Способ определения аллотипов иммуноглобулина человека

 

ОП ИСАН И Е

ИЗОБРЕТЕН и Я

1! 1! 649433

С о«оа Советских

Социалистических

Республик, QE =-. Ф -,, М АВ 1 ОРСХОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (61) Дополнительное к авт. свид-ву (22) Заявлено 30.06.75 (21) 2151759, 28-13 (51) М. Кг!.-е

А 61К 35/14 с присоединением заявки хЪ (43) Опубликовано 28.02.79. Бюллетень ¹ 8 (45) Дата опубликования описания 28.02.79 (53) УДК 616-097 (088.8) ло делам нзаеретеннй и открытий (72) Авторы изобретения

Е. Н. Басова и H. Н. Басова (71) Заявитель (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ АЛЛОТИПОВ

ИММУНОГЛОБУЛИНА 6 ЧЕЛОВЕКА

Изобретение относи гся к оол асти медицины, а пмсш«о к иммунологии.

Извес«си способ определения аллотипов имм; иоглобулииа С человека путем обработки эритропитов сснситщ!ом с последующим сведением голучснногo комплекса с испытуемой сыворогкой и учетом результаТО» (1).

Однако известный спосоо слохкен, трудоемок и нс обеспс !ивает высокой чувствитсл«=ности.

Целью i:BoopcTcппя является повышение ч вствитсльности и упрощение спосооа.

Зга цель достигается тем, что формалпнизирован:!ыс эритроциты животных сенсибилBзиру!от î ..!Ill íûм мопоклональным парапротсиио.! в дозе 100 †3 мкг на

1 мм 2,5 — 10 !о-ной взвеси эритроцитов и полученный диагностический комплекс стабилизируют и сводят с испытуемой сывороткой, предварительно смешанной с 1,0—

2,0 ГЕ стандартной антисыворотки к аллотипу.

Кроме того, для приготовления диагiloстичсского ко..:..лс«:са используют эритроцить. в .!Остоин«!О«11 ко,!1!Снтрации, а диагпоcT1 IccI I!. I .0 i iBBcI(c 3DiITpoII!iToB с разными аллотипами готовят «!2 формалинизироваппых эритроцитах одной серии.

ГосУдарстеенный комитет (23) П-,иоо««тег

П р и м с р. Ф01!к!аг!ииизиров«!нные эритроциты барана (2,5- 10ое ) сеисибилизир) «От (!Ip!! 4 — 6"С B Tc ici:iic 16 — -24 I) ноклопальпым парапротсином (100—

500 м!Сг Iia мл} CTBi!OBлс!.Iþ :, аллотипичсской пр! падле:киосl il и Оораоатывают формальдсгидом. Готовыс стабильныс комплексы дают положитсльи, :c р акцию пасс.!вной гсмаггл«отинац !и со стандартными антиаллотии;l«ecêïìè сыворотками соотВс Гств юи;и спсцифи l ilocTc;. .

Оопаружс !ис ".BT. т:,I к аллотипам в сыворотке людей посредством стабильных диагностических комплексов и.!ест самостоятс 1«):1Oc 31:".:ici! Ис для диагностиl .и.

13

Для определения аллотщ«а серию дгукратных разведений испытуемой сыворотки соединяют с 1,0 — 2,0 "E спсцифи.сских антител гротив конкретного алiiÎTHIIB и к оо смеси добавляют комплекс той >ке аллотипической специфичности. В результате взаимодействия наличие аллотипа проявляется «I""йтрализацисй антител, т. е. предотвращенн«!См гс",! агглютинацпи, Предлагаемый способ обеспечивает высокую !увстш!тельиость и упрощается.

Повышение чувств!!тельиости достигается, во-гсрвых, подборо.л Оптимальных соотношений кол««чсства эритроцитов и мислом649433

Формула изобретения

Составитель С. Малютина

Редактор М. Дмитриева Техред С. Антипенко Корректоры: Т. Добровольская и А. Степанова

Заказ 83/3 Изд. Мо 196 Тираж 680 Подписное

НПО Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Типография, пр. Сапунова, 2 ного парапротеина, соблюдением стандарт.нОсти взвесей эритроцитов при производстве комплексов и их применении, во-вторых, заменой реакции торможения гемагглютинации на реакцию нейтрализации антител с 1,0 — 2,0 ГЕ специфических антител.

Повышение воспроизводимости результатов достигается применением единой серии формалинизированных эритроцитов при изготовлении комплексов разной аллотипической специфичности, стабилизацией их формальдегидом, что позволяет одновременно и разновременно испытывать множество проб в равных условиях.

Упрощение способа достигается заменой эритроцитов нативных формалинизированными, человеческих — животными, мелких проб — крупными сериями полуфабрикатов.

1. Способ определения аллотипов иммуноглобулина G человека путем обработки эритроцитов сенситином с последующим сведением полученного комплекса с испытуемой сывороткой и учетом результатов, отличающийся тем, что, с целью повышения чувствительности и упрощения способа, формалинизированные эритроциты

5 животных сенсибилизируют очищенным моноклональным парапротеином в дозе

100 — 300 мкг на 1 мм 2,5 — 10%-ной взвеси эритроцитов и полученный диагностический комплекс стабилизируют и сводят с испы10 туемой сывороткои, предварительно смешанной с 1,0 — 2,0 ГЕ стандартной антисыворотки к аллотипу.

2. Способ по п. 1, отличающийся тем, что для приготовления диагностиче15 ского комплекса используют эритроциты в постоянной концентрации.

3. Способ по п. 1, отличающийся тем, что диагностический комплекс эритроцитов с разными аллотипами готовят на

20 формалинизированных эритроцитах одной серии.

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе

1. Фьюденберг Х. Х. и др. Введение в им25 муногенетику. М., «Мир», 1975.