Способ выделения яиц описторхов

 

Изобретение относится к медицине и ветеринарии, точнее к паразитологии. Предназначено для приготовления антигенных препаратов и получения иммунных сывороток. Цель изобретения - повышение выхода и упрощение способа путем разрушения тел описторхов, суспендированных в 5-25 мл 0,85%-ного р-ра NaCl. Проводят ультразвуковую дезинтеграцию с помощью экспоненциального излучателя при частоте 44 мГц, мощности 65-70 Вт/см, длительности обработки 10-20 мин, концентрации взвеси 1,2 описторха в 1 мл. Количество одномоментно подвергаемых обработке описторхов 80-100 шт. Тела гельминтов разрушаются полностью, целостность яиц сохраняется. 1 табл. С

СОЮЗ СОВЕТСНИХ

КЮ

РЕСПУБЛИН

„.SU„„1386169 (5р 4 А 61 В 10/00

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ

®О .;:

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ l3."

К АВТОРСКОМ Ф СВИДЕТЕЛЬСТБУ г,. / / ! (21) 4076406/28-14 (22) 06.06.86 (46) 07.04.88. Бюл. Ф 13 (71) Научно-исследовательский институт эпидемиологии, микробиологии и инфекционных болезней (72) Ю.В.Теплухин и Б.В.Каральник (53) 612.015(088.8) (56) Кривенко В.В. Биологические свойства яиц описторхов и роль некоторых видов окончательных хозяев как источников инварионного материала при описторхозе в Западной Сибири. Диссертация на соиск. учен. степени к-та биолог. наук. Тюмень, 1984, с. 151. (54) СПОСОБ ВЫДЕЛЕНИЯ ЯИЦ ОИИСТОРХОВ (57) Изобретение относится к медицине и ветеринарии, точнее к паразитологии.

Предназначено для приготовления антигенных препаратов и получения нммунных сывороток. Цель изобретения — повышение выхода и упрощение способа путем разрушения тел описторхов, суспендированных в 5-25 мл 0,857.-ного р-ра ЯаС1. Проводят ультразвуковую дезинтеграцию с помощью экспоненциального излучателя при частоте 44 мГц, мощности 65-70 Вт/см, длительности обработки 10-20 мин, концентрации взвеси 1,2 описторха в 1 мп. Количество одномоментно подвергаемых обработке онисторхов 80-100 шт. Тела гельминтов разрушаются полностью, целостность яиц сохраняется. 1 табл.

1386169

Изобретение относится к медицине и ветеринарии, в частности к паразитологии, и может быть использовано при приготовлении антигенных препаратов и получении иммунных сывороток.

Целью изобретения является повышение выхода и упрощение способа.

Поставленная цель достигается путем разрушения тел описторхов, сус- 1п пендированных в 5-25 мл 0,85%-ного раствора хлорида натрия, ультразвуковой дезинтеграцией с помощью экспоненциального излучателя при частоте

44 кГц, мощности 65-70 Вт/см, дли- 15 тельности обработки 10-20 мин, концентрация взвеси-1,2 описторха в 1мл.

Количество одномоментно подвергаемых обработке описторхов 80-100 шт.

При этом полностью разрушаются тела 20 гельминтов, Но сохраняется целостность яиц, Пример 1. 100 описторков в

50 мл 0,85%-ного раствора хлорида натрия подвергли ультразвуковой дезин- 25, теграции при помощи прибора УЗДН-1 в рабочем режиме: частота 44 кГц, мщность 70 Вт/см, время обработки

20 мин. Ультразвуковая обработка гельминтов в данном режиме обеспечи- ЗО ла полное разрушение тел паразитов, но сохранила целостность яиц описторхов. После дизентеграции взвесь яиц описторхов перенесли в пробирки и центрифугировали при 1000 об/минЗ5 в течение 3 мин. Осадок, состоящий из целых яиц, трижды промывали

0,85%-ным раствором хлорида натрия с неустановленным рН центрифугированием при 1000 об/мин в течение 40

2-3 мин. Полученные яйца описторхов до использования хранили в 0,85%-ном растворе хлорида натрия при -20 С.

Одновременно из 100 описторхисов выделяли яйца по известному способу, 45

Чистоту препаратов яиц оценивали по наличию частей тел описторхов, устанавливаемомумикроскопически.Данные,характеризующие предлагаемы и известный способы, приведены в таблице.

Из таблицы видно, что затраты . времени при использовании предлагаемого способа в сравнении с известным снизились в 10 раз, количество выделенных яиц (выход целевого продукта) но предлагаемому способу увеличилось

55 практически в 2 раза.

Пример 2. Способ осуществляли при различной частоте — 22 и

Время выделения, мин

Количество выделенных яиц

Чистота выделенных яиц

300-350

2100000

1080000

11репарат Препарат чистый чистый

44 кГц (значения частоты определяются фиксированными характеристиками отечественного диспергатора УЗДН-1, где 44 кГц — максимальная частота), мощности 50, 60, 65, 70 и 80 Вт/см, длительности l0 20 и 30 мин, объеме

5,25 и 50 мп и концентрации взвеси описторхов 1,2 и 3 в 1 мл. Эффективность различных режимов дезинтеграции оценивали по минимальной необходимой длительности обработки, чистоте препарата яиц и целостности яиц.

С учетом целесообразности обеспечения наименьшей длительности обработки, наибольших объема и концентрации взвеси описторхов следует, что оптимальными являются следующие параметры дезинтеграции: частота 44 кГц, мощность 65-70 Вт/см, длительность обработки 20 мин, объем взвеси 525 мл, концентрация 1-2 оп исторха в 1 мл.

Таким образом, применение простого метода ультразвуковой дезинтеграции тел описторхов в выбранном режиме обеспечивает эа короткое время и при очень небольшой трудоемкости получение сравнительно больших количеств яиц гельминтов. При этом выход яиц из одного и того же количества описторхов повышается практически в два раза.

Ф о р м у л а и э о б р е т е н и я

Способ выделения яиц описторхов путем разрушения тел описторхов, о тл и ч а ю шийся тем, что, с целью повышения выхода и упрощения способа, разрушение проводят с помощью ультразвуковой дезинтеграции, при этом взвесь описторхов в количестве

5-25 мл, суспендированных в 0,85%-ном растворе хлорнда натрия при концентрации 1-2 описторха в 1 мл, обраба- . тывают ультразвуком при частоте

44 кГц и мощности 65-70 Вт/см в течение 10-20 мин.