Дигидрохлорид 1-(3-нитро-4-метоксибензил)-2-[бис-(2- хлорэтил)аминометил]имидазола, проявляющий противоопухолевую активность

 

(19)SU(11)976654(13)A1(51)  МПК ⁶    _{C07D233/64, A61K31/415}(12) ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯк авторскому свидетельствуСтатус: по данным на 17.12.2012 - прекратил действиеПошлина:

(54) ДИГИДРОХЛОРИД 1-(3-НИТРО-4-МЕТОКСИБЕНЗИЛ)-2-[БИС-(2- ХЛОРЭТИЛ)АМИНОМЕТИЛ]ИМИДАЗОЛА, ПРОЯВЛЯЮЩИЙ ПРОТИВООПУХОЛЕВУЮ АКТИВНОСТЬ

Предлагается новое соединение дигидрохлорид 1-(3-нитро-4-метоксибензил)-2-[бис-(2-хлорэтил)аминометил] имидазола, проявляющее противоопухолевую активность, которое может найти применение в медицине. Наиболее близким структурным аналогом предлагаемого соединения является 4(5)-[бис-(2-хлорэтил)аминометил] имида- зол. Сведения о его биологической активности в литературе не приведены. В настоящее время в качестве противоопухолевого препарата широко применяют сарколизин. Однако этот препарат не обладает избирательностью действия, высокотоксичен и угнетает костномозговое кроветворение. Цель изобретения расширение арсенала средств воздействия на живой организм. Поставленная цель достигается описываемым дигидрохлоридом 1-(3-нитро-4-метоксибензил)-2-[бис-(2-хлорэтил)аминометил]имидазола формулы
(ClCH₂CH₂)₂N CH проявляющим противоопухолевую активность. Описываемое соединение получают исходя из имидазола по следующей схеме: алкилирование имидазола 3-нитро-4-метоксибензилхлоридом в жидком аммиаке дает 1-(3-нитро-4-метоксибензил)имидазол (I), оксиметилирование которого формалином приводит к образованию 1-(3-нитро-4-метоксибензил)-2-оксиметил имидазолу (II), последний с помощью хлористого тионила переводят в соответствующее хлорметильное производное (III), обработав которое диэтаноламином получают 1-(3-нитро-4-метоксибензил)-2-[бис-(2-этил)амино-метил]имидазол (IV), замена в бис-оксипроизводном оксигруппы на хлор под действием хлористого тионила приводит к образованию описываемого дигидрохлорида 1-(3-нитро-4-метоксибензил)-2-[бис-(2-хлорэтил)аминометил]имидазола. Строение получаемых в процессе синтеза соединений подтверждено данными элементного анализа, чистота проверена тонкослойной хроматографией на силуфоле UV-254 в системах н-бутанол уксусная кислота вода 4:1:5 (соединения I, II и III), н-бутанол уксусная кислота вода, 4:1,5:5 (соединения IV и V). Молекулярные веса определяют масс-спектрометрически. Масс-спектры снимают на приборе МХ-1303 с прямым вводом вещества в ионный источник. П р и м е р. 1-(3-Нитро-4-метоксибензил)имидазол (I). В 50 мл жидкого аммиака растворяют 6,8 г (0,1 моль) имидазола и при перемешивании вводят 2,3 г (0,1 моль) металлического натрия в течение 10-15 мин. Затем добавляют 22 г (0,11 моль) 3-нитро-4-метоксибензилхлорида, растворенного в 30 мл диметилформамида, смесь перемешивают при охлаждении в течение 2 ч и оставляют на ночь. Добавляют воду, выпавший осадок отфильтровывают и перекристаллизовывают из смеси этанол-вода, 1:1. Выход 16,0 г (68,8%), т.пл. 119-120^оС, R_f 0,33. Найдено, C 56,46; H 4,72; N 17,84
C₁₁H₁₁N₃O₃
Вычислено, С 56,65; Н 4,75; N 18,02. М-233 (масс-спектрометрически).1-(3-Нитро-4-метоксибензил)-2-оксиметилими-дазол (II). Смесь 9,3 г (0,04 моль) 1-(3-нитро-4-метоксибензил)имидазола и 10,5 г формалина нагревают в ампуле 6 ч при температуре 130-135^оС и 15 ч при 110-120^оС. Ампулу вскрывают, смесь подкисляют 10%-ной соляной кислотой до кислой реакции на конго, а затем подщелачивают водным аммиаком. Выпавший осадок отфильтровывают и перекристаллизовывают из смеси этанол-вода 1:1. Выход 7,2 г (68,4%), т.пл. 165-166^оС, R_f 0,34. Найдено, С 54,52; Н 4,75; N 15,83
C₁₂H₁₃N₃O₄
Вычислено, С 54,75; Н 4,98; N 15,96. М-263 (масс-спектрометрически). Гидрохлорид 1-(3-нитро-4-метоксибензил)-2-хлорметилимидазола (III). Смесь 35 мл хлористого тионила и 10,5 г (0,04 моль) 1-(3-нитро-4-метоксибензил)-2-оксиметилимидазола кипятят 30 мин, хлористый тионил отгоняют на водоструйном насосе, к остатку добавляют абсолютный эфир. Осадок отфильтровывают и промывают на фильтре абсолютным эфиром. Выход 11,5 г (90,3%), т. пл. 190-191^оС (с разложением, абсолютный этанол) R_f 0,43. Найдено, С 45,15; Н 4,10; N 13,42; Cl 22,54. C₁₂H₁₃Cl₂N₃O₂
Вычислено, С 45,30; Н 4,12; N 13,21; Cl 22,29. М-281/283 (масс-спектрометрически). 1-(3-Нитро-4-метоксибензил)-2-[бис-(2-окси-этил)аминометил] имидазол (IV). К смеси 15,9 г (0,05 моль) гидрохлорида 1-(3-нитро-4-метоксибензил)-2-хлорметили- мидазола в 150 мл диоксана добавляют 12,6 г (0,12 моль) диэтаноламина, растворенного в 25 мл диоксана, и нагревают на водяной бане 25 ч. Затем диоксан отделяют от маслообразного осадка. Диоксановый раствор концентрируют в вакууме, к остатку добавляют воду и смесь оставляют на ночь в холодильнике. Выпавший осадок отфильтровывают. Выход 10,5 г (60,0%), т.пл. 108-109^оС, R_f 0,50, т.пл. дигидрохлорида 185-187^оС (с разложением). Найдено, C 55,04; H 6,21; N 15,68. C₁₆H₂₂N₄O₅
