Способ определения хлоракона
СОЮЗ СОВЕТСКИХ
%UN °
РЕСПУБЛИК
„„SU„„1078292 A (д) 0 01 Б 21/78
ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР
ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТИЙ
19
К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ 21 ) 3489387/23-04 (22) 06.09.82 (46) 07.03.84. Бюл. Р 9 (72) С.Г.Жемчужин, E.Ä.Êîëåãîâà и Л.Г.Холодкова (71) Всесоюзный научно".исследова-тельский институт фитопатологии (53) 543.42.063 (088.8)
{56) 1. Авторское свидетельство СССР
9.834469, g 01 н 21/78, 1981.
2. Авторское свидетельство СССР
9 653537, кл. G 01 N 31/16, 1981. (прототип). (54)(57) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ХЛОРАКОНА, отличающийся тем, что, с целью повышения селективности способа и сокращения времени определения, пробу анализируемого вещества последовательно обрабатывают резорцином или пирокатехином и.хлорнокислым железом в присутствии ацетатного буферного раствора и перекисью водорода с последующей обработкой полученной смеси 4-аминоантипирином в присутствии фосфатного буферного раствора и феррицианидом калия и фотометрированием полученного раствора.
ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
1078292!
Изобретение относится к аналитической химии лекарственных веществ, а именно к способу количественного фотометрического определения хлоро— кона N-бензил-в-хлорпропионамида.
Известен способ определения хлоракона путем растворения анализируемой пробы в этаноле, обработки полученного раствора этанольным рас-. твором тимолового синего с получением окращенного соединения 1 . !О
Недостаток способа состоит в его неселективности, так как большинство первичных и вторичных аминов, к классам которых относятся многие лекарственные препараты, мешают определению.
Наиболее близким по технической сущности и достигаемым реэультатфм является способ определения хлоракона путем обработки анализируемого вещества 30-40Ъ-ным раствором щелочи с последующим титриметрическим определением выделившегося хлоридиона (2 ). недостатками cIIoco6B являются его 25 неселективность, так как любое органическое вещество, содержащее при алифатическом радикеле атом хлора, будет также определяться в данных условиях, а также длительность способа (более 1 ч). 30
Цель изобретения состоит н повышении селективности и сокращении времени определения.
Поставленная цель достигается способом определения хлоракона путем последовательной обработки пробы анализируемого вещества реэорцином или пирокатехином и хлорнокислым железом в присутствии ацетатного буферного раствора и перекисью 40 водорода с последующей обработкой полученной смеси 4-аминоантипирином в присутствии фосфатного буферного растнора, феррицианидом калия и фотометрированием полученного раствора. 45
Пример 1. Количественное определение хлоракона н растворах.
РеаКтивы и растворы: резорцин или пирокатехин Зх10 3 М раствор в воде, железо хлорнокислое Fe(010<)g, 50
1,5 10 М раствор в воде; 0,005 М ацетатный буфер, рН-4; 4-аминоантипирин, 1Ъ-ный раствор н воде, ôîñфатный буфер, рН-9 (150 г дизамещенного фосфата калия растворяют н воде,55 разбавляют до 500 мл и прибавляют
15 мл 0,8 M раствора монозамещенного фосфата калия); стандартный раствор хлоракона, 1 мг/мл; перекись водорода, ЗЪ-ный раствор в воде, калий желеэосинеродистый K>Fe(0N)<, 1,4Ъ-ный раствор в воде.
В пробирке 0,2 мл раствора реэорцина смешивают с 0,2 мл раствора хлорнокислого железа, прибавляют 1мл раствора анализируемой пробы, смесь 65 встряхивают и приливают 3 мл ацетатного буфера и затем 0,05 мл раствора перекиси водорода. Пробирку встряхивают и оставляют на 10 мин при обычной температуре (18-25 С), прибавляют 3 мл фосфатного буфера и 0,1 мл раствора 4-аминоантипирена. Через
2 мин добавляют 0,2 мл 1,4Ъ-ного раствора феррицианида калия, пробирку встряхивают, оставляют на 10 мин и светопоглощение измеряют на приборе ФЭК-М-56 со светофильтром N 6 и с кюветами толщиной 1 см на спектрофотометре при длине волны 520 нм.
Концентрацию хлоракона находят по калибровочному графику.
Построение калибровочного графика.
В серию пробирок помещают по
0,2 мл раствора резорцина и хлорнокислого железа, прибавляют 0,0; 0,05;
0,1; 0,2; 0,3; 0,4 мл стандартного раствора хлоракона (1 мг/мл), объем растворов но всех пробирках доводят до 1,4 мл и далее поступают, как при проведении определения.
Опыты проводят в 5-кратной повторности. График строят н линейной системе координат по усредненным для каждой концентрации значениям оптическои плотности.
Полученные на фотоэлектроколориметре ФЭК-M-56 фотометрические данные приведены в табл. 1.
