Штамм гриба @ @ 8256, используемый в качестве тест-культуры для определения микробиологической стойкости неметаллических материалов

 

Штамм гриба Aspergillus puniceus 8256 (Центральный музей промышленных микроорганизмов Института ВНИИгенетика , коллекционный номер ЦИПМ F 215), используемый в качестве, тест-культуры для определения микробиологической стойкости неметаллических материалов. 5

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

ОМ

РЕСПУБЛИК

«е а»

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ 1

И АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

264tl591

ГОсудАРстВекк и soMmaT ceca

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ (21) 3410536/28-13 (22) 06.01.82 (46) 23.05.84. Бюл. Ф !9 (72) Н.К.Слепухина, Г.И.Рубан и С.А.Законникова (53) 663.13.(088.8) (56) 1.Авторское свидетельство СССР

В 557101, кл, С 12 N 15/00, 1977.

2. Авторское свидетельство СССР

В 661012, кл. С 12 К 15/00, 1976.

3. Авторское свидетельство СССР

ll 737451, кл. С 12 К 15/00, 1977.

4. Билай Т.И. Термостабильные . ферменты грибов. Киев, "Наукова думка", 1979.

5. Методика по эксплуатации неметаллических покрытий. ГОСТ 9.048-75 .

ЗС5» С 12 N 15/00//С 12 Q 1/18;

С 12 R (54) ШТАММ ГРИБА ASPERGZLLUS PUNICF.US 8256,,ÈÑÏ0ËÜÇÓÅÈÛÉ В КАЧЕСТВЕ

ТЕСТ-КУЛЬТУРЫ ДЛЯ ОПРЕДЕЛЕНИЯ МИКРО,БИОЛОГИЧЕСКОЙ СТОЙКОСТИ НЕМЕТАЛЛИЧЕСКИХ МАТЕРИАЛОВ. (57) Штамм гриба Aspergillus puniceus 8256 (Центральный музей промьаплен" ных микроорганизмов Института "ВНИИгенетика", коллекционный номер

ЦИПМ Р 215), используемый в качестве, тест-культуры для определения микробиологической стойкости неметаллических материалов.

1093699

Изобретение относится к микроьиольгической промышленности и касается нового штамма гриба, преднаэначенного для определения микробиологической стойкости неметаллических материалов, таких как пластмасс, компаундов, резин, лакокрасочных покрытий, тканей и т.д.

Известны штаммы мицелиальных грибов, например Torula convoluta, Cladosporium gossipicola 1902, Cephalosporium acremonium — 2033, используемые для испытания и оценки различных органических материалов на микробиологическую стойкость (1) — (3 .

Недостатком этих грибов является то, что они растут при сравнительно низких температурах и не могут применяться при испытании материалов, предназначенных для эксплуатации в условиях теплого и влажного климата, например при режимах, установленных

ГОСТ 9.048-75 и ГОСТ 9.049-75, Известны также активные разрушители материалов — штаммы грибов Asper25

gillus niger 2442 и A.terreus 1860, которые развиваются при повышенных .температурах и используются при стан;дартных испытаниях на воздействие плесневых грибов (4j, 30

Однако эти виды являются менее эффективными при оценке микробиологической стойкости иеметаллических материалов, 1

Известно, что при оценке микроби- .. 35 логической стойкости технических из-, делий и используемых при их изготовлении неметаллических материалов, ис. пользуют набор тест-культур по

ГОСТ 9.048-75 f5) .

Недостатком известных штаммов является их избирательная активность по отношению к определенным группам материалов, например Aureobasidium

puIlulans развивается на лакокрасоч- 45 ных покрытиях, Aspergillus terreus — .

ua пластмассах, Frichoderma viride на целлюлоэосодержащих материалах.

Многие кислотоустойчивые материалы и покрытия являются стойкими к гри- 50 бу Aspergillus niger, являющемуся активным биоразрушителем за счет интенсивного продуцирования органичес ких кислот.

