Терапия и способ внутриопухолевого введения цитотоксического т-лимфоцита и/или nkt-клетки с антителом против tnf и/или антителом против il-10

Группа изобретений относится к медицине, а именно к онкологии, и может быть использована для лечения злокачественных опухолей. Способы по изобретению включают получение и введение внутрь опухоли незрелых дендритных клеток, после этого введение внутрь опухоли цитотоксических T-лимфоцитов и/или NKT-клеток и антитела против TNF и/или антитела против IL-10. Использование изобретений позволяет добиться регрессии, снижения или элиминации опухолевых клеток в опухолевой ткани пациентов. 3 н. и 14 з.п. ф-лы, 4 табл., 4 ил., 4 пр.

 

Перекрестная ссылка на родственные заявки

Для настоящей заявки испрашивается приоритет, в соответствии с 35 U.S.C., раздел 119(e), по предварительной заявке 61/664998, озаглавленной «Терапия и способ внутриопухолевого введения цитотоксического T-лимфоцита и/или NKT-клетки с антителом против TNF и/или антителом против IL-10», зарегистрированной 27 июня 2012 года.

Область изобретения

[0001] Изобретение относится к внутриопухолевой терапии и способам применения терапии для лечения пациента со злокачественной опухолью. Изобретение предусматривает введение цитотоксических T-лимфоцитов и/или естественных киллерных T (NKT)-клеток с антителом против фактора некроза опухоли (антителом против TNF) и/или антителом против IL-10 в опухолевую ткань пациента.

Описание известного уровня техники

[0002] Цитотоксические T-лимфоциты являются важным компонентом клеточного иммунитета. Они играют ключевую роль в борьбе со многими инфекциями и злокачественными опухолями. Эти T-клетки отвечают за "выслеживание" других клеток организма, которые являются инфицированными вирусами или содержащими злокачественную клетку, и разрушают их. Например, когда вирус или злокачественная опухоль использует клетку для размножения, клетка предоставляет некоторые белки вирусов или компоненты злокачественной опухоли на своей поверхности. Цитотоксические T-клетки могут распознавать такие белки или компоненты и специализироваться на разрушении инфицированных или содержащих злокачественную опухоль клеток до того, как они могут высвобождать новую инфекцию или злокачественную опухоль в кровоток. Многие вакцины являются эффективными по меньшей мере частично в результате стимуляции активации или ответа этого типа T-клеток. Цитотоксические T-клетки также могут образовывать химические соединения, известные как цитокины, которые содействуют координации того, как иммунная система активируется против заболевания.

[0003] NKT-клетки представляют собой гетерогенную группу T-клеток, которые обладают свойствами как T-клеток, так и естественных киллерных клеток.

[0004] Фактор некроза опухоли (TNF) представляет собой цитокин, который циркулирует во всем организме. TNF является очень важным для эффективного иммунного надзора и является необходимым для правильной пролиферации и функции естественных киллерных клеток, T-клеток, B-клеток, макрофагов и дендритных клеток. Первичная роль TNF заключается в регуляции иммунных клеток. Известно, что TNF может вызывать системное воспаление, которое может приводить к различным хроническим состояниям. Антитела против TNF, также известные как блокаторы или ингибиторы TNF, препятствуют продукции TNF в организме.

[0005] В данной области существует необходимость в разработке терапии и способов применения указанной терапии для регрессии, снижения или элиминации опухолевых клеток в опухолевой ткани пациентов. Желательным является, чтобы терапия и способы применения являлись эффективными в течение приемлемого периода времени, и дополнительно желательным является, чтобы терапия и способы применения являлись настолько минимально инвазивными для пациентов, насколько это разумно возможно. Кроме того, предпочтительным является, если терапия и способы являются эффективными без подвергания пациента лучевой терапии.

Сущность изобретения

[0006] Изобретение преодолевает указанную выше необходимость путем предоставления эффективной терапии и способов регрессии, снижения или элиминации опухолевых клеток в локальной опухолевой ткани пациента и опухолевых клеток в метастазирующих опухолях. В одном из аспектов изобретение относится к способу, который включает сбор моноцитарных клеток от пациента, культивирование моноцитарных клеток с получением незрелых дендритных клеток, введение внутрь опухоли терапевтически эффективного количества незрелых дендритных клеток пациенту, сбор цитотоксических T-лимфоцитов и/или NKT-клеток от пациента, введение внутрь опухоли терапевтически эффективного количества цитотоксических T-лимфоцитов и/или NKT-клеток пациенту и введение внутрь опухоли терапевтически эффективного количества антител против TNF и/или антител против IL-10 пациенту.

[0007] Цитотоксические T-лимфоциты и/или NKT-клетки можно культивировать в среде, содержащей IL-2 и CD3.

[0008] Введение внутрь опухоли антитела против TNF и/или антитела против IL-10 можно проводить до или после, или одновременно с введением внутрь опухоли цитотоксических T-лимфоцитов и/или NKT-клеток.

[0009] Способ может дополнительно включать введение пациенту лекарственного средства, выбранного из группы, состоящей из химиотерапии, лучевой терапии, терапии антителами и их сочетаний.

[0010] В другом аспекте изобретение относится к способу, включающему внутриопухолевое введение терапевтически эффективного количества незрелых дендритных клеток в опухолевую ткань, внутриопухолевое введение терапевтически эффективного количества цитотоксических T-лимфоцитов и/или NKT-клеток в опухолевую ткань и внутриопухолевое введение терапевтически эффективного количества антитела против TNF и/или антитела против IL-10 в опухолевую ткань.

[0011] Терапевтически эффективное количество цитотоксических T-лимфоцитов и/или NKT-клеток можно индуцировать введением незрелых дендритных клеток.

Краткое описание чертежей

[0012] Дополнительное понимание изобретения можно получить из следующего ниже описания предпочтительных вариантов осуществления при чтении в сочетании с сопровождающими чертежами, где:

[0013] фигура 1 представляет собой радиоизотопное изображение левых ребер 7 и 10, демонстрирующее опухолевую ткань до и после терапии в соответствии с одним из вариантов осуществления настоящего изобретения;

[0014] фигура 2 представляет собой радиоизотопное изображение Th10, L1, левой подвздошной кости, левого ребра 6, правой бедренной кости, левого ребра 10, Th12, L3 и правой подвздошной кости, демонстрирующее опухолевую ткань до и после терапии в соответствии с одним из вариантов осуществления настоящего изобретения;

[0015] фигура 3 представляет собой радиоизотопное изображение левого ребра 2, демонстрирующее опухолевую ткань до и после терапии в соответствии с одним из вариантов осуществления настоящего изобретения, и

[0016] фигура 4 представляет собой радиоизотопное изображение левого ребра 3, демонстрирующее опухолевую ткань до и после терапии в соответствии с одним из вариантов осуществления настоящего изобретения.

Подробное описание предпочтительных вариантов осуществления

[0017] Как используют в настоящем описании, "пациент(ы)" включает млекопитающего(их), которое включает человека(людей).

[0018] Как используют в настоящем описании, термин "терапевтически эффективное количество" относится к такому количеству цитотоксических T-лимфоцитов, NKT-клеток, антител против TNF, антител против IL-10, незрелых дендритных клеток, противовоспалительного средства, адъюванта, химиотерапии, лучевой терапии, терапии антителом или их сочетаний, которое необходимо для получения желаемого эффекта у человека или другого млекопитающего. Во всех возможных случаях на самом базовом уровне желаемое действие представляет собой регрессию, снижение или элиминацию опухолевых клеток в опухолевой ткани пациента по сравнению с опухолевыми клетками в опухолевой ткани пациента до применения способов терапии по изобретению.

