Способ окраски микроорганизмов

 

Изобретение касается медицины, а именно микробиологии. Цель изобретения - быстрая одномоментная дифференцировка различных по чувствительности к кислороду каталаэоотрицательньт анаэробных и каталазопоЛожительных аэробных микроорганизмов кик в смешанной, так и в чистой культуре . Исследуемый материал наносят на предметное стекло. Обрабатьгеают его растворами метиленовой сини,фторида иатрия и перекиси водорода.Фик- cиpyюt в этиловом спирте и обрабатывают раствором основного фуксина.ЗатеМ препарат микроскопируют. ААроС- ные микроорганизмы окрашены в расцвет, анаэробные - в фиолетов осиний цвет. 2 табл. i (Л С NP со сх ел ас ГС

СОЮЭ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК

au g G 01 N 1Узо

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К ASTOPCHOMV СВИДЕТЕЛЬСТВУ

:В

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ (21) 3756693/28-14 (22) 04.05.84 (46) 23.03.87. Бюл. 1Ф 11 (71) Харьковский научно-исследовательский институт микробиологии вак цин и сывороток им. И.И. Мечникова (72) В..Ф. Калиниченко, С.В. Бирюкова, 3,Г. Старобинец и С.Я. Исаева (53) 615.475 (088.8) (56) Биргер М.О. Справочник по микробиологическим и вирусологическим методам исследования. - 1978, с, 22. (54) СПОСОБ ОКРАСКИ МИКРООРГАНИЗМОВ (57) Изобретение касается медицины, а именно микробиологии. Цель иэоб-

„„SU„„1298582 А 1 ретения - быстрая одномоментная дифференцировка различных по чувствительности к кислороду каталаэоотрицательных -анаэробных и каталазоположительных аэробных микроорганизмов как в смешанной, так и в чистой культуре. Исследуемый материал наносят на предметное стекло. Обрабатывают его растворами метиленовой сини,фто" рида натрия и перекиси водорода.Фиксируют в этиловом спирте и обрабатывают раствором основного фуксина.Затем препарат микроскопируют. Аэробные микроорганизмы окрашены в арасщлй цвет, аназробные — в фиолетовосиний цвет, 2 табл.

12чЯ582

Изобретение относится к медицине. а именно к микробиологии, и может быть использовано в бактериологичеc . ких лабораториях при исследовании патологического материала от больных.

Цель изобретения - быстрая, одномоментная дифференцировка различных по чувствительности к кислороду каталазоположительных аэробных и каталазоотрицательных анаэробных микроорганизмов как в смешанной, так и в чистой культуре.

Способ осуществляется следующим образом.

Исследуемый материал тонким слоем наносят на предметное стекло,обрабатывают 10-20 мин Г„1-0,2%-ным водным раствором метиленовой сини., 5-10 мин 1-3%-ным раствором фторида натрия, 2,5-5 мин 1,5-3%-ным раствором Н О при 20-22 С, фиксируют в о этиловом 9б спирте 5-10 мин, обрабатывают 5-7 мин 0,5-1%- ым воцным раствором основного фуксина. После высушивания препарат микроскопируютаэробные микроорганизмы окрашены в красный цвет, анаэробные — в фиолетово-синий, Пример. Змульгированные ткани больного с подозрением на газовую гангрену или бактероидную инфекцию, кровь, экссудат, гной наносят тонким слоем на прецметное стекло или используют отпечатки раневой поверхности на предметном стекле, наливают на 10 мин О, 1%-ный раствор метиленовой сини, сливают. Затем наливают на

5 мин 3%-ный раствор фторида. натрия, сливают, наливают на 3 мин 3%-ный раствор Н О, сливают, наливают на

5 мин 95 этиловый спирт, сливают и наливают на 5 мин 1%-ный раствор основного фуксина. Препарат высушивают и микроскопируют.Анаэробные каталазоотрицательные микроорганизмы окрашаны Р синий и,и 1 а I пll 6!сю I; I, 1 (,;ла зо положит » l!! !!ые "" Р к рл<: 7!ый

В качестве контроля проводят пав раску идентичных препаратов волным раствором метилевовой сил ки H no

Граму. Результаты исследований препставлены в табл. 1 и 2.

Нз представленных в таблицах дан10 ных следует, что предлагаемый способ окраски достаточно информативен и точен и позволяет четко разграничиват. аэробные и анаэробные бактерии как в исследуемых образцах патологических тканей, так и при окраске известных штаммов аэробных и анаэробных культур, Использование предлагаемого способа позволит повысить в 8-10 раз выявление в первую очередь анаэробных РЛ микроорганизмов и ускорить выязление указанных микроорганизмов в патологическом материале.

Формула изобретения

Способ окраски микроорганизмов., -включающий нанесение материала на предметное стекло, окраску органическими красителями и микроскопию, о тл и ч а ю шийся тем, что, с целью быстрой, одномоментной дифференцировки различных по чувствитель35 ности к кислороду каталазополо:ытельных аэробных и каталазоотрицательных анаэробных микроорганизмов как в смешанной, так и в чистой культуре, исследуемый материал обрабатывают

10-20 мин 0,1-0,2%-ным раствором метиленовой сини. 5-10 мин 1-3%-ным раствором NaF, 2,5-5 мин 1,5-3% раст-. вором Н О при 20-22 С, затем фиксируют 5-10 мин в 96 спирте и дополнительно обрабатывают 5-7 мин 0 51%-ным раствором основного фуксина.

1298582

Таблица 1

Микроорганизмы

КоличестРезультаты окраски по предлагаемому способу етиленовой синь ой по Граму во штаммов

Фиоле- Красный товый иоле- Красный овый

Красный

Фузобактерии

10

Бактероиды

10

Пептококки

12

12

Пептострептококки

14.

Аэробные

Грамотрицательные палочки

10

Грамположительные палочки

Кокки

12

Таблица 2

Результат окраски

Количество проб

1 атериал

Синие палоч- Синие палоч- С. perfringens ки,красные ки и кокки Стафилококки кокки

Ткань больного с подозрением на газовую гангрену

Синие и крас- Синие палоч- С. perfringens ные палочки ки P. aeruginosa

То же

Гной из гайморовой полости

Bactегоides

Синие палочки

Bactегоides

Е. coli

Синие и красные палочки и палочки

Анаэробные

Клостридии

Экссудат брюшной по- 4 лости больных с перитонитом

Содержимое матки при 3 эндометрите по предлагае метиленовой мому способу синькой

Синие кокки Синие кокки и палочки, красные кокки и палочки

Результат бактериологического исследования

Peptococcus

Bactегоides

P. aeruginosa

Staphilococcus