Способ минерализации костной ткани

 

СПОСОБ МИНЕРАЛИЗАЦИИ КОСТНОЙ ТКАНИ, включающий термическое озоление в муфельной печи, отличающийся тем, что, с целью сокращения длительности процесса и уменьшения потерь легколетучих веществ, образец выдерживают при 400-450с в течение 5-6 ч, получен .ную золу обрабатывают концентрированной азотной кислотой в течение 25-30 мин при 110-120°С до получения бесцветного раствора. сл

СООЭ СОВЕТСНИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК

17 А (19) 01) 3151) G 01 N 33/48

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТИЙ

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Н ABTOPCHOMY СВИДЕТЕЛЬСТВУ

1д .". (21) 3342175/28-13 ("2) 29 ° 09.81 (46) 07.07. 83. Бюл. Р 25 (72 ) Ю. А. Ершов, Н . A . .Рощина и

Т. С. Чупятова (71) 1-й Московский ордена Ленина и ордена Трудов ого Красного Знамени .медицинский институт им, И,М.Сеченова (53) 612. 75. 015. 31 (088. 8) (56) 1. Smith С.F. Wet oxidation of

organic matter omployang perehloric

acid at graded oxidition роФentians

and, contго11ей temperatures. .Anal.

Chim Acta v, 17, 1957,р. 175.

2. i!artin А. А comparison of вове bone ashing Techniques. Health

physics. The official Journal of the

health plysics society, v. 13, р, 1348-1351, 1967. (54) (57) СПОСОБ МИНЕРАЛИЗАЦИИ

КОСТНОЙ ТКАНИ, включающий термическое озоление в муфельной печи, отличающийся тем, что, с целью сокращения длительности процесса и уменьшения потерь легколетучих веществ, образец выдерживают при

400-450 С в течение 5-6 ч, получено, ную эолу обрабатывают конце нтрирова нной азотной кислотой в течение

25-30 мин при 110-120 С до получения бесцветного раствора.

1027617

Составитель h Донцов

Техред С,Мигунова

Корректор А. Повх

Редактор С, Юско

Заказ 4730/48

Тираж 873

Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035р Москва, Ж-35, Раушская наб.г д. 4/5

Филиал ППП "Патент", г. ужгород, ул.,Проектная, 4

Изобретение относится к аналитической биохимии, а именно к способам об работ ки биологиче ского материала с целью последующего элементарного анализа, и может быть использовано для определения содержания микроэлементов в костной ткани в норме и при патологиях.

Известен способ минерализации костной ткани„ включающий экстракцию из кости жира с последующей обработкой образца смесью концентрированных азотной и хлорной кислот в соотношении 1: 4 в течение 30 мин (1 ).

Недостатками способа являются неполнота озоления материала, большой расход реактивов и взрывоопасность.

Известен способ минерализации костной ткани путем термического (сухого) озоления, включающий выдерживание образца в муфельной печи при 800 C в течение 18 ч (2 ).

Однако способ длителен и приводит к большой потере легколетучих компонентов.

Цель изобретения — сокращение длительности процесса минерализации костной ткани, уменьшение. потерь легколетучих веществ.

Поставленная цель достигается согласно способу минерализации костной ткани включающему терглическое озоление в муфельной печи, при котором образец выдерживают при

400-450 С в течение 5-6 ч, полученную золу обрабатывают концентрированной азотной кислотой в течение

25 -30 мин при 110-120ОС де получения бесцветного раствора.

Способ осуществляют следующим образом.

2 г предварительно высушенного о до постоянного веса при 105 С образца кости помещают в фарфоровом тигле в муфельную печь. Постепенно доводят температуру в печи до 400450 С и проводят термическую обработку в течение 5-6 ч.

Золу, охлажденную в эксикаторе до постоянной массы, переносят при помощи 5 мл концентрированной азотной кислоты в колбу Кьельдаля и проводят дальнейшее озоление материала путем нагревания образца при 115 0 в течение 25-30 мин до получения бесцветного раствора.

Для качественной проверки минераj лизата на полноту озоления упаривают полученный раствор до сухого остатка. Озоление считается законченным при получении остатка белого цвета.

При получении остатка желтоватого или буро-черного цвета (следы обуг10 ленных органических веществ) добавляют новую порцию (5 мл ) концентрированной азотной кислоты и продолжают минерализацию до завершения.

Белий сухой остаток растворяют в 5 мл концентрированной соляной кислоты. Полученный раствор переносят в мерную колбу на 50 мл и доводят до метки бидистиллированной водой, тщательно перемешивают.

Содержание элементов в минерализате определяют путем атомизации .20 мкл аликвот в графитовой печи атомно-абсорбционного спектрометра фирмы "Перкин-Эльмер".

Пример. 2 г высушенного до постоянной глассы при 105 С образца кости помещают в фарфоровом тигле в муфельную печь. Доводят температуру в печи до 400 С и проводят термическую обработку B течение 5 ч.

Золу охлаждают в эксикаторе до постоянной массы и переносят при помощи 5 мл концентрированной азотной кислоты в колбу Кьельдаля и проводят дальнейшее озоление материas.:à путем нагревания при 110"С в течение 25 мин до получения бесцвет— ного раствора.

Способ позволяет з начительно сократить время проведения процесса минерализации (c 18 ч согласно известному способу до 7 ч по предлагаемому ). Это дает возможнссть озолять большие массивы образцов в короткие сроки.

Кроме того, способ позволяет получать хорошо воспроизводимые результаты вследствие сокращения потерь легколетучих компонентов, что обеспечивается снижением температуры термической обработки материала с 800 до 400 С.