Способ профилактики желудочно-кишечных болезней молодняка крупного рогатого скота
Владельцы патента RU 2722161:
Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Сибирский федеральный научный центр агробиотехнологий Российской академии наук (СФНЦА РАН) (RU)
Изобретение относится к области ветеринарии, в частности к способам профилактики желудочно-кишечных болезней телят, вызванных условно-патогенной и патогенной микрофлорой, и может быть использовано для повышения естественной резистентности телят из группы риска для снижения заболеваемости их желудочно-кишечными болезнями и сохранности молодняка крупного рогатого скота в целом. Предложен способ профилактики желудочно-кишечных болезней молодняка крупного рогатого скота. Способ включает применение биологически активного препарата, согласно изобретению, в качестве препарата используют биотинилированное производное окисленного декстрана, представляющее собой конъюгат, полученный реакцией гидрозида биотина и окисленного декстрана с молекулярной массой 40-70 кДа с образованием азометиновой связи в дозе 0,06 мг/кг живого веса теленка первых дней жизни, внутримышечно, каждые 72 часа, 5 инъекций. Технический результат - сокращение сроков болезни животных и минимизация потерь их дальнейшей продуктивности, повышение естественной резистентности и сопротивляемости организма новорожденных телят. 5 табл., 4 пр.
Изобретение относится к области ветеринарии, в частности к способам повышения клеточного иммунитета и профилактики желудочно-кишечных болезней телят вызванных условно-патогенной и патогенной микрофлорой и может быть использовано для повышения естественной резистентности телят из группы риска для снижения заболеваемости их желудочно-кишечными болезнями и сохранности молодняка крупного рогатого скота в целом.
Проблема желудочно-кишечных болезней телят и их профилактика всегда остается актуальной темой в ветеринарии. В этиологии кишечной патологии у телят в молозивный период большую роль играют не только патогенные, но и условно-патогенные бактерии.
В связи с этим для профилактики желудочно-кишечных болезней телят применяют средства специфической защиты.
Известен способ профилактики желудочно-кишечных болезней у телят с применением препарата «Гидрогемол», основными действующими компонентами которого являются гидролизат крови убойных животных, янтарная, бензойная и молочная кислоты. Сущность способа заключается в том, что животным с рождения выпаивают с молозивом данный препарат в дозе 50 мл на животное два раза в сутки, 5 дней (А.Я. Арушанян, В.И. Терехов. Профилактическая эффективность Гидрогемола при острых кишечных инфекциях у новорожденных телят // Научный журнал КубГАУ. - №86(02). - 2013. - С. 1-10).
Недостатком этого способа является трудоемкость изготовления препарата.
Так же известен способ лечения и профилактики желудочно-кишечных болезней телят путем внутримышечного введения 0,01% раствора тимогена один раз в сутки в дозе 1,0 мл/гол, в течение 1-3 дней с профилактической целью (Инструкцию по применению препарата "Тимоген", утвержденной Главным управлением ветеринарии Госагропрома СССР. 07.06.89 г.).
Недостатком этого способа является то, что при многократном применении данного препарат могут возникнуть аутоиммунные реакции организма, негативное влияние на тимус телят, что вызывает его повреждения.
Наиболее близким решением, принятым за прототип, является способ применения композиции, обладающей иммуностимулирующим действием при сублингвальном применении (П РФ №2647455 от 31.05.2017, МПК А61К 9/50, A61K 31/7105, А61К 31/732). Сущность способа заключается в применении композиции, обладающей иммуностимулирующим действием для сублингвального применения, состоящую из двуспиральной РНК бактериофага Ф6, одноцепочечной дрожжевой РНК, пектина, лактата кальция, декстрана, хлорида натрия и воды очищенной. Данное изобретение обеспечивает стимуляцию клеточного звена иммунитета.
Однако данная композиция предполагает использование только в медицине, так как разработана для индивидуального применения людям.
Задача изобретения - расширение арсенала способов профилактики желудочно-кишечных болезней молодняка крупного рогатого скота, основанном на введении биологически активного препарата, в качестве последнего используют биотинилированное производное окисленного декстрана.
Поставленная задача решается тем, что в способе профилактики желудочно-кишечных болезней молодняка крупного рогатого скота, включающем применение биологически активного препарата, согласно изобретению, в качестве препарата используют биотинилированное производное окисленного декстрана, представляющее собой конъюгат, полученный реакцией гидрозида биотина и окисленного декстрана с молекулярной массой 40-70 кДа с образованием азометиновой связи, раствор биотинилированного производного окисленного декстрана, в дозе 0,06 мг/кг живого веса теленка первых дней жизни, внутримышечно, каждые 72 часа, 5 инъекций.
