Способ введения тритиевой метки в органические соединения

Авторы патента:

C07B23 - Общие способы органической химии; устройства для их проведения (получение эфиров карбоновых кислот теломеризацией C07C 67/47; теломеризация C08F)

СПОСОБ ВВЕДЕНИЯ ТРИТИЕВОЙ МЕТКИ В ОРГАНИЧЕСКИЕ СОЕДИНЕНИЯ путем обработки вещества, нанесенного на подложку, газообразным тритием, активированным на раскаленной вольфрамовой нити, отличающийс я тем, что, с целью повьшения производительности процесса и увеличения радиохимического выхода, в качестве подложки используют хроматографическую бумагу.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ .

РЕСПУБЛИН..SU„„

3(511 С 07 В 23/00

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ

Н ABTOPCHOMV СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 3279279/23-04 (22) 09.03.81 (46) 30.04.84. Бюл. Я- 16 (72) В.С. Смоляков и Л.А. Нейман (71) Институт биоорганической химии им. M.M. Шемякина (53) 547.964.4.07(088.8) (54)(57) СПОСОБ ВВЕДЕНИЯ ТРИТИЕВОЙ

МЕТКИ В ОРГАНИЧЕСКИЕ СОЕДИНЕНИЯ путем обработки вещества, нанесенного на подложку, газообразным тритием, активированным на раскаленной вольфрамовой нити, о т л и ч а ю щ и йс я тем, что, с целью повьппения производительности процесса и увеличения радиохимического выхода, в качестве подложки используют хроматографическую бумагу.

1089080 тритиевой метки в органические соединения, заключающемуся в том, что органическое соединение, нанесенное на хроматографическую бумагу, подвергают воздействию газообразного трития, активированного на раскаленной вольфрамовой нити, в качестве подложки для нанесения исходных соединений используют хроматографическую бумагу.

Применение предлагаемого способа позволяет повысить производительность процесса путем увеличения количест-, ва наносимого на подложку исходного соединения до 10 мг (с 1 мг в известном способе) и радиохимический выход конечных продуктов (до ЗОЖ).

Кроме того, имеется возможность получать меченные тритием соединения, которые в условиях известного, способа разрушаются (например, 1,2-димиристоил-Sn-глицеро-Ç-фосфохолин).

Способ включает следующие стадии: нанесение органического соединения на хроматографическую бумагу; помещение бумаги с нанесенным органическим соединением в реакционный сосуд; вакуумирование реакционного сосуда с одновременным охлаждением внешних стенок сосуда жидким азотом; выведение газообразного трития в реакционный сосуд; активирование газообразного трития подачей напряжения на вольфрамовую нить, находящуюся внутри реакционного сосуда; откачивание избыточного газообразного трития; отключение реакционного сосуда от вакуумной системы и смывание меченого соединения с бумаги соответствующим растворителем. !

Пример 1. На бумагу марки

ФНС размером 220х100 мм наносят

10,0 мг 2s-иэокапрнлоил-3R-оксиметил- -бутиролактона (А-фактора).

Помещают ее в реакционный сосуд. (диаметр 75 мм, высота 100 мм), вакуумируют, охлаждают жидким азотом.

Затем напускают в реакционный сосуд газообразный тритий (50 мКи), нагревают вольфрамовую нить, размещенную вдоль оси реакционного сосуда, до

2200 К(время облучения 30 с), откачивают остаточное количество газообразного трития, вновь подают свежую порцию газообразного трития (50 мКи) повторяют облучение. После откач- . и избыточного газообразного трития нимают охлаждение, смывают с фильИзобретение относится к способам введения тритиевой метки в органические соединения и может найти применение в биохимии.

Известен способ получения мечен- 5 ных тритием органических соединений, согласно которому вещество, нанесенное на пористую поверхность, обрабатывают газообразным, тритием, активированным разрядным методом.

