Способ ингибирования изомеризации грляс-диэтилстилббестрола в кормовых составахдля животных

 

1ц 42 85И

ОПИСАНИЕ

ИЗОБРЕТЕН ИЯ

К йАТЕНТУ

Союз Советских

Социалистических

Республик (61) Зависимый от патента (51) М. Кл. А 23к 1/165 (22) Заявлено 26.01.71 (21) 1616832/1753767/

30-15 (32) Приоритет 13.02.70 (31) 11301,11307 (33) США

Опубликовано 15.05.74. Бюллетень № 18

Государстеениа и комитеъ

Совета Министров СССР во делам изобретений ч открытий (53) УДК 636.085.57 (088.8) Дата опубликования описания 2.11.74 (72) Автор изобретения

Иностранец

Нельсон Генри Людвиг (США) Иностранная фирма

«ЭЛИ ЛИЛЛИ ЭНД КОМПАНИ» (CIIIA) (71) Заявитель (54) СПОСОБ ИНГИБИРОВАНИЯ ИЗОМЕРИЗАЦИИ

ТРАНС-ДИЭТИЛСТИЛЬБЕСТРОЛА В КОРМОВЫХ СОСТАВАХ

ДЛЯ )КИВОТНЫХ

Изобретение относится к способу ингибирования изомеризации транс-диэтилстильбес рола в кормах, 1lo предлагаемому способу превращение транс-диэтилстильбестрола в цис-изомер в составах кормов для животных можно в значительной степени ингибировать или в основном даже предотвращать и использовать его в качестве компонента корма для животных.

Предлагаемый способ отличается тем, что транс-диэтилстильбестрол осаждают из негалогенированного жидкого связующего на твердые частицы инертного носителя, не содержащего веществ, растворяющих диэтилстильбестрол, и затем вводят в кормовые составы.

Многие применяемые компоненты кормов для животных, например пшеничные зерна, соевая мука, ячменные зерна, гранулы из люцерны и другие подобные компоненты содержат вещества, растворяющие диэтилстильбестрол, например жиры растительного происхождения, ксантофиллы, спирты и т. п, По предлагаемому способу в составы кормов для животных избегают вводить остаточные растворители для диэтилстильбестрола и не придают значения выдерживанию диэтилстильбестрола в его природных растворителях, которые имеются в составе кормов для животных.

Г1редлагаемый способ позволяет повысить стойкость транс-диэтилстильбестрола в составах кормов для животных, давая таким образом надежную гарантию того, что животным, принимающим корм, содержащий диэтилстильбестрол, попадает в основном транс-диэтилстильбестрол — физически активный изо10 мер. Таким образом, количество активного транс-изомера B корме для животных повышается от 65% от общего количества усваигаемого диэтилстильбестрола, обычно содержащегося в корме для животных, до не менее

95%, т. е. повышается до максимального весового количества диэтилстильбестрола, вводимого в корм для животных.

Преимущество способа в том, что сводит к минимуму опасность контакта рабочих с фи20 зиологически активным агентом, что обычно происходит при введении диэтилстильбестрола в составы для корма животных. Транс-диэтилстильбестрол является весьма сильнодействующим эстрагеном, который при попада25 нии на кожу и слизистую оболочку вызывает нежелательные вторичные женские половые признаки у лиц мужского пола. Поэтому необходимо принимать черезвычайные меры пре428591

Зо

40

3 досторожности с целью защиты рабочих даже от незначительных количеств эстрагена. По предлагаемому способу перед употреблением диэтилстильбестрол рекомендуется смешивать с относительно крупными, сухими немаслянистыми частицами. Такие частицы меньше прилипают к одежде и коже рабочих, что значительно снижает опасность, связанную с работой с диэтилстильбестролом.

По предлагаемому способу транс-диэтилстильбестрол осаждают из негалогенированного жидкого связующего на твердые частицы инертного носителя, почти не содержащего веществ, растворяющих диэтилстильбестрол, и используемого в качестве компонента кормов для животных. Рекомендуется, чтобы твердый носитель имел частицы такого размера, чтобы не менее 95О/о их проходило через сито с размером отверстий 20 меш и чтобы не более 10 /о частиц проходило через сито с размером отверстий 60 меш. Эти размеры отверстий сит соответствуют размерам частиц

150 — 850 мк. Частицы такого размера могут содержаться и в негранулированном корче.