[0019] Как используют в настоящем описании, термин "внутриопухолевая терапия" относится к терапии, которая включает введение (например, инъекцию) цитотоксических T-лимфоцитов и/или NKT-клеток с антителом против TNF и/или антителом против IL-10 и, необязательно, противовоспалительного средства, и/или незрелых дендритных клеток и, необязательно, адъюванта непосредственно в опухолевую ткань пациента (человека или животного). Антитело против TNF и/или антитело против IL-10 можно вводить внутрь опухоли до, одновременно или после внутриопухолевого введения цитотоксических T-лимфоцитов и/или NKT-клеток. Кроме того, цитотоксические T-лимфоциты и/или NKT-клетки можно необязательно вводить в сочетании с противовоспалительным средством и незрелые дендритные клетки можно, необязательно, вводить в сочетании с адъювантом. Комбинация цитотоксических T-лимфоцитов и/или NKT-клеток с антителами против TNF и/или антителами против IL-10 и необязательными идентифицированными соединениями, является эффективной в опухолевой ткани для регрессии, снижения и/или элиминации опухолевых клеток.

[0020] В основном изобретение относится к комбинации незрелых дендритных клеток, цитотоксических T-лимфоцитов и/или NKT-клеток с антителом против TNF и/или антителом против IL-10 и внутриопухолевому (например, непосредственному) введению в опухолевую ткань, включая опухолевую ткань, образованную метастазами, пациента.

[0021] Не желая быть связанными какой-либо конкретной теорией, полагают, что внутриопухолевая инъекция незрелых дендритных клеток пациенту приводит к индукции цитотоксических T-лимфоцитов и/или NKT-клеток. Это означает, что цитотоксические T-лимфоциты и/или NKT-клетки индуцируются как часть иммунного ответа, вызываемого внутриопухолевой инъекцией незрелых дендритных клеток. Такой иммунный ответ может способствовать реакции TNF, которая в свою очередь может индуцировать воспаление в месте локализации опухоли и прогрессирование роста опухоли. Таким образом, антитела против TNF и/или антитела против IL-10 можно комбинировать (например, совместно вводить или совместно инъецировать) с цитотоксическими T-лимфоцитами и/или NKT-клетками для ингибирования такого воспаления.

[0022] Кроме того, не желая быть связанными какой-либо конкретной теорией, полагают, что цитотоксические T-лимфоциты и/или NKT-клетки, индуцированные естественным образом как часть аутоиммунного ответа, как описано выше, могут являться неэффективными против опухолей, особенно когда опухоли находятся на поздней стадии или являются агрессивно растущими. Причины могут заключаться в том, что такие цитотоксические T-лимфоциты и/или NKT-клетки не индуцируются с соответствующим качеством и/или в соответствующем количестве, и/или таким образом, чтобы своевременно защищать организм пациента от инвазии опухоли. Выявлено, что внутриопухолевая инъекция незрелых дендритных клеток может положительным образом способствовать иммунному ответу для индукции цитотоксических T-лимфоцитов и/или NKT-клеток, обладающих улучшенным качеством, повышенным количеством, и своевременным образом. Однако в дополнение к содействию иммунному ответу внутриопухолевая инъекция незрелых дендритных клеток также может индуцировать уровень TNF в кровотоке пациента и увеличивать воспаление в месте(ах) локализации опухоли, которое может препятствовать иммунному ответу цитотоксических T-лимфоцитов и/или NKT-клеток.

[0023] Антитело против TNF является эффективным для подавления системного воспаления, вызываемого TNF, и цитотоксические T-лимфоциты и/или NKT-клетки не являются ограниченными в своей иммунологической функции подавлением воспаления.

[0024] Таким образом, целью изобретения является предоставление соответствующего количества и качества цитотоксических T-лимфоцитов и/или NKT-клеток в организме пациента и в частности в месте(ах) локализации опухоли для регрессии, снижения или элиминации опухолевых клеток. Кроме того, эти клетки комбинируют с антителом против TNF и/или антителом против IL-10 для ингибирования возможного воспаления в месте(ах) локализации опухоли. Предусмотрено, что количество и качество природных цитотоксических T-лимфоцитов и/или NKT-клеток (т.е. индуцированных внутриопухолевым введением незрелых дендритных клеток пациенту) может являться достаточным (например, терапевтически эффективным количеством) для выполнения этой задачи. Кроме того, также предусмотрено, что количество и качество природных цитотоксических T-лимфоцитов и/или NKT-клеток может являться недостаточным, и, таким образом, изобретение относится к сбору природных цитотоксических T-лимфоцитов и/или NKT-клеток у пациента, необязательно, культивированию таких собранных клеток и их повторному введению в комбинации с антителом против TNF и/или антителом против IL-10 внутрь опухоли пациенту в количестве и качестве, которое является достаточными (например, терапевтически эффективным количеством) для регрессии, снижения или элиминации опухолевых клеток и для ингибирования воспаления в месте(ах) локализации опухоли.

[0025] В основном, антитело против TNF вводят, когда в аутоиммунной системе пациента присутствует достаточное количество цитотоксических T-лимфоцитов, таким образом, что иммунный ответ цитотоксических T-лимфоцитов поддерживается подавлением активности TNF.

[0026] Антитело против TNF может находиться в различных формах. Например, антитело против TNF можно вводить в механизм доставки, такой как жидкий носитель или среда, для облегчения введения (например, инъекции).

[0027] Таким образом, в определенных вариантах осуществления изобретение включает сбор моноцитарных клеток от пациента, культивирование собранных моноцитарных клеток в подходящей среде с получением незрелых дендритных клеток и введение внутрь опухоли терапевтически эффективного количества незрелых дендритных клеток пациенту. Кроме того, после внутриопухолевого введения незрелых дендритных клеток у пациента собирают цитотоксические T-лимфоциты и/или NKT-клетки, культивируют в подходящей среде и объединяют с антителом против TNF и/или антителом против IL-10 для внутриопухолевого введения пациенту в терапевтически эффективном количестве. Антитело против TNF и/или антитело против IL-10 можно вводить внутрь опухоли до, одновременно или после внутриопухолевого введения культивированных цитотоксических T-лимфоцитов и/или NKT-клеток. Изобретение является эффективным для вызывания регрессии, снижения или элиминации опухолевых клеток у пациента. Кроме того, в определенных вариантах осуществления это можно проводить без лучевой терапии.

[0028] Как указано в настоящем описании, изобретение включает комбинацию цитотоксических T-лимфоцитов и/или NKT-клеток с антителом против TNF и/или антителом против IL-10 в опухолевой ткани. В определенных вариантах осуществления цитотоксический T-лимфоцит включает популяцию T-клеток CD8+NKn. Цитотоксические T-лимфоциты и NKT-клетки продуцируются у пациента, и их можно повторно вводить одному и тому же пациенту. Аналогично, моноцитарные клетки продуцируются у пациента, и их повторно вводит в виде незрелых дендритных клеток одному и тому же пациенту. В определенных вариантах осуществления внутриопухолевое введение дендритных клеток, цитотоксических T-лимфоцитов и/или NKT-клеток, и антитела против TNF и/или против IL-10 проводят посредством инъекции пациенту.

