Способ определения келлина

 

(72) Авторы нзобретення

А.А.Хабаров и Л.П.Xàáàðî ЯЯРЦЩЗ5АЯ

9АТЕН7501 тияичисыв (7) ) Заявнтель

Курский медицинский инсти ут у дио7щд (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ КЕЛЛИНА

Изобретение относится к аналитической химии, а именно к способам определения лекарственного препараI . та-2-метил-5,S-диметоксифуро- 4,5

6,71 хромон-келлина» и может быть применено для анализа этого соединения в различном материале, необходимом для клинических исследований и лекарственных форм.

Известен способ определения келлина, основанный на использовании полярографии t,1).

Недостатком данного способа является невысокая чувствительность 25 мкг/мл. .Наиболее близким к предлагаемому по технической сущности и достигаемым результатам является способ определения келлина путем растворения анализируемого вещества в этаноле с последующим измерением оптической плотности полученного раствора $ 2).

Недостаток известного способа состоит в его невысокой чувствительности (6 мкг/мл ) и неизбиратель. ности.

Цель изобретения - повышение чувствительности и избирательности способа.

Поставленная цель достигается тем, что согласно способу определения келлина путем растворения анализируемого вещества в хлороформе с последующим измерением интенсивности флуоресценции полученного раствора в качестве органического растворителя используют хлороформ и после растворения измеряют интенсивность флуоресценаии полученного раствора.

Предлагаемый способ позволяет без отделения от сопутствующих ингредиентов проводить количественное определение келлина в сложных лекарственных формах, а выСокая чувствительность (О,! мкг/мл ) и избира968714 тельность позволяет использовать его для количественного определения келлина в биожидкостях.

Установлено, что интенсивность флуоресценции келлина в хлороформе не изменяется 2 ч. Показано, что зависимость интенсивности флуоресценции келлина в хлороформе (с=10 мкг/мл ) от рН остается посто- 1В янной в интервале рН=3-7, Спектр возбуждения флуоресценции лежит в области от 320 до 380 нм с максимумом

350 нм, и спектр излучения флуоресценции - от 375 до 520 нм с максимумом 460 нм. Прямолинейная зависимость между интенсивностью флуоресценции и концентрации келлина соответствует О, I — 70 мкг/мл келлина.

Пример 1. Количественное определе ние к елл и на .

Табли ца 1

Найдено келлина

Навеска мелкоизмельченных таблеток, r

Иетрологические ха рактеристи ки по калибровоч- в таблетному графику, ках, г мкг/мл

Х = 0,0208

0,0213

0,0206

0,0221

0,0274

0,0211

0,0212 . 0,0209

0,0212

0,0212

0,0193

37 (у — +16 9. 10-4

Е =+12,7 10

0,95

32 а = 0,0208+12,7 10

27

fl р и м е р 2. Определение келлина в таблетках келлатрина следующего состава:

Келлин

Папаверина гидрохлорид .

Атропина сульфат

0,02

0,02

0,00025

0,0591

0, 0584

0,0561

0,0563

0,0540

0 «0517

0,0503

0,0491

О, 0476

0 0450

Томную навеску мелкоизмельченной таблетки (0,05 r) помещают в мерную колбу на 100 мл. Прибавляют 80 мл хлороформа и энергично встряхивают

5- 10 мин, добавляют хлороформ и перемешивают. К 3 мл данного раствора прибавляют 7 мл хлороформа, встряхи" вают и измеряют интенсивность Флуоресценции. Содержание келлина рассчитывают по калибровочному графику, для чего в ряд пробирок отмеряют

1,0; 3,0; 5,0; 7,0 и 10 мл стандартного раствора келлина в хлороформе с содержанием 100 мкг/мл, доводят все растворы до 10 мл хлороформом., взбалтывают и флуориметрируют одновременно с раствором исследуемых образцов. По результатам этих измерений строят калибровочный график. Результаты количественного флуориметрического определения келлина в таблетках по

0,02 r представлены в табл.1.

