Синтетическая среда для замораживания и хранения спермы баранов

 

ОПИСАНИЕ

ИЗОЬГЕтЕНИЯ ""698"

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (61) Дополнительное к авт. саид-ву

Союз Советских

Социалистических

Республик (51)М. Кл.2 (22) Заявлено 240778 (21) 2647238/30-15 с присоединением заявки М

А 61 Р 7/02

Государственный комитет

СССР но делам изобретений и открытий (23) Приоритет (5З) УАК636.082,,453. 5 (088 ° 8) Опубликовано 15.11.79. Бюллетень И9 43

Дата опубликования описания 181179 (72) Автсры

ИЗОбрЕТЕния K. T° . Касымов, Ж. Ашимов, Ж. Утесинов и Г.К. Асильбекова

Казахский научно-исследовательский технологический институт овцеводства (54 ) СИНТЕТИЧЕСКАЯ СРЕДА ДЛЯ ЗАМОРАЖИВАНИЯ

И ХРАНЕНИЯ СПЕРЯЫ БАРАНОВ (желток, глицерин),и антиоксидант (токоферилацетат). Такой состав дает возможность сохранять сперму в течение нескольких месяцев.

Изобретение относится к области животноводства и может быть использовано для длительного хранения спермы с целью рационального и долгосрочного использования племенных баранов-производителей.

Применение искусственного осемекения н овцеводстве способствует более интенсивному использованию наиболее ценных, проверенных по качестну потомства баранов-производителей и значительно ускоряет качественное улучшение поголовья.

Длительное сохранение спермы даст возможность полнее использовать производителей-улучшателей, особенно в условиях госплемстанций.

Известен способ глубокого замораживания спермы баранов (11, Для разбавления спермы используется среда следующего состава: вода дистиллированная — 50 мл; глюкоза,4 г; глицерин динамитный — 2 мл; токоферилацетат 10%-ный(в виде масляного раствора витамина Е) — 1 мл; желток куриного яйца — 10 мл.

В состав этой среды входят. питательное вещество (глюкоза), вещества, оказывающие защитное действие при резком понижении температуры

Однако известная (1) среда недостаточна, эффективна.

Известна также среда следующего состава: сахароза — 8 г; глюкоза—

О, 6 г; этилен)тиаминтетрацетат — О, 8г; трис-оксиметиламинометан — 0,28 г; глицерин динамитный — 4 мп; стрептоцид белый растворимый — 0,2 г; моноиицин - 30 тыс. ед.; бутокситолуол, БОТ) — 20 мп; вода дистиллированнаядо 100 мл (2).

Кроме того,в состав этой среды введены бактериологические средства (стрептоцид и мономицин), в качестве оксиданта используется бутокситолуол (БОТ). Этилендиаминтетраацетат вводят в среду для понижения содержания в сперме кальция и магния, избыток которых усиливает аглютинацию спермиев ° Этилендиаминтетрацетат также тормозит активность ферментов и понижает обмен веществ н сперме, способстнуя лучшей выживаемости спермиев. Введение названных компонентов н состав среды дает возмо ность сох698617 ранять сперму в течение нескольких лет, Широкое использование этого состава ограничено труднодоступностью и дороговизной отдельных компонентов этого состава (трис-оксиметиламиноме5 тан, бутокситолуол),а используемый при этом активный антибиотик (мономицин

30 тыс. ед.) угнетает активность спермы и ухудшает переживаемость.

Цель изобретения — сохранение вы- 1 1 сокой биологической активности спермиев, ...

Для достижения этого в среду, содержащую сахарозу, глицерин, этилендиаминтетрацетат, желток куриного яйца, антиоксидант и бактериостатическое средство, вводят калий фосфорнокислый одноэамещенный, а в качестве бактериостатического средства используют более мягкие антибиотики левомицетин и полимиксин. Калий фосфорнокислый вводят в среду для стабилизации содержания АТФ (аденозинтрифосфорной кислоты) в спермиях и увеличения активности, переживаемости и оплодотворяемости, Глюкозу в предлагаемой среде полностью заменяют сахарозой и количество ее (для снижения гипотонического действия глицерина) увеличивают до 10%.

