7. Технический результат: получено новое соединение, которое может применяться при лечении рака молочной железы. 1 пр.

 

Изобретение относится к синтезу 7β-Метил-3,17αβ-дисульфамоилокси-D-гомо-6-окса-эстра-1,3,5(10),8,14-пентаен в качестве ингибитора роста клеток рака молочной железы МСF-7 и предполагает возможность его применения в медицине.

Рак молочной железы женщин является одним из самых распространенных онкологических заболеваний [1], который часто бывает эстрогенозависимым [2]. Один из путей лечения таких заболеваний направлен на ингибирование образования свободных эстрогенов в опухоли, мишенями являются ароматаза, 17β-гидроксистероид дегидрогеназы и стероидная сульфатаза [3]. Модифицированные эстрогены с сульфаматной группой в ароматическом кольце могут одновременно ингибировать активность стероидной сульфатазы и ароматазы [4], стероидной сульфатазы и 17β-гидрок-систероид дегидрогеназы [5,6]. При взаимодействии сульфаматов эстрогенов со стероидной сульфатазой происходит необратимая дезактивация фермента с освобождением носителя сульфаматной группы [7]. Поэтому поиск новых сульфаматов проводят на основе стероидов, не имеющих гормональной активности [2].

Известно, что введение метильной группы в положение 7β эстрогенов с природным сочленением колец приводит к заметному снижению эстрогенного действия [8], однако синтез таких веществ технически сложен [8-10], поэтому их использование в качестве промежуточных соединений экономически не целесообразно. В дальнейшем исследование таких веществ было остановлено. Тем не менее, модифицированные стероиды с указанным заместителем представляют интерес для создания на их основе соединений с противоопухолевыми свойствами.

Целью изобретения является расширение группы веществ, блокирующих рост клеток рака молочной железы MCF-7. Поставленная цель достигается синтезом рацемического 7β-метил-3,17αβ-дисульфамоил-окси-D-гомо-6-окса-эстра-1,3,5(10),8,14-пентаена (I) из достаточно доступного соединения эстрапентаена (II) [11], что послужило основанием для предложенного пути синтеза.

Пример

7β-Метил-3,17αβ-дисульфамоилокси-D-гомо-6-окса-эстра-1,3,5(10),8,14-пентаен (I). К раствору 70 мг эстрапентаена (II) [10] в 3 мл тетрагидрофурана и 0.3 мл воды добавляют 15 мг борогидрида натрия, реакционную смесь перемешивают 3 ч при 20ºС, затем избыток борогидрида натрия разлагают, медленно прикапывая уксусную кислоту. Далее реакционную смесь выливают в 50 мл воды, продукты реакции экстрагируют 50 мл этилацетата, экстракт промывают равным объемом воды и сушат над сульфатом натрия. Растворитель удаляют на роторном испарителе, остаток растворяют в 2 мл диметилацетамида, раствор охлаждают смесью льда и соли, а затем в атмосфере аргона добавляют 80 мг сульфамоилхлорида. Раствор перемешивают 4 ч, после чего оставляют на 12 ч при 20°С, а затем выливают в 50 мл воды. Продукты реакции экстрагируют 50 мл этилацетата, экстракт промывают равным объемом насыщенного раствора хлористого натрия, сушат над сульфатом натрия. Растворитель удаляют на роторном испарителе, продукт реакции очищают флэш-хроматографией на силикагеле в элюирующей системе гексан-этилацетат 3:1-2.1. После кристаллизации из смеси гексан-этилацетат получают 67 мг (62%) целевого продукта (I), т.пл. > 185°С (разл.)

Спектр ЯМР 1Н (CD3CN, δ, м.д.): 7.30 д (1Н, J=8.5 Гц, Н1); 6.91 дд (1Н, J=8.5 Гц, J= 2.4 Гц, Н2), 6.79 д (1Н, J=1.8 Гц, Н4); 6.06 с (2H, C3-SO3NH2); 5.77 c (2H, C17-SO3NH2); 5.77 (1Н, Н15), 5.37 кв (1Н, J=6.4 Гц, Н); 4.45 дд (1H, J=12.4 Гц, J=4.1 Гц, H17аα); 2.61 (1H, H11β), 2.46 (1H, H11α), 2.41 (2H, H16); 2.19 (1H, Н17α); 2.17 (1Н, Н12β); 2.07 (1H, H17β); 1.51 ддд (J=12.6 Гц, 12.6 Гц, 5.8 Гц, H12α); 1.21 д (3Н, J=6.5 Гц, СН3), 1.06 с (3Н, H18). Спектр ЯМР 13С (CD3CN, δ, м.д.): 152.3; 150.1 (C3, С5); 135.9 (C9); 123.9 (C1); 129.4; 123.0; 122.6 (C8, C10, С14); 120.9 (C15); 114.9, 110.4 (C2, C4); 86.6 (C17а); 70.4 (C7); 36.6 (C13); 31.9; 24.7; 23.3; 21.0 (C11, C12, C16, C17); 17.6; 16.7 (СН3; C18). HRMS (ESI-TOF), ион [M+Na]+, [С19Н24N2О7S2Na]+: вычислено 479.0917, найдено 479.0925.

