Способ получения s-форм энтеробактерий

 

<»i896067

Союз Советскнн

Социалнстнческнн .Республик

ОП ИСАНИЕ

ИЗОБРЕТЕНИЯ

Х АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (6I ) Дополнительное к авт. свид-ву— (22)Заявлено 2 10480 (21) 2938586/28-13 с присоединением заявки М— (23) Приоритет—

Опубликовано 070182 Бюллетень hh1

{5l)N. Кп.

С 12 и I/00

9кударственный квинтет

СССР ао делан нзабретеннй н отнрнтн11 (53) УЛК 57&.8.093, .1(088.8) Дата опубликования опнсання0701.82 (72) Авторы изобретения илтiитsПХН 1 .. > ., И

БИЙЛН4ТЕК4

А.М. Воскресенский и Л.Б. Борисов

Первый Ленинградский ордена Трудового Красного Знамени медицинский институт им. акад. И.П. Павлова (71) Заявитель (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ S-ФОРМ ЭНТЕРОБАКТЕРИ11

Изобретение относится к медицинской микробиологии.

Известен способ получения S-форм энтеробактерий путем выращивания диссоциированной культуры на питательной среде $1).

Однако известный способ трудоемок, требует много времени (2-14 сут) и только 927. из числа диссоциированных культур удается перевести в S-форму.

Цель изобретения — упрощение способа и повышение выхода S-форм.

Цель достигается тем, что способ получения S-форм энтеробактерий осуществляют путем выращивания диссоциированной культуры на питательной сре де, диссоциированную культуру выращивают в присутствии бактериофага

Тз в концентрации 10 -10 частиц фа7

ra/ìë среды.

При этом выращивание осуществляют на аминопептидном агаре, среде ЭНДО или аминопептидном бульоне.

Способ осуществляют следующим об" разом.

Приготавливают селективную питательную среду. Для этого берут исходные компоненты: бактериофаг Ts в исходной композиции 10 фаговых час-, тиц/мл, аминопептидный агар (АПА), о расплавленный и остуженный до 40 -43.

В мерную колбу вносят 2 мл фага

10 и 200 мл расплавленного АПА до конечной концентрации фага 107 частиц на

1 мл среды, разливают на 7-8 чашек

Петри.

Вместо AIIA можно использовать сре1S ду ЭНДО или аминопептидный бульон (АПБ). В последнем случае получается жидкая селективная среда для отбора

S-форм, которая имеет некоторые преимущества по сравнению с плотными питательными средами.

Активность фага в плотной среде при + 4 С сохраняется до 4-х недель; в АПБ - неопределенно длительное время.

Формула изобретения

Составитель С. Малютина

Техред 3. Фанта КорректорE. .Рошко

Редактор M. Келемеш

Заказ 11631/10 Тираж 504 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, )К-35, Раушская наб., д. 4/5

Филиал ППП "Патент", г. Ужгород, ул. Проектная, 4

3 89606

Селекцию S-форм энтеробактерий проводят с помощью питательной среды, содержащей в качестве селективного агента бактериофаг Тз.

0,1 мл взвеси бульонной или агаровой диссоциированной культуры, содержащей 10 -109 бактерий/мл, высевают на чашку с селективной плотной питательной средой, растирают шпаделем, I о оставляют при 37 С на 20-24 ч. На lp следующие сутки образуются S-формы колоний, которые отсевают в чистом виде в пробирку в АПБ или скошенным

АПА без фага.

Предлагаемым способом достигается

100-ная эффективность селекции (т.е. ."каждую диссоциированную культуру возможно перевести в S-форму), что гарантирует качество работы.

Сйособ обеспечивает сокращение времени, селекции до минумума (1 сут), снижает трудоемкость в результате вы деления S-форм после однократного по= eesа:На."селективную среду, исключает ., .рабо ф; С Hb, eTH BBTCH OpHO 25 ..моментноеть. технологического процесса

7 4 обработки селективным агентом и процесса выделения S-форм.

1. Способ получения 5-форм энтеробактерий путем выращивания диссоциированной культуры на питательной среде, отличающийся тем, что, с целью упрощения способа и повышения выхода S-форм, диссоциированную культуру выращивают в присутствии бактериофага Тэ в концентрации IOIO частиц фага/мл среды.

2. Способ по и. 1, о т л и ч а юшийся тем, что выращивание осуществляют на аминопептидном агаре, среде ЭНДО или аминопептидном бульоне.

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе

l. Кауфман Ф. Семейство кишечных бактерий. М., Медицина", 1959, с. 54.