[0029] В определенных вариантах осуществления изобретение представляет собой инициированную человеком терапевтическую вакцину с цитотоксическими T-лимфоцитами и/или NKT-клетками в комбинации с антителом против TNF и/или антителом против IL-10.

[0030] Цитотоксические T-лимфоциты и/или NKT-клетки, собираемые от пациента, можно культивировать в среде, выбранной из сред, которые являются известными в данной области. В определенных вариантах осуществления среда содержит IL-2, CD3 или их смеси.

[0031] В определенных вариантах осуществления цитотоксические T-лимфоциты и/или NKT-клетки можно вводить пациенту в сочетании с противовоспалительным средством. Подходящие противовоспалительные средства могут содержать средства, которые являются известными в данной области. Цитотоксические T-лимфоциты и/или NKT-клетки, и противовоспалительное средство можно комбинировать с получением композиции и композицию можно вводить внутрь опухоли пациенту.

[0032] В определенных вариантах осуществления изобретение может необязательно предусматривать предшествующее лечение. Перед введением пациенту (например, путем сбора и культивирования цитотоксических T-лимфоцитов и/или NKT-клеток и повторного введения) внутрь опухоли цитотоксических T-лимфоцитов и/или NKT-клеток пациенту можно проводить лечение, выбранное из химиотерапии, лучевой терапии, терапии антителом и их сочетания. Схемы лечения химиотерапии, лучевой терапии и терапии антителом хорошо известны в данной области, и эти известные схемы лечения являются пригодными для использования в изобретении.

[0033] Необязательно предусматривают, что использование химиотерапии, лучевой терапии, терапии антителом и их сочетаний можно проводить в различные другие моменты времени на всем протяжении способа по изобретению.

[0034] Кроме того, в определенных вариантах осуществления предусмотрено, что терапия по изобретению не предусматривает использования лучевой терапии. Таким образом, терапия по изобретению может являться эффективной для регрессии, снижения или элиминации опухолевой ткани у пациента при отсутствии лучевой терапии.

[0035] В определенных вариантах осуществления изобретение может включать этапы лечения: внутриопухолевого введения незрелых дендритных клеток в терапевтически эффективном количестве в опухолевую ткань пациента; сбор у пациента цитотоксических T-лимфоцитов и/или NKT-клеток, индуцированных введением незрелых дендритных клеток; повторного введения собираемых цитотоксических T-лимфоцитом и/или NKT-клеток в опухолевую ткань того же пациента и введения внутрь опухоли антитела против TNF и/или антитела против IL-10 пациенту. Внутриопухолевое введение незрелых дендритных клеток является необходимым условием для внутриопухолевого введения цитотоксических T-лимфоцитов и/или NKT-клеток с антителом против TNF и/или антителом против IL-10 для индукции природных цитотоксических T-лимфоцитов и/или NKT-клеток.

[0036] В определенных вариантах осуществления индукция цитотоксических T-лимфоцитов и/или NKT-клеток незрелыми дендритными клетками является достаточной (например, терапевтически эффективным количеством), таким образом, что природные цитотоксические T-лимфоциты и/или NKT-клетки не извлекают у пациента и не вводят повторно. Таким образом, антитело против TNF и/или антитело против IL-10 можно вводить внутрь опухоли для ингибирования воспаления при отсутствии внутриопухолевого введения цитотоксических T-лимфоцитов и/или NKT-клеток. Это означает, что внутриопухолевое введение незрелых дендритных клеток можно проводить в комбинации с внутриопухолевым введением антитела против TNF и/или антитела против IL-10.

[0037] В определенных вариантах осуществления изобретение может включать этапы лечения: внутриопухолевого введения незрелых дендритных клеток в терапевтически эффективном количестве в опухолевую ткань пациента; индукции терапевтически эффективного количества цитотоксических T-лимфоцитов и/или NKT-клеток в опухолевой ткани пациента и введения внутрь опухоли антитела против TNF и/или антитела против IL-10 пациенту. Внутриопухолевое введение незрелых дендритных клеток является необходимым условием для индукции цитотоксических T-лимфоцитов и/или NKT-клеток и внутриопухолевого введения антитела против TNF и/или антитела против IL-10.

[0038] Моноцитарные клетки, собираемые от пациента, культивируют в среде, такой как, но, не ограничиваясь ими, IL-4 и GM-CFS. Незрелые дендритные клетки вводят внутрь опухоли пациенту. В определенных вариантах осуществления незрелые дендритные клетки можно вводить в сочетании с адъювантом. Незрелые дендритные клетки и адъювант можно комбинировать с получением композиции и композицию можно вводить внутрь опухоли пациенту.

[0039] Подходящие адъюванты для применения в изобретение могут включать без ограничения адъюванты на основе липидов, белков и полисахаридов, такие как среды для культивирования лимфоцитов, Marignase, Agaricus, OK432, BCG, Lentinan (шиитаке), Reishi, Sarunokoshikake, TNF Meshimakobu, полный или неполный адъювант Фрейнда, LPS, жирные кислоты, TW80, фосфолипиды, цитокины или вирус. В определенных вариантах осуществления адъювант может представлять собой адъювант среды для культивирования лейкоцитов (LCM). Адъювант LCM может содержать по меньшей мере три цитокина, выбранных из группы, состоящей из эотаксина, FGF, G-CSF, GM-CSF, IFNγ, IP10, ILβ, IL1ra, IL2, IL4, IL5, IL6, IL7, IL8, IL9, IL10, IL12, IL13, IL15, IL17, MCP1, MIP1α, MIP1β, PDGFbb, RANTES, TNFα и VEGF.

[0040] В определенных вариантах осуществления терапия по изобретению включает следующие ниже этапы:

[0041] Этап 1: сбор моноцитарных клеток от пациента;

[0042] Этап 2: культивирование моноцитарных клеток, собираемых от пациента, с получением незрелых дендритных клеток;

[0043] Этап 3: внутриопухолевого введения незрелых дендритных клеток тому же пациенту;

[0044] Этап 4: культивирования цитотоксических T-лимфоцитов и/или NKT-клеток (индуцированных незрелыми дендритными клетками) от того же пациента;

[0045] Этап 5: культивирования цитотоксических T-лимфоцитов и/или NKT-клеток, собираемых от пациента;

[0046] Этап 6: внутриопухолевого введения, например, инъекции в терапевтически эффективном количестве культивируемых цитотоксических T-лимфоцитов и/или NKT-клеток пациенту. Цитотоксические T-лимфоциты и NKT-клетки можно вводить совместно (например, в смеси или композиции) или цитотоксические T-лимфоциты можно вводить раздельно с NKT-клетками.

[0047] Этап 7: внутриопухолевого введения, например, инъекции, в терапевтически эффективном количестве антитела против TNF и/или антитела против IL-10 пациенту. Антитело против TNF и антитело против IL-10 можно вводить совместно (например, в смеси композиции) или вводить раздельно.

[0048] В определенных вариантах осуществления этапы 6 и 7 можно комбинировать, таким образом, что культивируемые цитотоксические T-лимфоциты и/или NKT-клетки объединяют с антителом против TNF и/или антителом против IL-10 в смеси композиции.

