Питательная среда для выращивания рsеudомоnаs aeruginosa- продуцента алкалоидов фенилтиазолового ряда

 

Изобретение относится к биотехнологии и может быть использовано .при производстве алкалоидов. Цель изобретения - повышение выхода целевого продукта. Для приготовления питательной среды используют, г/л: (NH)SO. 5-14,3; молочная кислота 10-13,5; глюкоза 20-40; 1-2; MgS04-7H20 0,3-0,7; NaCl 1-7; водный зкстракт биоконцентрата дрожжей Candida sp. 10-50; дистиллированная вода до 1 л. Устанавливают рН среды 8,0. Ферментацию Ps.aeruginosa проводят при 34±1,0 С при перемешивании в течение 24-30 ч. Выход алкалоида 15,5-40,9 мг/л среды. (Л

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ:.„:

К А BTOPCKOMV СВИДЕТЕЛЬСТВУ л (21) 4034196/28-13 (22) 05.03.86 (46) 30.06.88. Бюл. В 24. (71) Институт микробиологии AH УЗССР (72) Д.К.Огай, Т.Д.Джамалов, Ш.M.Ìóñàåâ и С.M.Ходжибаева (53) 678.044.29(088.8) (56) Огай Д.К. и др. Регуляция синтеза бактериального алкалоида фенилтиазолового ряда с помощью различных факторов среды у Ps.aeruginosa. Тезисы докладов UII съезда Всесоюзного микробиологического общества, 1985, с. 108. (54) ПИТАТЕЛЬНАЯ СРЕДА ДЛЯ ВЫРАЩИВАНИЯ PSEUDOMONAS AERUGINOSA-ПРОДУЦЕНТА

АЛКАЛОИДОВ ФЕНИЛТИАЗОЛОВОГО РЯДА

„„SU„„1406155 А 1 (М 4 С 12 N 1/20, С 12 Р 1/04//

//(С 12 Р 1/04 С 12 R 1 385) (57) Изобретение относится к биотехнологии и может быть использовано .при производстве алкалоидов. Цель изобретения — повышение выхода целевого продукта. Для приготовления питательной среды используют, г/л: (NH<) SO+ 5-14,3; молочная кислота

10-13,5; глюкоза 20-40; KHgPO 1-2;

MgSO< 7Н О 0,3-0,7; NaC1 3-7; водный экстракт биоконцентрата дрожжей

Candida sp. 10-50; дистиллированная вода до л. Устанавливают рН среды

8,0. Ферментацию Ps.aeruginosa проводят при 34+1,0 С при перемешивании в течение 24-30 ч. Выход алкалоида

15,5-40,9 мг/л среды.

1406 155

9,6

11,7

30,0

1,5

0,5

5,0

Сул ьфат аммония

Молочная кислота

Глюкоза

КН 2РО4 м8$0, 7н,о

Хлористый натрий

Изобретение относится к биотехнологии и может быть использовано при производстве алкалоидов.

Цель изобретения — повышение выхо5 да целевого продукта °

Для приготовления среды используют экстракт биоконцентрата дрожжей

Candida sp. IIg-4, который получают следующим образом. 10

Биоконцентрат получают из отходов зернопроизводства.

В состав среды для выращивания дрожжей входят следующие компоненты, г/л:

1I5

Рисовая шелуха 100 (NH,),$O, 3 . Мд$О4 7Н,О 097

NaC1 О, 5

КН <РО4 1 20

КН РО4-3Н О 0,1

Водопроводная вода 1 л (рН

5,6-6, О) ст ерили з уют среду при 1 00-11 Оо С, 1 атм в течение 20 мин. 25

Выращивают дрожжи Candida ps IIg-4 в 100-литровом ферментере при заполнении средой в количестве 50,0 л, внесении посевного материала 10-15K, перемешивании 500 об/мин, подаче воздуха 0,5 л/мин, температуре 30,0

+1 С в течение 24 ч, Готовый биоконцентрат представляет собой густую суспензию, содержащую в среде, аминокислоты, мгЕ;

Цистин 0,6

Лизин 5,3

Гистидин 3,1

Аргинин 4,4

Аспарагин-серин 5,0

Трипт офа н 2,7

Валин 4,5

Лейцин 5,1

Глицери н 3,2

Глютаминовая кислота 7,9

Треонин 4,1

Алании 4,9

Тирозин 3,2

Мети они н 1,4

Сумма аминокислот составляет.

