Способ получения бициклического соединения или его фармацевтически приемлемых солей

 

Способ получения бициклического соединения формулы О СНз СНгСНг 3 -H-C-CH-NH-CH-COOCjHs снгсоон или его фармацевтически приемлемых солей, отличающийся тем, что соединения общей формулы где R водород или трет-бутил, подвергают взаимодействию со сложным кетоэфиром формулы ГЛ-СНпСНо-С- С-ОС2Н5 / II II о о в восстановительных условиях и в СО случае необходимости полученный сложный эфир общей формулы О СН, ОТгСИг-О h-N- :-cH-NH-CH-cooCjH5 CH2COOR to где R трет-бутил, подвергают гидролизу и. целевой продукт выделяют в свободном виде или со в виде соли. ю см

ССЮЭ СОВЕТСКИХ Я МОЮ

РЕСПУБЛИК

15114 С 07 К 5/06, С 07 С 103/50, А61 Ä 37Щ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

h0 ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ

МСР ()@о д

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ д

К ПАТЕНТУ

ЙВЯКОТЕКМ

О СН3

И 1

N-С вЂ” С вЂ” БН

СН С008

O СН СН вЂ” С вЂ” С вЂ” ОС Н5 — 11 ll

О О

o m сн,сн1

I м-с-сн-нн-сн-соос,н, I

CHz (21) 3350151/23-04 (22) 29.10.81 (31) 154394/80 (32) 31.10.80 (33) ТР (46) 15.11.86. Бюл. М 42 (71) Такеда Кемикал Индастриз, ЛТД (л) (72) Есикаэу Ока, Кохеи Нисикава и Акио Мияке (JP) (53) 547.964.07(088,8) (56) Вейгаид-Гильгетаг. Методы эксперимента в органической химии.

М,: Химия, 1968, с. 473.

Патент США Р 4105776, кл. А 61 К 31/40, опублик. 1978. (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ БИЦИКЛИЧЕСКОГО

СОЕДИНЕНИЯ ИЛИ ЕГО ФАРМАЦЕВТИЧЕСКИ

ПРИЕМЛЕМЫХ СОЛЕЙ (57) Способ получения бицикличе ского соединения формулы о сн сн,снг > и-с-сн- н-сн-соосн

1 сн2соон или его фармацевтически приемлемых солей, отличающийся тем, что соединения общей формулы

„.Я0„„1271372 A3 где R водород или трет-бутил, подвергают взаимодействию со сложным кетоэфиром формулы в восстановительных условиях и в случае необходимости полученный слож. ный эфир общей формулы где R трет-бутил, подвергают гидролиэу и целевой продукт выделяют в свободном виде или в виде соли.

1271 372

Изобретение относится к способу получения бициклического соединения или его фармацевтически приемлемых солей — новых биологически активных соединений, которые могут найти при- 5 менение в медицине, Цель изобретения — способ получения новых бициклических соединений, обладающих более высокой гипертензивной активностью и низкой токсично-стью, Пример 1, Гидрохлорид этилового эфира глицина (20 r) растворяют в 1О г раствора 10 г 2-инданона в

200 мл метанола, после чего к полученному раствору, охлаждаемому на ледяной бане, прибавляют порциями при перемешивании 5„0 r цианоборгидрида натрия, После перемешивания при комнатной температуре в течение 2 ч реакционную смесь выливают в 500 мл ледяной воды, всю эту смесь подщелачивают бикарбонатом натрия и экстрагируют 300 мл этилацетата. Экстракт промывают водои и высушивают, после

25 чего этилацетат отгоняют при пониженном давлении (в вакууме), к остатку прибавляют 10 мл 20%-ного этанольного раствора хлористого водорода и

200 миллилитров диэтилового эфира„ после чего отстаивают при комнатной температуре. Образующийся при этом кристаллический осадок отделяк т фильтрованием и сушат до постоянного веса, В итоге получают !l г гид- 35 рохлорида этилового эфира N-(индан-3-ил)глицина в виде бесцветных игольчатых кристаллов, имеющих т ° пл, 165-!67 С. !

