Способ получения производных 7 @ -метоксицефалоспорина или их солей с щелочными металлами

 

Способ получения производных 7 (Х, -метоксицефапоспорина общей формулы I с они-сн-сотшД--. оснз I г I Q --Ks CH2-$-Ri соон где К(-тетразол-5-ил, замещенный в положении 1 этилом, карбоксиметилом или диметиламинозтилом, 1,3,4-тиадиазол-2-ил , свободньй или замещенный в положении 5 метилом или карбоксиметилом , или 1,3,4-оксадиазол-2-ил, замещенный в положении 5 метилом или карбоксиметилом; Rg -.водород или оксигруппа; два радикала из R, R4 и R, СЕЯзанныхС с соседними атомами углерода, означают оксигруппы и третий радикал водород , или их солей, с щелочными металлами , отличающийс я тем, что соединение общей| формулы|0л где . имеют указанные значения, или его соль, или гидрат подвергают взаимодействию с соединением формулы III R, где R,, имеет указанные значения, при нагревании в среде водного органического растворителя с вьделением целевого продукта в виде свободной кислоты или ее соли с щелочным металлом.

СОЮЗ СОВЕТСНИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК

0% (111 1бР С 07 D 501/57 // А 61 К 31/545

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И OTHPblTMA

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

H llATEHTV

eH2 $ Е1

СООК г

R †.водород или окснгруппа1 два радикала из R>, R4 и Rg, связанных

3 с соседними атомами углерода, означают оксигруппы и третий радикал водород, или их солей, с щелочными металлами, о т л и ч а ю щ и й— с я тем, что соединение общей формулы

ОС 4

О

СОЯН- Сй — СОЯН

СИ20СОСН3

БООИ

О 4 4 где R< имеет укаэанные значения, при нагревании в среде водного органического растворителя с выделением целевого продукта в виде свободной кислоты или ее соли с щелочным металлом. где R<-R< имеют укаэанные значения, или его соль, или гидрат подвергают взаимодействию с соединением формулы III

Ri - SH (21) 3436637/23-04 (71) Эйсаи Ко., ЛТД (Япония) (62) 3226153/23-04 (53) 547.869.1.07(088.8) (22) 17.05.82 (56) 1. Патент СССР по заявке (23) 07. 01. 81 В 3338763/23-04, кл. С 07 D 501/36, (31) 26112/80, 92199/80 1979. (32) 04. 03. 80, 08. 07. 80 (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ПРОИЗВОДНЫХ (33) Япония 7 -МЕТОКСИЦЕФАЛОСПОРИНА ИЛИ ИХ СОЛЕЙ (46) 23.07.84. Бюл, В 27 С ЩЕЛОЧНЫМИ МЕТАЛЛАМИ (72) Есимаса Матида, Исао Санто, {57) Способ получения производных

Сеиитиро Номото, Сигето Неги, Хироно- 7 Ср -метоксицефалоспорина общей формури Икута и Киосуке Кито (Япония) лы I

0 0 - 4

К СОВН-СН-С0КН

l I г а

14 0

R5

Rg где R1-тетразол-5-ил, замещенный в положении 1 этилом, карбоксиметилом или диметиламиноэтилом, 1,3,4-тиадиазол-2-ил, свободный или замещенный в положении 5 метилом или карбоксиметилом, или 1,3,4-оксадиазол-2-ил, замещенный в положении 5 метилом или карбоксиметилом;

1105117 н ((н — соян

ЯН

2 О

Скг- -, СООН

N e?f20 Co СН3

POOH

<,Б), 0

СОЯН вЂ” СН вЂ” СОЮН

О

СН -S-К1

СООН к„ 5

R — водород или два радикала из R >, ных с соседними атом начают оксигруппы и оксигруппа;

R 1 и R<;, связанамн углерода, озтретии радикал водорода, или их солей с ще<(оч который заключается пение общей формулы ными;еталлами, г, т< и, чт > с<<едиИзобретение относится к способу получения новых производных 7 (т(. -метоксицефалоспорина или их солей с щелочными металлами, которые обладают антигде R(означает тетразол-5-ил, замещенный в 1-м положении метилом, эти—

15 лом, 2-диметиламиноэтилом или карбоксиметилом, 1,3,4-тиадиазол-2-ил, 4Н-1,2,4-триазол-3-ил, 2-пиридил, 2-пиридил-1-оксид, 2-пиримидинил

R СН-СОЖН !