Твердые инертные носители в виде частиц — минералы-носители содержат силикаты алюминия, кальция и магния, например слюду, гидробиотит, как в виде руды, так и чешуйчатый, тальк, пирофиллит, монтморилоноидные глины, каолинитную глину, аттапульгитную глину и т. п. В качестве инертного носителя особенно рекомендуется использовать чешуйчатый гидробиотит. Обычно такие минералы представляют собой смеси силикатов различных катионов, часто содержащие такие катионы, как катионы железа, титана,,натрия и калия, а также катионы алюминия, кальция и магния. Часто такие минералы содержат комплексы, имеющие более одного катиона внутри силикатной решетки, например гидробиотит (вермикулит). Однако более предпочтительным .катионом для силиката является катион кальция, магния или алюминия.

Подходящими инертными носителями являются также диатомовые земли, как неиспользованные, так и в виде водных солей. Эти минералы в основном представляют собой кремнезем. Аморфная структура диатомовых земель является причиной неоднородности поверхности частиц, что позволяет этим минералам быть особенно пригодными для осаждения на них транс-диэтилстильбестрола, поскольку между неровной поверхностью и осажденным веществом образуется более надежная связь.

Для инертных носителей пригодны также известняк, в том числе кальцит и доломит, и гипс. Другими минеральными материалами, подходящими для твердых носителей, являются карбонаты, хлориды, фосфаты и сульфаты натрия, калия, магния и кальция. Из этих соединений наиболее рекомендуемыми являются дикальцийфосфат, хлорид натрия и карбонат натрия, поскольку они обычно входят в сос;-ав корма для животных.

В качестве инертных носителей для трансдиэтилстильбестрола можно также применять природные органические материалы, почти не содержащие веществ, которые растворяют диэтилстильбестрол. Такими материалами являются грубые корма, содержащие целлюлозу, например кукурузные кочерыжки, багасса сахарного тростника, высушенная измельченная меласса сахарной свеклы, высушенная шелуха от гороха, высушенная картофельная масса и т. п. Грубые корма, например приведенные выше, жвачным часто дают в пищу для стимулирования активности рубца. Эти сравнительно непитательные грубые вещества являются особенно рекомендуемыми носителями для транс-диэтилстильбестрола. В качестве твердых носителей можно также использовать, например экстрагированные растворителем и пропариванием костной муки крупяное зерно, полированный рис и т. п. Для стабилизации транс-изомера корма должны содержать менее 0,5 о/о жиров. В том случае, когда корма содержат такие вещества, как сухие остатки после перегонки, рис, применяемый при пивоварении, высушенную лимонную мякоть, скорлупу от арахиса, рисовые отруби; их также можно использовать в качестве твердых носителей для транс-диэтилстильбестр ол а.

Отложение транс-диэтилстильбестрола на твердых частицах инертного носителя, например приведенного выше, рекомендуется производить раствором транс-диэтилстильбестрола в подходящем растворителе путем разбрызгивания с последующим удалением растворителя выпариванием. Превращение в аисизомер происходит более медленно в одноатомном C> — С -спирте или ацетоне, которые считаются наиболее рекомендуемыми растворителями. Скорость изомеризации возрастает с повышением температуры растворителя, поэтому раствор рекомендуется выдерживать при комнатной температуре. В любом случае при нанесении транс-диэтилстильбестрола на носитель из жидкого связующего, в котором он хорошо растворим, в качестве такого связующего рекомендуется использовать летучий растворитель, который можно легко удалять.

Транс - диэтилстильбестрол .рекомендуется растворять в метаноле, этаноле, н-пропаноле, изопропаноле или ацетоне при температуре окружающего воздуха в количестве 5 — 50 г на 100 мл растворителя. Этот раствор должен содержать 30 — 40 г транс-диэтилстильоестрола в 100 мл 95 /О-ного этанола.

Транс-диэтилстильбестрол смешивают с жидким связующим, например, диэтиловым, н-пропиловым, изопропиловым эфирами, С5—

Ст-алканами, бензолом, водой и водными дисперсиями, содержащими 0,1 — 5О/о метилцеллюлозы, натриевой карбоксиметилцеллюлозы, оксипропилцеллюлозы или поливинилпирролидона, и полученную суспензию диэтилстильбестрола наносят на любой из инертных носителей. При использовании жидкого связующе428591

Отложение транс-диэтилстильбестрола из жидкого связующего на твердые частицы инертного носителя, приводит к образованию стабилизированной формы транс-диэтилсгильбестрола, который подмешивают в состав корма для животных, что позволяет эффекгивно задерживать превращение транс-диэтилстильбестрола в неактивный мис-изомер или значительно снижать скорость указанного превращения. Составы корма для животных, указанные выше, относятся к обычно применяемым составам твердых, предварительно смешанных кормов, кормовых концентратов, добавок к кормам, готовых кормов, комплексных рационов и т. п. Поскольку диэтилстильбестрол, вводимый в составы кормов .для животных, широко применяются в качестве стимулятора роста жвачных животных, большое значение придается тому, чтобы в указанных составах