[0049] Допустимое время для перехода между этапами может изменяться. Например, период времени между введением незрелых дендритных клеток пациенту и введением культивируемых цитотоксических T-лимфоцитов и/или NKT-клеток одному и тому же пациенту может составлять несколько часов или суток, недель или месяцев. Кроме того, например, этапы 6 и 7 можно проводить в течение относительно короткого периода времени или их можно проводить одновременно (например, одномоментно).

[0050] В соответствии с этапом 5 среду для культивирования можно выбирать из сред, известных в данной области, и она может содержать IL-2, CD3 и их смеси. В определенных вариантах осуществления этап 6 можно проводить с использованием противовоспалительного средства в дополнение к культивируемым цитотоксическим T-лимфоцитам и/или NKT-клеткам. Цитотоксические T-лимфоциты и/или NKT-клетки и противовоспалительное средство можно комбинировать с получением композиции и композицию можно вводить внутрь опухоли пациенту. Противовоспалительное средство можно выбирать из известных в данной области противовоспалительных средств.

[0051] Как описано выше, этапы 1, 2 и 3 являются необходимыми этапами для индукции цитотоксических T-лимфоцитов и/или NKT-клеток у пациента.

[0052] Не желая быть связанными какой-либо конкретной теорией, полагают, что цитотоксический T-лимфоцит, NKT-клетки и незрелые дендритные клетки (образуемые из моноцитарных клеток), которые продуцируются у пациента и которые собирают от пациента, обеспечивают усиленный желаемый эффект при инъекции тому же пациенту по сравнению с цитотоксическим T-лимфоцитом, NKT-клетками и незрелыми дендритными клетками, продуцируемыми и получаемыми другими средствами. Например, по-видимому, собственные цитотоксический T-лимфоцит, NKT-клетки пациента, которые собирали, культивировали и повторно водили внутрь опухоли, обеспечивают улучшенное сопряжение или взаимодействие с цитотоксическими T-лимфоцитами и NKT-клетками в организме пациента.

[0053] В определенных вариантах осуществления изобретение относится к регрессии, снижению или элиминации опухолевых клеток в опухолевой ткани, которую можно визуально детектировать MRI и/или, CT и/или эхо-сканированием, и/или радиоактивным изотопом.

[0054] Изобретение более конкретно описано в следующих ниже неограничивающих примерах, которые предназначены только иллюстрировать, т.к. различные модификации и изменения в нем будут очевидны специалистам в данной области.

Примеры

Пример 1

[0055] У пациента мужского пола в возрасте 71 года проводили MRI и диагностировали у пациента рак предстательной железы IV стадии и множественные костные метастазы. Пациент страдал злокачественной опухолью на поздней стадии и прогрессирующим заболеванием, которое не реагировало на общепринятые стандартные виды терапии. Для сбора моноцитарных клеток от пациента пациенту проводили аферез. Моноцитарные клетки культивировали с IL4 и GM-CFS. Это приводило к продукции незрелых дендритных клеток. Получали смесь, содержащую приблизительно от 107 до 108 незрелых дендритных клеток и приблизительно от 1,0 до 2,0 мг LCMadj, для получения 10% концентрации в нормальном физиологическом растворе. В зависимости от размера опухоли инъецировали от 2,0 до 5,0 см3 нормального физиологического раствора во множественные очаги опухоли пациента. Пациенту также проводили лучевую терапию и последующую внутриопухолевую инъекцию смеси, содержащей незрелые дендритные клетки и LCMadj.

[0056] Для сбора клеток CTL от пациента пациенту проводили аферез. Культивировали клетки CTL и получали смесь, содержащую от 10×108 до 30×108 культивируемых клеток CTL и от 12,5 мг до 50,0 мг антитела против TNF. Смесь инъецировали во множественные очаги опухоли пациента. Подробный протокол представлен в таблице 1.

[0057] Пациента оценивали по анализу изображений RI. Для четырех обрабатываемых опухолей пациента демонстрировали полную реакцию (CR), для двух обрабатываемых опухолей демонстрировали частичную реакцию (PR) и для всех других обрабатываемых очагов демонстрировали стабильное заболевание (SD). CR определяют как снижение маркеров в сыворотке до нормальных уровней и полное исчезновение всех измеримых очагов. PR определяют как 30% уменьшение размера опухоли, в которую вводили инъекции, снижение уровня маркеров в сыворотке, отсутствие увеличения размера опухоли в других метастатических очагах или появления новых метастазов. SD определяют как демонстрацию менее чем 20% увеличения размера опухоли и менее чем 30% уменьшения размера опухоли при отсутствии повышения уровня опухолевых маркеров в сыворотке.

[0058] На фиг. 1 представлены изображения RI левого ребра 7 и 10 до (например, до инъекции смеси CTL и антител против TNF, как описано выше) и после (например, после инъекции смеси CTL и антител против TNF, как описано выше). Эти обрабатываемые опухоли представляли собой две из четырех обрабатываемых опухолей пациента, для которых демонстрировали полную реакцию.

Пример 2

[0059] У пациента мужского пола в возрасте 74 года диагностировали рак предстательной железы III стадии и множественные костные метастазы. Пациент страдал злокачественной опухолью на поздней стадии и прогрессирующим заболеванием, которое не реагировало на общепринятые стандартные виды терапии. Для сбора моноцитарных клеток от пациента пациенту проводили аферез. Моноцитарные клетки культивировали в IL4 и GM-CFS. Это приводило к продукции незрелых дендритных клеток. Получали смесь, содержащую приблизительно от 107 до 108 незрелых дендритных клеток и приблизительно от 1,0 до 2,0 мг LCMadj, для получения 10% концентрации в нормальном физиологическом растворе. В зависимости от размера опухоли инъецировали от 2,0 до 5,0 см3 нормального физиологического раствора во множественные очаги опухоли пациента. Пациенту также проводили лучевую терапию и последующую внутриопухолевую инъекцию смеси, содержащей незрелые дендритные клетки и LCMadj.

[0060] Для сбора клеток CTL клетки от пациента пациенту проводили аферез. Культивировали клетки CTL и получали смесь, содержащую 30×108 культивируемых клеток CTL и 37,5 мг антитела против TNF. Смесь инъецировали во множественные очаги опухоли пациента, включая крестец, Th7, Th10, Th12, LI, L3, правую подвздошную кость, левую подвздошную кость, левое ребро 6(1)(2), левое ребро 10 и правую бедренную кость. Подробный протокол представлен в таблице 2.

[0061] Пациента оценивали по анализу изображений RI. Для трех обрабатываемых опухолей пациента демонстрировали PR (как определено выше) и для оставшихся обрабатываемых опухолей демонстрировали CR (как определено выше).

[0062] На фиг. 2 представлены изображения RI Th10, L1 и левой подвздошной кости до (например, до инъекции смеси CTL и антитела против TNF, как описано выше) и после (например, после инъекции смеси CTL и антитела против TNF, как описано выше). Эти обрабатываемые опухоли представляли собой три обрабатываемые опухоли пациента, для которых демонстрировали PR. Кроме того, на фиг. 2 представлены изображения RI до проведения лечения левого ребра 6, правой бедренной кости, левого ребра 10, Th12, L3 и правой подвздошной кости. Они представляют собой обрабатываемые опухоли, для которых демонстрировали CR.

