Штамм @ @ @ -215,обладающий фунгицидным действием в отношении фитопатогенных грибов
Штамм Bacillus thuringiensis ИПМ-215, Б-29-18 (Центральный музей промышленных микроорганизмов института ВНИИгенетика), обладающий фунгищщным действием в отношении фитопатогенных грибов.
СОЮЗ СОНЕТСНИХ
С«В
РЕСПУЬЛИН
ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ
ГОСУДАРСТНЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР
ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТИЙ (21) 3673013/28-13 (22) 09.12.83 (46) 30.08.85. Бюл. ¹ 32 (72) Н.Н. Галкина, А.Н; Алексеев, В.В. Ыевцов, .Е.В. Щелокова и В. Г. Попов (71) Всесоюзный научно-исследовательский институт прикладной микробиологии (53) 632.952(088.8) (56) 1. Авторское свидетельство СССР. № 660314, кл. С 12 К 3/00, 1977.
„„SU„„)! 44377 A ()4 С 12 Р 1/04 // (С 12 Р 1/04, С 12 R 1:07) (54) ЫТАИИ BACILLUS THURINGIENSIS
ИПМ-215, ОБЛАДАЮЩИЙ ФУНГИЦИДНЬМ ДЕЙСТВИЕМ В ОТНОИЕНИИ .ФИТОПАТОГЕННЫХ
ГРИБОВ (57) IzawM Bacillus thuringiensis
ИПИ-215, Б-29-18 (Центральный музей промышленных микроорганизмов института "ВНИИгенетика"), обладающий фунгицидным действием в отношении фитопатогенных грибов.,ффО ф
1 164 77 2
Изобретение относится к области На мясо-пептонном бульоне обрамикробиологии и может быть использо- зует пленку, осадок на 6-7 сутки. вано для борьбы с фитопатогенными lIa коагулированном желтке и на грибами - возбудителями заболеваний ломтиках картофеля дает рост, колонии сельскохозяйственных культур. з складчатой формы, пигмент на картофеИэвестен штамм культуры Васillus ле светло-бурый.
thuringiensis, ècïîëüsóåìûé для по-, Молоко коагулирует и пептониэилучения энтомопато1 енных бактериаль- рует без образования пигмента. ных препаратов, применяемых в сельс- Не образует лецитиназу на яичноком и лесном хозяйстве для борьбы с желтковых средах, уреазу на среде вредными насекомыми (1) . с мочевиной. Желатину разжижает.
Однако известный штамм не подав- Крахмал гидролиэует. На среде с каляет роста и развития фитопатогенных зеином дает зоны просветления. Хи-. грибов - возбудителей таких заболева тиназу образует. Нитраты в нитриты ни@ сельскохозяйственных культур как 1 восстанавливает. Хорошо усваивает вертициллезное увядание хлопчатника, глюкозу, сахарозу, крахмал, маннит, фуэариоз овощей, корневая гниль бах- удовлетворительно — целлобиоэу. чевых, технических культур, мучнистая Не использует арабиноэу, ксилозу, роса огурцов и т.д. маннозу, Активен по отношению эскуЦель изобретения — получение штам- Р ма, обладающего фунгицндными свойствами к ряду.фитопатогенных микроорганизмов, вызывающих заболевание растений.
Цель достигается.с помощью штамма
Bacillus thuringiensis ИПИ-215.
Штамм получен в результате отбора естественных вариантов штамма 26 куль туры ВТ sub sp. gallerial, депонирован в коллекции Центрального музея 30 промышленных микроорганизмов "ВНИИгенетика" йод номером В-29-18 и харак. теризуется следующими признаками.
Иорфологические признаки. Клетки палочковидные, прямые, с закругленными концами, подвижные, расположенные одиночно, парами или цепочками, на агаризованных средах цепочки короткие, на мясо-пептонном агаре величина клеток в экспоненциальной 4р фазе развития равна 0,7-0,9 х 2,03,0 ммк.. Грамположительные. Перитрихи. Споры крупные, овальной формы, расположены центрально или субтерминально. Особенностью штамма является отсутствие белкового параспо-. рального включения — кристалл-токсина.
Культуральные и физиолого-биохимические признаки.