О

О 1

С0! где R2 К3 и К4 имеют указаннь<е зна- 30 чения, или его соль, подвергают взаимодействию с соединением общей формчлыВ R! — SH (В), ( где R (имеет вьппеуказанные значения, в среде инертного растворителя при 35 о температуре 30-90 С, предпочтительно в присутствии основного или кислотного агента 1". где  — тетразол-5-ил заме!ценный ( в положении 1 этилом, карбок(иметилом или диметиламиноэтилом, 1,3,4тиадиазол-2-ил, свободный или замещеннь(й в положении 5 метилом или карбоксиметилом, или 1,3,4-оксадиа 3 Ох! 2 ил, за J« !öñ .JJ <<ый В положе нии

5 >(pтилом илп карбоксил(<. тилом; микробной актпвностьп< и и(гут найти применение в медици«i(.

Известен (посОб по<(чения и(.фалоспоринов об!цей! форл<улы Л или 5-метил-1,3,4-оксалиазол-2-ил;

Rz — атом водорода или оксигруппа;

R и R — атом водор Опа или оксиили ацелоксигруппа, и<(ь их солей, заключающийся в том, что соединение общей. формулы Б

Цель изобретения — !толучение новых антибиотиков цефалоспоринового ряда, расширяющих арсенал средств воздействия на живой организм.

Поставленная цель достигается основанным на известной реакции спо— собом получения 7 к -метоксицефало-. споринов формулы

1105117 ()с 3

О

СОМН- Сп-СОБН сн оеосн> соон (ПТ) R1 — SH

Вычислено

Найдено где Г2-R5 HMeloT Указанные sna e en»»a, 1О или его соль или гидрат подвергают взаимодействию с соединением формулы где R, имеет указанные значения, 15 при нагревании в среде водного органического растворителя с выделением целевого продукта в виде свободной кислоты или ее соли с щелочным металлом. 20

Обычно взаимодействие проводят при температуре 50-70 С в водно-оргаО ническом буферном растворе в присутствии основания, такого как бикарбонат натрия или едкий натр. 25

Соединения предлагаемого изобретения проявляют противомикробную активность и являются эффективными против грамположительных и грамотрицательных бактерий. Особенно эффективны соедине 30 ния этого изобретения против таких бактерий, как Pseudomonas aегоginosa, Serratia marcescens, и т.п., которые вызывают тяжело протекающие заболевания, а также против бактерий, продуци35

Рующих 1" -лактамазу.

Величины острой токсичности (доза, вызывающая 507 смертности при пероральном ведении мышам) для соединений формулы I превышают 5 г/кг.

Пример 1. 7 P — ( — 2-(6,7Диоксихромон-3-карбоксиамидо)-2-фенил ацетамидо1-7 Ж -метокси-3- 5-метил-2(1,3,4-тиадиазолил)1 -тиометил-3-цефем-4-карбоновая кислота. 45

100 мг 7P -(D-2-(6,7-диоксихромон3-карбоксамидо) -2-фенилацетамидо

7 .-метокси-3-ацетоксиметил-3-цефем-4карбоновой кислоты и 87 мг 2-меркапто-5-метил-1,3,4-тиадиазола растворя- 0 ют в 2,5 мл диметилформамида. К полученному при этом раствору по каплям добавляют при 75 С и перемешивании о смесь 83 мг бикарбоната натрия, дистиллированной воды (2,5 мл) и фосфор 5 нокислого буферного раствора (5 мл) .