Спектры ЯМР 1Н снимали при 25°С на спектрометре DPX-300 фирмы Bruker с рабочей частотой 300,130 МГц, спектры ЯМР 13С – на том же приборе, рабочая частота 75.468 МГц.

Исследование влияния сульфамата (I) на рост клеток рака молочной железы проводили в условиях работы [12].

Клеточные культуры и условия культивирования.

Работа проведена на перевиваемой культуре клеток человека MCF-7 (аденокарцинома молочной железы). В качестве отрицательного контроля использовали нормальные кожные фибробласты человека (КФЧ) ранних пассажей. Клетки культивировали во флаконах Карреля в среде DMEM/F12 (Биолот) с добавлением 1% эмбриональной сыворотки крупного рогатого скота (Биолот), без антибиотиков, в 5% СО2 атмосфере, при 37ºС.

Оценка пролиферативной активности клеток.

Клетки высаживались на флаконы Карреля по 50×104 клеток на флакон.

Для изучения пролиферативной активности клеток в условиях подавления сульфатаз, через 24 часа после посева, культуральную среду заменяли на среду, содержащую ингибиторы сульфатаз до конечной концентрации 50 мкг/мл, после чего инкубировали данные опухолевые клеточные линии в течение различных промежутков времени (от 24 до 72 ч). Ингибитор растворяли в ДМСО. Конечная концентрация ДМСО в культуральной среде не превышала 0.5%. Для исключения цитотоксического действия ДМСО ставили контроль с добавлением ДМСО без ингибитора сульфатаз. Для исключения неспецифического губительного действия веществ использовали нормальные кожные фибробласты человека. Далее клетки снимали раствором версена-трипсина (Биолот), рассеивали на флаконы Карреля, содержащие новую полную культуральную среду. Подсчет клеток проводили в момент достижения необработанными контрольными клетками максимальной плотности клеток на единицу площади поверхности культурального флакона (монослой), при этом их количество определялось как 100%. Пролиферативную активность всех исследованных клеточных культур при воздействии ингибиторов сульфатаз определяли не менее трех раз.

Исследование влияние полученного сульфамата на рост перевиваемой культуры клеток человека MCF-7 (аденокарцинома молочной железы показало, что стероид (I) практически полностью блокирует рост опухолевых клеток при концентрации 20 мкг/мл, при этом он не влияет на рост кожных фибробластов человека, не имеющих рецепторов эстрогенов. Рост опухолевых клеток ингибируется в той же степени, что и под действием тамоксифена, применяемого в медицинской практике более 30 лет. Это весьма важно, поскольку сульфаматы и тамоксифен имеют разные механизмы действия.

Список источников

[1] Siegel R, Naishadham D, Jemal A. Cancer statistics, 2012. Cancer J Clin. 2012. Vol. 62, pp.10-29.

[2] Yue W, Yager JD, Wang Ji-P, Jupe ER, Santen R.J. Estrogen receptor-depended and independent mechanisms of breast cancer carcinogenesis. Steroids. 2013. Vol. 78, N 2, pp. 161-170.

[3] Thomas M.P., Potter B.V.L. Estrogen O-sulfamates and their analogues: Clinical steroid sulfatase inhibitors with broad potential // J. Steroid Biochem. Mol. Biol. 2015. Vol. 153, pp. 160-169.

[4] Numazawa M, Tominaga T, Watari Y, Tada Y. Inhibition of estrone sulfatase by aromatase inhibitor-based estrogen 3-sulfamates. Steroids. 2006. Vol. 71, N5, pp. 371–379.

[5] Vicker N, Lowrence HRR, Allan GM, Bubert C, Fisher DSM, Purohit A, Reed MJ, Potter BVL. 17β-Hydroxysteroid dehydrogenase inhibitors. US patent 8003783 B2; 2011.

[6] Lowrence H.R., Vicker N., Alan G.M., Bubert C., Smith A., Mahon M.F., Tutil H.J., Fischer D.S., Purohit A., Reed M.J., Potter B.V.L. Preparation of steroid derivatives as inhibitors of 17β-hydroxy steroid dehydrogenase. U.S. Pat. Appl. US 2006 74060.

