Способ дифференциальной диагностики затяжной и циклической форм вирусного гепатита @

 

Изобретение относится к медицине. 1Дель изобретения - ранняя диагностика. И 5 мл венозной крови больного вирусным гепатитом В на 5-15 день болезни в градиенте фиколлвериграфин выделяют мононуклеары . Готовят раствор свежи.х эритроцитов барана. Смешивают равные объемы мононуклеаров и эритроцитов барана, инкубируют в течение 25-35 мин. Затем нодсчитывают число стабильных розеткообразующи.х мононуклеаров и нри их отсутствии или нри наличии 1-92 кл/мл диагностируют затяжную форму вирусного гепатита В, а при их содержании 153-464 кл/мл - циклическую форму. Если количество стабильных розеткообразующих мононуклеаров не входит ни в один интервал, необходимо повторить это исследование.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К A8TOPGHOMY СВИДЕТЕЛЬСТВУ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ (21) 3881 526/28-14 (22) 11.04.85 (46) 07.12.86. Бюл. № 45 (71) Рижский медицинский институт (72) А. Ф. Блюгер, Х. M Векслер, Р. Г. Чарная и Н. А. Оспа (53) 615.375 (088.8) (56) Авторское свидетельство СССР № 234300, кл. А 61 В 10/00, 07.06.82. (54) СПОСОБ ДИФФЕРЕНЦИАЛЪНОЙ

ДИАГНОСТИКИ ЗАТЯЖНОЙ И ЦИКЛИЧЕСКОЙ ФОРМ ВИРУСНОГО ГЕПАТИТА В (57) Изобретение относится к медицине.

Цель изобретения — ранняя диагностика.

„„Я0„„1274690 (51) 4 А 61 К 39 00, б 01 U,.33 49

И, 5 мл венозной крови больного вирусным гепатитом В на 5 — 15 день болезни в градиенте фиколлвериграфин выделяют мононуклеары. Готовят раствор свежих эритроцитов барана. Смешивают равные объемы мононуклеаров и эритроцитов барана, инкубируют в течение 25 — 35 мин. Затем подсчитывают число стабильных розеткообразуюгцих мононуклеаров и при их отсутствии или при наличии 1 — 92 кл/Më диагностируют затяжную форму вирусного гепатита В, а при их содержании 153 — 464 кл/мл — циклическую форму. Если количество стабильных розеткообразую1цих мононуклеаров не входит ни в один интервал, необходимо повторить это исследование.

1274690

Изобретение относится к медицине, в частности к гепатологии, и касается диагностики ВГВ, а именно затяжной формы в острой стадии вирусного гепатита В (ВГВ) .

Целью изобретения является ранняя диагностика.

Способ осуществляют следующим образом.

Из 5 мл гепаринизировянной венозной крови больного БГВ на 5 — !5 день болезни в градиенте фиколлверигряфин выделяют моно!!уклеарь!. Готовят раствор свежих эритроцитов барана и смешивают равные об ьемы мононуклеаров и эритроцитов барана, пнкубируют при 36 — 38 С в течение 25 —35 мин, затем подсчитывают число образовавшихся розеток, т. е. число стабильных розсткообразующих мононуклеаров и при их ,:г«, i-«п3ип или наличии — 92 кл/мл ставят дия!ц!Оз затяжной формы ВГВ, а при их количестве 153 — -464 кл/мл ставят цикличе«ку!О фо1)му В ГВ.

llpu.iIåp 7. Больной Г1, на основании об;цспринятых клинико-эпидемиологически", и серологических (обнаружен HiBsAg в сыворотке крови) дынных был установлен диаг:!оз острого вирусного гепатита B на б-ой день болезни, в этот день были сделаны иссл«дования сыворотки крови на выявление сенс!!билизяции лимфоцитов к . 1Г1Ч, она равнялась 10,5%, активность ЛлАТ была

