Способ дифференциальной диагностики вяло текущего ревматизма и инфекционно-аллергического миокардита

 

Изобретение относится к ревматологии . С целью повьшения точности ,. дифференциальной диагностикой в периферической крови определяют Т-, В-, О- и D-лимфоциты, а также антителозависимую клеточно-опосредованную цитотоксичность и уровень иммунных комплексов. При увеличении 0-лимфоцитов и уровня иммунных комплексов и при снижении Т-лимфоцитов и антителозависимой клеточно-опосредованной цитотоксичности относительно нормы диагностируют вялотекущий ревматизм. Отсутствие таких изменений позволяет диагностировать инфекционно-аллергический миокардит. а « (Л с ISD 00 ;о 4 ;о

СО1ОЗ СОВЕТСКИХ

РЕСПУБЛИК

А1,SU, 12894

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ . Н ASTOPCHOMV СВИДЕТЕЛЬСТВУ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ (21) 3580154/28-14 (22) 15.04.83 (46) 15.02.87. Бюл. 111 6 (71) Киевский медицинский институт им.акад.А.А.Богомольца (72) А.И.Грицюк и Е.И.Митченко (53) 615.373(088;8) (56) Холмогорова Г.Т. Уровень иммуноглобулинов у больных острой ревматической лихорадкой и инфекционно-аллергическим миокардитом. Тезисы докладов научной конференции ревматоло, гов Литовской ССР, Вильнюс, 1979, . с.51-52.

gg 4 А 61 К 39/00, G 01 И 33/48 (54) СПОСОБ ДИФФЕРЕНЦИАЛЬНОЙ ДИАГНОСТИКИ ВЯЛОТЕКУЩЕГО РЕВМАТИЗМА И ИНФЕКЦИОННО-АЛЛЕРГИЧЕСКОГО МИОКАРДИТА (57) Изобретение относится к ревмато1 логии. С целью повышения точности . дифференциальной диагностикой в периферической крови определяют Т-, В-, О- и D-лимфоциты, а также антителозависимую клеточно-опосредованную цитотоксичность и уровень иммунных комплексов. При увеличении О-лимфоцитов и уровня иммунных комплексов и при снижении Т-лимфоцитов и антителозависимой клеточно-опосредованной цитотоксичности относительно нормы диагностируют вялотекущий ревматизм.

Отсутствие таких изменений позволяет диагностировать инфекционно-аллергический миокардит.

1 12894

Изобретение относится к медицине, а именно к ревматологии, и может быть использовано в клинической практике при дифференциальной диагностике вялотекущего ревматизма и инфекционноаллергического миокардита.

Целью изобретения является повышение точности способа.

Способ осуществляется следующим образом. 10

Содержание Т-, В-, 0- и D †лимфоцитов в периферической крови определяют методом двойного розеткообразования с зимозаном. Для этого из периферической венозной гепаринизированной крови выделяют лимфоциты в градиенте плотности фиколл-верографина.

В силиконированную пробирку с суспензией лимфоцитов (2х10 лимф/мл) в в среде 199 добавляют 0,5Х-ную взвесь эритроцитов барана и 0,17Х-ную взвесь комплекса зимозан-комплемент. Затем последовательно смесь инкубируют при

+37 С, осаждают центрифугированием, вновь инкубируют при +12 С, фиксируют глютаральдегидом и готовят мазок из тщательно ресуспензированного осадка с последующей его фиксацией в метиловом спирте и окраской метиловым зеленым по Браше. Т-лимфоциты определяют как Е-розеткообразующие клетки,  — как клетки, фиксировавшие на своей поверхности окрашенный комплекс зи.зимозанкомплемент, 0-лимфоциты — как клетки, не имеющие рецепторов ни к 35 эритроцитам барана, ни к комплементу, а D-лимфоциты, как двойные розетки, т.е. несущие на своей поверхности рецепторы как к эритроцитам барана, так и к комплексу зимозан-комплемент. 40

Циркулирующие в крови иммунные комплексы определяют реакцией преципитации с 3,75Х-ным полиэтиленгликолем, мол.вес.=6000. Для этого к предварительно растворенной в боратном . 45 буфере (0,01M) сыворотке добавляют растворенный в этом же буфере поли— этиленгликоль. Затем инкубируют при комнатной температуре и сопоставляют с контрольным разведением сыворотки 50 без полиэтиленгликоля спектрофотометрическим методом при длине волны

450 нм.

Антителозависимую клеточно-опосре55 дованную цитотоксичность определяли спектрофотометрическим методом. Для этого из периферической гепаринизированной крови выделяют лимфоциты в

59,8-65,0

11,8-14,2

21,9-25,7

0,7-1,0 симая клеточно-опосредованная цитотоксичность, 18

Содержание иммунных комплексов, усл.ед.