Все это количество перемешивают при о

65 С в течение пон лнительных 12 ч. охлаждают льдом и фильтруют. К фильтрату добавляют 15 мл дистиллированной воды и 1,5 мл н. соляной кислоты.

Выпавший осадок отделяют фильтрацией и промывают его последовательно дистиллированной водой, изопропиловым спиртом и этиловым спиртом, получая целевой продукт.

Отгоняют изопропиловый и этиловый спирт. Собранный осадок растирают со смесью этилового эфира и этанола в объемном соотношении 4:1 и промывают этиловым эфиром для того, чтобы рекуперировать дополнительное количество целевого продукта.

Таким образом получают в сумме

30,4 мг объединенного продукта. Т. пл.

188 †1 С (разложение). о

Элементный анализ для С ОН2 К ОЮБ,Х:

50,63 3, 54 9,84

49,12 3,88 8,51

ИК-спектр поглощения (см, ну" джол): 1770, 1660, 1610, 1520.

ЯМР†спек (млн. доли ДМСО-d6)

2,69 (ЗН, S) 3,23 (1Н, d, j-18Hz)

3,42 (ЗН, S); 3,61 (1Н, d, g-13Hz), 4,13 (1Н, d, 3 — 13Hz) 4,50 (1Н, d

j-13Hz), 5,09 (1Н, S), 5,83 (1Н, d, J — 8Hz), 6, 99 (1Н, S), 7, 20-7,60 (5H, М), 7,42 (1Н, $), 8,87 (1Н, S) .

Пример 2. 7 pr — LD-2- (6, 7-Диоксихромон-3-карбоксамидо)-2-(4-оксифенил)ацетамидо) -7 -метокси-3-(1карбоксиметил-5-тетразолил)-тиометил3-цефем-4-карбоновая кислота.

250 мг 7 (— (D-2-(6,7-диоксихромон3-карбоксамидо)-2-(4-оксифенил)ацетамидо) — 7М, -метокси-3-ацетоксиметил3-цефем-4-карбоновой кислоты и 85, мг

5-меркапто-1-карбоксиметилтетразола растворяют в 5 мл диметилформамида. Бикарбонат натрия (149 мг) растворяют в 10 мл калий-фасфатного буферного раствора (0,1 М, рН-6,4), и полученный раствор по каплям добавляют в указанный выше раствор при о

70 С в течение 45 мин при перемеши1105117 вании. Смесь дополнительно перемеши. вают при той же температуре в течение 4,5 ч. Затем реакционную смесь охлаждают до комнатной температуры и добавляют ее в разбавленную соляную кислоту (5 мп 1н. соляной кислоты + 100 мл воды) при 0 С и перемео шивании. Образовавшийся осадок собирают фильтрацией, и после его промывают этиловым эфиром, растворяют в 50 мл тетрагидрофурана и высушивают над сульфатом магния. Затем раствор концентрируют приблизительно до 6 мл, и концентрат добавляют в 100 мл этилового эфира при перемешивании. Образо- 15 вавшийся осадок собирают фильтрацией, промывают этиловым эфиром и высушивают, получая 124 мг целевого продукта.

Т. пл. 230-250 С (разложение).

Элементный анализ для С, Н „И 0, $, ; 20

С H N

47,68 3,33 12,98

46,52 3,27 11,07

Вычислено

Найдено

ИК-спектр поглощения (см-», нуджол):

1765-1775, 1730, 1660, 1610.

ЯМР-спектр (млн. доли, ДМСО-dg):

3 ° 42 (ЗЫь S) ь 3,6 (2Hз br) 4 э 10 (1Н,» d, g = 14Hz), 4,50 (iH, d, 1 = 14Нк), 5, 01 (1Н, S), 5, 29 (2Н, br, S), 5,68 (1Н, d, g = 8Hz), 6,74 (2Н, d, = 8Hz), 6, 99 (1Н, S), 7, 31 (2Н, d,g =8Hz), 7, 40 (1Н, S)

8,87 (1Н, S) .