3.9 «л. 1-1и по с«цсибилизации лимфоцитов к 1!!Ч, ни по активности ЛлАТ отдифферснцировать затяжную или циклическую форму н«представлялось возможным, только по !О«ому способу на 6-й день болезни Е3 результате "îãî,,что Е-РОК стабильные отсутствовали в сыворотке крови, можно предположить, что будет затяжная форма. Это подтверждено спустя 8 недель, когда активность АлАТ не нормализовалась (4,8 ед.) и дальнейшее наблюдение 3я этим больным (спустя 1 год), где в биоптате печени, а именно цер;!портальная инфильтрация, псевдолол1;ки указывают па наличие у этого боль;!о!о ХЛГ с переходом в цирроз.

/1ри,!!ер 2. Больной В. на основании общепринятых клин«ко-эпидемиологических и серологических (HBsAg в сыворотке крови) данных установлен диагноз острого БГ Б на 5-й день болезни. В этот же день сделаны исследования сыворотки крови на выявление сенсибилизации к ЛПЧ лимфоцитов, она равнялась 11%, активность АлАТ 11,0 ел.

1Io известным способам на 5-й день болезни отдифференцировать затяжную от циклической формы ВГВ не представлялссь возможным. По предлагаемому способу на 5-й день болезни в результате того, что количество

E-РОК стабильных 92 кл/мл ilpcäïoëîæI3,.!и о наличии затяжной формы ВГВ. Это подтверждено спустя 8 недель по активности

ЛлАТ, равной 6,45 ед. (при норме 0,8 — -0,77), выздоровление у этого больного наступило спустя 10 недель от начала заболевания.

С целью отработки оптимального времени инкубации и температурного режима поставили несколько опылгов по определению количества Е-РОК стабильных. При 36 С со времени инкубации 35 мин Е-РОК стабильных

6% на 100 лимфоцитов больного, количество лимфоцитов у больного 1525 в 1 мл крови.

Е-РОК стаб. в абсолютных числах 92 кл/мл.

При 38"С и времени инкубации 25 мин

E-РОК стабильных также 6%, т. е. их число не изменялось, в результате их было 92 кл/мл.

При 40 С и вр< мени инкубации 40 мин

Е-.РОК стабильных не обнаружено, т. е. произошел распад розеток, таким образом при этом режиме этот метод не работает.

При 30 С и времени инкубацип 20 мин

E-РОК стабильных 8%, а в абсолютных числах это 122 кл/мл.

Таким образом, этJ уже не затяжная форма и анализы надо повторять до 15 лня болезни. Пониженц«температуры и укорочение времени ведет к неспсцифическому увеличению субпопуляции лимфоцитов за счет общей популяции T-клеток, которая сохраняет способнссть образовывать розетки при более низкой температуре.

77ример !. Больная К. на основании общепринятых клинико-биохимических и с«рологических (HBsAg в сыворотк«крови) данных установлен диагноз острог В?13 на 8-й день болезни. Б этот же день с;!«ланы исследования сыворогки крови на вы1!вг!«нис сенсибилизации к .,71Г!Ч лимфоцитов, оня ра!3НН Ié«b 13%, !ктивнос i b A:IAT — 7.4 v;I,.

По известным способам на 5-й лень болезни отдифференцировать затяжную ат циклич«ской фОрмы БГВ не пpе 1«Tс!в, lя;!Ось воз— можным. По предлагаемом способу ца 8-й день болезни в р«зультяте !ого, !!о количество E-РОК стабильных 155 кл/M.i «пр«.i- . полагают наличие циклической формы БГБ.

Это подтве1!хкдепо сг!устя 8 нсл«, !ь но активности АлЛТ равной 0,8 «л. (II!3!< норме 0.8-0,47), выздоровление у этой больнои няс!упило на 8-й неделе заболевания.

