Способ индикации нехолерогенных вибрионов эль-тор

 

СПОСОБ ИНДИКАЦИИ НЕХОЛЕРОГЕННЫХ ВИБРИОНОВ Эль-Тор путем выращивания исследуемой культуры на щелочном агаре, . о т л и ч а ю щ и йс я тем, что, с целью ускорения и упрощений способа, культуру со щелочного агара пересевают в среду Рисса с 0,8-1,2% маннита, посев инкубируют и индикацию проводят по изменению цвета среды в течение 2-4 ч с момента посева. (Л С

(l9) () 1) СОЮЗ СОВЕТСНИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСНИХ и.:спюлин

4(5!) 12 1/04

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ . Й АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

ГОСУДАРСТВЕЙНЬЙ НОМИТЕТ COOP

f30 ДЕЛАМ ИЗОБРЕТ1=НИЙ. И ОТКРЫТИЙ (21) 3444093/28-13. (22) 22.02.82 (46) 15.04.85, Бюл. У 14 (72) А.Е. Либинзон, А.А. Левкович, И..С.. Шестиалтынова и Е.M. Квасов (71) Ростовский-на-Дону государственный научно-исследовательский противочумный институт (53) 576.8.093.1(088.8) (56) 1 Быстрый Н.ф. Холерные бактериофаги, их классификация и перспективы использования для диагностики холеры. Автореф. докт. дис, Саратов, 1974, с. 20-25 (прототип). ъ. (54) (57) СНОСОБ ИНДИКАЦИИ НЕХОЛЕРОГЕННЫХ ВИБРИОНОВ Эль-Тор путем выращивания исследуемой культуры на щелочном агаре, о т л и ч а ю щ и йс я тем, что, с целью ускорения и упрощения способа, культуру со щелочного агара пересевают в среду

Рисса с 0,8-1,2Ж маннита, посев инкубируют и индикацию проводят по изменению цвета среды в течение

2-4 ч с момента посева.

1090718

Hp и м е р 1. На щелочной агар (рН 7,6) засевают 42 холерогенных и 31 нехолерогенный штаммы вибрионов Эль-Тор. Спустя 18 ч вибрионы.пересевают бактериологи56

Изобретение относится к медицинс= кой микробиологии, а именно к ускоренным методам обнаружения нехолерогенных вибрионов Эль-Тор.

Известен способ индикации нехо- 5 лерогенных вибрионов Зль-Тор путем выращивания исследуемой культуры на щелочном агаре j1) .

Однако известный способ длителен и сложен в осуществлении.

Целью изобретения является ускоpeimel a упрощение способа.

Цель достигается тем, что согласно способу индикации нехолерогенных вибрионов Эль-Тор путем выращивания исследуемой культуры на щелочном аrape культуру со щелочного агара нересевают в среду Гисса с 0,8-1.27 маннита, посев инкубируют и индикацию проводят по изменению цвета 20 среды в течение 2-4 ч с момента посева.

Способ осуществляют следующим образом.

Среду предварительно проверяют 25 на пригодность для постановки данного теста с помощью заведома нехолерогенного и холерогенного штаммов.

Среда может быть использована для обнаружения нехолерогенных штаммов, Зо если контрольный нехолерогенный штамм изменяет ее цвет в течение

2-3 ч, а холерогенный — в течение

6 и более часов.

Посевы помещают в термастат при

37 С и ежечасно контролируют йзменео ние цвета среды. Если при очередном просмотре наблюдается очень слабое изменение цвета среды, то следующее наблюдение проводят через 30 мин.

Для контроля в пробирку со средой засевают нехолерогенный штамм, время изменения которым цвета среды известно. Кроме того, вместе с посевами ставят пробирку с незасеянной 45 средой — контроль среды, ее цвет при стоянии в термостате при 37 С не должен меняться. ческой петлей в пробирки со средой

Гисса с 0,8 маннита и ставят в термастат при 37 С. Изменение цвео та среды, свидетельствующее о расщеплении маннита, регистрируют ежечасно, а в некоторых случаях и че-. рез 30 мин. В таблице представлены сроки расщепления маннита холерогенными и нехолерогенными вибрионами-в средах с различной концентрацией его.

Пример 2. 42 холерогенных и 31 нехолерогенный штаммы вибрионов Эль-Тор засевают на щелочной агар (рН 7,6). Через 18 ч вибрионы пересевают бактериологической петлей в пробирки со средой Гисса с 1Х маннита. Иетодика учета результатов аналогична примеру 1.

Пример 3. 42 холерогенных и 31 нехолерогенный штаммы вибрионов Зль-Тор засевают на щелочной агар (рН 7,6). Через 18 ч вибрионы пересевают бактериологической петлей в пробирки со средой Гисса с

1,2Х маннита. Иетодика учета результатов по примеру 1 ° Представленные. в таблице данные свидетельствуют о том, что нехолерогенные вибрионы расщепляют маннит в течение 2-4 ч, а холерогенные вибрионы в такие сроки маннит не расщепляют.

На основании проведенных экспериментов штаммы вибрионов Эль-Тор, расщепляющие маннит с образованием кислых продуктов и изменяющие вследствие этого цвет среды в течение

2-4 ч, следует считать нехолерогенными. Вибрионы Эль-Тор, расщепляющие маннит и изменяющие цвет среды в более поздние сроки, целесообразно изучать путем заражения кроликов-сосунков.

Предлагаемый ускоренный способ обнаружения авирулентных вибрионов

Эль-Тор прост, экономичен и может быть использован для экспрессной оценки эпидемической значимости вибрионов Зль-Тор. Его применение будет способствовать сокращению числа штаммов, нуждающихся в изучении более длительным, трудоемким и дорогостоящим способом на кроликах-сосунках.

1090718

2 2,5 3 4

Группы вибрионов

5 6 7 8 9 10

Нехолерогенные

0,8

1,2

Холерогенные

0,8

1,0

1,2

КоРРектоР B. Гирняк

Редактор С. Титова

Техред М.Пароцай

Заказ 2769/1 Тираж 525 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам иаобретеиий и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Филиал ППП "Патент", r Ужгород, ул. Проектная, 4

Концентрация маннита, Х

Сроки расщепления маннита, ч

8 16 5 2 О О 0 О О 0

8 16 5 . 2 О О 0 О О О.

8 16 5 2 О 0 0 О 0 0

О О О 5 7 20 4 5 1

О 0 0 5 7 20 4 5 1

О О 0 5 7 20 4 5 1