Пример 3. 7 P — (0-2-(6,7-Диоксихромон-3-карбоксамидо)-2-(4-оксифенил)-ацетамидо)-7с6 -метокси-3-(1карбоксиметил-5-тетразолил)-тиометил3-цефем-4-карбоновой кислоты динатри4О евая соль.

Соединение (26,6 мг), полученное в примере 2, растворяют в 0,6 мл смеси метанола и тетрагидрофурана (1:1) и добавляют 70,2 мкл 0,5 М метаноль45 ного раствора натриевой соли 2-этилгексановой кислоты при перемешивании смеси. Затем к реакционной смеси добавляют 6 мл этилацетата и образовавшийся осадок собирают фильтрацией.

Осадок промывают этилацетатом, затем этиловым эфиром и высушивают, получая 19 мг целевого продукта. Т.пл. около 250 С (разложение). о

Элементный анализ для ГЩЩЯЧа,%

SS

С Н

Вычислено 45,06 2,90 12,26

Найдено 44,55 2,86 11,88

ИК-спектр поглощения (см, нуджол):

1770, 1725, 1710, 1660, 1615.

ЯМР-спектр (млн, доли ДМСО-d <)

2,0(ЗН,$),3,42(ЗН,Б),4,61(1Н

d, g = 13Hz), 4, 90 (!Н, d, g = 13Hz), 5,09 (1Н, S), 5,66 (1Н, d, g = 7,5Ня), 6,73 (2Н, d g = 8,5Hz), 7,04 (IH, d, = 8,5Hz) 7,30 (2H, d, = 8,5Hz)

7,51 (1Н, d «J = 8,5Hz).

Пример 4, 7 ð -(0-2-(7,8-Диоксихромон-3-карбоксамидо) — 2-(4-оксифенил)-ацетамидо) 7 оЬ -метокси-3- (1карбоксиметил-5-тетразолил)-тиометил"3-цефем-4-карбоновая кислота.

100 мг 7 Р -(0-2-(7,Р.-,диоксихромон3-карбоксамидо)-2-(4-ок6ифенил)ацетамидо1 -7 -метокси-3-ацетоксиметил-3цефем-4-карбоновой кислоты и 5-меркапто-1-карбоксиметилтетразол (34 мг) суспендируют в 2 мл диметилформамида. Раствор, полученный растворением бикарбаната натрия (60 мг ) в 4 мл калийфосфатного буферного раствора (0,1 М, рН 6,4), по каплям добавляют к указанному вьппе раствору при 70 С о в течение 30 мин при перемешивании.

Дополнительно продолжают перемешивание в течение 5 ч при той же температуре, Реакционную смесь охлаждают, до комнатной температуры и добавляют ее к разбавленной соляной кислоте (2 мл 1н. соляной кислоты + 40 мл воды) при 0 С и перемешивании. Полуо ченный осадок собирают фильтрацией и промывают водой. Осадок растворяют в тетрагидрофуране (20 мл) и высушивают над сульфатом магния. Затем раствор концентрируют приблизительно до 3 мл и концентрат добавляют к 30 мл этилового эфира при перемешивании.

Образовавшийся осадок собирают фильтрацией и высушивают, получая 16 мг о, целевого продукта. Т. пл. 220-240 С (разложение).

Элементный анализ для С Н N <0, Б, :

Вычи сл е но 47,68 3,33 12,98

Найдено 46,89 3,29 12,26

ИК-спектр поглощения (см, нуджол):

1770, 1725, 1710, 1660, 16 10.

ЯМР-спектр (млн. доли, ДМСО-йь):

3,42 (ÇH, S), 5,01 (1Н, S), 5,28 (2Н, Ъг, S), 5,68 (1Н, d, j = 7,5Hz), 6,74 (2Н, d, j = 8,5Hz), 7,04 (1Н, d, j = 8,5Нг), 7,30. <2Н, d, 8,5Hz), 7,52 (!Ы, d, g = 8,5Hz)

8,91 (1Н, S), 11051

Пример 5. 7 -(D-2-(6,7Диоксихромон-3-кар боксамидо) -2- (4оксифенил)-ацетамидо1-7oL -метокси-3f5-карбоксиметил-2-(1,3,4-тиадиазолил)) -тиометил-3-цефем-4-карбоновая 5 кислота.