С целью Отработки оптимяг!ь! ого врез!«!!и инкубации и температурного р< жима 1:оставили несколько опытов по о«редел«нию

E-РОК стабильных. При 36 С инкубации

35 мин. E-РОК стабильных 4% ня 100 лимфоцитов, количество лимфоцитов в мл крови 3840. Е-РОК стаоильных в абсогпотных числах 155 кл/мл

При 38 С и времени инкубацни 25 мин

E-РОК стабильных 4%, т. е. их число н«изменялось, 55 кл, ;I,I. lip!3 40 - С ц вр«мени инкубации 40 MI II Е-РОК стаб; lhIIIlx не обнаружено, т. с. !роизошел распад розеток, таким образом, при этом режиме этгл мето..l не работает. При 30 С и времени инкубаццн

20 мин E-РОК стабильных 8%, что составило в абсолютных числах 307,2 кл/мл.

Таким образом изменение режима т«мпературы и инкубации ведет к неспецифическому распаду или увеличению, т. е..г!я1274690

Фор.)!ула из!)бретенич

Составитель 11. Бонарцев

1 охре l И. Берег Корректор 1. Ко,)б

Тираж 660 11одни нос

ВНИИГ!И Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж вЂ” 35, Раушская наб., д. 4!5

Филиал ППП «Г!агент>.. г. Ужгород, ул. Проектная, 4

Редактор С. Патрушева

Заказ 6507 3 ность и специфичность метода резко снижается.

В процессе разработки способа диагностики затяжной формы ВГА на .5 — 15 день болезки выявлены специфические особенности.

При разработке температуры инкубапии оказалось, что 36 — -38 С является оптимальной температурой, при которой наиболее четко различаются показатели стабильных

F.-РОК при затяжной и циклической формах

ВГВ. При более низкой температуре их количество увеличивается за счет общей субпопуляции Т-клеток и выявить интервал— различие между формами ВГВ не удается, а при более высокой температуре идет неспецифическое разрушение E-РОК.

При разработке времени инкубапии оказалось, что 25 — 35 мин является Al:TI;;I«,1üным сроком, при котором наиболее !етко различаются показатели стабильных Е-POK при затяжной и циклических формах ВГВ.

При уменьшении времени инкубапии или увеличении эти различия нивелируются.

Только при соблюдении времени инкубации 25 --35 мин и температуры инкубапии

36--38 С могут быть получены те интервалы количества термостабильных Е-РОК, т. с. их отсутствие или количество 1 — 92 кл/мл кроВИ, КОТОРЫС Н()ЗВОЛЯ!О Г ВЫЯBHTI> Л))ТЯЖН Ю форму ВГВ уже на 5 — 15 день болезни, при количестве стабильных E-РОК 153-464 кл/мл можно констатировать циклическую форму ВГВ.

Если количество стабильных E-РОК не входит ни в один интервал. необходимо в течение 5- -15 дней болезни повторять это исследование и, если Нх количество будет ! 53 — 464 кл/мл, то это циклическая форма, если она отсутствует или 1- — 92 к.) /мл затяжная форма острого вирусного гепатита В.

Способ дифференциальной д!гагностики затяжной и циклической форм вирусного

I cHBTHT3 HhTc vi ol1pE . Ic,lc HHH розсткообра3), IOIiIHX .1н)1фопиТОВ 001ЬНОГО lip« ннкубапии их с эритроцитами барана, <)тличаюи<ий 5i тсм, что, с Hc1üio ранней диагностики, на l -15 день болезни инкуб«рук)т лимфопиты с эритроп!игами барана пр«36---38 С в течение 25---35 мин. определяют чис )О терм остабильн ы х розсткообразующих клеток и при нх отсутс!вии или при наличии 1 ——

92 к;1/м.1 кров и,! И а гнО(. тиру K)т зе!тЯ жих к) форму вирусного гепатита В, а при количестве 153 — 464 кл/х)л — циклическую форму вирусного гепат!!та Б.