Целью изобретения является получение штамма Aspergillus piniceus 8256 с более высокой биологической активностью и повышение достоверности испытаний неметаллических материалов на микробиологическую стойкость, Штамм Aspergil lus piniceus 8256 выделен с образцов полисульфамидной термостойкости ленты, хранится в коллекции института микробиологии АН Армянской ССР и депбнирован во "ВНИИгенетика", регистрационный номер ВМПМ.

Штамм имеет следующую характеристику.

Морфологические признаки.

Конидиальные головки радиальные серовато-зеленых тонов, 40-90 мк в диаметре. Конидиеносцы образуются из погруженных гифмицелия, светлокоричневые с толстыми гладкими стенками 150-200-5 мк. Конидиеносец заканчивается почти шаровидным вздутием 10-13 мк в диаметре, стеригмы двурядные. Стеригмы первого ряда

4-6 2-3, стеригмы второго ряда 5 ° 2.

Конидии шаровидные, слегка шероховатые в массе светло-зеленые 2,5—

3 мк.

Культуральные признаки.

На среде Чапека с сахарозой при о

28+2 С колония пушистая достигает

5 см в диаметре за 7 дн. Вначале белая, затем желтовато-кремовая, центральная часть слегка приподнята. Обратная сторона и окружающий агар окрашены в ярко-желтый цвет. Эксудат, если присутствует, красноватого цвета. Запах слабый, плеснеттый. Конидигльные головки образуются в 4-е сутки, снороношение умеренное. С возрастом образуются многочисленные Hillle-клетки, На картофельно-морковной среде при

28+ 2 С колония пушистая, ровная, достигает 4 см в диаметре эа 7 дн.

Вначале слегка розоватая, затем серовато-кремового цвета. Растущий край белый. Запах слабый плесневый.

Эксудат в мелких каплях светло-розового цвета. Спороношение умеренное, начинается на 4-е сутки, Hiille-клетки не обнаружены.

Физиологические признаки.

Оптимальная температура роста

26+2оС, рост приостанавливается ниже

10 и выше 38оС. Из сахаров хорошо усваивает сахарозу, глюкозу, фруктозу, ксилозу, мальтозу, хуже лактозу. Хорошо развивается на средах с целлюлозой, хуже на среде с крахмалом и белком. Устойчив к материалам, защи55

Э 10936 щенным фунгицидами. На среде с сахарами подщелачивают среду. Интенсивно развивается на пластмассах, компаундах, герметиках, резинах, лакокрасочных покрытиях, стекле, керамике, бумаге, тканях и пленках.

Антагонйстические свойства.

Антибиологическая активность на средах с сахарами не обнаружена. Подавляет Aur.pullulans, Cladosporium !О

herbarum, PeniciIlium Heniculosum, Scopulariopsis brevicaulis за счет быстрого распространения по субстрату. Не подавляется другими видами..

Развивается совместно с видами 15

А.niger, А.ustus, А.terrens.

Пример 1. (Использования штамма). Сравнивают активность двух наборов грибов: набор тест-культур. по ГОСТ 9.048-75 с добавлением штам- 20 ма Aspergillus puniceus 8256 и набор тест-культур но ГОСТ 9.048-75.

Испытание проводят на 50 марках неметаллических материалов — пластмассах, компаундах, резинах, тканях, 25 а также лакокрасочных покрытиях при о

28+2 С, относительной влажности 90Х в течение 28 сут. Образцы всех марок материалов поделены на две партии.

Каждая партия заражена одним из ука- щ занных наборов грибов. В каждой партии испытывают по 10 образцов каждой марки материалов, т.е. с каждым на-. бором грибов испытано по 500 образцов всех марок материалов. Степень

-поражения материалов грибами (в баллах по ГОСТ 9.048-75) представлена в табл. 1 ("+" — 8256 развивается на материалах, "-" — 8256 не развивает- ся на материалах 2-й партии).

В табл. 2 представлены сравнитель. ные обобщенные данные по интенсивности поражения всех испытанных материалов,каждой партии из 500 образцов.