Пример 2, 2-Инданон (ч0 г) / Щ растворяют в 300 мл метанола, к раствору прибавляют 78 г фосфита третбутилового эфира глицина и !50 г воды, после чего к этой смеси, охлаждаемой на ледяной бане, прибавляют

4 порциями при перемешивании (в течение 15 мин) 23 г цианоборгицрида натрия, Затем полученную реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 4 ч. Далее к этой реакционной смеси прибавляют порциями в течение 1 ч 400 мл 207ной фосфорной кислоты, 200 мл воды и смесь перемешивают в течение

30 мин, после чего экстрагируют

Я

800 мл диэтилового эфира, водный слой подщелачивают 20%-ным водным раствором гидроокиси натрия до рИ 10 и экстрагируют 4 порциями (в общей сложности 500 мл) хлороформа. Экстракт сушат над безводным сульфатом натрия H затем упаривают при пониженном остаточном давлении ° К полученному маслянистсму остатку добав-ляют сначала 50 мл этанола, а затем

150 мл воды и смесь охлаждают. Образующийся при этом кристаллический осадок отделяют фильтрованием и дважды перекристаллизовывают из водного этанола. В итоге получают 47 г третбутилового эфира (индан-2-ил)глицина в виде бесцветных призматических кристаллов, имеющих т, пл. 54 — 55 С.

Пример 3, Раствор 22,3 г

N-карбобензокси-L-аланина и 14 мл триэтиламина в 200 мл тетрагидрофурана охлаждают до †10 С и к этой смеси осторожно прибавляют по каплям 13,1 мл изобутилхлоркарбоната, После перемешивания в течение 30 мин. к этой смеси прибавляют по каплям при охлаждении до (-10)-(-5) С раствор 24,1 г гидрохлорида этилового эфира N-(индан-2-ил)глицина и 14 мл триэтиламина в 200 мл хлороформа, После выдер:кивания в течение ночи при комнатной температуре реакционную смеcü промывают последовательно водой, а затем водным раствором би— карбоната натрия, !07-ной соляной киспотой и водой, после чего сушат над безводным сульфатом натрия. ЗагеМ растворитель отгоняют при пони— женном давлении, остаток растворяют в 100 мл метанола, к раствору добавляют 75 мл 2 н, раствора гидроокиси натрия и смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 2 ч.

Затем смесь подкиспяют 10%-ной соляной кислотой с целью выделения образуюшегося маслянистого продукта, который экстрагируют в делительной во-. ронке 500 мл этилацетата. Полученный экстракт промывают водой, высушивают над безводным сульфатом натрия и упаривают в вакууме с целью отгонки растворителя, В остатке получают

25 г N — карбобензокси-Е-аланил-!! (индан-2-ил)глицина в виде масла °

Продукт растворяют в 50%-ном этаноле и подвергают каталитическому восстановлению в присутствии 4 г 10%-ного палладия на угле. Когда поглощение водорода закончится, катализатор отфильтровывают и фильтрат концентрируют при пониженном давлении, При остатке 50 мл метанола получают 11 r

1271 з

L-аланил-N-(индан-2-ил} глицина в виде .бесцветных игольчатых кристаллов, имеющих т. кип ° 180-182 С.

Пример 4, N-Карбобензокси5

-L-алании (21, 8 г) в 12, 3 миллилитра триэтиламина растворяют в 200 мл тетрагидрофурана и к раствору, температуру которого поддерживают на уровне -15 С, осторожно прибавляют по каплям при перемешивании 8,5 г этилхлоркарбоната, После завершения прикапывания перемешивание продолжают в течение 15 мин и затем в реакционной смеси прибавляют по каплям при перемешивании и охлаждении до — 10 С о или ниже раствор 22 г трет-бутилового эфира N-(индан-3-ил)глицина в

