Способ консервирования костногомозга

 

ОПИСАНИЕ

ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОИ:КОМУ СВ ВТЮЛЬСИУ

Сеюз Сееетскнх

Социалистических

Ресвублмк

gi>805968 (6)) Дополнительмое к авт. сеид-ву (22) Заявлено 1605.79 . (21)2767573/28-13 с присоединением заявки Йо (51)М. Кл.з

A 01 и 1/02

Государстаеииыа комитет

СССР по делам изобретеиий я открытий (23) Г3риорйтет

Опубликовано 230281. Бюллетень Н9 7

Дата опубликования описания 2 302 81 (S3) УДК 616.475 (088.8) P2) Авторы изобретения

A. A. Цуцаева, Н. Н. Попов, О..А. Дроздова, В. И. Гарбуз, А. Н. Гольцев Т. Н. Воскобойникова, А. ИБранжников и В. В. Щербина

Институт проблем криобиологии и криоме

АН Украинской CCP c ° 1)Г к ,а цины, д„.;,:...., БЫЕ Н: -" (71) Заявитель (54 ) СПОСОБ КОНСЕРВИРОВАНИЯ КОСТНОГО

МОЗГА

Изобретение относится к криомедицине и может найти применение в клиниках и станциях переливания крови.

Известен способ консервирования ко5 стного мозга при низких температурах с последукицим размораживанием его подогреванием до температуры 41-42оС (13

Однако известный способ не обеспе- 10 чивает высокого количества жизнеспособных деконсервированных клеток костного мозга.

Цель изобретения — повышение количества жизнеспособных деконсервированных клеток костного мозга.

Поставленная цель достигается тем, что способ консервирования костного мозга осуществляют при низких температурах с последующим раэмораживанием его подогреванием до темпера- 2О туры 41 - 420C, суспензию клеток после размораживания смешивают с раствором, содержащим 30-35% нативной аутологичной сыворотки с вязкостью 1,121,19 сСт и пропускают последовательно через фильтры с .диаметром 30-40 и 10-12 мк, под давлением 0,3-0,4 атм.

Пример. Клетки костного мозга ьвзаей (5 х 106- 1 х 10 ) смешивают со стабилизирующей средой, состоящей из раствора ЦОЛИПК-З, содержащего,r/ë4 цитраткислый 6,2; глюкозу 4,0; сульфатиоэол 2,0 или левомицетин 0,06 и полиэтиленоксида, мол. в. 400{ПЭО-400) с таким расчетом, чтобы его конечная концентрация составляла 15В. Подготовленную смесь заливают в контейнеры и эамораживают на криогенной установке ври температуре от 20 до

15оС со скоростью 4 С в минуту, а начиная от минус 15 С скорость замораживания увеличивают от 100 С, охо лаждая клетки до минус 196 С.

Оттаивают на водяной бане при температуре +41 С. Размороженные клетки костного мозга смешивают в соотношении 1:1 с раствором ЦОЛИПК-З, содержащем ЗОВ нативной аутологичиой сыворотки, и пропускают последовательно через фильтры с диаметром пор 40 и 12 мк под давлением 0,3 атм.

Оценку качества деконсервированных клеток костного мозга проводят по количеству жизнеспособных клеток в образцах, морфологической сохранности клеток, клеточному составу, колониеобразующей активности Установлено, что число жизнеспособных клеток после фильтрации через фильтры составляет

97%, удаляются стромальные элементы

805968

Формула изобретения

Составитель С. Малютина

Редактор A. Шишкина Техред Е. Гаврилешко Корректор М. Коста

Заказ 85/1 Тираж 711 Подписное

ВНИИПИ Государственного ковжтета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва., Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Филиал ППП "Патент", r. Ужгород, ул. Проектная, 4 и разрушенные клетки, конгломераты клеток,.происходит относительное увеличение количества клеток малых размеров (от 6 до 10 мк) и снижение числа клеток больших размеров (от 11 до

20 мк).

Предлагаемый способ дозволяет по- высить количество жизнеспособных деконсервированных клеток костного мозга.

Способ консервирования костного мозга при низких температурах с последукщим раэмораживанием его подогреванием до температуры 41 — 42 С, отличающийся тем, что, с целью повышения количества жизнеспособных деконсервированных клеток костного мозга, суспенэию клеток

5 после размораживания смешивают с раствором, содержащим 30-35% нативной аутологичной сыворотки с вязкостью

1,12-1,19 сСт и пропускают последо" вательно через фильтры с диаметром

30-40 и 10-12 мк, под давлением 0,30,4 атм.

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе

1. Авторское свидетельство СССР

Р 395054, кл. A 01 H 1/02, 1971.