Пример 3

[0063] У пациента женского пола в возрасте 51 год диагностировали рак молочной железы IV стадии и метастазы в лимфатическом узле левой подмышечной впадины. Пациент страдал злокачественной опухолью на поздней стадии и прогрессирующим заболеванием, которое не реагировало на общепринятые стандартные виды терапии. Для сбора моноцитарных клеток от пациента пациенту проводили аферез. Моноцитарные клетки культивировали с IL4 и GM-CFS. Это приводило к продукции незрелых дендритных клеток. Получали смесь, содержащую приблизительно от 107 до 108 незрелых дендритных клеток и приблизительно от 1,0 до 2,0 мг LCMadj, для получения 10% концентрации в нормальном физиологическом растворе. В зависимости от размера опухоли инъецировали от 2,0 до 5,0 см3 нормального физиологического раствора во множественные очаги опухоли пациента. Пациенту также проводили лучевую терапию и последующие внутриопухолевые инъекции незрелых дендритных клеток и LCMadj в комбинации с 25,0 мг антитела против TNF. Подробный протокол представлен в таблице 3.

[0064] Пациента оценивали по анализу изображения RI. Для обрабатываемых опухолей пациента демонстрировали PR и CR.

[0065] На фиг. 3 представлены изображения RI до и после (PR и CR) левого ребра 2.

Пример 4

[0066] У пациента женского пола в возрасте 79 лет диагностировали рак легких II стадии и метастазы в головном мозге. Пациент страдал злокачественной опухолью на поздней стадии и прогрессирующим заболеванием, которое не реагировало на общепринятые стандартные виды терапии. Для сбора моноцитарных клеток от пациента пациенту проводили аферез. Моноцитарные клетки культивировали с IL4 и GM-CFS. Это приводило к продукции незрелых дендритных клеток. Получали смесь, содержащую приблизительно от 107 до 108 незрелых дендритных клеток и приблизительно от 1,0 до 2,0 мг LCMadj, для получения 10% концентрации в нормальном физиологическом растворе. В зависимости от размера опухоли инъецировали от 2,0 до 5,0 см3 нормального физиологического раствора во множественные очаги опухоли пациента. Пациенту также проводили лучевую терапию и последующую внутриопухолевую инъекцию смеси, содержащей незрелые дендритные клетки и LCMadj.

[0067] Для сбора клеток CTL от пациента пациенту проводили аферез. Клетки CTL культивировали и получали смесь, содержащую от 10×108 до 40×108 культивируемых клеток CTL и 12,5 мг до 25,0 мг антитела против TNF. Смесь инъецировали во множественные очаги опухоли пациента. Подробный протокол представлен в таблице 4.

[0068] Пациента оценивали по анализу изображений RI. Для обрабатываемых опухолей пациента демонстрировали CR.

[0069] На фиг. 4 представлены изображения RI левого ребра 3 до и после лечения. Для этой обрабатываемой опухоли демонстрировали полную реакцию.

[0070] Специалистам в данной области понятно, что в описанных выше вариантах осуществления можно проводить изменения, не выходя за границы идеи изобретения. Таким образом, следует понимать, что настоящее изобретение не ограничено описанными конкретными вариантами осуществления, а предназначено включать модификации, которые входят в рамки сущности и объема изобретения, как определено прилагаемой формулой изобретения.

ТАБЛИЦА 1
Протокол HITV и CTL-II (внутриопухолевая)
Рак предстательной железы (IV стадия), множественные костные метастазы (№0442, 71 год, мужской пол)
2007/02 MRI выявляли рак предстательной железы, костный метастаз
Эндокринная терапия: лейплин/касодекс
2007/09 MRE CR (поджелудочная железа), PR (костный метастаз)
2008/11 Rec.
2009/09 Пептид DC, витамин C и озоновая терапия
2010/01 MRE диффузные метастазы в тазе
2010/02 IMRT предстательной железы+метастазы таза
2010/03 MRE множественные костные метастазы
2010/03/25 IMRT: 48,3 Гр/20 фрак./21 сут (первичный, SV, двухсторонний паховый лимфатический узел) 56,2Гр/20F/21 сут (другие костные метастазы)
2010/04/04 Аферез
2010/04/29 Инъекция DC в 20 мест локализации
2010/06/01 Инъекция DC в 30 мест локализации
2010/06/07 IMRT: 40,0 Гр/10 фрак./12 сут
2010/08/06 MRE CR (предстательная железа) PR (грудной отдел позвоночника) Rec. (многие кости)
2010/10/26 RI: Rec. (многие кости)
2010/11/15 IMRT: 26,26 Гр/12 фрак./19 сут (множественные костные метастазы)
2010/12/01 IMRT: 30,00 Гр/5 фрак./9 сут (правая седалищная кость, двухсторонняя бедренная кость)

Таблица 1 (продолжение)
Протокол HITV и CTL-II (внутриопухолевая)
Рак предстательной железы (IV стадия), множественные костные метастазы (№0442, 71 год, мужской пол)
2010/12/15 Инъекция DC в 21 место локализации
2011/04/21 RI: PR (поясничный~тазовый) PD (шейный~грудной)
2011/07/22 RI: SD (костные метастазы в целом)
2011/12/09 Аферез CTL
2011/12/09 CTL (25,0×10*8) с антителом против TNF 25,0 мг (L4/L5)
2012/01/13 CTL (25,0×10*8) с антителом против TNF 25,0 мг (L3/левая подвздошная кость)
2012/02/03 RI: CR (L4/L3)
PR (L5/левая подвздошная кость)
Необрабатываемая резидуальная опухоль (левое ребро 7 и 10, грудина)
2012/03/28 CTL (20,0×10*8) с антителом против TNF 25,0 мг (левое ребро 7 и 10, грудина)
2012/05/11 RI: PR (левое ребро 7 и 10) SD (грудина)
2012/05/17 Аферез CTL
2012/06/21 CTL (10,0×10*8) с антителом против TNF 12,5 мг (левое ребро 7)
2012/07/19 Аферез CTL
2012/08/09 CTL (10,0×10*8) с антителом против TNF 12,5 мг (левое ребро 10)
2012/08/10 RI: CR (левое ребро 10 SD (левое ребро 7) Rec. (правая крестцовая кость)

Таблица 1 (продолжение)
Протокол HITV и CTL-II (внутриопухолевая)
Рак предстательной железы (IV стадия), множественные костные метастазы (№0442, 71 год, мужской пол)
2012/09/03 CTL (30,0×10*8) с антителом против TNF 37,5 мг (грудина/правая крестцовая кость/левая подвздошная кость)
2012/10/04 CTF (30,0×10*8) с антителом против TNF 37,5 мг (Th7/Th8/левое ребро 7)
2012/11/05 Аферез
2012/11/05 CTF (20,0×10*8) с антителом против TNF 50,0 мг (левое 5/правое L5/Th3/Th4)
2012/11/19 RI: CR (левое ребро 7)
SD (другие обрабатываемые места локализации)
2012/12/03 DC с антителом против TNF 50,0 мг в каждое место локализации (правое ребро 1/грудина)
2013/01/08 DC с антителом против TNF 50,0 мг в каждое место локализации (Th3)
2013/02/05 DC с антителом против TNF 50,0 мг в каждое место локализации (левое L5/правое L5)