На мясо-пептонном агаре колонии среднего размера, .диаметр колоний достигает 4-6 мм 5-суточной культуры. Пигмент не образует. Колонии светло-серые, матовые, с неровными кр .ями, с поверхности сухие, внутри вязкой консистенции. лина и не разлагает .салицин. Использует пептон, ферментативные и кислотные гидролйзаты БВК, дрожжевой автолизат, мясные отвары и бульоны, кукурузные и пшеничные экстракты.
Серологические свойства, Штамм
ИШ1-215 не проявляет антигенного родства с сыворотками 15 серовариантов Bacillus thuringiensis..
Биологическая активность штамма определялась ббщеизвестными методами: методом блочков, лунок, колодцев, фильтровальных дисков, смоченных культуральной жидкостью. Концентрация грибов составляла 100 спор/мл.
Полученный штамм не продуцирует термостабильный /3-экзотоксин и не обладает инсектицидной активностью.
Он проявляет антагонистические свойства против ряда фитопатогенных микроорганизмов и имеет широкий спектр действия.
Штамм выращивают на производствен ной дрожже-полисахаридной среде (ДПС).
Состав среды, %: дрожжи 3,0; кукурузная мука 1,5 NaC1 0,5, водопро водная вода, рН до стерилизации
7,4. Интенсивный рост культуры на данной среде наблюдается к 12-15 ч при 28-30 С. Спорообразование отме0 чается к 19-22 ч и заканчивается к 44-48 ч. Процент свободных спор составляет 96%. Титр жизнеспособных спор в конце ферментации на данной среде составляет 2,5-3,0 млрд/мл.
Максимальный выход был 4 млрд/мл.
Редактор О. !Оркова Техред Т.Фанта . Корректор А. Тяско
Заказ 5774/4
Тираж 525 Подписное
ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий
113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5
Филиал ППП "Патент", r. Ужгород, ул. Проектная, 4
Штамм хранится на косяках с карто. фельным агаром или под ваэелиновым маслом на мясо- пептонном агаре при о температуре 3-4 С или в лиофильно высушенном состоянии в ампулах.
После 12 месяцев культура сохраняет основные морфолого-культуральные, физиологические и антагонистические свойства.
Использование штамма иллюстрируется следующими примерами.
Пример- 1. В качестве посевного материала используют штамм.
ИПМ-215, выращенный в течение 2 суток на картофельном агаре. Культивирование проводят в качалочных колбах емкостью 750 мл с 50 мл ДПС/240—
260 об/мин, 28О С, 48 ч. Число жизне-. способных спор определяют методом глубинного титрования на мясо-пептонном агаре.
Антагонистические свойства культуральной жидкости, полученной в процессе ферментации, проверяют по отношению ряда фитопатогенных грибов:
Uerticillium dahtiae,, Ihielaviopsis
basicola, alter naria tenuissima, bot rytis cinerea, Helminthosporium
sativum; Fusarium Culmorum.
Наибольший эффект действия отмечен по отношению к Uerticillium
dahtial. Зона подавления роста соответствовала 50-60 мм. Культуральная жидкость, разведенная от
44377 4
10 до 10, сохраняет фунгицидные свойства, однако эффект действия ,снижается.
Пример 2. Культуру нараба5 тывают в ферментереАПК-210 путем периодического культивирования в. течение 48 ч на среде ДПС. Условия ферментации: 28-30 С, число оборотов мешалки 300-400 об/мин, подача воздуха 1:1, насыщение 0 -100X. В качестве инокулята используют суспензию спор двухсуточной культуры с картофельным агаром.
Культуральную жидкость штамма
ИПМ-215 сепарируют- и высушивают на распылительной сушилке "Ангидро".
Температура воздуха на входе 140160 С, на выходе 75-85 С. Титр высуio шенного препарата 1,3> 10 спор/мл. 0 Высушенная культуральная жидкость представляет собой сыпучий порошок кремового цвета. Этот порошок бып испытан в тепличном хозяйстве совхоза "Большевик" против гриба Sphaегоtheca. — возбудителя мучнистой росы огурцов. Обработка растений препаратом, полученным на основе штамма
ИПМ-2!5, подавляет развитие мучнистой росы в течение 2 недель.
30 Использование штамма Bacillus
thuringiensis ИПИ-215 позволяет расширить арсенал средств для борьбы с вредителями сельскохозяйственных культур.