Пример 2 . В пробирке О, 2 мл
3 10 M водного раствора пирокатехина смешивают с 0,2 мл 1,5-10 Ì раствора хлорнокислого железа н воде, прибавляют 1 мл раствора анализируемого вещества, смесь встряхивают, прилинают 3 мл 0,005 М ацетатного буфера (рН-4).и затем 0,05 мл
3Ъ---ной перекиси водорода. Пробирку встряхивают, оставляют на 10 мин при обычной температуре (18-25 С), прибавляют 3 мл фосфатного буфера (рН-9; 150 г диэамещенного фосфата калия растворяют н воде, разбавляют до 500 мл и прибавляют 15 мл 0,8 М раствора однозамещенного фосфата калия ) и 0,1 мл 1Ъ-ного раствора
4-аминоантипирина. Через 2 мин добавляют 0,2 мл 1,4Ъ-ного растнора феррицианида калия, пробирку встряхивают, оставляют на 10 мин и светопоглощение измеряют на приборе ФЭК-М-56 со светофильтром 9 6 и кюветами толщиной 1 см или на спектрофотометре при длине волны 505 нм. Концентрацию хлоракона находят по калибровочному графику.
Фотометрические данные для раствора хлоракона после химического гидроксилирования в присутствиипирокатехинаи реакции с 4-аминоантипирином представлены в табл. 2
Таким образом, предлагаемый способ позволяет повысить селектинность.
1078292 ратов и транквилизаторов, в табл. 6с пирокатехином в присутствии других противосудорожных препаратов и транквилизаторов.
В табл. 7 представлены сравнительные аналитические характеристики предлагаемого фотометрического способа определения хлоракона и известного титрометрического способа.
Таблица 1 Содер канне хлоракона, мг
Оптическая плотность в серии опытов
Коэффициент вариации, В ср
2 3
А„
0,040 0,035 0,030 0,040 0,045 0,038 0,005 14,2
0,05
0,1
0,080 0,080 0,080 0,085 0,095 0,084 0,054
0,215 0,220 0,225 0,235 0,240 0,227 0,010
0,340 0,360 0,355 0,325 0,320 0,340 0,017
0,450 0,460 0,420 0,440 0,400 0,434 0,024
6,5
0,2
4,5
0,3
5,17
0,4
5,53
Таблица 2
Коэффициент вариации, В
Оптическая плотность в серии опытов
Содержание хроракона, мг
A А А+ А А
0,022 0,025 0,024 0,022 0,028 0,024 0,003 10,37
0,05
0,040 0,043 0,045 0,045 0,048 0,044 0,00?
5,08
0,10
5,64
0,090 0,095 0,099 0,102 0,090 0,095 0,005
0,20
0,172 0,186 0,178 0,183 0,174 0,179 0,006
3,31
0,30
0,338 0,340 0,321 0,325 0,341 0,333 0,009
2,79
1,71
0,40
0,430 0,450 0,441 0,008
0,50 определения и сократить время анали за с 1 ч до 25 мин.
Результаты определения хлоракона в растворах химическим гидроксилированием представлены в табл. 3-6, при этом в табл. 3-в присутствии резорцина} в табл, 4 — пирокатехина в табл. 5 — с резорцином в присутствии других противосудорожных препаСтандартное откло— нение, n -=5
Стандартное откло» нение, n=5
1078292
Т а б л и ц а 3
Ошибка анализа .
Хпоракон
Абсолютная, Относительная, Открывамкг В емость, %
94,7
10,7
69
8,0
92,0
150
143
4,7
95,3
6,0
150
141
94,0
4,8
250
238
95,2
250
236
5,6
94,4.350
5,1
332
94,9
94,0
6,0
350
329
Таблица 4
Ошибка анализа
Хлоракон, мкг
Найдено
Взято
75
93;3
6,7
75
9,3
90,7
94,7
142
150
5,3
150
140
6,7
93,3
250
4,0
96,0
250
236
5 6
94,4
337
350
3,7
96,3
350
341
2,6
97,4
437
450
2,9
97,1
440
450
2,2
97,8
Взято, мкг
Найдено, %
L 9
Абсолютная, Относительная миг Ъ
Открываемость, В
1078292
Найдено хлоракона, мкг
Ошибка анализа, Ъ
Взято, мкг бензонала мепробамата хлоракона триметина
0,081
0,218
500
100
1000
192
200
0,80
100
500
1000
0,216
0,080
0,217
0,016
190
200
500
100
191
1000
4,5
200
500
0,012
500
500
0,023
Оптическая Найдено плотность хлораконечного кона, раствора мкг
Сшибка анализа, В хлора- тримекона тина
1000
100
186
200
100
500
200
1000
188
100
500
200
189
500
500
500
Взято, мкг бензо- мепробанала мата
Оптическая плотность конечного раствора
0,042
0,088
0,041
0,089
0,042
0,089
0,013
0,016
0,015
Таблица 5
Т а б л и ц а 6
1078292
Таблица 7
Аналитический параметр
Известный
Продолжительность .анализа, мин
Около 50
1,6
0,05
Температура протекания. аналитической реакции, С о
152
18-25
Количество стадий анализа
Составитель С. Хованская
Редактор Н. Лазаренко Техред Т.Дубинчак Корректор Г. Решетник
Заказ 936/36 Тираж 823
Подписное
ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий
113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5
Филиал ППП "Патент", r. Ужгород, ул. Проектная, 4
Чувствительность (минимальная определяемая концентрация), мг/мл
Способ
Предлагаемый
2 (гидроксилирование и образование окраски) 3 (щелочное омыление, нейтрализация, титрование)