Способ осуществляется следующим образом.
Способ получения биологически активного препарата биотинилированного производного окисленного декстрана (П РФ №2537246 от 27.12.2014).
Сухой окисленный декстран с молекулярной массой 40-70 кДа предварительно растворяют в трис-ацетатном буферном растворе с рН 5,0-5,5 до концентрации 5%. Для запуска реакции в реакционную смесь добавляют гидразид биотина в качестве активного реагента в весовом соотношении с декстраном 1:(20-25) в пересчете на массу сухого вещества. Реакцию проводят при температуре 80-90°С в течение 30-60 минут. Гидразид биотина взаимодействует с карбонильными группами окисленного декстрана с образованием азометиновой связи -C=N-.
Полученный биологически активный препарат биотинилированного производного окисленного декстрана представляет собой конъюгат, в котором гидразид биотина и окисленный декстран связаны ковалентными связями. Именно наличие азометиновой связи в конъюгате гидразида биотина с окисленным декстраном обусловливает его специфические биологические свойства имитировать (моделировать) конъюгаты с лекарственными препаратами, имеющими в своей структуре первичные аминогруппы. Далее по тексту препарат обозначается «БОД».
Изобретение иллюстрируется следующими примерами.
Пример 1. Определение дозировки препарата БОД телятам.
Для определения дозировки были сформированы по принципу аналогов 4 группы новорожденных телят: три опытных и одна контрольная (n=15). Животным опытной группы внутримышечно вводился препарат БОД по схеме, представленной в таблице 1.
На 14 сутки опыта у всех животных произвели взятие проб крови, для изучения морфологического состава и показателей клеточного звена иммунитета.
Результаты влияния препарата БОД на морфологический состав клеток крови отвечающих за клеточный иммунитет представлены в таблице 2.
Из таблицы 2 видно, что максимальное увеличение числа клеток ответственных за клеточный иммунитет отмечалось во 2 и 3 группах где доза БОД составила 0,06 мг/кг и 0,1 мг/кг. В первой опытной группе количество лейкоцитов превышает показатели контроля на 4,81%, в то время как во второй и третьей опытных группах данный показатель составляет 19,6% и 20% соответственно.
Увеличение числа фагоцитирующих клеток отмечено в группах получавших БОД в дозах 0,06 мг/кг и 0,1 мг/кг (2 и 3 опытные группы): количество моноцитов во второй опытной группе увеличилось на 75%, а количество гранулоцитов в третьей опытной группе превышает аналогичный показатель контроля на 23,42% по сравнению с контрольной группой, что значительно меньше, чем в первой опытной группе.
Аналогичная картина прослеживается и в отношении количества лимфоцитов. Во второй опытной группе данный показатель превышает показатели контроля на 33,09%, в третьей - на 33,7%. Показатели первой опытной группы существенно не отличаются от контрольных значений.
Проведенные исследования определили эффективную дозировку БОД. Максимальное увеличение числа клеток отвечающих за клеточных иммунитет наблюдалось в группах мышей, препарат которым вводился в дозах 0,06 мг/кг и 0,1 мг/кг. Применение дозировки препарата 0,1 мг/кг не целесообразно, так как это ведет к перерасходу препарата при таких же показателях, как и при дозе 0,06 мг/кг. При дозе 0,02 мг/кг отсутствуют заметные эффекты от его применения.
Пример 2. Изучение влияния препарата БОД на активность иммунного фагоцитоза у телят.
Для оценки активности опсонизации проводили опсонофагоцитарную реакцию (ОФР) по стандартной методике. В качестве тестового микроорганизма использовали суточную культуру Staphylococcus albus. Результаты представлены в таблице 3.
Как видно из представленных данных применение БОД в дозах 0,06 мг/кг и 0,1 мг/кг повышают показатели фагоцитарного индекса крови животных опытной группы на 4,76% и 6,04% соответственно. Показатели 1 опытной группы значительно не отличаются от контроля.
Так же во второй и третьей опытных группах отмечено увеличение фагоцитарного числа на 18,2% и 21,3%, а показатель фагоцитарной активности - на 8,82% и 11,4% соответственно, по сравнению с контрольной группой.
Таким образом, максимально хорошие результаты наблюдались в группах, получавших БОД внутримышечно в дозах 0,06 мг/кг и 0,1 мг/кг. Показатели второй и третьей опытных групп значительно не отличаются друг от друга, и применять БОД в большей дозе (0,1 мг/кг) не целесообразно.
