Способ выделения живых гельминтов из лягушек

 

СОЮЗ СОВЕТСНИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСНИХ

РЕСГЮЬЛИК (50 4 А 01 К 67/02

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТИЙ (21) 3891828/30-15 (22} 30.04.85 (46) 30.08.86. Бюл.N 32 (71) Винницкий филиал Украинской ордена Трудового Красного Знамени сельскохозяйственной академии (?2} Н.Ф.Запорожец, Ж.Н.Запорожец, Б.П.Стасюк и В.И.Попов

{53) 59.082;595.828(088.8) (56) Котельников Г.А. Гельминтологические исследования животных и окружающей среды. — М.: Колос, 1984, с.94-95.

Щербина А.К.Болезни рыб.- Киев:

Урожай, 1973, с.206-220.

Ершов В.С. и др. Паразитология и инвазионные болезни сельскохозяйственных животных. М.: 1959. с.34.

„.SU 1253553 А 1 (54} (57) 1. СПОСОБ ВЫДЕЛЕНИЯ ЖИВЫХ

ГЕЛЫ1ИНТОВ ИЗ ЛЯГУШЕК, о т л и ч аю щи и с я тем, что, с целью сохранения жизнеспособности лягушек, их помещают на 72-120 ч в 0,0050,0077-ный раствор мочевины в растворе нитрата.

2. Способ по п.1, о т л и ч а юшийся тем, что из нитратов используют нитрат калия или нитрат натрия, или нитрат кальция, или нитрат аммония в концентрациях соответственно 1:8000-10000; 1:10000-12000;

i 12000-14000 1: 13000-15000.

В результате проведенных экспериментальных исследований установили, что наиболее эффективными являются

0,0О5-О,ОО7%-ные растворы мочевины в растворах нитрата калия (1:800010000) или в растворах нитрата нат5S

Ф 1253

Изобретение относится к биологии, а именно к зоологии, и может быть использовано в учебно-методической и научно-исследовательской работе в период проведения лабораторных 5 занятий студентов и учащихся по курсам биологии, зоологии, физиологии, паразитологии, фармакологии и другим дисциплинам, а также для диагностических целей и в террариумах для 10 дегельминтизации лягушек.

Цель изобретения — сохранение жизнеспособности лягушек.

Сущность изобретения состоит в слецующем. !5

В сосуд емкостью 3 л наливают I л дистиллированной воды. В воду после взвешивания добавляют один из химических реагентов: нитрат калия или нитрат натрия, или нитрат каль- 20 ция, или нитрат аммония (например, О, I г нитрата калия, что создает концентрацию соли 1:10000). Содержимое сосуда перемешивают до растворения соли. Затем взвешивают 0,05 г кристаллической мочевины и ее вносят в только что приготовленный раствор и после перемешивания получают 0,005%-ный раствор мочевины в растворе нитрата калия. В приготов- З0 ленный двухкомпонентный раствор помещают лягушек любого вида. Сосуд закрывают крышкой,, в которой предварительно сделаны отверстия диаметром 1 см для доступа воздуха.

В растворе лягушки вьдерживают 72120 ч. После истечения этого времени крышку с сосуда снимают и удаляют лягушки. Содержимое банки сливают в другой сосуд, например кювету, 40 раствору дают отстояться 5 мин, при этом вьделенные лягушками гельминты оседают на дно. Их учет и сбор проводят общепринятыми методами, после чего используют на лабораторных заня- 45 тиях студентов или учащихся или с научными целями. Лягушки возвращают в террариум.

Для отработки режимов выполнения способа бьы и приготовлены растворы различных концентраций, представленные в таблице.

53 2 рия (1:10000-12000), или в растворах нитрата кальция (1:12000-14000), или в растворах нитрата аммония (1:13000-15000), причем активное выделение гельминтов наблюдается через 72-120 ч после помещения лягушек в растворы. С концентрациями, выходящими за пределы изложенных выше, применение растворов мочевины в растворах солей нитратов не сопровождалось положительным эффектом.

Применение растворов мочевины или растворов солей нитратов в указанных пределах,но не сочетанно, а раздельно, также не сопровождается положительным эффектом.

Пример 1. Известными способами готовят в стеклянной банке емкостью 3 л раствор нитрата калия при концентрации 1:8000. В этот же раствор добавляют 0,05 г мочевины.

В банку помещают 5 прудовых лягушек.