Испытания показали, что в 1-й пар-45 тии образцов, зараженных набором грибов, содержащих штамм A.puniceus 8256, не выдерживают испытания 537всех испытанных образцов, а во 2-й партии — 41X .

Следовательно, увеличение отрицатель-50 ных результатов при испытании материалов 1-й партии происходит за счет присутствия в наборе тест-культур грибов по ГОСТ 9.048-75 штамма гриба А.puniceus 8256.

Таким образом, применение штамма А.puniceus 8256 в качестве тесткультуры для определения микробиоло99 гической стойкости неметаллических материалов повышает достоверность испытаний.

Пример 2. С целью повышения достоверности испытаний на воздействие плесневых грибов выявляют наиболее активные виды и штаммы грибов, выделяемых с различных материалов, а также установленные действующие стандартами: ГОСТ 9.048-75,ГОСТ.9.04875, ГОСТ 9.050-75.

Исследовано 16 штаммов грибов, наиболее часто развивающихся на неметаллических материалах. Исследуемые штаммы выделены в чистую культуру после лабораторных и натурных испытаний хранятся в музее лаборатории. Штаммы, входящие в набор тест-культур по

ГОСТ 9.048-75, получены из института микробиологии АН СССР.

Из 16 штаммов грибов составляют четыре набора в различных сочетаниях:

T набор, i. A1ternaria alternata 15 АЭ

2. Aspergillus ustus 21 СЭ

3. Scopulariopsis buvicaulis 19 ПЭ

4 . Frichoderma viride 27 U3

5. Aspergillus niger 31 — СЭ

6. Aspergillus terreus 8254

7. Aspergillus puniceus 8256

8. Aspergillus Havus 10-Т

9. Penicillium Heniculosum 61-ТЭ

10. Г.chrysogenum 1-U3

П набор

1. Alternaria alternata 15 АЭ

2. Scopulariopsis buvicaulis 19-БЭ

3. Aspergillus niger 31-СЭ

4. А.ustus 21-СЭ

5. А.penicilloides 13-Х

6. Cladosporium herbarum 11-Л

7. Penicillium сЬгузодепап 27 3J3

8. Frichoderma viride 27-УЭ

Ц1набор

1. Aspergillus terreus 8254

2. А.punictus 8256

3. А.havus 10-T

4. А.niger 31-СЭ

5. A.penicilloides 13-Х

6. Fusarium moniliforme 34-ГЭ

7. Cladosporium herbarum 11-Л

8. Penicillium Heniculosum

1М набор тест-культур по ГОСТ 9.048,75.

1. Aspergi?lus niger 3 1-СЭ

2. А.terreus 8254

3. Aureobasidium pullulans 1116

4. Paecilomyces variotii 1749

5. Penicillium Heniculosum 61-ГЭ

1093699

ОЭ

Таблица 1

Степень порашения материалов при эарааении, бал м

Наличие

А.puniceus 8256 на мате-. риалак

2-й партии

Марка материала

Aspergi- Тестllus puni- êóëü-!

ceus . j туры, тест-куль- по туры по ГОСТ

ГОСТ 9.048 9.048-.

"75 -75

К-2"4ЭТ

К 21-22

К 214-43Т

ДИАФ

ДСВ-2Р-2М

Поликарбонат

АГ-4В

Аг-4

6. P.ochro-сЫогап 1702.

7. Scopulariopsis brevicaulis 198. Pric4pderma viride 27-0Э . Испытания проводят по методике

ГОСТ 9.О48.75. Кашдый набор грибов используют для зарашения 50 марок материалов. В зависимости от того, в какое количество наборов грибов (из 4-х предлагаемых наборов) входил

1О кашдый вид гриба. и столько раз в различных сочетаниях он высевался.

Штамм А.puniceus 8256 использован в двух набораш, следовательно, в двух сочетаниях он был высеян 100 раз (на 50 марок материалов с одним набором и на эти ше 50 марок с другим).