Точную навеску (0,05 г ) мелкоиз- . мельченной таблетки помещают в мерную колбу на 100 мл, прибавляют 3050 мл хлороформа, энергично встря55 хивают 5 мин, добавляют хлороформа до метки, перемешивают. К 3 мл данного раствора прибавляют 7 мл хлоро5 968714 Ф форма и измеряют интенсивность флуо Результаты количественного флуоресценции. Содержание келлина рассчи- риметрического определения келлина тывают по калибровочному графику в таблетках келлатрина представлены (см.пример 1 . в табл.2.

Таблица 2

Навеска мелкоизмельченных табпеток, г

Найдено келлина

Метрологические характеристики по калибро.вочному графику, мкг/мл в таблетках, г

Х = 0,0201

О, 0621

О, 0196

О, 0216

О, 0197

0,0202

0,0201

0,0207

0,0205

0,0190

0,0594

0,0581

0 =".14 710 4

+11,1 10-4

096

-4 а = 0,0205411,1. 10

28

0,0202

0,0195

Пример 3. Определение келлина в таблетках викалин следующего состава:

Висмут основной 0,35

Магния карбонат основной

Натрия гидрокарбонат

Порошок аира и коры крушины 0,025

Рутин и келлин 0,005

Точную навеску (0,1 г) мелкоизмельченной таблетки прмещают в мерную

0,4

0,2

Таблица 3

Навеска мелкоизмельченных таблеток,г

Найдено келлина

Метрологические характеристики по калибровочному графику, мкг/мл в таблетках, Г

0,0049

0,0046

О, 1219

0,1173

Х = 0,0047

О;0534

0,05»

0, 0504

0,0492

О, 0473

О, 0451

О, 0449 колбу емкостью 50 мл, прибавляют

30 мл хлороформа и энергично встряхивают 5 мин, добавляют хлороформа до метки, перемешивают. 10 мл данного раствора переносят в кювету и измеряют интенсивность флуоресценции.

Содержание келлина расчитывают по калибровочному графику (см.пример 11, Результаты количественного флуориметрического определения келлина в таблетках викалин представлены в табл.3.

968714

Продолжение табл. 3

Найдено келлина

Навеска

Метрологические. характеристики мелкоизмельченных таблеток, r по калибро« вочному графику, мкгlмл юаезвеюее в в таблетках, г

0, 1144

0,0043

0,0044 б = 28,2 ° 10

О, 1.121

Ъ

О, 1118

0,0044

0,0051

0,0052

0,0051

0,0044

0,0047

E =21,2 10

О,, 1075

0,1051

0,0978

0,1009

0,0957 а = 0,0047+21 2. 10-ь

Формула изобретения

Способ определения келлина путем растворения анализируемого вещества и в органическом растворителе, о т л ич а ю шийся тем, что,с целью повышения чувствительности и избирательности способа, в качестве органического растворителя используют

40 хлороформ и после растворения измеряют интенсивность флуоресценции полученного раствора.

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе а 1. Орлов Ю.Е., Дзюба П.П. Опре" деление келлина полярографическим методом. -" Аптечное дело", 1965, с.52-53.

2. Келлин - стандарт. ФС 42-956-75 (прототип}. тель A.Æèäèêîâà м, Тепер Корректор О.Билак

Предложенный способ в 60 раз чувствительнее .известного, что дает возможность эффективно использовать его при биофармацевтических и других биохимических исследованиях для разработки оптимальной

Соста ви

Редактор П.Коссей Техред

Заказ 8157/72 Тираж 887 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Филиал ППП "Патент", r. Ужгород, ул. Проектная, 4

Пример 4. Определение келлина в крови и моче (искусственная смесь). К 1 мл плазмы крови или мочи, содержащей 30 мкг келлина, прибавляют 5 мл Фосфатного буферного раствора с рН 6-7, 1О мл хлороформа, перемешивают 5 мин. Центрифугируют 3 мин при 3000 об/мин. Хлороформный слой сливают в выпарительную чашку, экстрагирование повторяют, выпаривают на водяной бане досуха. К остатку прибавляют 10 мл хлороформа,флуориметрируют одновременно со стандарт- ными растворами келлина с содержанием 1,0; 3,0; 5,0; 7,0 и

10,0 мкг/мл в хлороформе. лекарственной дозы и ритмах их назначения.