Способ дифференциальной диагностики гломерулонефрита и пиелонефрита

Авторы патента:

G01N33/68 - с использованием протеинов, пептидов или аминокислот

Изобретение относится к медицине ,, касается лабораторной диагностики болезней почек. Цель изобретения - роввппение точности способа.-Для этого порцию ацетонового порошка тест-м1кроба растирают в ступке с водой, к суспензии добавляют 1 т реактива рдя приготовления полиакриламидноЬо геля (ПАТ), рН 4,3 (раствор гидроокиси калия 1 н. 48 мл, уксусная кислота ледяная 17,2 мл, N,N,N ,N- -TeTpaMeTRn- зтилэтилендиамин 4 мл, вода до 100 мл), 1,5 мл реактива, содержащего акриламид 60 г, N,N -мeтилe Iбиc- акриламид 0,4 г, вода до 100 мл, и добавляют 4 мл реактива, содержащего персульфат аммония 0,28 г, вода до 100 МП. СГмесь перемешивают и заливают в трубки аппарата для электрофореза в ПАГ. После полимеризации на поверхность гелей наслаивают О,15 мл свежевзятой отцентрифугированной Мочи, на нее наслаивают злектродньй буфер (рН 4,0, глицин 28,1 г, уксусная кислота ледяная 3,06 мл, вода), верхним электродом служит анод (+), а нижним - g катод (-). Разделение проводят 2,5 ч в холодильнике при силе тока 2 мА на ГЛ трубку. Затем проводят инкубацию в термостате 1 ч при З7 с. Результат оценивают по расположению зоны лизиса тест-микробов, соответствующей положению лизоцима в геле. При расположении полосы лизоцима в области катода диагностируют гломерулонефрит,. а при расположении полосы лизоцима в области анода - пиелонефрит, 2 ил.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ, РЕСПУБЛИК

„„SU„„ ll 429031 (so 4 С 01 М 33/68

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И OTHPblTHA

Н д BTOPCHGMV СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 4080571/28-14 (22) 20.06.86 (46) 07.10.88. Бюл. ¹ 37 (71) Калининский государственный медицинский институт (72} А.П. Тофило и М.П. Антонов (53) 616.07(088.8) (56) Заварзина Т.М., Петрунь Н.М.

Содержание лизоцима и его молеку« лярных.разновидностей в сыворотке крови и моче больных гломерулонефритом. - Тер. архив, 1975, т. 45, № 4, с. 70-73. (54) СПОСОБ ДИФФЕРЕНЦИАЛЬНОЙ .ДИАГНОСТИКИ ГЛОМЕРУЛОНЕФРИТА И ПИЕЛОНЕФРИТА (57) Изобретение относится к медицине,.касается лабораторной диагностики болезней почек. Цель изобретенияПовышение точности способа. Для этого порцию ацетонового .порошка тест-микроба растирают в ступке с водой, к суспензии добавляют 1 мп реактива для приготовления полиакриламидного геля (ПАГ), рН 4,3 (раствор гидроокиси калия 1 н. 48 мл, уксусная кислота ледяная 1 7,2 мл, N,N,N,N -тетраметилэтилэтилендиамин 4 мл, вода до

100 мл), 1,5 мл реактива, содержащего акриламид 60 г, N,N -метиленбисакриламид 0,4 г, вода до 100 мл, и добавляют 4 мл реактива, содержащего персульфат аммония 0,28 r, вода до

100 мл. Смесь перемешивают и заливают в трубки аппарата для электрофореза в ПАГ. После полимеризации на поверхность гелей наслаивают О, l5 мл свежевзятой отцентрифугированной мочи, на нее наслаивают электродный буфер (рН 4,0, глицин 28,1 г, уксусная кислота ледяная 3,06 мл, вода), верхним электродом служит анод (+), а нижнимкатод (-) . .Разделение проводят 2,5 ч в холодильнике при силе тока 2 мА на трубку. Затем проводят инкубацию в термостате .1 ч при 37 С. Результат оценивают по расположению зоны лизиса

-.ъ тест-микробов, соответствующей положению лизоцима в геле. При расположении полосы лизоцима в области катода диагностируют гломерулонефрит,. а при расположении полосы лизоцима в облас. ти анода - пиелонефрит. 2 ил.