10, Недостатком данного метода являетоя использование больших количеств газообразного трития, что значительно снижает радиохимический выход меченых соединен?ий и требует специаль- 1з ных мер по утилизации избыточного трития и его циркуляции. Кроме того, установка, применяемая в разрядном методе, сложна в аппаратурном оформлении. 20

Наиболее близок к предлагаемому способ введения тритиевой метки в органические соединения, основанный на термической активации газообразного трития, согласно которому органическое соединение наносят в виде тонкой пленки на внутреннюю поверхI ность стеклянного реакционного сосу" да, по оси которого размещена вольфрамовая нить, затем реакционный со

30 суд вакуумируют, охлаждают жидким азотом, вводят тритий до давления

-2 -3

10 -10 торр, нагревают вольфрамовую нить до 1600-2000 К в течение 0,5 мин, удаляют избыток трития и смывают подходящим растворителем со стенок реакционного сосуда меченое соединение, которое отмывают от лабильного трития и подвергают дальнейшей очистке.

Недостатками известного способа

40 являются трудность нанесения исходного вещества в виде тонкой пленки на стеклянную поверхность, неоднородность образующейся пленки, низкая производительность процесса, 45 обусловленная тем, что создать достаточно тонкую пленку удается при навесках вещества не более 1 мг, высокая степень разложения вещества в процессе взаимодействия с гаэообраз б ным тритием и низкий радиохимический выход (не более О,ОЗЖ).

Цель изобретения вЂ” повышение производительности процесса и увеличение радиохимического выхода меченых со- единений. и

Поставленная цель достигается к тем, что согласно способу введения с

1089080 тровальной бумаги вещество хлороформом (Зх30 мл) и после хроматографической очистки на колонке со сфери ческим силика гелем (фракция 10-20 мкм) в системе метанол-хлороформ получают 3,0 мг (307) меченого соедине- ния с удельной радиоактивностью

0,26 Ки /ммоль.

Пример 2. На бумагу марки

ФНС размером 220х100 мм наносят !О

6 мг тетрафторбората триэтилоксония.

Бумагу помещают в реакционный сосуд (диаметр 75 мм, высота 100 мм), вакуумируют, охлаждают жидким азотом, подают газообразный тритий (с 30 мКи), 15 нагревают вольфрамовую нить до

2200 К (время облучения 30 с). Удаляют остатки газообразного трития, снимают охлаждение, напускают в систему инертный газ, отсоединяют Ю реакционный сосуд, смывают вещество с бумаги сухим хлористым метиленом и получают 1,2 мг (20X) тетрафторбората триэтилоксония с удельной радиоактивностью 4 Ки/ммоль. 25

Пример 3. На бумагу марки

НФС размером 220х100 мм,.предварительно промытую смесью хлороформвЂ” метанол (1:1) наносят 1,75 мг 1,2димиристоил-sn-глицеро-3-фосфохоли" на. Бумагу с веществом помещают в реакционный сосуд (диаметр 75 мм, высота 100 мм) вакуумируют, охлаж. дают жидким азотом, подают газообраз. ныи.тритии двумя порциями по 10 мКи, нагревая каждый раз вольфрамовую нить до 2200 К (время облучения

30 с). После облучения откачивают остаток газообразного трития, снимают охлаждение, отсоединяют реакционный сосуд и смывают вещество

40 с бумаги 100 мл смеси хлороформ-метанол (1 1), отмывают от лабильного трития, упаривают досуха, остаток очищают препаративной тонкослойной хроматографией на силикагеле КСК

45 .(фракция больше 150 меш) в системе хлороформ-метанол-вода (65:25:4).

Пятно с R 0,40 вычищают и экстрагируют смесью хлороформ-метанол (1:1). Чистоту полученного меченого фосфолипида контролируют тонкослойной хроматографией на силуфоле в системе хлороформ-метанол-вода (65:25:4), используя соответствующее немеченое соединение в качест- 55 ве свидетеля. В итоге получают меченое соединение с удельной радиоактивностью 0,02 Ги/ммоль.