7 (-tD-2-(6,7-диоксихромон-3-карбоксамидо)-2-(4-оксифенил)ацетамидо)7g -метокси-3-ацетоксиметил-3-цефем4-карбоновую кислоту (131 мг) и 210 меркапто-5-карбоксиметил-1,3,4-тиадиазол (70,4 мг) растворяют в 2,5 мл диметилформамида. К этому раствору по каплям добавляют раствор фосфатного буфера (5 мл, рН 6,4), в котором растворено 110 г бикарбоната натрия. Полученный раствор после этого перемешивают при 70 С 5 ч. Реакционо ный раствор охлаждают, затем подкисля ют разбавленной соляной кислотой. Gca20 док, кристаллизующийся из раствора, вьщеляют фильтрацией, получая 49 мг целевого продукта. Т. пл. 208-220 С о (разложение) .

ИК-спектр поглощения (см, нуджол):

1760, 1750, 1610.

ЯМР-спектр (мян, доли, ДИСО-d>):

3,42 (ЗН, S), 4, 18 (2Н, S), 5 03 (1Н, S), 5,66 (1Н, d, 3 = 8Hz), 6,71 (2H, d, 3 = 8Hz}, 6,96 (fH, S), 7,30 (2Н, 30

d, g = 8Hz), 7,39 (1Н, S), 8,82 (1Н, s).

Пример б. 7 P — (0-2-(6,7-Диоксихромон-3-карбоксамидо)-2-(4-оксифенил)-ацетамидо)-7d- -метокси-3- (5- 35 карбоксиметил-2-(1,3,4-оксадиазолил) тиометил-3-цефем-4-карбоновая кислота.

Исходную карбоновую кислоту примера 5 (!31 мг) и 64 мг 2-меркапто- 40

5-карбоксиметил-1,3,4-оксадиазола (64 мг) растворяют в 2,5 мл диметилформамида. К этому раст;ору по каплям добавляют фосфатный буферный раствор (5 мл, рН 6,4), в котором растворе- 45 но 110 мг бикарбоната натрия. Раствор перемешивают 6 ч при 70 С. Реакционо ный раствор охлаждают и затем вылива- ют в разбавленную соляную кислоту.

Выпавший осадок вьщеляют фильтрацией, 5{) получая 64 мг целевого продукта.

Т. пл. 192-195 С (разложение).

ИК-спектр поглощения (см 1, нуджол):

1760, 2655, 1610.

ЯИР-спектр (млн.доли, ДИСО-d<) 55

3,41 (3H, S), 4,01 (2Н, S), 5,07 (1Н, S), 5,67 (1Н, d, g = 8Hz), 6,72 (2Н, d, g = 9Hz), 6,98 (1Н, S), 7,25 (2Н,, 17 8 й, 3 = 9Hz) ° 7,40 (IН, S), 8,85 (IBý

S).

Пример 7. 7 p --fD-2-(7,8-Диоксихромон-3-карбоксамидо)-2-фенилацетамидо)- 70I,-метокси-3- f5-карбоксиметил-2-(1,3,4-тиадиадиазолил)) -тиометил-3-цефем-4-карбоновая кислота.

Способом, аналогичным описанному в примере 5, 7 Р -(0-2-(7,8-диоксихромон-3-кар боксамидо)-2-фенилацетамидо) -7 М. -метокси-3-ацетоксиметил3-цефем-4-карбоновую кислоту (128 мг) ,и 2-меркапто-5-карбоксиметил-1,3,4тиадиазол (?0,4 мг) подвергают взаимодействию друг с другом с образованием 44 мг целевого продукта.

ИК-спектр поглощения (см, нуджол):

1760, 1650, 1610.

