Способ хроматографического анализа в тонком слое сорбента

 

61 9853

Зто достигает=я тем, что по предлагаемому способу в водную суспензию сорбента (силикагеля), используемую для приготовления тонкослойных пластинок, добавляют концентрированную серную кислоту в количестве 2-5%

5 от содержания сорбента.

По предлагаемому способу хроматографический анализ в тонком слое сорбента проводили следующим образом, Настеклянныепластинки12 < 18см наносили смесь 6, r силикагеля КСК, 0,3 r гипса и 15 мл дистиллированной воды, содержащей 0,15-0,30 мл концентрированной кислоты, и оставляли на 12-16 ч на воздухе для поцсушивания. 15

Перед хроматографированием пластинки активировали при 105©С в течение 1 ч

1 наносили липиды мышечной или жировой ткани в количестве 1 мг в виде пятен диаметром 3-4 мм и затем хроматогра фировали в системе петролейный эфирдиэтиловый эфир, 85:15 (для разделения нейтральных липидов) или в системе хлороформ-метанол-вода, 65:25:4 (для разделения фосфолипидов на отдел у5 ные фракции). После хроматографического разделения пластинку нагревают до 80-110 С в течение 10-25 мин.

Опыты показали, что добавление в сорбент концентрированной серной кис- ЗО лоты (до 5% от веса сорбента) не отражается сколько-нибудь заметно на его разделительных свойствах. В то же время, содержащейся на сорбенте кислоты вполне достаточно, чтобы осущест 35 вить обугливание анализируемых веществ на,тонкослойной пластинке в процессе ее нагревания при 80-110 С.в о течение" 10-25 мин.

Было устайовлено,. что при проявле-. 40 нии количественных хроматограмм по описываемому способу диффузии пятен не наблюдается, по всей хроматограммэ образуется. белый фон с, одним . уровнем, причем поверхностный слой 45 хроматограммы не подвергается какомулибо разрушению.

При проведении описываемого способа легко осуществляется стандартизаций условий проявления количественных 50 хроматограмм, причем интенсивность окрашивания пятен на хроматограмме легко контролируется и регулируется.

При проявлении хроматограмм известньв способом удается выявить лишь ту часть вещества, которая распределилась на поверхностных частицах сорбента.

В глубинных слоях сорбента пятна анализируемьгх веществ выявляются в едва заметных количествах. Отсюда следует, что проявленные известным способом хроматограммы нельзя испол.зовать для денситометрии в проходящем свете или количественного определения веществ с использованием элюирования, поскольку

1 при этих условиях проявления хроматограмм возможно значительное искажение результатов анализа. Важным явля-ется и то, что для денситограмм, полу ченных при денситометрии этих хроматограмм, характерны различные уровни фона на отдельных участках проявленных тонкослойных пластинок.

При проявлении хроматограмм по описываемому способу анализируемые пятна выявляются равномерно по всей глубине сорбента и при отражающей денситометрии с обеих сторон хромато. граммы получают аналогичные денситограммы. В результате появляется воз. можность резко повысить точность определения. веществ.

Следует при этом отметить то, что путем подбора количеств серной кислоты, добавляемых в сорбент, легко удается достичь нужной интенсивности скрашивания пятна, причем, эти условия легко выполняются в процессе длительного анализа одних и тех же групп веществ.

Формула изобретения

Способ хроматографического анали- за в тонком слое сорбента, включающий приготовление водной суспензии сорбента, нанесение на стеклянную йластинку, акгивирование, разделение анализируемой смеси веществ в системе растворителей и нагревание при 80-160 С в

О течение 10-25 мин, о т л и ч а ю— шийся тем, что, с целью повышения точности определения содержания веществ при их тонкослойной х15омато:графии и увеличения экономичности прс ведения анализов, при приготовлении тонкослойных пластинок в водную суспензию сорбента вводят концентрированную серную кислоту в количестве 2-5% от содержания сорбента.

Источники информации, принятые во внимание. при экспертизе:

1. "Хроматография в тонких слоях» под ред. З. Шталя, изд. "Мир», М., 1965, стр.47. - Ахрем А. A. Кузнецова A. H„

Тонкослойная хроматография, язд.

Наука, М., 1969, стр. 34.