100 мл хлороформа. После перемешивания при комнатной температуре в течение 1 ч реакционную смесь выливают в 500 мп воды, хлороформенный слой отделяют и хлороформ отгоняют при пониженном давлении ° Остаток растворяют в 300 мл этилацетата, раствор про-25 мывают двумя 50-миллилитровыми порциями I н. водного раствора гидрокиси натрия, одной 50-миллилитровой порцией воды, двумя 50-миллилитровыми порциями 203-ного водного раствора фосфорной кислоты и одной 50-милли30 литровой порцией воды (в указанном порядке), после чего сушат над безводным сульфатом магния и растворитель отгоняют в вакууме до получения в остатке 35 г N-карбобензокси-L-аланил-N-(индан-2-ил)глицин-третбутилового эфира в виде масла. Маслянистый продукт растворяют в 300 мл метанола, и после добавления 7 r щавелевой кислоты в 3,5 r 107-ном палладий на угле (содержащего 507 воды), подвергают каталитическому восстановлению при комнатной температуре и нормальном давлении, После завершения поглощения водорода, что является свидетельством завершения реакции, катализатор отфильтровывают, фильтрат упарнвают в вакууме с целью отгонки растворителя и к

:остатку прибавляют 500 мл этанола.

При охлаждении раствора образуется кристаллический осадок, который выделяют фильтрованием, и после сушки получают 21,8 г оксалата трет-бутилового эфира L-аланил-И(индан-2-ил) глицина, имеющего т, пл. 138-141 С, 2 L

Удельное вращение: (с = +20,4 (С = 1, метанол).

372

Пример 5 ° Смесь 143 r этилового эфира 3-фенилпропионовой кислоты, 234 г этилоксалата и 154 мл

28 -ного раствора этилата натрия в этаноле нагревают на водяной бане, имеющей температуру 60-70 С в течение 1,5 ч, осуществляя при этом отгонку этанола из смеси при пониженном давлении, К полученному в остатке красноватому сиропу прибавляют

1,3 л 15Х (в объемном исчислении) серной кислоты. Смесь кипятят с обратным холодильником при перемешивании в течение 15 ч, после чего образующийся маслянистый слой отделяют, нейтрализуют 10Х-ным раствором гидроокиси натрия и экстрагируют этилацетатом. Водный слой подкисляют разбавленной серной кислотой. Образующееся при этом масло экстрагируют этилацетатом, промывают водой и высушивают. Удаление этилацетата отгонкой при пониженном давлении приводит к получению 100 г 2-оксо-4фенилмасляной кислоты в виде маслянистого продукта, Пример 6, 2- Оксо-4-фенилмасляную кислоту (130 г) прибавляют к смеси 650 мл этанола и 13 мл концентрированной серной кислоты, после чего всю эту смесь кипятят с обратным холодильником в течение 5 ч..

Далее реакционную смесь концентрируют до примерно половины первоначального объема и остаток разбавляют 500 мп воды. Образующееся при этом масло отделяют, а водный слой экстрагируют этилацетатом. Зтилацетатный экстракт и масло объединяют и сушат, после чего растворитель отгоняют при пониженном давлении. Остаток подвергают фракционной перегонке в вакууме, в результате чего получают 13 г этилового эфира 2-оксо-4 фенил-масляной кислоты в виде бесцветного масла, имеющего температуру кипения 135-141 С/3 мм рт,.ст.

Пример 7, К раствору 1,0 г

L-аланил-N-(индан-2-ил)глицина и

6,0 г этил-2-оксо-4-фенил-бутирата в 200 мл этанола прибавляют 8 r молекулярных сит (цеолита) и смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 1 ч, Затем к этой смеси прибавляют 1,0 r цианоборгидрида натрия. После выдерживания в течение ночи реакционную смесь концентрируют при пониженном давлении, 1271372

S остаток подщелачивают 107-ным водным раствором гидроокиси натрия до рН

9,0 и нерастворимые вещества удаляют экстракцией диэтиловым эфиром, Водный раствор подкисляют до рН 4 107ной соляной кислотой и экстрагируют двумя 200-миллилитровыми порциями этилацетата. Экстракт промывают водой, сушат над безводным сульфатом натрия и упаривают в вакууме с целью удаления растворителя, Остаток растворяют в 2 мл 207.-ного раствора хлористого водорода в этаноле, к раствору добавляют 100 мл диэтилового эфира и смесь остаивают при комнат- 15 ной температуре. Образующийся осадок отфильтровывают, промывают диэтиловым эфиром> сушат и в итоге получают 0,4 г гидрохлорида N-(1-этоксикарбонил-3-фенилпропил}-L-аланил-N-(ин- 20 дан-2-ил}глицина, имеющего т, пл.