Пример 3. Изучение профилактического действия БОД при желудочно-кишечных заболеваниях телят.
Изучение профилактического действия БОД проводилось на новорожденных телятах породы «Сибирячка» в возрасте 1 суток. Было сформировано 3 группы животных (n=15) по принципу аналогов. Для проведения опыта животным, разделенным на группы в соответствии с планом, БОД вводился по следующей схеме:
- группа 1: внутримышечное введение БОД в дозе 0,06 мг/кг с интервалом 3 суток, 5 инъекций;
- группа 2: внутримышечное введение БОД в дозе 0,06 мг/кг с интервалом 5 суток, 5 инъекций;
- группа 3: контрольная.
Всем животным независимо от присвоенной группы в ходе эксперимента было назначено применение антибиотика «Дорин-Р» в дозировке согласно инструкции по применению.
Перед началом опыта в хозяйстве было зарегистрировано 3 павших теленка. От всех павших животных для бактериологического исследования были отобраны образцы патологического материала (внутренние органы). В результате бактериологического и биохимического исследований был выделен патогенный изолят E. colli.
На всем протяжении опыта ежедневно проводили клинический осмотр животных, определяли частоту дефекации и характер фекалий. При возникновении заболевания фиксировали клинические признаки.
Симптомы, сопровождающие заболевание, существенно отличались у животных в зависимости от группы. В первый день заболевания у животных из 1-й и 2-й опытных групп наблюдались наименее выраженные клинические признаки колибактериоза по сравнению с группой контроля. У 30% телят первой группы и 60% телят второй опытной группы отсутствовал аппетит в начале заболевания, по сравнению с проявлением анорексии у 80% контрольных животных.
Таким образом, профилактическое применение БОД внутримышечно в дозе 0,06 мг/кг телятам с интервалом 3 суток, 5 инъекций наиболее положительно сказывались на клиническом состоянии животных.
На следующий день после последней инъекции у всех животных производили взятие проб крови для морфологического исследования. Результаты представлены в табл. 4.
Из представленных данных видно, что максимальное число лимфоцитов и моноцитов наблюдали в контрольной группе. У телят отмечали лейкоцитоз, моноцитоз, а также явления гранулоцитоза. Это говорит о том, что в организме происходят воспалительные процессы и наличие инфекционного агента.
Во второй опытной группе отмечено уменьшение уровня лимфоцитов, что главным образом объясняет большую сопротивляемость организма в связи с введением препарата в первые сутки жизни телятам данной группы. В первой опытной группе все показатели были в пределах физиологической нормы, что указывает на отсутствие воспалительных процессов в организме и выздоровление животного.
Пример 4. Определение продолжительности заболевания
Наименьшую продолжительность заболевания отмечали у телят первой опытной группы, которым БОД вводили внутримышечно в дозе 0,06 мг/кг живого веса теленка с интервалом 3 суток. Телята из данной группы болели на 15% меньше, чем в контрольной группе (табл. 5).
Продолжительность заболевания в контрольной группе на 15% больше, чем в первой опытной группе и на 10% больше чем во второй опытной группе.
Таким образом, применение БОД телятам в дозе 0,06 мг/кг внутримышечно с 1 раз в 3 суток, 5 инъекций, начиная с первого дня жизни, позволяет профилактировать заболевания желудочно-кишечного тракта у новорожденных животных.
Эффективность профилактического действия проявляется в сокращении сроков терапии, таким образом, данная схема позволяет ускорить выздоровление животных на 15% быстрее по сравнению с контрольной группой.
Таким образом, БОД является эффективным и результативным средством профилактики болезней желудочно-кишечного тракта у новорожденных телят, позволяющий сократить сроки перебеливания животных и минимизировать потери их дальнейшей продуктивности, повышает естественную резистентность и сопротивляемость организма новорожденных телят, помогает легче переносить и в среднем на 48% быстрее справляться с заболеванием.
Способ профилактики желудочно-кишечных болезней молодняка крупного рогатого скота, включающий применение биологически активного препарата, отличающийся тем, что в качестве препарата используют биотинилированное производное окисленного декстрана, представляющее собой конъюгат, полученный реакцией гидрозида биотина и окисленного декстрана с молекулярной массой 40-70 кДа с образованием азометиновой связи, раствор биотинилированного производного окисленного декстрана, в дозе 0,06 мг/кг живого веса теленка первых дней жизни, внутримышечно, каждые 72 часа, 5 инъекций.
