Способ постановки серологических реакций

 

ОПИСАНИЕ

ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (ii) 432193

Союз Советских

Социалистических

Республик,4Я 1 2 - Ф (51) M. Кл -С-+2k 1700 (б1) Зависимое от авт. свидетельства (22) Заявлено 18.09.72 (21) 1828811/31-16 с присоединением заявки № (32) Приоритет

Опубликовано 15.06.74. Бюллетень № 22

Дата опубликования описания 2.11.74

Государственный комитет

6оввта 1йнннотров СССР по долам нзооретеннй и открытий (53) УДК 616-078(088.8) З

Ю. М. Шелудько, Н. А. Погорилько и В. С. Сиверс > 1)у" г, умец :;.„

Украинский головной научно-исследовательский институт сельскохозяйственной микробиологии (72) Авторы изобретения (71) Заявитель (54) СПОСОБ ПОСТАНОВКИ СЕРОЛОГИЧЕСКИХ РЕАКЦИЙ

Изобретение относится к серодиагностике.

Известен способ постановки серологических реакций, заключающийся в том, что антитело сводят с антигеном, адсорбированным на бентоните.

Недостатком такого способа является недостаточно высокая чувствительность реакции.

С целью повышения чувствительности реакции по предлагаемому способу в качестве носителя используют минерал палыгорскит, Для приготовления суспензии палыгорскита его измельчают в ступке и растворяют в дистиллированной воде. После гомогенизации центрифугированием при 4000 об/мин в течение 20 мин удаляют грубые примеси. Надосадочную жидкость центр ифугируют при

5000 об/мин в течение 40 мин, а полученный осадок используют в дальнейшей работе.

Навеску палыгорскита 0,5 г растворяют в

100 мл дистиллированной воды, гемогенезируют и к гемогенату добавляют дистиллированную воду до объема 500 мл, отстаивают в течение 2 час и центрифугируют в течение

10 мин при 2700 об/мин. Осадок отбрасывают, а супернатант снова центрифугируют при

40!;U об/мин, осадок доводят до 100 мл дистиллированной водой. Зту суспензию используют в дальнейшем.

Для сенсибилизации гамма-глобулиновой фракции антисыворотки на частицах палыгорскита к его суспензии добавляют выделенную осаждением сульфата аммония гамма-глобулиновую фракцию антисыворотки в отношении

2: 1.?!осле выдерживания смеси в течение ночи в холодильнике к ней добавляют 2 мл

0,1 %-ной метиленовой синьки. После центрифугирования в течение 10 мин при 2700 об/мин

ip осадок ресуспендируют в 10 мл забуференного физраствора и дважды отмывают забуференным физраствором с последующим центрифугированием при тех же режимах. Конечный осадок ресуспендируют в 10 мл дистиллиро15 ванной воды и к нему добавляют 0,2 мл 1 0ного поливинилпирролидона и 0,2 мл 3%-ного мертиолята. Реакцию ставят капельным методом на предметных стеклах. В качестве антигена используют приготовленный антиген

Х-вируса картофеля и сок молодых зараженных этим вирусом растений.

Предмет изобретения

Способ постановки серологических реакций путем сведения антитела с антигеном, адсорбированным на носителе, отличающийся тем, что, с целью повышения чувствительности реакции, в качестве носителя используют минерал палыгорскит.