168"170 С,.

Пример 8, Оксалат трет-бутилового эфира L-аланил-11- (индан-2-ил) глицина (21 г) растворяют в 200 мил- 25 лилитрах этанола. К этому раствору прибавляют последовательно 4,1 г ацетата натрия, 10 мл уксусной кислоты, 25 г этил 2-оксо-4-фенилбутирата и 25 г молекулярных сит марки б

ЗА, После этого добавляют 30 г никеля Ренея, суспендированного в 100 мл этанола, H проводят каталитическае восстановление в атмосфере водорода при комнатной температуре и нормальном давлении, Когда поглощение водорода прекратится, супериатант (надосадочную жидкость) отделяют декантацией и осадок промывают два или три раза этанолом, Супернатаит и промывные этаиольные вытяжки объединяют и концентрируют при пониженном давлении. Остаток растворяют в 500 мл этилацетата, раствор промывают в делительной воронке водным раствором бикарбоната натрия и фильтруют через слой (ЗО г) диатомитовой земли.

Этилацетатный слой отделяют от фильтрата, промывают водой и сушат над безводным сульфатом магния. После

50 отroнки растворителя в вакууме в остатке получают 24 г N-(1-этоксикарбо нил- 3-фе нил пр о пил) -L- ала нил-N-(индан-2-ил) глицин трет-бутилового эфира в виде слегка желтоватого вязкого масла, ИК-спектр неразбавленного продукта: 1730 см 1(полоса поглощения сложноэфирного карбонила), 1640 см (полоса Амид 1).

ПМР-спектр (в дейтерохлороформе) о : 1, 2 7 мд. (ЗН, трипл ет, CH )

1,40 м.д, (9Н, синглет, CH хЗ), 1,82,2 м.д, (ÇH, мультиплет, CH ), 2,6з

4,5 м. д. (10Н, мультиплет), 3, 83,9 м,д, (2Н, мультиплет, CH ), 4,2 м,д. (2Н, квадруплет, CH ), 4,9 м, д. (1H, триплет, СН), 7,!в

7,4 м,д, (9Н, мультиплет, протоны фенильной группы).

Пример 9. Трет-бутиловый эфир N-(1-этоксикарбонил-3-фенилпропил) -L-ал анил-N- (л ндан-2-ил) глици на, полученный в примере 2, подвергают очистке методом колоночной хроматографии с использованием 700 r силикагеля, При использовании в качестве элюента cHc .òåìû растворителей бензол — ацетон (с градиентом от !О:1 до 4:1) и системы метанол — бензол

{1:9) получают две фракции продукта.

Каждую фракцию подвергают затем колоночной хроматографии с использованием 400 r силикагеля и указанных элюентов ° Очистка в =òèõ условиях первой фракции дает 2 г трет-бутилового эфира N- !1 — (R)-этоксикарбонил-3-фенил пропил ) — L- ал анил-N- (индан-2-ил) глицина в виде бесцветного вязкого масла, Удельное оптическое вращение /g/ =- - 16,4 (C=l, метанол).

22

Аналогичная обработка второи фракции приводит к получению 16,5 г трет-бутилового эфира N- !! — {Я)-этоксикарбонил-3-фенилпропил1-L-аланил-N-(индан-2-ил)глицина в виде бесцветного вязкого масла, имеющего

22 удельное оптическое вращение /d/ — ) 2,6 (С= l, метанол) .