Таблица 2
Протокол HITV и CTL-II (внутриопухолевая)
Рак предстательной железы (Rec.), множественные костные метастазы (№0611, 74 года, мужской пол)
2006/05 Рак предстательной железы (III стадия)
Брахитерапия
2011/05/12 Сцинтиграфия костей выявила много костных метастазов
2011/05/23 Аферез
2011/06/03 Инъекция DC в 15 костных метастазов
2011/06/08 IMRT: 48,5 Гр/10 фрак./14 сут
2011/06/24 Инъекция DC
2011/07/22 Аферез
2011/08/05 RI: PR (все обрабатываемые места локализации)
2011/09/09 Начинали еженедельную CTL
2012/04/16 RI: всего SD-PR, новый очаг в крестцовой кости и th8
2012/05/30 Аферез
2012/05/30 CTL (30,0×108) с антителом против TNF 37,5 мг в th7, левую подвздошная кость, крестцовая кость
2013/01/24 RI: много костных метастазов
2013/02/08 DC с антителом против TNF 25,0 мг в каждое место локализации: th10, th12, L1, L3, правую подвздошную кость, левую подвздошную кость, левое ребро 6 1 2, левое ребро 10 и правую бедренную кость
2013/02/19 PET-CT: PR~CR, новый очаг C4

Таблица 3
Протокол HITV и CTL-II (внутриопухолевая)
Рак молочной железы (IV стадия), метастаз в лимфоузле в подмышечной впадине (№0675, 51 год, женский пол)
2011/10/05 PET-CT: левая молочная железа поглощение FDG (отказ от операции)
2011/10/20 Биопсия: инвазивная протоковая карцинома
2011/10/27 Аферез
2011/12/01 Инъекция DC AT (6 раз)
2012/01/07 Лимфоузел в левой подмышечной впадине (отказ от операции)
2012/01/19 Аферез
2012/01/27 Инъекция DC в левую молочную железу (4 места локализации) и лимфоузел в левой подмышечной области (3 места локализации)
2012/02/06 IMRT: 48,32 Гр/20 фрак./30 сут (левая молочная железа полностью)
60,00 Гр/30 фрак./30 сут (первичная+лимфоузел в левой подмышечной области)
2012/03/09 Инъекция DC в левую молочную железу (2 места локализации) и лимфоузел в левой подмышечной области (4 места локализации)
2012/04/20 PET-CT: CR
2012/07/20 PET-CT: CR
2012/10/27 PET-CT: CR, но новый очаг (левое ребро 2)
2012/11/09 Инъекция DC в левое ребро 2 с антителом против TNF 25,0 мг
2012/11/26 Инъекция DC с антителом против TNF 25,0 мг
2012/12/27 PET-CT: PR
2013/02/14 PET-CT: CR

Таблица 4
Протокол HITV и CTL-II (внутриопухолевая)
Рак легких (II стадия), метастаз в головном мозге (№0701, 79 лет, женский пол)
2011/08 Увеличение опухоли: операцию не проводят вследствие ее слабого состояния
2011/12/8 PET-CT: правое легкое первичный очаг S3, правое ребро 2, 3, лимфоузел правого корня легкого
2011/12/28 Аферез
2012/01/16 IMRT: 24,5 Гр/5 фрак./5 сут в первичный очаг S3 40,0 Гр/5 фрак./5 сут в ребра
2012/01/24 Инъекция DC в правый первичный очаг (3 места локализации), лимфоузел правого корня легкого, правое легкое 2 и 3
2012/03/06 PET-CT: PR (правый первичный очаг), CR (правый корень легкого и правые ребра)
Новый очаг: правое легкое S5, левое легкое S4 и лимфоузел левого корня легкого
2012/03/14 Аферез
2012/04/26 CTL (40,0×10*8) с антителом против TNF 12,5 мг (правый первичный очаг S3, правая грудная полость)
2012/05/24 CTL (10,0×10*8) с антителом против TNF 25,0 мг (лимфоузел левого корня легкого)
2012/06/06 PET-CT: PR (первичный очаг S3), CR (левый корень легкого) и новый очаг в левом ребре 6
2012/06/13 CTL (10,0×10*8) с антителом против TNF 25,0 мг (левое ребро 6)
2012/09/03 PET-CT: PR (первичный очаг S3), CR (левое ребро 6,) новые очаги отсутствуют
2012/09/27 CTL (10,0×10*8) с антителом против TNF 25,0 мг (правый первичный очаг S3, лимфоузел правого корня легкого)
2012/12/03 PET-CT: оба PR, новый очаг в левом ребре 3
2013/01/22 Инъекция DC с антителом против TNF 25,0 мг в левое ребро 3
2013/03/04 PET-CT: CR

1. Способ регрессии, снижения или элиминации опухолевых клеток в опухолевой ткани пациента, включающий:

(a) сбор моноцитарных клеток от пациента;

(b) культивирование указанных моноцитарных клеток с получением незрелых дендритных клеток;

(c) введение внутрь опухоли терапевтически эффективного количества незрелых дендритных клеток указанному пациенту;

(d) после стадии (c), сбор цитотоксических T-лимфоцитов и/или NKT-клеток от указанного пациента; введение внутрь опухоли терапевтически эффективного количества цитотоксических T-лимфоцитов и/или NKT-клеток указанному пациенту;

(e) после стадии (d), повторное введение внутрь опухоли терапевтически эффективного количества указанных цитотоксических T-лимфоцитов и/или NKT-клеток от указанного пациента; и

(f) введение внутрь опухоли терапевтически эффективного количества антитела против TNF и/или антитела против IL-10 указанному пациенту.

2. Способ по п. 1, где культивируют собираемые цитотоксические T-лимфоциты и/или NKT-клетки.

3. Способ по п. 2, где культивирование проводят в среде, содержащей IL-2, CD3 и их смеси.

4. Способ по п. 1, где введение культивируемых цитотоксических T-лимфоцитов и/или NKT-клеток проводят в сочетании с противовоспалительным средством.

5. Способ по п. 4, где культивируемые цитотоксические T-лимфоциты и/или NKT-клетки объединяют с противовоспалительным средством с получением композиции.

6. Способ по п. 1, где пациент является человеком.

7. Способ по п. 1, где введение внутрь опухоли антитела против TNF и/или антитела против IL-10 проводят до повторного введения внутрь опухоли цитотоксических T-лимфоцитов и/или NKT-клеток.

8. Способ по п. 1, где введение внутрь опухоли антитела против TNF и/или антитела против IL-10 проводят после повторного введения внутрь опухоли цитотоксических T-лимфоцитов и/или NKT-клеток.

9. Способ по п. 1, где введение внутрь опухоли антитела против TNF и/или антитела против IL-10 проводят одновременно с повторным введением внутрь опухоли цитотоксических T-лимфоцитов и/или NKT-клеток.

10. Способ по п. 1, где цитотоксический T-лимфоцит представляет собой популяцию T-клеток CD8+NK.

11. Способ по п. 1, где лучевую терапию исключают.

12. Способ по п. 1, где пациенту проводят терапию, выбранную из группы, состоящей из химиотерапии, лучевой терапии, терапии антителом и их сочетаний.