Состав предлагаемой синтетической 30 антиоксидантной среды следующий: вода дистиллированная - 45-55 мл; саха роза — 4-6 г; натриевая соль этилендиаминтетраацетата — 0,04-0,4 г; калий фосфорнокислый однозамещенный — 35

0,04-0,20 г глицерин — 2-3 млу желТоК куриного Яйца — 10-15 мл токоферилацетат 10%-ный (масляный раствор витамина Е) — 1 в ; левомицетин — 13-25 тыс. ед; полимиксин — 40

13-25 тыс.ед.

Пример. Компоненты синтетических сред отвешивают на аналитических весах. Чашку весов перед взвешиванием реактивов протирают спиртовым тампоном. Воду, используемую для приготовления среды, предварительно кипятят для удаления растворенного кислорода а затем остужают до 40о

45 С. В 100 мл подготовленной таким образом воды растворяют 250-500 тыс. ед. левомицетина и такое же количество полимиксина. После полного растворения антибиотиков берут 50 мл этого раствора и в него поочередно всыпают 5 r сахарозы, 40 мг натриевой соли этилендиаминтетрацетата и 50 мг калия фосфорнокислого однозамещенного. Каждый раз после добавления компонента колбу с раствором покачивают до полного растворения всех компонен-60 тов. Затеи в среду добавляют 10 мл ,желтка куриного яйца ярко-оранжевой окраски, предварительно размешав его в 1 м.". раствора токоферилацетата, Яйца перед использованием тщательно моют, протирают спиртовым тампоном, по"ле чего раскалывают пополам, сливают белок в стаканчик, а желток осторожно перекладывают на стерильный листок фильтровальной бумаги. Лучше использовать стерильные фильтры диаметром 9 см. Желток вносят в среду, тщательно перемешивают, добавляют глицерин, после чего среда готова для разбавления спермы. Среду обычно готовят до получения семени и, до употребления хранят в специальных водяных ваннах или термостате при 3540 С. Среда должна быть использована в течение 1-2 ч с момента ее приготовления.

Министерство сельского хозяйства, СССР провело государственные испытания пригодности замороженной спермы,. приготовленной на предлагаемой среде, для искусственного осеменения овец.

Проведенные испытания показали,что предложенная среда обеспечивает высокую активность спермиев после первичного осеменения (58%, колебание

52-63%) . Оплодотэоряемость овец по ягнению составила в среднем 48,8% (колебание 42,6-54,8%) . На 100 окотившихся маток получено по 137 ягнят, Синтетическая среда по результатам ,проведенных испытаний оказалась пригодной для замораживания спермы баранов scex пород, разводимых в Казахстане.

Научно-технический совет Министерства сельского хозяйства СССР рекомендовал способ низкотемпературного замораживания и длительного хране" ния спермы баранов с использованием синтетической антиоксидантной бактериологической среды.для широких производственных испытаний в 1978-1980 гг. на госплемстанциях, племпредприятиях и на основных пунктах искусственного осеменения овцеводческих хозяйств РСФСР, Украинской ССР, Узбекской CCP Казахской ССР и Киргизской ССР, Формула изобретения

Синтетическая среда для замораживания и хранения спермы баранов,включающая воду, сахарозу, натриевую соль зтилендиаминтетраацетата,глицерин, желток куриного яйца и токоферилацетат, отличающаяся тем, что, с целью сохранения высокой биологической активности спермиев, среда дополнительно содержит одноза-, мещенный фосфорнокислйй калий, левомицетин и полимиксин при следующем соотношении компонентов: сахароза4-6 г; натриевая соль этилендиамин« тетраацетата — 0,04-0,4 r; глицерин

2,0-3,0 (ц1у желток КуриНОГО Яйца10-15 млу 10%-ный раствор токофе«

698617

Составитель A. Макаров

Ре акто Т. Заг бельная Тех М Петко М. Пожо

Заказ 7120/6 Тираж 672 Подписное

ЯНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035 Москва Ж-35 Ра ская наб 4 5

Филиал ППП Патент, г. Ужгород, Ул. Проектная, 4 рилацетата - 1-2 мл; калий фосфорнокислый однозамешенный — 0,04-0,20 г; левомицетин — 13-25 тыс.ед,; полимиксин — 13-25 тыс.ед.; вода — 45-55 мл.

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе

1. Касымов К. Т, заимов й. 4ы.,еводство, 1975, М 8, с. 9.

2. 0сташко Ф.И, Глубокое замораживание и длительное хранение сп догмы производителей, — Киев..урожай, 1978, 5 с. 183.