Пример 4. 40 мг этилового эфира гГ -аминобензойной кислоты наносят на хроматографическую бумагу

Ватман ¹ 1 (220х100 мм). Проводят обработку аналогично примеру 1. Напуск газообразного трития (80 мКи) проводят 1 раз. Вещество смывают с бумаги этанолом и после отмывки от .лабильного трития остаток очищают и идентифицируют с помощью тонкослойной хроматографии на пластинках с силикагелем фирмы Fastman (ClllA) в системе толуол-метанол (10: 1), используя немеченый этил- П -аминобен- эоат в качестве свидетеля. В итоге получают конечный продукт с удельной радиоактивностью 0,135 Ки/ммоль.

Пример 5. На фильтровальную бумагу (марка ФНС) размером

220х100 мм наносят 1 мг тРНК из Е.

cori (мол. масса 25000) и обрабатывают аналогично примеру 1, напуская газообразный тритий (30 мКи) 1 раз. Вещество смывают с бумаги водой, .элюат пропускают через небольшую колонку с DEAE-целлюлозой, адсорбированную тРНК.отмйвают от лабильного трития, буферным раствором с рН 4,5 (0,1 И NaCX, 10 мИ MaCf, 10 MM AcONa) и затем смывают с колонки 1 M NaCg. Выход меченой тРНК

75Х, удельная радиоактивность

0,3 Ки/ммоль.

Сохранение структуры и функции меченой тРНК доказано тремя методами: при электрофорезе в полиакриламидном геле в денатурирующих условиях о (8.М мочевины при рН 8,3 и 40 С) для ис. ходной и меченой тРНК получают идентичные электрофореграммы, причем распределение Н совпадает с расположе. кием полос тРНК при окрашивании ме- тиленовым синим; по идентичности-связывания фенилаланина меченой и исходной тРНК (опыты с фенилаланином- 4С in vitro) по сохранению меченой тРНК способности к образованию тройных комплексов с фенилаланином и 70 s рибосомами E. coli.

Пример 6. На фильтровальную бумагу (220х100 мм) марки ФНС наносят 5 мг декапептида ангиотензина и обрабатывают аналогично примеру 1 (однократный напуск 30 мКи газообразного трития). Вещество смывают с бумаги водой и лабильный тритий отмывают, лиофилизуя водный раствор и

1089080

Показатели

Стекло Бумага

Количество исходного

А-фактора, мг

Кратность обновления поверхности

100

0,27

Выход, Е

13 5

Включение трития, мКи

3,2

100, 700

Затрачено T>, мКи

Радиохимический выход

0,7

3,2

Составитель О. Галкин

Редактор Л. Пчелинская Техред С.Пегеза

Корректор С. Шекмар

Заказ 2863/21 Тираж 410

ВНИИПИ Государственного комитета СССР

rro делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Подписное

Филиал IIIIII "Патент", r. Ужгород, ул. Проектная, 4

5 повторяя операции растворения и лиофилизации. Затем препарат очищают хроматографией на колонке (DEAE-сефадекс А 25), элюируя ангиотензин I с помощью 0,1 М фосфатного буфера 5 (рН 7,5) Выход меченого ангиотензина I 1,6 мг (32X), удельная радиоактивность 0,4 Ки/ммоль.

По данным тонкослойной хроматографим на силуфоле в системе изопропанол-метанол-вода-аммиак (1,5:9:1,5:

: 1), меченый и немеченый препараты ангиотензина I идентичны.

Выход меченого А-фактора (после хроматографической очистки), мг

Показатели предлагаемого и извест ного способов приведены в таблице.

Таким образом, описываемый способ введения тритиевой метки в органические соединения позволяет повысить производительность процесса, увеличить радиохимический выход конечных соединений и получить меченные тритием соединения, которые в условиях способа-прототипа полностью раз рушаются.

