Способ диагностики аутоиммунного бесплодия у мужчин

 

СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ АУТОИММУННОГО БЕСПЛОДИЯ У МУЖЧИН путем исследования крови, отличающийся тем, что, с целью повышения его точности, из исследуемой крови выделяют лимфоциты, культивируют их в присутствии фитогемагглютинина , затем добавляют семе}1ную плазму в разведении 1:100-1:600, подсчитывают количество властных клеток и при уменьшении их количества ниже диагносцируют аутоиммунное бесплодие.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК

„„SU„„1171039 (5114 Л 61 К 39 00

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕ

Н А ВТОРСКОМЪ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (54) (57) СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ ЛУТОИММУННОГО БЕСПЛОДИЯ У МУЖЧИН путем исследования крови, отличаюшиисч тем, что, с целью повышения его точности. из исследуемой крови выделяют лимфоциты. культивируют их в присутствии фитогемагглютинина, затем добавляют семенную плазму в разведении 1:100 в 1:600, подсчитывают количество бластных клеток и при уменьшении их количества ниже 70% диагносцнруют а утаи м м унное бесплодие.

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ (21) 3700754/28-13 (22) 14.02.84 (46) 07.08.85. Бюл. № 29 (72) Г. Н. Дранник, И. Ф. Юнда, Н. И. Бойко и Т. С. Монтаг (71) Киевский научно-исследовательский институт урологии и нефрологии (53) 615.375 (088.8) ТЕНИЯ 1",,"., . 3

CO

С Э

С0

1171039

Составитель Г. Смирнова

Рсдакт<>р В. Петраш Текред И. Верес Корректор < Тяск«

3 а ка з 4764/3 Тираж 722 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж вЂ” 35, Раушская наб., д. 415

Филиал ППП «Г!атент», г. Ужгород, ул. Проектная, 4

Изобретение относится к медицине, в частности к способу диагностики иммунологического бесплодия у мужчин.

Цель изобретения — повышение точности способа.

Способ осуществляют следующим образом.

Реакцию бласттрансформации лимфоцитов ставят по любому известному методу.

В стерильную пробирку берут кровь из локтевой вены в объеме 5 мл. Предварительно в пробирку наливают по 25 ед. гепарина на 1 мл крови. Помешают пробирку в термостат на 30 мин при 37 С в вертикальном положении для отстаивания эритроцитов.

Надосадочную жидкость отбирают в чистую пробирку и отмывают 1 раз средой 199.

После отмывания клетки заливают той же средой, содержащей 15 /о сыворотки крупного рогатого скота, 100 ед. пенициллина и 100 ед. стрептомицина в 1 мл. После подсчета клеток в камере Горяева их концентрацию доводят до 500 тыс.(мл. Посев производят в плоскодонных пробирках из нейтрального стекла в об.ьеме 2 мл. Фитогемагглютинина добавляют 0,1 мл в концентрации 40 ед./мл.

Семенную плазму получают из свежего эякулята. После разжижения при комнатной температуре в течение 30 мин эякулят центрифугируют при 300 в течение 6 мин для отделения семенной плазмы, которую и добавляют в культуру аутологичных лимфоцитов в концентрации 1:100 — 1:600. Пробирки закрывают резиновыми пробками и инкубируют при 37 С 96 ч. Контролем служат пробы без добавления семенной плазмы. После культивирования ресуспендируют культуру клеток в среде для роста, центрифугируют 10 мин при 175 g, сливают надосадочную жидкость и готовят мазки. Мазок фиксируют и окрашивают по Романовскому-Гимзе. Подсчитывают 300 клеток (лимфоциты, переходные формы, митозы, бласты) и определяют процентное отношение трансформированных клеток.

Ингибирующий эффект семенной плазмы вычисляют по формуле !

5 ИЭ= Х 100, А-В где A — количество бластов в контроле;

 — количество бластов в опыте.

Аутоиммунное бесплодие диагносцируют при снижении ингибирующего эффекта семенной плазмы ниже 70 /о.

Предлагаемым способом был определен ингибирующий эффект семенной плазмы у

22 мужчин: 15 бесплодных и 7 фертильных.

Оказалось, что из 15 бесплодных мужчин у 9 ингибирующий эффект семенной плазмы был ниже 70о/о. Напротив, у 7 фертильных мужчин ангибирующий эффект семенной плазмы ниже 70о/о был зарегистрирован только в одном случае. Из 9 бесплодных мужчин, у которых семенная плазма обладала снизр женным ингибирующим эффектом, только у 5 были выявлены сперматоагглютинирующи е а нтител а.