13. Способ регрессии, снижения или элиминации опухолевых клеток в опухолевой ткани пациента, включающий:

(a) введение внутрь опухоли терапевтически эффективного количества незрелых дендритных клеток в опухолевую ткань;

(b) сбор цитотоксических T-лимфоцитов и/или NKT-клеток от указанного пациента;

(c) культивирование указанных цитотоксических T-лимфоцитов и/или NKT-клеток, собранных от указанного пациента, для получения культивированных цитотоксических T-лимфоцитов и/или NKT-клеток;

(d) объединение указанных культивированных цитотоксических T-лимфоцитов и/или NKT-клеток с терапевтически эффективным количеством антител против TNF и/или антител против IL-10 для получения смеси; и

(e) введение внутрь опухоли терапевтически эффективного количества указанной смеси указанному пациенту;

где стадию (а) проводят в качестве необходимого условия перед стадиями (b), (c), (d) и (e).

14. Способ по п. 13, дополнительно включающий:

сбор моноцитарных клеток от пациента и

культивирование моноцитарных клеток с получением незрелых дендритных клеток.

15. Способ по п. 13, где терапевтически эффективное количество цитотоксических T-лимфоцитов и/или NKT-клеток индуцируют введением незрелых дендритных клеток.

16. Способ регрессии, снижения или элиминации опухолевых клеток в опухолевой ткани пациента, включающий:

(a) сбор моноцитарных клеток от пациента;

(b) культивирование моноцитарных клеток с получением незрелых дендритных клеток;

(c) введение внутрь опухоли терапевтически эффективного количества незрелых дендритных клеток пациенту;

(d) сбор цитотоксических T-лимфоцитов и/или NKT-клеток от пациента;

(e) культивирование цитотоксических T-лимфоцитов и/или NKT-клеток с получением культивированных цитотоксических T-лимфоцитов и/или NKT-клеток;

(f) повторное введение внутрь опухоли терапевтически эффективного количества цитотоксических T-лимфоцитов и/или NKT-клеток пациенту; и

(g) введение внутрь опухоли терапевтически эффективного количества антитела против TNF и/или антитела против IL-10 пациенту,

где стадии (d), (e) и (f) последовательно проводят после проведения стадий (a), (b) и (c).

17. Способ по п. 16, где стадии (f) и (g) проводят одновременно.



 

Похожие патенты:

Изобретение относится к области биотехнологии. Изобретение представляет собой способ оценки антимикобактериального действия противотуберкулезных препаратов с использованием биологического материала пациентов, больных туберкулезом легких, включающий забор биологического материала, культивирование в питательной среде, ее замену на свежую питательную среду в контрольной культуре и на такую же питательную среду в опытной культуре, дополнительно содержащую противотуберкулезный препарат, сопоставление роста микобактерий туберкулеза в контрольной и опытной культурах, где в качестве биологического материала используют образцы ткани легкого из операционного материала; получают из него ex vivo культуру альвеолярных макрофагов; культивируют ее в течение 1 суток в питательной среде; заменяют питательную среду на свежую в контрольной культуре клеток и на такую же среду с добавлением противотуберкулезного препарата в опытных культурах клеток, различающихся концентрациями одного и того же противотуберкулезного препарата; продолжают культивирование в течение трех дней; фиксируют клетки на покровных стеклах; окрашивают по методу Циля-Нильсена; проводят цитологический анализ на наличие признаков цитотоксического воздействия противотуберкулезного препарата на альвеолярные макрофаги; определяют доли альвеолярных макрофагов, содержащих микобактерии туберкулеза, от общего числа альвеолярных макрофагов в контрольной и опытной культурах клеток; при отсутствии признаков цитотоксического воздействия противотуберкулезного препарата на альвеолярные макрофаги в опытной культуре, отсутствии микобактерий в альвеолярных макрофагах или снижении доли альвеолярных макрофагов, содержащих микобактерии туберкулеза, в 2 и более раз в опытной культуре относительно контрольной делают положительное заключение об антимикобактериальном действии противотуберкулезного препарата и его минимальной концентрации, достаточной для достижения антимикобактериального эффекта, и при проведении цитологического анализа на наличие признаков цитотоксического воздействия противотуберкулезного препарата на альвеолярные макрофаги учитывают наличие ядра с признаками конденсации хроматина, и/или отсутствие целостности плазматической мембраны, и/или образование апоптозных телец, и/или разрушение клеток до отдельных участков цитоплазмы, и/или появление клеток без ядер; при наличии по меньшей мере одного из них делают заключение о наличии признаков цитотоксического воздействия.

Изобретение относится к медицине, а именно к способу выделения хондроцитов. Способ выделения хондроцитов включает забор материала, срезание хрящевой ткани с кости, нарезание хрящевой ткани на фрагменты, далее полученные фрагменты хрящевой ткани помещают в фильтрующее устройство, инкубируют в растворе трипсина, полученную суспензию хондроцитов центрифугируют, супернатант отбрасывают, а образовавшийся осадок хондроцитов промывают раствором фосфатного буфера PBS 2 раза, осуществляют отбор первой фракции хондроцитов, затем нелизированные фрагменты хрящевой ткани, находящиеся в фильтрующем устройстве, инкубируют в растворе коллагеназы II типа, полученный осадок хондроцитов промывают раствором фосфатного буфера PBS 2 раза, осуществляют отбор второй фракции хондроцитов, затем первую и вторую фракцию хондроцитов объединяют, далее нелизированные фрагменты хрящевой ткани удаляют из фильтрующего устройства и инкубируют в культуральной среде DMEM/F12, содержащей FBS, пенициллин, стрептомицин, амфотерицин В, затем вышеописанную культуральную среду отбрасывают и добавляют раствор коллагеназы II типа, полученный после осаждения хондроцитов центрифугированием на втором этапе, инкубируют, полученную суспензию хондроцитов центрифугируют, образовавшийся супернатант, содержащий коллагеназу II типа, отбрасывают, а полученный осадок хондроцитов промывают раствором фосфатного буфера PBS 2 раза, осуществляют отбор третьей фракции хондроцитов и соединяют ее с первой и второй фракциями хондроцитов, затем полученную суспензию хондроцитов высевают на культуральный пластик для адгезионных культур в среде DMEM/F12 содержащей FBS, пенициллин, стрептомицин, амфотерицин В, получая первичную клеточную популяцию нулевого пассажа.

Изобретение относится к области биотехнологии, конкретно к клеточной нейротрансплантологии, и может быть использовано в медицине для лечения травм спинного мозга.

Группа изобретений относится к области биотехнологии. Предложена заготовка микрофлюидного чипа и микрофлюидный чип для культивирования и/или исследования клеток.

Изобретение относится к области биотехнологии, в частности к получению мультипотентных мезенхимальных стромальных клеток, культивированных в виде сфероидов и индуцированных в ангиогенном направлении.

Изобретение относится к области клеточной биологии и биотехнологии, а именно к получению инсулина. Способ включает обеспечение контакта индуцированных плюрипотентных стволовых клеток человека, из которых исключены эмбриональные стволовые клетки человека, полученные путем разрушения эмбриона, in vitro с первой средой для выращивания клеток, содержащей агент, активирующий член семейства рецепторов TGFβ, выбранный из группы, включающей Активин А, Активин В, Nodal, GDF-8, GDF-9, GDF-10, GDF-11 и костный морфогенетический белок (BMP).
Изобретение относится к области биотехнологии. Изобретение представляет собой применение клеточной линии меланомы кожи человека 388mel, экспрессирующей раково-тестикулярные антигены, хранящейся в специализированной коллекции культур клеток позвоночных Российской коллекции клеточных культур под регистрационным номером РККК (П) 728Д, для приготовления биомедицинских клеточных продуктов и тестирования противоопухолевых био- и химиопрепаратов.