ЯИР-спектр (млн.доли, ДИСО-dg):

3,42 (ЗН, синглет), 4,18 (2Н, S), 5,05 (1Н, S), 7,04 (1Н, дуплет,g — 8,5Hz), 7,1-7,6 (6Н, мультиплет), 8,91 (1Н, S).

Пример 8. 7 — jD-2- (6, 7-диоксихромон-3-карбоксамидо) -2- (4-оксифенил) — ацетамидо -7 — метокси-3- (1(2-(N М-диметиламино) -этил)-5-тетразолил)-тиометил-3-цефем-4-карбоновая кислота.

Исходную кислоту примера 5 (131,1 мг) и 5-меркапто-1- (2-(N,Nдиметиламино)-этил) -тетразол (52 мг) растворяют в 2,5 мл диметилформамида.

В этот раствор вводят второй раствор, который получают растворением бикарбоната натрия (58,8 мг) в 5 мл фосфатного буферного раствора при 70 С и перемешивании, и все количество перемешивают 7 ч при той же температуре.

Реакционную жидкость охлаждают и выливают в 0,2 н. соляную кислоту (50 мл). Выделившийся осадок собирают фильтрацией, промывают водой и высушивают. Таким образом получают 35 мг о целевого продукта.. Т. пл. 223-225 (разложение).

ИК-спектр поглощения (см, нуджол):

1760, 1660, 1610, 1510.

ЯИР-спектр (млн, доли, ДИСО-dg):

2,57 (6Н, S), 3,28 (2Н, t, g = 6Hz), 3,42 (ЗН, S), 4,55 (2Н, t, g = 6Hz), 5,01 (1H, S), 6,72 (2Н, с, q = 8Hz), 6,96 (fH, S), 7,30 (2Н, d, g = 8Hz), .7,39 (1Н, S), 8,84 (1H, S).

Аналогично описанному в предыдущих примерах 5-8 получены следующие соединения примеров 9-11.

Пример 9. 7 Я -(0-2-(6,7-ДиI оксихромон-3-карбоксамидо)-2-(4-окси1105117

10 фенил)ацетамидо)-7 g -метокси-3-(1зтил-5-тетразолил)-тиометил-3-цефем4-карбоновая кислота, Т. пл. 205-207 С (разложение).

ИК-спектр поглощения (см, нуджол):

1760, 1660, 1610, 1515.

ЯМР-спектр (млн.доли, ДМСО-й6):

1,38 (ЗН, t, g = 8Hz), 3,42 (ЗН, S), 4,27 (2Н, q, "j = BHz), 5,02 (1Н, S), 5,66 (1Н, д, 3 = 8Нг), 6,75 (2Н, d, 8Hz), 6,96 (1Н, S), 7,32 (2Н, d, 8Hz), 7,39 (1Н, S), 8,82 (1Н, S) .

Пример 10. 7 P -(D-2-(6,7Диоксихромон-3-карбоксамидо)-2-(4-оксифенил)-ацетамидо) -7 Ф -метокси3- (2-(1,3,4-тиадиазолил)) -тиометил-3цефем-4-карбоновая кислота.

Т. пл. 207-209 С (разложение).

ИК-спектр поглощения (см, нуджол):

1760, 1650, 1605, 1505.

ЯМР-спектр (млн. доли, ДМСО-d ):

3,41 (ЗН, S), 4,16 (1Н, d, 1 = 13Hz), 4,56 (1Н, d, 1 = 13Hz), 5,05 (1Н, S), 5,66 (1Í, d, g = 7Hz), 6,72 (2Н, d, ° * 8Hz), 6,96 (1Н, S), 7,29 (2Н, d, g 8Hz), 7,39 (1Н, S), 8,84 (1Н, S), 9,51 (1Н, S) .

Пример 11. 7 P — )D-2-(6,7-Диоксихромон-3-кар боксамидо) -2- (4-оксифенил)-ацетамидо)-7п. -метокси-3-(5-ме-ЗО тил-2-(1,3,4-оксадиазолил))-тиометил3-цефем-4-карбоновая кислота.

