Плоская камера для культивирования клетоки тканей
О П И СА Н И Е
ИЗО6РЕТЕН ИЯ
К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ
298644
Союз Советских
Социалистических
Республик
Зависимое от авт. свидетельства ¹
Заявлено 29.Х11.1969 (Pk 1390067/31-16) с присоединением заявки №
Приоритет
Опубликовано 16,!11.1971. Бюллетень № 11
Дата опубликования описания 29.IV.1971
МПК С 12k 1110
Комитет по делам иаобретениЧ и открытиЧ при Совете Министров
СССР
УДК 578 683 576 347 (088.8) Авторы изобретения
С. С. Гречанлийский, С. А. Кузнецов и И. И. Дашитр—
Институт зоологии АН Молдавской ССР йлТ .;
Заявитель
ПЛОСКАЯ КАМЕРА ДЛЯ КУЛЬТИВИРОВАНИЯ КЛЕТОК
И ТКАНЕЙ
Изобретение относится е оборудованию для культивирования клеток и тканей, а именно к плоским камерам для культивирования клеток и тканей.
Известны плоские камеры для культивирования клеток и тканей, содержащие основание, охватывающее его поворотное кольцо и покровные стекла, между которыми имеются прокладки. Недостатком известных камер является то, что эксплантаты, выращиваемые на общей поверхности, нельзя извлекать из камеры отдельно от других, а наличие большого числа прокладок усложняет сборку и разборку камеры.
С целью независимой установки и удаления покровных стекол с эксплантатами в предлагаемой камере внутри основания расположены сообщающиеся между собой радиальные рабочие камеры, а на наружной боковой поверхности поворотного кольца расположена горизонтальная прорезь по размерам рабочей камеры, что также позволяет устанавливать и извлекать из нее отдельные эксплантаты независимо друг от друга на любой стадии культивирования.
На фиг. 1 показана предлагаемая плоская камера в поперечном сечении по диаметру; на фиг. 2 — то же, вид в плане.
Плоская камера содержит поворотное кольцо 1 с конической внутренней поверхностью и
2 горизонтальной прорезью 2 и отверстиями 3.
Кольцо охватывает основание 4 камеры, снабженное штифтами 5. Внутри камеры расположены рабочие камеры б, связанные между собой кольцевой канавкой 7 и отверстиями 8.
Рабочие камеры, над,которыми наклеены полоски целлофана 9, снабжены пазами 10 для покровных стекол. К основанию камеры приклеены диск 11 и кольцо 12.
10 Перед использованием камеры конические поверхности кольца и основание 4 камеры смазываются глицерином, после чего на основание камеры плотно надевают кольцо, чем достигается герметизация рабочих камер 6, 15 доступ к которым возможен только со стороны боковой поверхности основания камеры.
Далее поворотом основания камеры с помощью штифтов 5 относительно кольца совмещают одну из рабочих камер б с горизонталь20 ной прорезью в кольце, устанавливают в паз
10 покровное стекло с прикрепленным к нему эксплантатом. Аналогичным образом покровные стекла устанавливают во все рабочие камеры, последовательно совмещая каждую
25 из них с горизонтальной прорезью 2. В дальнейшим поворотом основания 4 камеры горизонтальную прорезь 2 устанавливают таким образом, чтобы она не совпадала с рабочими камерами б и была наглухо перекрыта
30 конической поверхностью основания 4 каме298644 ры. При этом необходимо следить, чтобы рабочие полости совпадали с отверстиями 8, через которые выходит воздух при заполнении камеры, для чего необходимо подключить штуцер 18 к магистрали с питательной средой. Высота кольца выбирается такой, чтобы при наклоне камеры на 10 — 15 жидкость из нее не вытекала через отверстия. Для герметизации рабочих камер после их заполнения необходимо поворотом основания 4 камеры относительно кольца вывести отверстия за пределы рабочих;камер, следя за тем, чтобы горизонтальная прорезь в кольце по-прежнему оставалась наглухо перекрытой конической поверхностью основания камеры. После этого камеру помещают в термостат с заданной температурой для дальнейшего культивирования. Для смены среды необходимо совместить отверстия с рабочими камерами б, а штуцер 18 подключить к магистрали с питательной стедой. Поступающая под давлением из магистрали среда выталкивает использованную среду через отверстия 8 и заполняет рабочие камеры. Герметизации камеры после смены среды осуществляется вышеописанным способом. Для извлечения нужного эксплантата камеру устанавливают под углом 10—
15 так, чтобы прорезь 2 в кольце находилась в верхней точке, поворачивают основание камеры до совмещения рабочей камеры, в которой находится избранный эксплантат, с прорезью и извлекают покровное стекло с прикрепленным к нему эксплантатом. В освободившуюся камеру при необходимости помещают новый эксплантат и герметизируют камеру. Таким образом, в данной камере M02&;но получать препараты одной и той же культуры на разных этапах ее развития. Поскольку основание камеры выполнено из прозрачного материала, например из плексигласа, а высота ее в месте расположения эксплантатов не превышает, например, 4 мм, оказывается возможным проводить наблюдение и фотографирование развивающихся культур с помо10 щью фазовоконтрастной оптики. Так как фокусное расстояние применяемых объективов не превышает 0,3 мм, необходимо, чтобы о6щая толщина покровного стекла и верхнего покрытия рабочих камер не превышали эту
15 величину. Толщина применяемых покровных стекол находится в пределах 0,17 — 0,2 мм. В связи с этим в качестве верхнего покрытия рабочих камер может быть применена эластичная целлофановая пленка толщиной
20 0,06 — 0,08 мм, которая приклеивается к основанию камеры.
Предмет изоб ретения
25 Плоская камера для культивирования клеток и тканей, содержащая основание, охватывающее его поворотное, кольцо, и покров. ные стекла, отличающаяся тем, что, с цельк> независимой установки и удаления покровÇ0 ных стекол с эксплантатами, внутри основа" ния расположены сообщающиеся между со" бой радиальные рабочие камеры, а на наружной боковой поверхности поворотного кольца расположена горизонтальная прорезь по раз35 мерам рабочей камеры, f3 (2 2
ФиГ
Фиа.-2
Составитель E. Ланцбург
Редактор В. П. Новоселова Техред Л. Л. Евдонов Корректор О. С, Зайцева
Заказ 866,, 7 Изд. № 419 Тираж 473 Г1одписное
ЦНИИПИ Комитета по делам изобретений и открытий при Совете Министров СССР
Москва, Ж-35, Раушская иаб., д. 4/5
Типография, пр. Сапунова, 2