55,5 мг X.

Для приготовления водного экстракта биоконцентрата берут 500 мп биоконцентрата и 500 мл водопроводной воды. Кипятят 30 мин и фильтруют через ватно-марлевый фильтр. Фильтрат

2 раза разводят водопроводной водой . и стерилизуют при 1 атм 15 мин.

Аминокислотный состав водного экстракта биоконцентрата следующий, мг 7.;

Цистин 2,1

Лизин 1,6

Гистидин 1,2

Аргинин 0,9

Серии 1,9

Аспараги н 1,2

Валин 1,8

Триптофа н 2,9

Глютаминовая кислота 4,1

Треонин 1,0

Аланин 3,9

Тир озин 2,3

Метионин 1,3

Лей ци н 3,3

Гли ци н 1,7

Сумма аминокислот составляет

3091 Мг 70.

Пример 1, Культуру хранят до посева на скошенном МПА в пробирках, залитых вазелиновым маслом при

3-4 С, пересевают петлей в пробирке с бульоном и выращивают на круговой качалке при 150 об/мин в течение 48 ч.

Выращенной культурой инокулируют

40 колб со 100 мл питательной среды.

Посевной материал в объеме .4 л вносят в 100-литровый ферментер с 40 л питательной среды. Ферментацию проводят при 34 1, О"С, перемешивания

400 об/мин в течение 24-30 ч.

Питательная среда имеет следующий с оста в, г/л:

Сульфат аммония 5,0

Молочная кислота 10,0

Глюкоза 20,0

КЧ РО 1,0

Ма$04 7Н20 0,3

NaC1 3,0

Водный экстракт биоконцентрата дрожжей Candida sp. Hg-4 10,0

Дистиллированная вода До 1 л (рН

8,0)

Выход алкалоида составляет 1595 +

+4,3 мг/л среды.

Пример 2. Питательная среда имеет следующий состав ингредиентов,г/л:

1.3

1406 155

Водный экстракт биоконцентрата

Дистиллированная вода алкалоида при сохранении стабильности алкалоидообразования, а при оптимальном и максимальном соотноше25,0 нии компонентов превышается выход целевого продукта.

Фор мула и з обр ет ения

15

1,0-2,0

0,3-0,7

3,0-7,0

Составитель А. Завадская

Редактор Н.Швьдкая Техред А.Кравчук Корректор И. Эрдейи

Заказ 3157/23 Тираж 520 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Производственно-полиграфическое предприятие, г. Ужгород, ул. Проектная, 4

До 1л (рН

8,0)

Ферментация проводилась в тех же условиях, что в примере 1.

Выход целевого продукта составляет 36,4+10,5 мг/л среды.

Пример 3. Питательная среда содержит следующий состав ингредиентов, г/л:

Сульфат аммония 14,3

Мол оч на я кислота 13,5

Глюкоза 40,0

КН,РО, 2,0

Мя$0 7Н О 0 7

Хлористый натрий 7,0

Водный эстракт биоконцентрата 50,0

Дистиллированная вода До 1л (рН

8,0)

Режим ферментации такой же, как 25 и в примере 1.

Выход алкалоида составляет 19+

+ 5, 5 мг/л ср еды.

При использовании известной среды выход алкалоида 5,0-20,0 мг/л среды - 30 при длительности ферментации не менее 72 ч.

Использование данной питательной среды позволяет ускорить получение

Питательная среда для выращивания

Pseudomonas aeruginasa-продуцента алкалоидов фенилтиазолового ряда, содержащая сульфат аммония, молочную кислоту, глюКозу, фосфорнокислый однозамещенный калий, сернокислый маг". ний и дистиллированную воду, о т л ич а ю щ а я с я тем, что, с целью повышения выхода целевого продукта, она дополнительно содержит хлористый натрий и водный экстракт биоконцентрата дрожжей Candida pp. IIg-4 при следующем количественном соотношении компонентов, г/л:

Сульфат аммония 5, 0-14, 3

Молочная кислота 10, 0-13, 5

Глюкоза 20, 0-40, 0 Фосфорнокислый однозамещенный калий

Сернокислый магний

Хлористый натрий

Водный экстракт биоконцентрата дрожжей

Candida sp IIg-4 10,0-50,0

Дистиллированная вода До 1 л