Таблица 1

Содержание цис-диэтилстильбестрола в люцер овых смесях, содержащих 2 г диэтилстильбестрола нэ 453 6г смеси, выдержанных при темнературе 37 С в различные сроки времени

Содержание аис-изомера в смесях, о

Инертный носитель для отложения трансдиэтилстильбестрола

Исходная смесь

6 месяцев

3 месяца

2 месяца

1 месяц

Диатомовая земля

Хлористый натрий

Карбонат кальция

Дикальцийфосфат

Отслоения гидробиотита

Отслоения гидробиотита

Транс-диэтилстильбестрол в пропилекгликоле

Транс-циэтилстильбестрол в пропилепгликоле, разбрызгиваемый на гранулы люцерны

3

5

7

3 .6

4

3

<1

<1

<1

4

26

10 Контрольная смесь — смесь, приготовленная по известному способу.

По предлагаемому способу смесь транс-диэтилстильбестрола и инертного носителя, содержащую 0,22 — 22% транс-диэтилстильбест- 45 рола можно вводить в состав корма для животных в качестве компонента в количестве

0,1 — 5%. го, не являющегося растворителем, остаточный растворитель является менее подходящим, так что можно применять более стойкий растворитель. Для примера, 2 г метилцеллюлозы растворяют в 100 мл воды и при тщательном перемешивании в этот раствор добавляют тонкоизмельченный транс-диэтилсгильбестрол.

Раствор или суспензию транс-диэтилстильбестрола, полученные как уже было указано выше, разбрызгивают на инертный носитель в виде частиц при перемешивании, что вызывает отложение транс-диэтилстилъбестропа в количестве 1 — 100 r на 453,6 r смеси инертного носителя и транс-диэтилстильбестрола.

После нанесения транс-диэтилстильбестрола из летучего жидкого связующее выпаривают при 50 С под вакуумом. При использовании нелетучего жидкого связующего, например минерального масла, остаточная жидкость удерживается транс-диэтилстильбестролом и инертным носителем.

6 можно было инги бировать превращение транс-диэтилстильбестрола в цис-изомер.

Содержание цис- и транс-диэтилстильбес грола в различных составах можно определять с помощью газо-жидкостной хроматографии производных бис-триметилсилилового эфира.

Изомеры, содержащиеся в образце вступают в реакцию с избытком 9-бис- (триметилсилил)ацетамида в течение 20 мин и бисэфирное производное извлекают хлороформом. Хлороформный раствор вводят в газовый хроматограф и проводят определение при

220 С.:Соотношение мис- и транс-изомеров определяют путем подсчета площади пиков соответствующих изомеров, очерченных самописцем. При работе с жидкими препаратами берут 3 капли образца и 0,5 мл О-бис-(триметилсилил) ацетамида. Реакция идет в течение

-20 мин. Затем реакционный раствор разбавляют хлороформом до 5 мл и вводят в хроматограф. Для анализа твердых образцов берут 1 г препарата и избыток О-бис-(триметилсилил) ацетамид. Производное бис-триметилстилилового эфира экстрагируют хлороформом, разбавляют и вводят в хроматограф.

Транс-диэтилстильбестрол осаждают из жидкого связующего на различные инертные носители в виде частиц в количестве 20 г на

453,6 г смеси. Полученный материал смешивают с гранулами люцерны и получают твердую смесь, содержащую 2 r транс-диэтилстильбестрола на 453,6 г смеси. Осаждение проводят из раствора 95%-ного этанола при

25 С, этанол упаривают под вакуумом при

50 С. Люцерновую смесь готовят обычным способом путем растворения транс-диэтилстильбестрола в пропиленгликоле при температуре 80 — 100 С. Полученный горячий раствор разбрызгивают на гранулы люцерны с получением 2 г транс-диэтилстильбестрола на

453,6 г смеси. Эту смесь также подвергают испытанию для сравнения.

428591

Таблица 2

Содержание, г/т

Компоненты

5 55106

1814

28123

78926

4989! 45360

3628

5443

2721

262

635

635

Заказ 3301/2

Изд. № 1686

Тираж 466

Подписное

Сапунова, 2

Типография, пр.