В другую банку (контрольную) с 1 л дистиллированной воды указанных химических реагентов не вносят, но помещают 5 таких же лягушек. Банки закрывают капроновыми крышками (в каждой крышке имеется по 1 отверстию диаметром i см) и сод,ержат при 18 С. е

Ведут наблюдения. Через 72 ч от начала опыта лягушки удаляют из банки, раствор сливают в кювету, проводят учет и сбор гельминтов. Затем раствор с кюветы выливают в сосуд и туда же помещают лягушек. Эту процедуру повторяют через 96 и 120 ч. Через

72 ч из кишечника лягушки вьделился

1 гельминт, через 96 ч — 3 и через

120 ч — 2. В контрольном сосуде гельминты не обнаружены.

H p и м е р 2. В стеклянную банку емкостью 3 л наливают 1 л дистиллированной воды, вносят 0,111 г нитрата калия (раствор 1:9000), растворяют, добавляют 0,06 г мочевины, снова перемешивают, получают 0,006%-ный раствор мочевины в растворе нитрата калия. В контрольный сосуд наливают такую же воду, реактивов не вносят.

В оба сосуда помещают по 5 прудовых лягушек, банки закрывают капроновыми крышками с отверстием и выдерживают до 144 ч. Через каждые 24 ч ведут учет и сбор гельминтов, как изложено в примере 1. В опытном сосуде через

24 и 48 ч гельминты отсутствовали, через 72 ч их было 2, через 96 ч — 5, через 120 ч — 3 и через 144 ч — О, Сосуд,У

Концентрация

1 (контроль) 2 3 4 5 6

Растворов нитрата калия

1:7000 1:8000 i:9000 1: 10000 1:11000

Мочевины в растворах нитрата калия,7.

0 0,004 0,005 0,006 0,007 0,008

Растворов нитрата натрия

1: 9000 1: 10000 1: 11000 1! 12000 1: 13000

Иочевины в растворе нитрата натрия, 7.

Растворов нитрата кальция

0 0,004 0,005 0,006 0,007 0,008

0 1: 11000 1: 12000 1: 13000 1: 14000 1: 15000

Иочевины в растворе нитрата кальция, 0 0,004 0,005 0,006 0,007 0,008

Растворов нитрата аммония

О 1: 12000 1: 13000 1: 14000 1: 15000 1: 16000

Мочевины в растворе нитрата аммония, 0 0,004 0,005 0,006 0,007 0,008

3 25 т,е. за период опыта от 5 лягушек было получено 10 гельминтов, а в контроле О.

Пример 3. В контрольный и опытный сосуд наливают по 1 л дистил- лированной воды. В опытный сосуд вно-, сят О, 1 r нитрата калия и 0,07 гмочевины, после растворения реагентов (очередность аналогична примеру 1) получают 0,007Х-ный раствор мочевины 10 в растворе нитрата калия (1:10000}

В контрольный сосуд реагенты не вносят. Затем s o6a сосуда помещают по

5 прудовых лягушек. Учет и сбор гельминтов такой же, как и в примере 1. 15

В опытном растворе было через 72, 96 и 120 ч соответственно 1,2 и 1 гельминтов, а в контроле гельминты отсутствовали.

Пример 4. В две стеклянные 20 банки наливают по 1 л дистиллированной воды. В опытную банку добавляют

О, 1 г нитрата натрия и 0,05 г мочевины. В контрольный сосуд химические вещества не вносят. В обе банки по- 25 мещают по 5 прудовых лягушек. Банки закрывают капроновыми крышками (в каждой крышке имеется одно отверстие

Ф диаметром 1 см) и содержат при 18 С.

Через ?2 ч от начала опыта лягушки из сосудов удаляют и ведут учет и

3553 4 сбор гельминтов. Затем лягушек 803 вращают в соответствующие сосуды и из кювет наливают раствор и воду.

Эту операцию повторяют через 96 и l20 ч от начала опыта. Через 72 ч было собрано 2 гельминта, через

96 ч — 2, через 120 ч — 1, через

144 ч — О. В контроле гельминты не быпи обнаружены.

Пример 5. Постановка опыта аналогична примеру 4, однако вместо нитрата натрия используют нитрат кальция в концентрации 1: 12000 и

0,0057-ный раствор мочевины. Дальнейший ход опыта аналогичен изложенному в примере 4. В контрольном сосуде гельминтов не обнаружили, а в опытном растворе получено было 1 через 72 ч, 3 — через 96 ч, 1 через 120 ч и О через 144 ч.

Пример 6. Постановка опыта аналогична примеру 4, однако вместо нитрата натрия используют нитрат аммония при концентрации 1:1300 и

0,0057.-ный раствор мочевины. Через

24,48,72,96,120 и 144 ч от начала опыта в опытном сосуде обнаружили соответственно 0,0,1,2,2 и 0 гельминтов, в контроле гельминты не обнаружены.