Способ диагностики инфаркта миокарда в поздней стадии заболевания

 

Изобретение относится к кардиологии . Цель изобретения - повышение точности способа при определении срока от начала заболевания. В сыворотке крови определяют хлорнорастворимый мукопротеин, уровень общих гексоз и их трех фракций, полученных методом осаждения. В моче определяют содержание общего оксипролина. Производят гидролиз мочи с серной кислотой. В серию пробирок с анализируемым раствором добавляют изопропиловый спирт и окислитель. После добавления реактива Эрлиха пробирки погружают в водяную баню. Через час пробирки охлавдают, добавляют в них изопропиловый спирт и спектрофотометрируют. Инфаркт .миокарда с 8 по 15 день диагностируют при повышении всех определяемых показателей. (Л

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСНИХ

РЕСПУБЛИК (19) (11) (51) 4 G 01 N 33 48

g(p: р (3

ЙМЫЩ; .;

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ

К А BTOPCHOIVlY СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 4033127/23-14 (22) 03.03.86 (46) 30.05.88. Бюл. В 20 (71) 2-й Московский государственный медицинский институт им. Н.И.Пирогова и Куйбышевский медицинский институт им. Д.И. Ульянова (72) А,В. Виноградов, В.Н. Фатенков, Б.Л. Мовшович, Г.В. Бармотин и И.А. Журавлева (53) 616.005.8(088.8) (54) СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ ИНФАРКТА МИОКАРДА В ПОЗДНЕЙ СТАДИИ ЗАБОЛЕВАНИЯ (57) Изобретение относится к кардиологии. Цель изобретения - повышение точности способа при определении срока от начала заболевания. В сыворотке крови определяют хлорнорастворимый мукопротеин, уровень общих гексоз и их трех фракций, полученных методом осаждения. В моче опредеЛяют содержание общего оксипролина, Производят гидролиз мочи с серной кислотой.

В серию пробирок с анализируемым раствором добавляют изопропиловый спирт и окислитель. После добавления реактива Эрлиха пробирки погружают в водяную баню. Через час пробирки охлаждают, добавляют в них иэопропиловый спирт и спектрофотометрируют. Инфаркт миокарда с 8 по 15 день диагностируют при повышении всех определяемых Е показателей.

1399684

Изобретение относится к медицине, в частности к кардиологии,и может быть 1 использовано для диагностики инфаркта миокарда (HN) при поздней госпитализации больных и неясном анамнезе.

Целью изобретения является повышение точности способа при определении срока от начала заболевания.

Способ осуществляют следующим образомм.

Хлорнора.створимый мукопротеин (ХИП) определяли по следующей методике: в центрифужной пробирке смеIIIHBBIIH 1 мл cblIIopoTKH и 1 мл Н О,, По стенке т!риливали 2 мл б -ной хлорной кислоты, перемешивали палочкой.

Центрифугировали 10 мин при 3000 об/мин.

: Надосадочную ж!!цкость переливали в центрифужную пробирку, туда же добав- 20, ляли 2 мл 5%-ной фосфорно-вольфрамо- вой кислоты, встряхивали. Центрифугировали 10 мин при 3000 об/мин.

Надосадочную жидкость сливали, к о . осадку приливали 2 мл 96 -ного спир- 25 та, в з балтывали, цент рифу гир овали

10 мин при 3000 об/мин. Надосадочную жидкость сливали, осадок растворяли в 2 мл 0,4 í. NaOH добавляли 0,8 мл биуретового реактива. Пробирки ставили в термостат при 37 С на 30 мин.

Колориметрировали на ФЭК с зеленым светофильтром в кюветах 0,5 см. Калибровочная кривая строилась по мукопротеину в 0,4 í. NaOH.

Уровень сывороточного ХМП у здоро" вых составил 1,0 + О, 1 г/л, у больных стенокардией — 1, 16 + О, 05 г/л.

Определение сывороточных гексоз, (Г ) связанных с белком, и их фракций: гексоз гликоэоаминогликанов (Г-ГАГ) и гексоз гликопротеинов (Г-ГП) проводилось по следующей методике.