Количество исследуемых вариантов развития кжкдого исследуемого гриба в сочетании с другими видами грибов на 50 маршах материалов указано в табл. 2, название которой в данном ответе получило уточнение.

В табл. 3 перечислены 8 штаммов Р5 грибов иэ 16,исследуемвас, наиболее часто раэвивевщиеся на 50 марках материалов. (Таким образом, предлагаемый штамм А.puniceus 8256 наиболее часто и интенсивно развивается на неметаллических материалах по сравнению с видами, установленными в ГОСТ 9.04875. Полученный штамм мошно использовать при оценке микробиологической стойкости материалов, предназначенных для изготовления технических изделий, в т.ч. иэделий электронной техники, электротехники и других; Использование материалов, стойких к микробиологическим поврелщениям, позволит повысить надешность изделий прн их эксплуатации и хранении. Штамм обладает высокой физиологической активностью и мошет быть использован для деструкции отходов химической промышленности и неметаллических материалов кратковременно используемых в народном хозяйстве.

Предлагаемый штамм не является патогеннья и упрощает стандартный метод испытаний неметаллических материалов и изделий на микробиологическую стойкость, при замене малоактивных штаммов на штамм А.puniceus 8256.

1093699

Аг-4В с силикатом Д,2

Полипропилен

Э,к-91

ЭФП-60

ЭК-23

10-70

Стеклотекстолит СТ

Дифлон

Ф-47

ЭКП-200

Эк-16А

ЭП-933 по керамике

СК-2А-1

ЭП 140 по стеклу

С93-.1

ГФ-913 по меди М-3

ХВ-124 по алюминию А6 3

ИЛ-165 по 9 3

КО 5140 по керамике

ТШ-пб

Продолаение табл. 1

1093699

3

P-56

ПЭ-922 по стали 08КП 3

П-ЭП-45 по керамике

П-ЭП-971 по сплаву 29НК 2

ФЛ-590 по компаунду

Ф-47

УР-231 по ан.окс.хр.

УР-231 по стеклотестолиту СТ

ХС-9105 по эмали ЭП-255 2

ЭП-790 по прессматериалу К81-39С 2

ЭП-96 по компаунду Ф-47 3

ЭП-9114 по металлокерамике ЖГР-1 3

АК-113 по латуни Л-63

Э-4100 по компаунду Ф-47 3

ИРП-103 6

ИРП-1207

Продолжение табл

1093699 12

Продолжение табл.

Н0-68-1

РН20-44

О

Капроновая О

О.

Фторлоновая 1

ТСД-1ГК-5 1

П56П 2

О

Уремнеземная

Стеклянная

И-4 1.

Полифеновая 2

Оценка дана для всех 10 образцов каждой марки материала.

Таблица

Количество образцов, пораженных при испытании разными наборами. грибов, Х

41

53

28

4-3

1-0

Степень поражения образцов материалов цо ГОСТ 9.048-75, бал

А.puniceus 8256 + тест-культуры по

ГОСТ 9.048-75

Тест-культуры по

ГОСТ 9.048. -75

1093699

Таблица 3

Штаммы грибов

Количество вцделенных изолятов

А.puniceus 8256

47

100

64

43

100

26

200

P.Henieulosuum

61-ГЭ

150

44

26

100

150

Составитель И.Ларина

Техред T.Ìàòî÷êà Корректор Л. Шеньо

Редактор Н.Рогулич

Заказ 3377/22 Тираж 522 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

1 13035, Москва, %-35, Раушская наб., д. 4/5

Филиал ППП "Патент", r.Óæãîðîä, ул.Проектная, 4

А.terreus 8254

A;ustus

21-СЭ

А.niger

31-СЭ

$с.buvicaulis !

9-ИЭ

А.Havus

10-Т

Fr.virile

2 7-ИЭ

Количество исследуемых вариантов развития гриба в сочетании с другими видами на 50 марках материалов

Встречаемость на материалах, Й