Способ приготовления гистологических срезов из обезвоженной ткани для растровой электронной микроскопии

 

СОЮЗ СОЮЕТСНИХ

РЕСПУБЛИН

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ -"„.; -:

Н ABTOPCH0MV СВИДЕТЕЛЬСТВУ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ (21) 3656324/28-14 (22) 21.09.83 (46) 15.04.86. Бюл. В 14 (7l) Молдавский научно-исследовательский институт онкологии (72) А.П. Черный, H.È. Яковлева и А.А. Коробкова (53) 616-0.88.8 (088.8) (56) Гайер Г. Методы электронной гистохимии.-М., 1969, с. !3.

Ayres А. et а1, А method forob taining conventional histological.

J.Ìicrosñoðó . 1971, ч 93, п 3, 243250. (54)(57)СПОСОБ ПРИГОТОВЛЕНИЯ ГИСТОЛОГИЧЕСКИХ СРЕЗОВ ИЗ ОБЕЗВОЖЕННОЙ (19} (!!}

С 01 N I/28, А 61 В 10/00

ТКАНИ ДЛЯ РАСТРОВОЙ ЭЛЕКТРОННОЙ МИКРОСКОПИИ путем удаления с поверхности ткани слоя металла, промывания, пропитывания целлоидином и заключе.ния в парафин, о т л и ч а ю щ и йс я тем, что, с целью повькнения четкости структуры ткани при световой микроскопии, удаление металла проводят ацетоном в течение 5-6 ч, а промывание ведут в этиловом спирте в течение 1,5-2 ч, и пропитывание проводят в течение 12-14 ч при 35о

37 С, при этом среда для пропитывания дополнительно содержит касторовое масло в отношении 1:1 к целлоидину.

Составитель 11. Позняк

Те .ред М.11оргентал

Редактор М. Товтин

Корректср ь1. Демчик

Заказ 1942/41

Тираж 773 Подпис oe

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, 11осква„ 6-35, Раушская наб.. д. 4/5

Производственно-полиграфическое предприятие, г. Ужгород,, ул. Проектная, 4

Изобретение относится к медицине и может быть использовано при гистологических исследованиях операционного и биопсийного материала.

Цель изобретения — повышение четкости структуры ткани при световой микроскопии за счет того, что первоначально обезвоженный образец ткани обрабатывают органическими растворителями и веществами, растворимыми в ° них.

Способ осуществляют следующим образом.

С кусочков ткани для анализа удаляют металл ацетоном в течение 5

6 ч с последующим промыванием в этиловом спирте в течение 1,5-2 ч, затем проводят пропитывание ткани 12l4 ч при 35-37 С. Среда для пропитывания содержит дополнительно касторовое масло в отношении I:1 к целлоидину.

Пример 1. Для обработки берут различные образцы ткани, исследованной в растровом электронном микроскопе.

Обработку образцов проводят по предлагаемому способу и параллельно по известному для сравнения полученных результатов. Доставленные для анализа кусочки ткани матки размером 0,2х0,2 см погружают последовательно в две порции ацетона на 1 ч

45 мин в каждой, после чего образцы промывают в этиловом спирте в течение 2 ч. Промытые образцы ткани погружают. в IZ-ный раствор целлоидина в спирте с эфиром, перемешанным в равной степени с касторовым маслом

24á52 1 и выдерживают 12 ч при 35 С. Затем проводят поэтапное пропитывание сначала в двух порциях хлороформа последовательно по 45 мин в каждой при 35 С. После чего образцы погруо жают в равные порции парафина с хлороформом- при 40 С 25 мик, затем последовательно в две смены парафина при 55 С по 25 мин в каждой.

Пример 2. Доставленные для анализа кусочки ткани матки размером 0,5х0,5 см погружают последовательно в две порции ацетона по 3 ч в каждой, после чего обра-цы промывают в этиловом спирте в течение

2 ч промытые образцы погружают в

17.-ный раствор целлоидина в спирте с эфиром, перемешанным в равной степени с касторовым маслом и выдерживают о

14 ч при 37 С. Затем проводят по"-тапное пропитывание сначала в двух порциях хлороформа последовательно о по 1 ч в каждой при 37 С. После чего

25 образцы погружают в равные порции ,.о парафина с хлороформом при 45 С

30 мин, затем последовательно в две о смены парафина при 60 С по 30 мин в каждой. Из обработанного материала изготавливают гистологические препараты для диагностики.

Качество изготовленных гистологических препаратов из образцов ткани, исследованных в растровом электронном микроскопе, обработанных по

35 предлагаемому способу, значительно выше качества гистологических препаратов, приготовленных известным способом.