0,075

25-30

0,03-0,045

Полученные данные подтверждают наличие иммунной перестройки организма по типу развития иммунокомплексного поражения и свидетельствует о том, что больной страдет ревматизмом. Учитывая непродолжительный характер заболевания (3 мес. от начала заболевания), отсутствие данных, свидетельствующих об органическом поражении сердца и наличии характерных иммунологических сдвигов, больному бып поставлен диагноз: ревматизм, активная фаза, 1-й степени активности, первичный ревмокардит с преимуще97 2 градиенте плотности фиколл-верографина. В качестве клеток-мишеней используют эритроциты барабана, донатором антител для определения цитотоксичности служила стандартная кроличья антисыворотка в титре, превышающем агглютинирующий, т.е. 1/1280, чтобы предотвратить агглютинацию клеток-мишеней. Инкубацию клеток-эффекторов с клетками-мишенями проводят в соотношении 10:1 при +37 С в течении 18 ч. Цитотоксическую активность определяют по изменению оптической плотности супернатанта на спектрофотометре СФ-4А при длине волны 450 нм.

Пример 1. Больной Ю., 16 лет, поступил в стационар с жалобами на периодические ноющие боли в области сердца, сердцебиение при физической нагрузке, слабость, общее недомогание. Данные объективного обследования не свидетельствовали с достаточной достоверностью в пользу вялотекущего ревматизма или инфекционного миокардита.

Больной был обследован, получены следующие результаты:

Содержание лимфоцитов Нормальное в крови больного,Х

Т-49

В-13

0 — 37

D-1

Антителозави1289497

Нормальное содержание

59,8-65,0

ll 8-14,2

21,9-25,7

0,7-1,0

T — 59

В-17

0-21

Д-3

Антителозависи30, мая клеточно-опосредованная цитотоксичность

Нормальное содержание

25-30

Составитель Г.Крюкова

Редактор А.Долинич Техред В.Кадар Корректор В.Бутяга

Заказ 7837/6 Тираж 617 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д.4/5

Производственно-полиграфическое предприятие,г.Ужгород,ул.Проектная,4 ственным поражением миокарда, ХНК1 .

Больному был проведен полный курс противоревматической терапии, больной был взят на диспансерное наблюдение. В последующем при длительном наблюдении были выявлены признаки формирования ревматического поражения клапанного аппарата сердца.

П.р и м е р 2. Больной Г., 23лет, поступил в стационар с жалобами на l0 ноющие боли в области сердца, одышку при физической нагрузке, сердцебиение. Заболевание началось остро после перенесенного 2,5 мес. тому назад простудного заболевания. 15

Данные объективного обследования не давали достаточно достоверных данных в пользу ревматизма или инфекционно-аллергического миокардита. После иммунологического обследования были получены следующие результаты.

Содержание лимфоцитов в крови больного,%

30 35

Содержание иммунных комплексов, усл.ед., 0,045 0,030-0,045

Предположение о том, что у больного инфекционно-аллергический мио — 40 кардит, нашло свое подтверждение в развитии клинической картины и в благоприятном исходе после назначенного патогенетического лечения. Дальнейшее наблюдение за больным подтвер- 45 дило предположение о неревматической природе заболевания.

Обследовано 140 больных. У 132 больных был уточнен диагноз с использованием предлагаемого способа, что составило 94,37 случаев. В остальных

8 случаях, соответственно в 5,7Х случаев, очевидно имели место различные варианты клинической гипердиагностики.

По сравнению с прототипом предлагаемый способ дифференциальной диагностики вялотекущего ревматизма и инфекционно-аллергического миокардита обеспечивает высокую точность, так как устраняется возможная однонаправленность иммунологических сдвигов, представляется возможно раняя диагностика первичного ревмокардита и вялотекущего ревматизма с преимущественным поражением миокарда, повышается точность дифференциальной диагностики на 38,37, что позволяет правильно назначить патогенетическую терапию и предотвратить дальнейшее прогрессирование заболевания, а значит, сократить сроки пребывания больного в стационаре и улучшить дальнейший прогноз.

Формула изобретения

Способ дифференциальной диагностики вялотекущего ревматизма и инфекционно-аллергического миокардита путем исследования крови, о т л и ч аю шийся тем, что, с целью повышения точности способа, в исследуемой крови определяют количество Т и

О лимфоцитов, антителозависимую клеточно-опосредованную цитотоксичность, уровень иммунных комплексов, сравнивают с нормой и по снижению Т, увеличению О-лимфоцитов, снижению антителозависимой клеточно-опосредованной цитотоксичности и увеличению уровня иммунных комплексов, диагностируют вяло текущий ревматизм, а по отсутствию таких изменений — инфекционно-аллергический миокардит.