Вычислено, C 54,85; H 6,33; N 15,99. Дигидрохлорид 1-(3-нитро-4-метоксибензил)-2-[бис-2-хлорэтил)аминометил] ими- дазола (V). Смесь 3,5 г (0,01 моль) 1-(3-нитро-4-метоксибензил)-2-[бис-(2-оксиэтил)аминоме-тил] имидазола и 25 мл хлористого тионила кипятят 7-8 ч. Раствор концентрируют в вакууме водоструйного насоса и к остатку добавляют абсолютный эфир. Выпавший осадок отфильтровывают, промывают абсолютным эфиром и сушат в вакуум-эксикаторе над хлористым кальцием. Выход 4,0 г (87,0%), гигроскопичные кристаллы, R_f 0,57. Найдено, C 41.46; H 4,55; N 11,85; Cl 30,40. C₁₆H₂₂Cl₄N₄O₃
Вычислено, С 41,76; Н 4,81; N 12,18; Cl 30,82. Биологические испытания токсичности и противоопухолевой активности дигидрохлорида 1-(3-нитро-4-метоксибензил)-2-[бис-(2-хлорэтил)аминометил] имидазола (V) и сарколизина, взятого в количестве контроля, проведены на белых беспородных мышах весом 18-20 г и крысах весом 90-110 г. Предлагаемое соединение (V), как и сарколизин, растворимы в воде. В качестве растворителя при их испытании использован 0,9%-ный раствор хлорида натрия. Токсичность соединения V изучена на мышах обоего пола при однократном внутрибрюшинном введении. Установлены абсолютно смертельная (ЛД₁₀₀), средняя смертельная (ЛД₅₀) и максимального переносимая (МПД) дозы. Противоопухолевую активность описываемого соединения определяют на мышах и крысах с перевиваемыми опухолями: саркомой 45,180, карциносаркомой Уокера 256, карциномой Герена, лейкозом Швеца, лимфосаркомой Плисса и асцитной карциномой Эрлиха. Лечение крыс (8-10 животных в каждой группе) с саркомой 45, карциносаркомой Уокера и карциномой Герена начинают на пятые сутки после перевивки им опухоли, а в случае трансплантации лимфосаркомы Плисса и лейкоза Швеца на следующий день эксперимента. Подопытным крысам ежедневно в течение 8 дней внутрибрюшинно вводят описываемое соединение V в дозе 15 мг/кг, что составляет 1/12 от ЛД₁₀₀. В этой дозе соединение V испытывают на карциносаркоме Уокера при пероральном применении. Лечение мышей с саркомой 180 осуществляют через четверо суток после перевивки им опухоли. Подопытные животные получают 6 ежедневных внутрибрюшинных инъекций соединения V в дозе 12,5 мг/кг, составляющей 1/15 от ЛД₁₀₀.Через день после последней инъекции крыс и мышей забивают эфиром и определяют вес животного и опухоли. О противоопухолевой активности соединения V судят по проценту торможения роста опухоли (Т). Лечение мышей с асцитной карциномой Эрлиха начинают через 24 ч после перевивки опухоли. Подопытные животные (8 мышей в каждой группе) получают 6 внутрибрюшинных инъекций соединения V. После шестой инъекции мышей оставляют выживать. Погибших в течение опыта мышей взвешивают и вскрывают для установления наличия или отсутствия асцитической жидкости, а после гибели всех животных подсчитывают среднюю продолжительность их жизни (СПЖ) в каждой группе. Результаты сравнительного изучения противоопухолевой активности и токсичности соединения V и сарколизина приведены в табл. 1 и 2. Установлено, что заявляемое соединение в 7 раз менее токсично, чем сарколизин (см. ЛД₅₀ в табл.1). Меньшая токсичность описываемого соединения V для животных по сравнению с сарколизином установлена и в химиотерапевтических экспериментах, где они были применены в адекватных дозах (см. коэффициент роста (К_р) в табл.2). В результате проведенных исследований выявлено также, что соединение V обладает выраженной противоопухолевой активностью в отношении опухолей крыс, при этом наибольшую чувствительность к соединению проявляет карциносаркома Уокера 256 как в случае внутрибрюшинного, так и перорального применения (см. табл. 2). По действию на опухоли крыс эффективность соединения V практически не отличается от сарколизина. Однако в отношении использованных мышиных опухолей, особенно саркомы 180 в адекватных с сарколизином дозах, соединение V обнаруживает несколько большую активность (см. табл.2). Проведенные испытания показали, что описываемое соединение малотоксично, обладает высокой противоопухолевой активностью и по ингибирующему влиянию на рост мышиных опухолей превосходит сарколизин.

Формула изобретения

Дигидрохлорид 1-(3-нитро-4-метоксибензил)-2-[бис-(2-хлорэтил)аминометил] имидазола формулы

проявляющий противоопухолевую активность.

РИСУНКИ

Рисунок 1