Обычная концентрация транс-диэтилстильбестрола, допустимая для животных, 0,5—

20 мг на 453,6 г смеси с высоким содержанием питательных веществ. Носитель, инертный к транс-диэтилстильбестролу, смешивают с 5 гранулами люцерны, соевой муки или других продуктов и получают твердую смесь, содержащую 1 — 50 г транс-диэтилстильбестрола на

453,6 r. Ее смешивают с кормовыми концентратами, добавками к кормам, готовым кор- 10 мом или полным пищевым рационам перед скармливанием животным.

Полный высококалорийный рацион для крупного скота 15

Желтая кукуруза

Кукурузные кочерыжки

Люцерновая мука, влажность 17%

Соевая мука после экстрагирования растворителем, без отрубей

Мочевина

Меласса тростниковая

Дикальцийфосфат пищевой

Карбонат кальция

Соль

Микроэлементы

Витамин А и Д, (смесь)а

Витамин Е Смесь микроэлементов содержит: 2,50% марганца в виде окиси марганца, 0,07% иода в виде иодистого калия, 0,30% кобальта в виде карбоната кобальта, 0,50% меди в виде окиси меди и 20,00% цинка в виде сульфата цинка. а Каждые 45,6 г смеси содержат 2000000 ед. на

453,6 r витамина А и 227200 ед. на 453,6 г витамина на Д.

Пример, 100 г транс-диэтилстильбесгрола 40 растворяют в 350 мл 95%-ного этанола при

25 С. Раствор транс-диэтилстильбестрола разбрызгивают на 453,6 г отслоенного гидробиотита с величиной частиц 20 — 60 меш. Разбрызгивание производят с определенной скоростью на взрывобезопасном месте, приспособленном для манипулирования с горячими растворителями. После окончания разбрызгивания спиртового раствора полученный препарат переносят на сушильные противни и помещают в вакуумную печь с приспособлением для удаления горючих паров, затем упаривают этанол при 50 С. Через 1 час спирт полностью удаляется; 453,6 г сухого препарата содержат 100 г транс-диэтилстильбестро- 55 ла. В смеситель с ленточной лопастью загружают 22226 r гранул люцерны. При работающей мешалке в смеситель загружают 453,6 г смеси транс-диэтилстилъбестрола и отслоенного гидробиотита, и смесь перемешивают в 60 течение 5 — 15 мин, Полученная таким образом смесь содержит 2 r транс-диэтилстильбестрола на 453,6 r смеси.

Для получения полного кормового рациона, содержащего 0,5 мг транс-диэтилстильбестрола на 453,6 г смеси его с носителем, одну тонну полного рациона с компонентами, приведенными в табл. 2, загружают в подходящий смеситель, например в вертикальный смеситель, обычно применяемый для этой цели, и начинают операцию смешения. Добавляют

680,46 г люцерновой смеси, содержащей 2 г транс-диэтилстильбестрола на 453,6 r смеси его с носителем и смешивают в течение 5—

15 мин. Полученный полный кормовой рацион, содержащий транс-диэтилстильбестрол. подают на форму для скармливания мясному крупному рогатому скоту в количестве 9072 г в день. В среднем на одну голову крупного рогатого скота приходится примерно 10 мг

7ранс-диэтилстильбестрола в день.

Предмет изобретения

1. Способ ингибирования изомеризации транс-диэтилстилъбестрола в кормовых составах для животных, отличающийся тем, что транс-диэтилстилъбестрол осаждают из негалогенированного жидкого связующего на твердые частицы инертного носителя, почти не содержащего веществ, растворяющих диэтилстильбестрол, и затем вводят в кормовые составы, 2. Способ по п. 1, отличающийся тем, что транс-диэтилстилъбестрол осаждают в количестве 1 — 100 г на 453,6 г смеси инертного носителя и транс-диэтилстильбестрола.

3. Способ по пп. 1 и 2, отличающийся тем, что инертным носителем является минерал, содержащий силикат магния, кальция или алюминия.

4. Способ по пп. 1 и 2, отличающийся тем, что инертным носителем является диатомовая земля.

5. Способ по пп. 1 и 2, отличающийся тем, что инертным носителем является карбонат, хлорид, фосфат или сульфат натрия, калия, магния или кальция.

6. Способ по пп. 1 и 2, отличающийся тем, что инертным носителем является пищевое вещество, выбранное из измельченной кукурузной кочерыжки, багассы сахарного тростника, высушенной мелассы сахарной свеклы, кукурузной крупы, костной муки после экстрагирования растворителем, высушенной гороховой шелухи, высушенного картофеля и полированного риса.

7. Способ по п. 3, отличающийся тем, что инертным носителем является отслоенный гидробиотит или аттапульгитная глина.

8. Способ по п. 4, отличающийся тем, что инертным носителем является дикальцийфосфат.