Реактивы: 1) 96 -ный этиловый спирт; 2) орцнновый реактив "А" (40 мп дистиллированной воды и 60 мл концентрированной серной кислоты) и "Б" (1,6 r перекристаллизованного орцина в 100 мл воды), 3) 0,1 н. NaOH 4) стаццартные растворы галактозы и маннозы (50 г галактозы и 50 г маннозы в 100 мл воды); 5) 1 -ный рас.твор цетилпиридинхлорида (ЦПХ), Перед опытом смешива!и! 7,5 мл реактива "А" с 1 мл реактива "А" с 1 мл реактива "Б". 55

Ход реакции. В 2 центрифужные rrgoбирки наливали по 0,1 мл сыворотки, в первой определяли общие гексозы, во второй Г-ГАГ. В первую пробирку добавляли 5 мл реактива 1, во вторую

О, 1 мл реактива 5 и 0,8 мл воды. Перемешивали, центрифугировали 15 мин при 3000 об/мин.Сливали надосадочную жидкость, пробирки опрокидывали на

30-60 мин на фнльтровальную бумагу.

Осадок растворяли в 1 мл реактива 3, добавляли по 8,5 мл реактива 2, перемешивали и ставили в водяную баню на 15 мин в темноте при 80 С. Охлаждали пробирки во льду в течение 5 мин.

Фотометрировали ри длине волны 500560 нм в кюветах толщиной 1 см против контроля (смесь 1 мл реактива 3 и 8 5 мл реактива 2, обработанных как опыт).

Полученные показатели оптической плотности пересчитывали на содержание гексоэ в мг на 100 мл по калибровочной кривой, построенной по различ ным концентрациям стандартного раствора галактоза — манноза, а затем переводили в ммоль/л. Фракция Г-ГП рассчитывалась по разнице Г и Г-ГАГ.

У больных стенокардией (контроль) уровень Г составил 6„71+0,33 ммоль/л

Г-ГАà — 2,30+0,31 ммоль/л; Г-ГП—

4,41 0,32.

Определение общего оксипролина мочи (О„ „ ) проводилось по следующей методике.

Из суточного количества мочи брали 2 мл и гидролизовали в запаянных ампулах с равным количеством 50 -ной серной кислоты в течение 5 ч при о

120 С. Иэ ампул отбирали по 1 мл жидкости переносили в центрифужные пробирки с делениями до 5 мл. Добавляли по 2 мл дистиллированной воды и 1,6 мл

6 н. гидрата окиси натрия. Общий объем доводили до 5 мл. В серию пробирок разливали по 1 мл нейтрального или слабокислого анализируемого раствора. При тщательном перемешивании добавляли по 1 мл иэопропилового спирта и окислителя. Через 5 мин в каждую пробирку добавляли по 2,6 мл реактива Эрлиха и поrpужали их в водяную баню при 100 С. Через 1 ч пробирки охлаждали, объем доводили изопропиловым спиртом до 10 мп, После перемешивали, спектрофотометрировали в кюветах 1 см при длине волны 558ммк против контроля, в котором анализируемый раствор заменен дистиллированной водой. Содержание О„ . находили по калибровочной кривой.

3 13996

Суточная экскреция 0„ „ у здоровых составляет 256,0 i 6,9 мкмоль/сут, у больных стенокардией (K0HTpoль)

294 4,58 ммоль/сут.

Пример 1, Больной Н., 55 лет, госпитализирован 15. 1. 1986 r. с жалобами на неинтенсивные давящие боли в предсердечной области. Стенокардия в течение 12 лет, дестабилизация стенокардии (снижение толерантности физическим нагрузкам, малый эффект нитратов) в течение месяца. Состоя ние удовлетворительное. Тоны сердца глуховаты. Пульс ритмичен, 88 в 1 мин., АД 130/80 мм рт.ст. Температура нормальная. На ЭКГ от 15.1.1986 г, комплекс QS рg интервал $Тщ g BbmP. иэолинии, зубец Т отрицательный.

С 16 по 18.1.1986 динамики ЭКГ нет.

Лабораторные показатели от

16 . 1. 1986 r. лейкоциты 6,5 х 10 /л, СОЭ 28 мм/ч, ГБД 54 мМЕ/мл (норма).

Согласно прототипу нельзя диагностировать ИИ: нормальная активность 2б органоспецифического фермента ГБД, нет динамики формирования комплекса

QS на ЭКГ.

Проведено исследование по предлагаемому способу. Уровень ХМП соста- З вил 2,04 г/л (выше М + 2б контроля);

Г 12,3 ммоль/л (выше контроля);

Г-ГАГ 6,9 ммоль/л (выше N+2G контроля), Г-ГП 5,40 ммоль/л (не выше N+2(8 контроля); О„, „ 364,2 мкмоль/сут (выше M+25 контроля).

По.предлагаемому способу, учитывая высокие цифры ХМП, Г,, Г-ГАГ, I

О„, .следует диагностировать HN c

16 до 25 дня, это предполагает адек- 4О ватные укаэанным срокам лечебные мероприятияя.