[7] Reed M.J., Purochit A., Woo L.W.L., Newman S.P., Potter B.V.L. Steroid sulfatase: molecular biology, regulation and inhibition. Endocrine Rev. 2005. Vol. 26, N 2, pp. 171-202.

[8] 7β-Alkyl-steroids. Pat. GB 1298974 A1.

[9] Eder U., Haffer G., Neef G., Sauer G., Seeger A., Wiechert R. Synthese des (+)-1,3-Dimethoxy-7β-methyl-1,3,5(10)-ӧstratrien-17-ones. Chem. Ber. 1977. Bd. 110, N 9, s. 3161-3167.

[10] 17-Difluoromethylene-estratrienes. US Pat. 6136800 (2000).

[11] Fidarov A.F., Vihma V., Morozkina S.N., Bogautdinov R.P., Shavva A.G., Tikkanen M.J. Synthesis and evaluation of new estrogen analogues. Antioxidant effect on low density lipoprotein. J. Steroid Biochem. Mol. Biol. 2015. Vol. 154, pp. 142-149.

[12] Морозкина С.Н., Дроздов А.С., Ковалев Р.А., Филатов М.В., Шавва А.Г. Рацемический 2,17β-дисульфамоилокси-3-метокси-8α-эстра-1,3,5(10)-триен в качестве ингибитора пролиферации опухолевых клеток МСF-7. Патент РФ 2562242 (2015).

7β-метил-3,17αβ-дисульфамоилокси-D-гомо-6-окса-эстра-1,3,5(10),8,14-пентаен формулы

в качестве ингибитора роста клеток рака молочной железы МСF-7.



 

Похожие патенты:

Изобретение относится к биохимии. Описан способ стимулирования естественной защиты и индуцирования устойчивости к болезни, вызываемой Candidatus Liberibacter asiaticus, у цитрусовых растений (Huanglongbing), характеризующийся нанесением на растения соединения брассиностероида.

Изобретение относится к новым 4-окса- и 4-аза-16 ,17 -циклогексанопрегнанам (4-окса- и 4-аза-прегна-D -пентаранам), которые могут найти применение в медицине для лечения злокачественных опухолей, общей формулы I где Х=0 или NR, R=R1=R 2=R4=H, при этом R1+R3 образуют связь.

Изобретение относится к диацетату рацемического 3,17 -дигидрокси-7 ,18-диметил-6-оксаэстра-1,3,5(10),8(9)-тетраена формулы обладающему остеопротекторным, гипохолестеринемическим и антиоксидантным действием при пониженной утеротропной активности.

Изобретение относится к получению новых меченых аналогов физиологически активных соединений - тритерпеновых гликозидов голотурий Cucumaria формулы: Изобретение относится к области органической химии и может найти применение в аналитической химии, биоорганической химии, биохимии и прикладной медицине.

Изобретение относится к улучшенному способу получения химических соединений из ряда стероидов и конкретно касается получения эпибрассинолида [(22R, 23R, 24R)-2, 3, 22, 23-тетрагидрокси-В-гомо-7-окса-5-эргостан-6-она, относящегося к биологически активному веществу - фитостимулятору, регулирующему рост растений.
Изобретение относится к способам выделения и очистки тритерпеновых глюкозидов из растительного сырья, в частности сапонинов из свеклы и отходов сахарного производства, в частности из жома свеклы, и может быть применено в пищевой, фармакологической и косметической промышленности.

Изобретение относится к медицине, в частности к онкологии, и может быть использовано при коррекции гормонального статуса после проведения радикального хирургического лечения больных раком шейки матки репродуктивного возраста в раннем послеоперационном периоде.

Изобретение относится к фармацевтической промышленности и медицине и представляет собой способ лечения колоректальной аденокарциномы, включающий введение композиции, содержащей в эффективном количестве метилентетрагидрофолат и цетуксимаб, где способ лечения не включает использование 5-фторурацила, его аналогов, пролекарств и/или метаболитов.

Изобретение относится к медицине и может быть использовано для профилактического лечения при развитии неопластических процессов кожной ткани, таких как меланома, базально-клеточный рак, плоскоклеточный рак.

Изобретение относится к фармацевтической промышленности, а именно к средству, обладающему канцерпревентивным действием. Средство, обладающее канцерпревентивным действием, содержащее в качестве компонентов растительного происхождения комплексный экстракт из листьев зеленого чая, корней куркумы, семян чернушки посевной, корнеклубней виноградовника японского, травы сигезбекии восточной, корней шлемника байкальского, листьев и веток микробиоты перекрестнопарной, и дополнительно содержит мед натуральный, при определенном соотношении компонентов.

Изобретение относится к соединениям формулы I или их фармацевтически приемлемым солям. Соединения изобретения обладают свойствами ингибитора c-Met.

