Способ получения иммунной сыворотки
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ИММУННОЙ СЫВОРОТКИ путем иммунизации продуцентов специфическим антигеном с адъювантом с последуюшим забором крови и отделением целевого продукта, о тличаюшийс я тем, что, с целью псиаышения титра антител, в качестве адьюванта используют сополимер акриловой кислоты и Н пирролидона.
СОЮЗ СОВЕТСКИХ
СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ
РЕСПУБЛИК (1и (!1) 3(sl) А 64. К 391395
ГОсудАРственный НОмитет сссР
ПО делАм изОБРетений и ОткРытий и ;"- ? !ф ур. "
ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ, ;,- ;.,:„",. ;,,"
К ABTOPCKOMV СВИДЕТЕЛЪСТВУ (2 1) 3250637/28-13 (22) 22. 12. 80 (46) 15.06.83. Бюл. ¹ 22 (72) В, П. Евдаков, Л. Ф. Mocanosa, А. М. Нажмитдинов, P. В. Петров, И. B. Савинова.и P. М. Хаитов (53) 615. 373.3 (088.8) (56) 1. Петров P. В., Хаитов P. М.
Синтетические полиэлектролиты и peryJIHILHsl отдельных этапов иммуногенеза, Иммунология. T. 7. Регулярные клетки иммунной системы. Итоги науки и техники. М., изд. ВИНИТИ АН СССР, 1978. (54)(5.7) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ИММУННОА С ЫВОРОТКИ путем иммунизации продуцентов специфическим антигеном с адъювантом с последующим забором крови и отделениемцелевогопродукта, о т л и ч а ю ш и йс я тем, что, с целью повышения титра антител, в качестве адъюванта используют сополимер акриловой кислоты и Ц винилпирролидона.
759 а рования. Сополимер содержит 45 мол.% звеньев акриловой кислоты и 55 мол.-% звеньев Н -винилпирролидона. Молекулярная масса, оцененная по значению характеристической вязкости в 2н. КОН, составляет 1500008-1200000. Сополимер представляет собой белый порошок, хорошо растворимый в низших спиртах, воде, 953
Пример 1. Сополимер;акриловой кислоты и М -винилпирролидона получают методом радикальной сополИмеризации акрилОВОЙ кислоты с М «винилпирролидоном 40 в растворе метанола в присутствии ра-.> диального инициатора азодинитрилабисизомасляной кислоты (АДН) при 60 С. Смесь
4,97 мл И -винилпирролидона, 1,36 мл акриловой кислоты, 14,73 мл метилового 45 спирта и 0,0254 r АДН замораживают при температуре жидкого.. азота в вакууме, после чего доводят температуру до комнатной, Эту операцию проводят несколько раэ до достижения в системе остаточного
-4 50 давления, равного 1110 мм ртутного столба (1,33 10 4 гектопаскаля) и нагревают смесь 40 мин при 60 С, Реакционную массу выливают в 600 мл диэтилового эфира и выделяют сополимер по
55 известной методике. Выход сополимера
1,12 r, что составляет 17%. Состав сополимера определяют методами ЯМРспектроскопии и потенциометрического титИзобретение относится к области медицины, а именно к способам получения иммунных сывороток с высоким содержанием специфических антител к микробным антигенаме 5
Известен способ получения иммунной сыворотки путем иммунизации продуцентов специфическим антигеном с адъювантом с последующим забором крови и отделением целевого продукта jl)
Однако при известном способе nmryчают низкий титр специфических антител в иммунной сыворотке.
Целью изобретения является повышение, титра антител. 15
Это достигается тем, что при осуществлении способа получения иммунной сыво-, ротки, путем иммунизации продуцентов специфическим антигеном с адъювантом с последующям забором крови и отделением 20 целевого продукта, в качестве адъюванта используют сополимер акриловой кислоты и »винилпирролидона.
Способ осуществляют следующим образом в 25
В способе получения иммунной сыворотки путем иммунизации продуцентов специфическим антигеном с адъювантом с последующим забором крови и отделением целевого продукта в качестве адъюван-30 та используют сополимер акриловой кислоты и М -винилпирролидона. Сополимер содержит 45 мол,% звеньев акриловой кислоты и используется в виде 1-5%-ного водного расчъора в дозах 100 и Ж,) мг/кг. 5 физиологическом растворе, в водных раст ворах щелочей. Сополимер прак очески нетоксичен и существенно стимулирует антителогенеэ при вакцинации столбнячным анатоксином и коклюшной вакциной.
Пример 2. Проводят изучение влияния сополимера акриловой кислоты и
М -"винилпирролидона на специфический антителогенеэ при вакцинации коклюшной вакциной собак (весом 15-.20 кг), кроликов (весом 2-2,5 кг) и крыс (весом
200-250 r).Ðårt.USsi Ь (коклюшную моновакцину серии № 305 Ташкентского
НИИ вакцин и сывороток МЗ СССР) вводят подкожно собакам в дозе 10 млд. клеток, кроликам и крысам - по 7 млд. клеток. Сразу после инъекции животным внутривенно вводят сополимер 4%-ной концентрации в водном растворе (собакам в дозе 100 мг/кг веса тела, кроликам и крысам - в дозе 50 мг/кг веса тела). Через 8 дней после иммунизации у животных производят забор крови, отделяют целевой продукт - сыворотку, в которой определяют наличие антител к использованным антигенам методом пассивной гемагглютинации по Бойдену.
Пример 3. Исследуют влияние сополимера акриловой кислоты и К -винилпирролидона на иммунный ответ при вак,цинации столбнячньп4 анатоксином собак (весом 15-20 кг), кроликов (весом
2-2,5 кг) и крыс (весом 200-250 г).
4иМаХ< и um Ма и сит(столбнячный анатоксин серии № 95 Ташкентского НИИ вакцин и сывороток МЗ СССР) вводят подкожно собакам в дозе 10 ЕС, кроликам - 5 ЕС и крысам — 3 ЕС. После введения столбнячного анатоксина животным подопытных групп внутривенно инъепируют сополимер в дозе 100 мг/кг веса тела собакам и в дозе 50 мг/кг веса тела кроликам и крысам. Через 8 дней после иммунизации у животных производят забор крови, отделяют целевой продукт - сыворотку, в которой определяют наличие антител к использованным антигенам методом пассивной гемагглютинации по Бойдену.
Полученные результаты показывают, что введение сополимера животным всех
3 953759 4 использованных видов существенно повы- у собак 12-кратно, у кроликов — в 256 шает продукцию антител при вакцинации. раэ, у крыс «10-кратно.
Так, при введении сополимера одновременно с иммунизацией столбнячным анатокси- Предложенный способ получения иммунном продукция антител по сравнению с g ной сыворотки с использованием в качестконтролем (только вакцинация) повышает ве адъюванта сополимера акриловой кисся у собак более чем в 20 раз, у кроли- лоты и Й -винилпирролидона обеспечивает ков - в 4 раза, у крыс — в 20 раэ. Вве- выраженную стимуляцию иммунного ответа дение сополимера вместе с коклкнцной к использованным микробным антигенам вакциной повышает титр антител по срав- t0 и позволяет получать сыворотки с высонению с контролем (только вакцинация) кими титрами антител.
Составитель Ю. Алмазов
Редактор О. Юркова Техред М.Тепер Корректор И. Ватрушки па
Заказ 6356/1 Тираж 713 Подписное
ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий
113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5
Филиал ППП "Патент, r. Ужгород, ул. Проектная, 4