Пример 10 ° 5 г трет-бутилового эфира N- (1-(S)-этоксикарбонил-3-фенилпропилj -аланил- N-(индан-2-ил)глицина, полученного в примере

3, растворяют в 5 мл уксусной кислоты и к этому раствору прибавляют

20 мл 257-ного раствора бромистого водорода в ледяной уксусной кислоте, после чего смесь взбалтывают в течение 10 мин. Кристаллический оса док, который выпадает при добавлении к этой смеси 300 мл диэтилового эфира, выделяют фильтрованием и в итоге получают 5 r гидробромида

N- (1-(8)-этоксикарбонил-3-фенилпропил)-L-аланил"N-(индан-2-ил) глицина в виде бесцветного кристаллического продукта с т ° пл. 180-183 С.

Удельное оптическое вращение

/Ф/ = +15,6,(С1,4; метанол).

1271372

7

Пример l l, Используя N — (R) — этоксикарбонил-3-фенилпропил 1-L-аланил-N-(индан-2-ил) глицин третбутиловый эфир, полученный в примере 3, и обрабатывая его аналогично примеру 4> можно получить гидробро— мид-N- () †(R)-этоксикарбонил-3-фенилпропил1-L — аланил-N-(индан-2-ил)глицина в виде бесцветного кристаллического вещества, имеющего температуру плавления )50-155 С, /с / = -20,2 (С=l, метанол).

Пример 12. К смеси 500 мл этилацетата, 33 г бикарбоната натрия и 500 мп воды прибавляют 16 2 г гидробромида N — (1 — (S)-этоксикарбонил-8-фенилпропил ) -L N-,èíдан-2-ил) глицина, полученного в соответствии с методикой примера 4, После перемешивания до полного растворения раствор подкисляют до рН 4

1 н. соляной кислотой. Этилацетатный слой отделяют, промывают водой, вы— сушивают и после добавления 20 мп

7 н. этанольного раствора хлористого водорода, концентрируют при пониженном давлении. К остатку прибавляют 250 мл диэтилового эфира и 250 мл петролейного эфира. Образующийся при этом осадок отфильтровывают и в итоге получают 11 г гидрохлорида N- ()в †(S)-этоксикарбонил-3-фенилпропил1—

-L-аланил-(индан-2-ил) глицина в виде бесцветного кристаллического продук35 та ° Перекристаллизация этого продукта из смеси ацетона и 1 н, соляной кислоты приводит к получению бесцветных пластинчатых кристаллов, плавящихся при 166-170 С (с разложени40 ем) . Удельное оптическое вращение

/сс/ = +18,5 (C= l, метанол), ИКспектр полученного продукта (для суспензии в вазелиновом масле):

)740 см (валентные колебания карбонильной группы в сложноэфирной группировке — СООС Н ), )705 см (валентные колебания карбонила карбоксильной группы — СООН), 1640 см (валентные колебания карбонила амидной

50 группы (СО-N) полоса Амид 1) .

Приведены биологические испытания предлагаемых соединений.

Эксперимент 1 ° Ингибирование ангиотензин-1-превращающего фермента (АПФ) предлагаемыми соединениями.

Эксперимент проводят в соответствии с модифицированным вариантом метода. Используя гиппурил->..-гистидил-L-лейцин (ГГЛ) в качестве субстрата, ингибиторную активность в отношении ангиотензин-превращающего фермента (АПФ ингибиторную активность) определяют по количеству гиппуровой кислоты, продуцируемой ангиотензин-превышающим ферментом при добавлении тестируемого соединения и вы> ражают величиной степени ингибирования (в процентах), Раствор соединения, растворенного в 0,02-27-ном диметилсульфоксид-100 ш М фосфата калия буферном растворе (рН 8,3, содержащем 300 m М хлорида натрия, прибавляют к )00 ангиотензин-превращающего фермента (концентрация белка 20 мг/кг) и 100 1,25 m М раствора гиппурил-L-гистидил-8 †ëåéöè (ГГЛ) ° В качестве контроля используют буферный раствор фосфата калия, содержащий диметилсульфоксид в той же концентрации, что и испытуемый раствор. После инкубирования раствора при 37 С в течение 1 ч к нему для прекращения реакции добавляют .150 мкл 1 н. соляной кислоты. Затем туда же добавляют мл этилацетата, раствор центрифугируют при 3000 об/мин в течение 10 мин, из этилацетатного слоя отбирают аликвоту объемом 0,5 мп и высушивают ее при температуре ниже

50 С в токе газоообразного азота. Остаток смешивают с 5 мл 1М водного раствора хлорида натрия и смесь колориметрируют при длине волны

228 нм.