Изобретение относится к области клеточной биологии, а именно к дифференцировке популяции клеток заднего сегмента передней кишки в популяцию клеток-предшественников эндокринных клеток поджелудочной железы.

Изобретение относится к области биотехнологии, в частности к способам дифференцировки плюрипотентных стволовых клеток, представляющих собой клетки линии эмбриональных стволовых клеток человека Н1, клетки линии эмбриональных стволовых клеток человека Н7, клетки линии эмбриональных стволовых клеток человека Н9, клетки линии эмбриональных стволовых клеток человека SA002 или клетки линии мутантных эмбриональных стволовых клеток человека BG01v, в клетки, экспрессирующие маркеры, характерные для линии сформированной эндодермы.
Изобретение относится к области биотехнологии. Изобретение представляет собой применение клеточной линии светлоклеточного рака почки человека RC291C, экспрессирующей раково-тестикулярные антигены, хранящейся в специализированной коллекции культур клеток позвоночных Российской коллекции клеточных культур под регистрационным номером РККК (П) 724Д, для приготовления биомедицинских клеточных продуктов и тестирования противоопухолевых био- и химиопрепаратов.

Изобретение относится к группе конкретных соединений, указанных в формуле изобретения, или их фармацевтически приемлемым солям. Также предложены соединение формулы IId или его фармацевтически приемлемая соль, фармацевтическая композиция, применение соединений и способ необратимого ингибирования тирозинкиназы Брутона.

Изобретение относится к области медицины и биологии и представляет собой новое средство, обладающее апоптоз-ингибирующей (антиапоптотической) активностью. Средство может быть использовано для коррекции состояний, связанных с повышением уровня апоптоза клеток (окислительный стресс, ишемические повреждения), а также в качестве ингибитора апоптоза в культурах клеток in vitro.

Изобретение относится к соединению, имеющему формулу (I) ,включая фармацевтически приемлемые соли указанного соединения. В формуле (I): М выбран из группы, состоящей из железа, рутения и осмия, X выбран из группы, состоящей из Cl-, PF6-, Br-, BF4-, ClO4-, CF3SO3- и SO4-2, n=0, 1, 2, 3, 4 или 5, у=1, 2 или 3, z=0, 1 или 2, Lig в каждом случае независимо выбран из группы, состоящей из R1 выбран из группы, состоящей из и u представляет собой целое число, каждый из R2a, R2b, R2c, R2d, R2e и R2f представляет собой водород, R3a, R3b, R3c, R3d, R3e, R3f, R3g, R3h и R3i в каждом случае каждый независимо выбран из группы, состоящей из водорода и С1-6 алкила, R4a R4b и R4c в каждом случае представляет собой водород; или R4a и R4b в каждом случае, когда они присутствуют на кольце тиофена, вместе с атомом, с которым они связаны, образуют необязательно замещенное кольцо, содержащее 6 атомов кольца, включая два атома кислорода.

Изобретение относится к соединениям формулы I, или его стереомерам, таутомерам или фармацевтически приемлемым солям, где кольцо В и фрагмент NH-C(=X)-NH находятся в транс-конфигурации, и R1, R2, Ra, Rb, Rc, Rd, X, Кольцо В и Кольцо С определены в формуле изобретения.

Изобретение относится к новому соединению формулы (Ia) или его фармацевтически приемлемой соли. Соединения обладают свойствами ингибитора активности тирозинкиназы Брутона (Btk или BTK) или Янус-киназы (JAK), и могут найти применение для лечения рака, выбранного из саркомы, плоскоклеточного рака, фибросаркомы, рака шейки матки, рака желудка, рака кожи, лейкоза, лимфомы, рака легких, немелкоклеточного рака легкого, рака толстой кишки, рака ЦНС, меланомы, рака яичников, рака почки, рака предстательной железы, рака молочной железы, рака печени, рака головы и шеи и рака поджелудочной железы.

Изобретение относится к олигонуклеотиду, который может быть использован в медицине, включающему от двух до четырех последовательностей, каждая из которых представлена формулой 5'-X1X2CpGX3X4-3', имеющий длину, составляющую от 17 до 32 нуклеотидов, где CpG является неметилированным без модифицированных фосфатных остовов, где олигонуклеотид включает модифицированный фосфатный остов, включающий тиофосфат стереоизомера Sp-типа на сайте, за исключением частей, представленных формулой 5'-X1X2CpGX3X4-3', где Х1Х2 представляет собой один из АА, AT, GA или GT без модифицированных фосфатных остовов, и где Х3Х4 представляет собой ТТ, AT, АС, ТС или CG без модифицированных фосфатных остовов, и олигонуклеотид включает любую одну из последовательностей, где * означает Sp стереоизомер: Предложен новый CpG олигонуклеотид, обладающий высокой устойчивостью и уменьшенной цитотоксичностью, для выработки интерферона-α.

Изобретение относится к твердой форме соединения формулы I-2, где форма выбрана из группы, состоящей из кристаллического свободного основания соединения I-2, характеризующегося пиками, выраженными в 2-тета ± 0,2 при приблизительно 14,2, 25,6, 18,1, 22,0 и 11,1 градуса на изображении порошковой рентгеновской дифракции, полученном при использовании альфа-излучения Cu K, или кристаллического соединения I-2 • HCl, характеризующегося пиками, выраженными в 2-тета ± 0,2 при приблизительно 13,5, 28,8, 15,0, 18,8 и 15,4 градуса на изображении порошковой рентгеновской дифракции, полученном при использовании альфа-излучения Cu K.

Группа изобретений относится к медицине и касается композиции для лечения рака поджелудочной железы у пациента, где композиция содержит в качестве активного ингредиента полипептид, состоящий из SEQ ID NO: 1.

Изобретение относится к медицине, а именно к онкологии, и может быть использовано при лечении эпителиоидной саркомы и злокачественной рабдоидной опухоли. Способ включает введение нуждающемуся в этом субъекту терапевтически эффективного количества ингибитора EZH2.

Группа изобретений относится к медицине, а именно к онкологии, и может быть использована для лечения рака. Фармацевтическая комбинация, способ, применение и фармацевтическая композиция по изобретению предназначены для лечения рака и предусматривают введение (2-гидроксиэтокси)-амид 6-(4-бром-2-фторфениламино)-7-фтор-3-метил-3Н-бензоимидазол-5-карбоновой кислоты (соединение А) и антитела А, содержащего аминокислотные последовательности тяжелой и легкой цепей, представленные в SEQ ID NO: 1 и SEQ ID NO: 2, соответственно.

Изобретение относится к медицине, а именно к иммунологии, и может быть использовано для подавления воспалительной реакции в тканях пародонта в эксперименте. Для этого в десну вводят макрофаги, поляризованные in vitro в регуляторный фенотип М2, при этом суспензия содержит 250 тыс.

Группа изобретений относится к медицине, а именно к онкологии, и может быть использована для лечения злокачественных опухолей. Способы по изобретению включают получение и введение внутрь опухоли незрелых дендритных клеток, после этого введение внутрь опухоли цитотоксических T-лимфоцитов иили NKT-клеток и антитела против TNF иили антитела против IL-10. Использование изобретений позволяет добиться регрессии, снижения или элиминации опухолевых клеток в опухолевой ткани пациентов. 3 н. и 14 з.п. ф-лы, 4 табл., 4 ил., 4 пр.

Наверх