Катализатор для этерификации и дегидратации спиртов // 1018709

Способ получения мононатриевой соли 4-хлорфталевой кислоты // 1004328

Катализатор для алкилирования изобутана бутиленами // 988328

Катализатор для очистки газов от соединений серы // 959821

Способ получения катализатора для гидрирования ненасыщенных органических соединений // 940833

Катализатор для гидрирования полициклических ароматических соединений // 940831

Катализатор для рацемизации оптически активных @ - аминокислот // 892764

Способ управления процессами последовательного сульфирования алкилбензола и сульфатирования жирных спиртов // 889652

Способ получения меченных радиоизотопами брома @ и @ @ - бромбензойной и @ -бромгиппуровой кислот // 886444

Компостирующее устройство // 1196364

Способ получения кристаллического йода и устройство для его осуществления // 2549259

Изобретение касается области химической технологи, а именно способов получения кристаллического йода реактивных квалификаций и устройств для его осуществления. Способ получения кристаллического йода реактивных квалификаций, который включает выделение йода из растворов с получением йод-пасты, обезвоживание йод-пасты и сублимацию йода. Обезвоживание йод-пасты проводится за счет выпаривания воды на первом этапе процесса сублимации йода, перед сублимацией в йод-пасту добавляют карбонат натрия в количестве, которое обеспечивает рН конденсата воды не ниже 4,0, процесс сублимации обезвоженного йода проводят при температуре паров йода 114-184°С, а парциальное давление паров йода в йодовоздушной смеси перед десублимацией снижают за счет разведения воздухом до давления насыщенных паров йода в тройной точке Устройство для получения кристаллического йода реактивных квалификаций включает испаритель йода, конденсатор йода с приемником готового продукта, ловушку абгазов и хвостовой вентилятор. Конденсатор йода выполнен из эластичной пленки, натянутой на каркас, внутреннее пространство конденсатора находится под разрежением, которое предотвращает выход паров йода, при этом приемник йода является одновременно и тарой для готового продукта. Использование изобретения обеспечивает повышение качества готового продукта, упрощение и удешевление технологического процесса и повышение производительности устройства.

Стабильная кристаллическая форма типирацила гидрохлорида и способ ее кристаллизации // 2640417

Изобретение относится к новой кристаллической форме гидрохлорида 5-хлор-6-(2-иминопирролидин-1-ил)метил-2,4(1H,3H)пиримидиндиона формулы (I), указанной ниже. Соединение обладает свойствами ингибитора тимидинфосфорилазы и может быть использовано в качестве противоопухолевого средства. Кристаллическая форма соединения формулы (1) демонстрирует характеристические пики порошковой рентгеновской дифракции при углах 11,6°, 17,2°, 17,8°, 23,3°, 27,1° и 29,3°, в качестве дифракционного угла (2θ±0,1°) в безводной форме и эндотермический пик, определяемый методом термогравиметрии и дифференциального термического анализа, при температуре, составляющей около 262°C. Кристалл показывает, в анализе монокристаллов, следующие данные по кристаллу: кристаллическая система: моноклинная система, пространственная группа: P2l/n (No. 14), константа кристаллической решетки: a = 11,6006 (9) Å, b = 10,3106 (11) Å, с = 10,3036 (10) Å, α = 90°, β = 101,951 (7)°, γ = 90° и объем элементарной ячейки решетки: 1205,7 (2) Å3. 3 н. и 10 з.п. ф-лы, 3 ил., 3 табл., 7 пр.