Изобретение относится к органической химии, а именно к кристаллическому дигидрату гидрохлорида 6-(пиперидин-4-илокси)-2H-изохинолин-1-она формулы (I) и твердой фармацевтической композиции на его основе.

Изобретение относится к области органической химии, а именно к гетероциклическому соединению формулы (I) или к его энантиомеру, диастереомеру и их смеси и к его фармацевтически приемлемой соли, где А: СН или N; L: связь или С1-2алкил; R1 выбран из водорода, С1-4алкила, гетероарила, -(СН2)nC(O)OR15, -C(O)R15, -C(O)NR16R17, и -S(O)mR15, где каждый из алкила или гетероарила возможно замещен 1-3 группами, выбранными из галогена, гидрокси, циано, С1-2алкила, С1-2алкокси, С3циклоалкила, С6арила, пиридина и -(CH2)nC(O)OR15; R2 или R4 независимо выбран из водорода и C1-2алкила; R или R3 независимо выбран из водорода и галогена; R5 или R6 независимо выбран из водорода и C1-2алкила; R7, R8, R9 или R10 независимо выбран из водорода, С1-2алкила и гидроксиC1-2алкила; R11, R12, R13 или R14 независимо выбран из водорода или R11 и R12 или R13 и R14, взятые вместе, образуют оксогруппу; R15 выбран из С1-4алкила, С3циклоалкила, С2алкенила, С6арила и пиридина, где каждый из алкила, циклоалкила или гетероарила возможно замещен 1-4 группами, выбранными из галогена, гидрокси, циано, С1-4алкокси, С6арила, тетразола, -NR19R20, -S(O)mR18, -NHC(O)OR18 и -NHS(O)mR18; R16 или R17 независимо выбран из водорода, С1-3алкила и гетероарила, где гетероарил возможно замещен одной группой, выбранной из С1-2алкила, гидрокси, С1-2алкокси, С3циклоалкила, гидроксиC1алкила и -OR18; R18 выбран из С1-4алкила и гидроксиС1-4алкила; R19 или R20 независимо выбран из группы, состоящей из водорода; m равен 0, 1 или 2; n равен 0 или 1; р равен 0, 1 или 2; q равен 0 или 1; s равен 1 или 2; и t равен 1 или 2.

Изобретение относится к химико-фармацевтической промышленности и представляет собой усилитель противоопухолевого эффекта для усиления противоопухолевого средства, содержащий в качестве активного ингредиента имидазооксазиновое соединение, которое представляет собой транс-3-амино-1-метил-3-(4-(3-фенил-5Н-имидазо[1,2-с]пиридо[3,4-е][1,3]оксазин-2-ил)фенил)циклобутанол или транс-3-амино-1-циклопропил-3-(4-(3-фенил-5Н-имидазо[1,2-c]пиридо[4,3-е][1,3]оксазин-2-ил)фенил)циклобутанол, или его фармацевтически приемлемую соль.

Изобретение относится к области химии, химико-фармацевтической промышленности и медицины, а именно к липофильным полиаминам, обладающим противоопухолевой активностью и имеющим общую формулу I, где A выбирается из H и C2H5, n равно 2 или 3, m равно 2 или 4.

Изобретение относится к соединению формулы IIB или его фармацевтически приемлемым солям в которой R представляет собой бициклический 9-членный гетероарил, включающий 1, 2, 3 или 4 гетероатома, независимо выбранного(ых) из N, S или О, где указанный гетероарил может быть замещен с помощью одного заместителя, выбранного из группы, состоящей из оксо и галогена; R1 представляет собой -NHR4, и R4 представляет собой 3-10-членный циклоалкил, арил, выбранный из фенила и тетрагидронафталинила, или 9-10-членный гетероарил, содержащий 1 или 2 гетероатома, выбранных из N и О; 3-10-членный циклоалкил; арил, выбранный из фенила и нафталинила; или 5-10-членный моноциклический или бициклический гетероарил, содержащий 1 или 2 гетероатома, выбранных из N, О и S; R2 и R3 представляют собой водород; значения остальных заместителей указаны в формуле изобретения; или где соединение выбрано из группы, состоящей из соединений, представленных в формуле изобретения.

Группа изобретений относится к медицине, а именно к гинекологии, и может быть использована для способа профилактики и/или лечения урогенитальной атрофии у женщин, включающей вагинальное введение фармацевтических составов с эстриолом.

Изобретение относится к 7β-метил-3,17αβ-дисульфамоилокси-D-гомо-6-окса-эстра-1,3,5,8,14-пентаену формулы в качестве ингибитора роста клеток рака молочной железы МСF-7. Технический результат: получено новое соединение, которое может применяться при лечении рака молочной железы. 1 пр.

Наверх