Т. пл. 215-218 С (разложение).

ИК-спектр поглощение (см, нуджол)

1770, 1660, 1610, 1520. 35

ЯМР-спектр (млн . доли, ДИЛО-д ):

2,45 (ЗН, S), 3,41 (ЗН, S), 4,07 (iH, d, g 1Hz), 4,36 (1Н, d, g = 13Hz), 5,04 (1Н, S), 5,66 (1Н, d, Q = 7Hz), 6,73 (2Н, d, J = 8Hz), 6,96 (1Н, S), 40

7,27 (2Н, 3 = 8Нг), 7,39 (1H, S), 8,84 (1Н, S) .

Полученные в этих примерах соединения были испытаны на их противомикробную активность in vitro.

Метод.

Минимальную ингибирующую концентрацию (MIC) определяли стандартным методом раэбавлением агара Японского общества Хемотерапии. Соединения растворяли в подходящих растворителях (стерилизованная вода для натриевых солей и водоацетоновая смесь (1:1) для свободных кислот) и проводили двукратные разбавления.

Аликвоты (по 1 мл) от каждого разбавления смешивали с Э мл агара Мюллер Хинтона в чашках Петри, чтобы получить пластинки агара, содержащие соединение в последовательно разбавленных концентрациях. После затвердевания arapa пластинки помещали в инкубатор при 37 С на 1,5-2 ч, причем о крышки слегка приоткрывали для того, чтобы ацетон испарялся иэ пластинок.

Испытуемые организмы выращивали в течение 18 ч при 37"С в бульоне

Tryyticase Soy и разбавляли в солевом растворе приблизительно до содержания 1.10 образующих колонии часб тиц в 1 мл. Петлю каждой клеточной суспензии наносили на упомянутую выше пластинку агара, и пластинки вью держивали в течение 18 ч при 37 С, прежде чем определять значение МИК.

Значения результатов минимальных ингибирующих концентраций, мкг/мл, соединений формулы I приведены в таблице.

11051! 7

12 !

1

О

00 о

«сЪ О сч л О м мъ я. >

«съ л л м м

О О о сч

° с Ъ и. с ъ ф л л о

CO Ф с 4 л о с о сч о

Ю о и

Ф л

Ю о д

1

«4Ъ

И

cJJ

О Осч

g I r

1 О

««Ъ

«Ч 00 л л

О О о

Ю

00 «о -Ф л л о о о

I о

««Ъ O с 4 и

«ГЪ л

О «Ч

«Ъ

««Ъ л

«4Ъ а СЧ

СЧ N

«съ л

«4

««Ъ

СЧ

О 1

«0 О -< 1

QI

° л «тд .О Э

Э (б л

GO л

o o JJ о J(Ю

Ю

Ю

Ю

cd ,4= и Х о « н z

Q) л и

«Л О

ы и съ

«4 4"> в Ъ л

«съ с 4 л О

О \ л сч м. л

С 4 С"Ъ

«4 л О м

I 1

\ — — — Ч О л

° О

ОЪ л

«съ

С 4 л

Ю сп

«сЪ л

«4 М

«4 л О

-Ф

Ю м

Э

Ж

Э

Г1

Э о

1 н

«0

И

) 0Ъ 0О

I и о

1 1-

I О

И

Э и

И

Э и н

cd

g «Ъ

«

cd 1

° л «и

u ta

cd н н

Ь 0О1

1 4йC4 !ЭЭЫ 1 ««4 д!

Э1 си л

Х I ">

cd l Э «б

cO I и ЬС I

О нО. к1 н Оы

cd I O Я

Xl

З и О. и о а и о

О С4

» л J

G Э г4 н и

ОЪ Э !«

««

Ц сЪ О СО Î O O а

F»

Х о

» с

« !

cd cd

«

« о

Я л

cd

Ц &

О Э ш 5

0 о д с

«= и

° Х

IX cd

«0

Q) Э Е а

М E"»

cd ««4

«О X

4c Ic

-Ic