Результаты проведенных испытаний, полученных при тестировании .соединений, представлены в табл, 1.

Эксперимент 2. Действие предлагаемого соединения изобретения против гипертензивной активности Ангиотензина

В качестве экспериментальных животных в данном случае используют крыс-самцов (линии Sprague --Daley), весом от 250 до 350 г> которых содержат в условиях свободного доступа к питьевой воде и корму, Подопытных крыс анестезируют внутрибрюшинным введением пентобарбитала натрия (в дозе 50 мг/кг) в день, предшествующий дню проведения испытания, и в феморальную (бедренную) артерию каждой крысы вводят полиэтиленовую трубочку для измерения кровяного давления, а в феморальнуи (бедренную) вену аналогичную трубочку вводят для

Т а б л и ц а 1

Ингибиторная активКонцентрация, ность в отношении ангиотензинпревращающего фермента, 7 сиЛ 1 1

1! I

ы-С-Сн-МН-СНСООсу

Ьрюн . ио

1О

Таблица 2

35

19!

9 ж соснь

12 инъектирования ангиотензина 1 и 11, после чего трубочки фиксируют (закрепляют).

В день испытания измеряют среднее кровяное давление в контрольной фазе, которое регистрируют с помощью электрического гемодинамометра (модели ИР-4Т, производимой фирмой Ниппон Коден, Япония), после чего феморальную вену каждой подопытной крысы вводят сначала ангиотензин I, а затем ангиотензин ТТ в дозе 300 нг/кг и IOO нг/кг соответственно для измерения гипертензивной активности.

После этого подопытным крысам вводят перорально тестируемое соединеwe в дозе 13,8 мкмоль/кг веса тела в виде водного раствора или в виде суспензии в водном растворе гуммиарабика (аравийской камеди) и, спустя 20, 60 и 120 минут после введения, крысам повторно инъектируют ангиотенэин I u енгиотензин П

Тестируемое соединение

Формулы испытываемого соединения

71372 для того, чтобы проследить за проявлением и развитием гийертензивных реакций. При вычислении степени ингибирования (7. ингибирования) гипертензивной активности ангиотензина I величину степени ингибировання корректируют с учетом временной вариации в развитии гипертенэивной реакции под действием ангиотенэина I! °

1р Результаты испытания соединений на противогипертоническую активность представлены в табл, 2, приведенной ниже, Токсичность предлагаемого соеди1 нения в свободном виде 8000-9000 мг/кг в виде соли — 7400-8330 мг/кг, Проведенные испытания показали, что соединения, полученные предлагаемым способом, при низкой токсичности обладают более высокой антигипертонической активностью, чем известные соединения по структуре и действию.

Ингибирование против гипертонической реакции, вызванной ангиотензином I Х после после после

20 мин 60 мин 120 мин

1271372

Продолжение т абл . 2

Формулы испытываемого соединения после после после

20 мин 60 мин 120 мин

93

93

88.

П р и м е ч а н и е, Испытуемые соединения вводят в дозе 13,8 мкм/кг, Составитель В. Волкова

Техред Л. Сердюкова Корректор Е, Сирохман

Редактор M. Недолуженко

Заказ 6256/59 Тираж 343

ВНИИПИ Государственноro комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Подписное

Производственно-полиграфическое предприятие, г. Ужгород, ул, Проектная, 4

О СН, СН,СН,-Q

W — С- СН вЂ” 1 Н СНСООС Н сн,соон . о снз снгсн1 <Д

1 - С вЂ” СН вЂ” ННСНСООС Н

Сн,соон

Ингибирование против гипертонической реакции, вызванной ангиотенЗИНОМ Iу Х