Соль азотсодержащего гетероциклического соединения или ее кристаллическая форма, фармацевтическая композиция и ингибитор flt3 // 2641106

Изобретение относится к новым солям (S,E)-N-(1-((5-(2-((4-цианофенил)амино)-4-(пропиламино)пиримидин-5-ил)пент-4-ин-1-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)-4-(диметиламино)-N-метилбут-2-енамида, выбранным из сукцината, фумарата, памоата, гидрохлорида, фосфата, сульфата и гидробромида, а также к кристаллическим формам солей. Соединения обладают свойствами ингибитора FLT3 (Fms-подобной тирозинкиназы 3) и могут быть использованы для лечения карциномы крови, включающей различные формы лейкоза, например острого лимфатического лейкоза (ОЛЛ), острого миелоидного лейкоза (ОМЛ), острого промиелоцитарного лейкоза (ОПЛ), хронического лимфоцитарного лейкоза (ХЛЛ) и др. Кристаллическая α-форма сукцината (S,E)-N-(1-((5-(2-((4-цианофенил)амино)-4-(пропиламино)пиримидин-5-ил)пент-4-ин-1-ил)амино)-1-оксопропан-2-ил)-4-(диметиламино)-N-метилбут-2-енамида на порошковой рентгеновской дифрактограмме демонстрирует пики дифракции при углах дифракции (2θ) 10,5, 17,1, 19,1 и 22,4°; кристаллическая β-форма сукцината этого соединения демонстрирует пики дифракции при углах дифракции (2θ) 12,8, 16,1, 21,4 и 28,0°. Кристаллическая форма фумарата указанного соединения на порошковой рентгеновской дифрактограмме демонстрирует пики дифракции при углах дифракции (2θ) 8,6, 13,7, 17,8 и 23,0°. Предлагаемые соли обладают стабильностью при хранении и/или высокой растворимостью. 6 н. и 3 з.п. ф-лы, 6 ил., 10 табл., 13 пр.

Пролекарство ингибитора ns5b hcv полимеразы, способ его получения и применения // 2644156

Настоящее изобретение относится к новому пролекарству, представляющему собой циклобутил (S)-2-{[(2R,3R,4R,5R)-5-(2,4-диоксо-3,4-дигидро-2Н-пиримидин-1-ил)-4-фтор-3-гидрокси-4-метил-тетрагидрофуран-2-илметокси]-фенокси-фосфориламино}-пропаноат общей формулы 1, его стереоизомер, кристаллическую или поликристаллическую форму. Пролекарство обладает свойствами ингибитора NS5B HCV полимеразы и может быть использовано при лечении гепатита С. Стереоизомеры указанного соединения представляют собой циклобутил (S)-2-{(S)-[(2R,3R,4R,5R)-5-(3,4-дигидро-2,4-диоксо-2H-пиримидин-1-ил)-3-гидрокси-4-метил-4-фтор-тетрагидрофуран-2-илметокси]-фенокси-фосфориламино}-пропаноат формулы 1.1 или циклобутил (S)-2-{(R)-[(2R,3R,4R,5R)-5-(3,4-дигидро-2,4-диоксо-2H-пиримидин-1-ил)-3-гидрокси-4-метил-4-фтор-тетрагидрофуран-2-илметокси]-фенокси-фосфориламино}-пропаноат формулы 1.2. Поликристаллическая форма указанных соединений представляет собой смесь ромбической и моноклинной форм. Кристаллическая форма представляет собой ромбическую форму. Способ получения пролекарства формул 1, 1.1 и 1.2 заключается во взаимодействии циклобутил (S)-2-(пентафторфенилокси-фенокси-фосфориламино)-пропионата формулы 2 или циклобутил (S)-2-((S)-пентафторфенилокси-фенокси-фосфориламино)-пропионата формулы 2.1 или циклобутил (S)-2-((R)-пентафторфенилокси-фенокси-фосфориламино)-пропионата формулы 2.2 с трет-бутил (2R,3R,4R,5R)-5-(2,4-диоксо-3,4-дигидропиримидин-1(2H)-ил)-2-(гидроксиметил)-4-метил-4-фтор-тетрагидрофуран-3-ил карбонатом формулы 7 в присутствии алкилмагнийгалогенида с последующим снятием защитной группы. 5 н. и 5 з.п. ф-лы, 3 табл., 10 пр.