П.р и м е р 2. Больной 3., 38 лет, госпитализорован 22.12;1985 г. с жалобами на давящие эагрудинные боли с иррадацией в спину, возникающие 23 раза в день при ходьбе, продолжающиеся 20-30 мин. Заболел 20. 11. 1985 г. когда впервые возникли давящие загрудинные боли продолжительностью до

40 мин. С тех пор боли возникли ежедневно.. Нитроглицерином не пользовался. Обратился к кардиологу поликлиники, срочно госпитализирован после записи ЭКГ.

Тоны сердца глуховаты. Пульс ритмичен 82 в мин, АД 160/90 мм рт.ст.

Температура нормальная . ЭКГ от

22.12.1985 г: комплекс 0$„,, зубец

Q/ 4

H H T P. P B A JI $ Т 4 B bllll P H 3 0JIH HHH зубец Т„, отрицательный, 23,25,12 °

1985 г, без динамики. В крови активность ГБД 58 мМЕ/мл (норма) .

Согласно прототипу. у пациента нет

"свежего" НМ: нормальная активность органоспецифического фермента ГБД, отсутствует динамика формирования комплекса QS, Было проведено определение биохимических показателей согласно предлагаемому способу. ХМП 1,04 г/л (норма) Г 4,62 ммоль/л (норма), Г-ГАГ

1,?4 ммоль/л (норма), Г-ГП 2,88 ммоль/л (норма), экскреция О„ 968,0.мкмоль/

/сут (выше М+26).

По предлагаемому способу, учитывая нормальную активность ГБД, низкие цифры ХИП, Г,, Г-ГАГ в сочетании с высокими О„,о диагностирован ИМ в сроки от 26 до 40 дня. Это не противоречит клинической логике, поскольку HM мог возникнуть, по данным анамнеза, не ранее 20.11;85.

Пример 3. Больной А., 51 года, поступил в клиницу 27.12.84 r. с жа- лобами на тяжесть за грудиной, чувство нехватки воздуха. Около года периодически отмечает боли в области сердца. Ухудшение состояния последние 2 недели, когда появились приступы загрудинных, сжимающих болей при ходьбе. На снятой амбулаторно

ЭКГ очаговые изменения миокарда.

При поступлении состояние средней тяжести. Тоны сердца приглушены. АД 160/90 мм рт.ст., пульс ритмичный 72 в мин. На ЭКГ: ритм сину- ° совый, нормальное положение ЭОС, отрицательный зубец Tz, < . В последующие трое суток электрокардиограмма без динамики.

Лабораторные показатели от 28. 12.84: лейкоциты 5,9 10 ; СОЭ 34 мм/ч, ак9, тивность АСТ 10 ед. (норма) .

Согласно прототипу нельзя было диагностировать острый инфаркт миокарда: нормальная активность фермента, отсутствие динамики на ЭКГ.

Проведено исследование по предлагаемому способу. Уровень хлорнорастворимого мукопротеина составил 1,5 г/л, что в 1,5 раза превышало норму. Уровень гексоз сыворотки бып равен

7, 1 ммоль/л (норма 4,74 ммоль/л), а уровень Г-ГАГ составил 2,34 ммоль/л (норма 1,55 ммоль/л), суточная эксФормула изобретения

Способ диагностики инфаркта миокарда в поздней стадии заболевания путем биохимического исследования

Составитель Л. Покрышкина

Техред А.Кравчук Корректог N. Шавоши

Редактор И. Бандура

Заказ 2662/46

Тираж 847 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Производственно-полиграфическое предприятие, r. Ужгород, ул. Проектная, 4

5 13 креция оксипролина с мочой (О„р,„) была равна 237 ммоль/сут (норма).

Высокие цифры XNII, Г и Г-ГАГ, в сочетании с, низким уровнем 0„» позволили благодаря предлагаемому способу диагностировать инфаркт миокарда с давностью заболевания 8- 15 дней.

На вторые сутки стационарного лечения балльной уже был активизирован в пределах палаты.

99684 6 биологической жидкости, о т л и ч аю щ и й.с я тем, что, с целью повышения точности способа при определе5 нии срока от начала заболевания, в сыворотке крови определяют хлорнорастворимый мукопротеин, уровень обпщх гексоэ и их трех фракций, полученных методом осаждения, в моче определяют уровень общего оксипролина и при повышении данных показателей относительно нормы диагностируют инфаркт миокарда с 8 по 15 день, при тех же показателях и повышенном четвертом - с 16 по 25 день, а при повышении уровня четвертого показателя и нормальных остальныхс 26 по 40 день.