Способ определения жизнеспособности зооспорангиев возбудителя опухолей картофеля

 

СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ЖИЗНЕСПОСОБНОСТИ ЗООСПОРАНГИЕВ ВОЗБУДИТЕЛЯ ОПУХОЛЕЙ КАРТОФЕЛЯ, включающий окрашивание :юс раствором производного тетразолия в присутствии гриба-активатора , отлич ающи йся тем, что, с целью ускорения процесса, окрашивание проводят 0,5 - 0,7%-ным раствором нитросинего тетраэолия при Зб-ЗВ с в присутствии гомогената гриба Aspergillus niger 36.

СОЮЗ СОВЕТСНИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК

3(59 С12Ы1 00

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ OCOP

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТИЙ

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К ABTOPCHCNIY СВИДЕТЕЛЬСТВУ

)1 И 1»:,. ( (t

l(21) 3338996/30-15 (22) 22,09.81 (46) 30е04.83. Бюл. у 16 .(72) Н.Е.Сурнакова, Е.Н.Феофилова и К;Е.Круглякова (71) Ордена Ленина институт химичес.кой физики АН СССР (53) 576.807(088.8) . (56) 1, Рак картофеля, Л., Колос, 1978, с. 72.

2. Phytopathology, 1967, 9 57, р. 965-968.

„.SU„„!1 014880 А (54) (57) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ЖИЗНЕСПОСОБНОСТИ ЗООСПОРАНГИЕВ ВОЗБУДИТЕЛЯ

ОПУХОЛЕЙ КАРТОФЕЛЯ, включающий окрашивание ик раствором производного тетразолия в присутствии гриба-активатора, отличающийся тем, что, с целью ускорения процесса, окрашивание проводят 0,5 — 0,7В-ным раствором нитросинего тетразолия при

36-38оС в присутствии гомогената гриба Aspergillus niger Зб.

1014ВВО

Изобретение относится к микробиологическим исследованиям и может быть использовано в сельском хозяйстве и в Государственных инспекциях по карантину р1ля определения жизнеспособных зооспорангиев возбудителя опухо-, 5 лей картофеля.

Единственно достоверным способом определения жизнеспособных эооспорангиев является биологический, т.е„ высаживание восприимчивых к раку сор- 10 тов картофеля в почву, содержащую зооспорангии патогена (1) .

Однако результаты биологической проверки могут быть получены только через 60 сут после высадки картофеля )5 в почву, так как это вегетационный период развития растений картофеля, после которого проводят учет зараженных и незараженных растений по опухолевым наростам на клубнях, столонах и стеблях картофеля.

Известен также способ определенияжизнеспособных зооспорангиев возду- i дителя опухолей картофеля, заключающийся в окрашивании их 0,5%-мыа три125 фенилтетразолхлоридом {ТТХ) при 35©С в присутствии гриба-активатора Озрех gilius tumigatus. Bce жизнеспособные зооспорангии окрашиваются в розовый цвет на 45 сутки (2).

Недостатком способа является его длительность.

Цель изобретения - ускорение про цесса

Для достижения цели в способе определения жизнеспособности зооспо,рангиев возбудителя опухолей картофе.ля, включающем окрашивание их растяором производного. тетраэолия в присутствии гриба-активатора, окрашивание проводят 0,5-0,7%"ным раствором нит росинего тетразолия при 36-38 C s присутствии гомогената гриба Aspergillus niger 36.

Пример, К 50 мг эооспорангиев добавляют 2 мл 0,5% НСТ, 6 мл

0,05 И КН РО и 5 капель гомогената

0spergillus niger Зб и термостатируют при 37©С. Микроскопирование про" водят на каждые 3-4 сутки.

На ll сутки инкубирования жизне- способные зооспорангии окрашиваются в черный и бурйй с синим оттенком цвета 904 и 10% не окрашиваются (зеленые) - проросшие или пустые зооспорангии1 ., Контроль - зооспорангии убитые автоклавированием в течение 11 ч (4ч+ 4ч+ Зч) при 125 С и 1,5 атм.

Убитые зооспорангии окрашиваются в розовый цвет 75%, в бурй и черный цвета 22% (10%+12%} и ЗЪ не окрашиваются (пустые зооспорангии).

Результаты окрашивания жиъых и убитых зооспорангиев приведены в таблице./

1014880

66 х) }

1

1

-I

3! !

)

I

1

1 l

1

;3

:1

3 о

Р» !

I Ф Ц

I

I

1

3

3

1

1

)

ИЪ а

Ю

+1

»В ю

° Ь

I

»h а

Ю

+I

О

° Ь

1!

»Ч

»»Ъ

М

ОЪ

I

1

3 !

I !

f !

I

1

1

I

I

»»Ъ

М а ( (1

» »Ъ

»-»

МЪ

% »3»

° Н

Г Ъ »3» а 1

»»Ъ

» ) I

»Ъ

+! ьь

I о

Q о

И о

0

И

ОФ

ОФ

Я М

Ц»»3

N Р

I !

I !

I

1 о

И

ОФ

Ф И хи

И Ю хо

I») V

j) iI

»»!

Ц о

Р

Е» о

М о

Р» о

I

I -o

I! с

} Р»! Q

I 3fI

1 Ф

I М

1 й

1»»3

1 Р» о 1 . И

Q о о

1 Ц

I Ж

) i

l a!

I 3

1 9

1 Р»

; 1 )3(I 1

I 9

I Я о

3 tO I о ! Р» I ! 3 ! Ж ! Ф и ! 9 I

» и 1 1

» Э

-l A

I 9 I I » 1

1 I

i I

9 I

I 3 I

I I»I 1. о о а

l Я

I Е! Ф

1 Ф

»»Ъ !

»»

I 1.! 9 !

I 3.й О I L !

I 4t

3 Д

» Ь .(Л

+1

Ж

) о

+I ю"1 CO

»»

»»Ъ

»(-»»Ъ

»»Ъ ф

СЧ

»Ъ с

»(! g

Г Ъ»-» .

М

l +}

РЪ

CI

»»Ъ

СЧ

1

<М

) ! !

I

I.

I

1

1

1

1 !

1 (I

3

I

I

1

1, !

I

I (I

1014880

Составитель М.Мирзаев

Редактор E.Ëóøíèêoâà Техред Ж.Кастелевич Корректор A.дзятко

Заказ 3132/2l Тираж 523 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35„ Раушская наб., д. 4/5

Филиал ППП Патент, r.Óæãoðoä, ул.Проектная, 4 Она включает М+ tim и достоверности различий Ы окрашенных зооспорангиев в разные цвета (черных ат бурых, бурых от зеленых, зеленых от розовых). Условие достоверности 2,18.

Использование предлагаемого способа обеспечивает более быстрое опрецеление жизнеспособных зооспорангиев (11 сутки) и высокую достоверность определения