1429031

Изобретение относится к медицине, в частности, к лабораторной диагностике, и может быть использовано для диагностики болезней почек.

Целью изобретения является повышение точности способа.

На фиг. 1 и 2 схематически показано расположение мочи больных соответственно гломерулонефритом и пиелонефри- 1О. том после электрофореза в полиакоиламидном геле.

Способ осуществляют следующим образом. 10 мг ацетонового порошка тест-мик15 роба растирают в ступке с 1 мл воды, к суспензии добавляют 1 мп реактива

1,5 мл реактива и 4 мл реактива

5. Смесь. перемешивают и заливают в трубки аппарата для электрофореза в 20 полиакриламидном геле (ПАГ) ° После полимеризации иа поверхность гелей наслаивают О, 15 мл свежевыпущенной отцентрифугированной моче, на нее до края трубок наслаивают электродный буфер и25 трубки помещают в аппарат. В сосуды ! аппарата заливают электродный буфер, верхним электродом служит анод (+), а нижним катод (-). Разделение проводят в течение 2,5 ч в холодильнике при силе тока 2 мА на трубку. После окончания электрофореза гели, не вынимая из трубок, помещают в сухие пробирки и инкубируют в термостате 1 ч при

37 С, после чего оценивают результат по расположению зоны лизиса тест-мик. робов, соответствующей положению лизацима в геле. При расположении полосы лизоцима в области катода диагностируют гломерулонефрит, а при располо" жении Hojiocbt лизоцима в области ано.да » пиелонефрит.

Используют следующие реактивы.

1. Реактивы для прйготовления ПАГ, рН 4,3:

45 а. Раствор 1 н. гидроксида калия

48 мл; уксусная кислота ледяная

17,2 мл; N,N,N,N -тетраметилэтилендиамин 4 мп; вода до 100 мл.

6. Акрнламил 60 г; N,N -метнлен бисакрнламнд 0,4 г; вада да 100 мл.

5. Персульфат аммония 0,28 г; вода до 100 .

2. Электродный буфер, рН 4,0: глицнн 28,1 г, уксусная кислота ледяная

3 06 мл; вода до 1000 мл. . 3. Ацетоновый порошок тест-микроба.

Перед использованием все реактивы разводят в 10 раз.

Пример 1 ° Расположение лизоцима мочи больных гломерулонефритом после 2,5 ч электрофореза в 12Х-ном полиакриламидном геле при рН геля

4,3 и рН электродного буфера 4,0.

Зона лизиса тест-микробов, соответствующая положению лнзоцима в геле, указана стрелкой (фиг. 1).

Пример 2. Расположение лизоцима мочи больных пиелонефритом1 после 2,5 ч электрофореза в 127.-ном полиакриламиднам геле при рН геля

4,3 и рН электродного буфера 4,0.

Зона лнзиса тест-микробов, соответствующая положении лизоцима в геле, указана стрелкой (фиг. 2).

Использование предлагаемого способа позволяет повысить точность диагностики с 60-70 (известный способ) до 977..

Формула изобретения

Способ дифференциальной диагностики гломерулонефрита и пиелонефрита путем злектрафоретического исследования лизоцима мочи, о т л и ч а ю щ и йвЂ” с я тем, что, с целью повышения точности способа, электрофорез проводят в полиакриламидном геле при значениях рН геля и электродного буфера менее 7,0 и прн расположении полосы лизоцима в области катода диагностируют гломерулонефрит, а при расположении полосы лизоцима в области анодавЂ” пиелонефрит.

1429031

Составитель Г. Чуич

Техред М.Дидык

Редактор С. Пекарь

1 орректор В.. Бутяга

Заказ 5118/41

Тираж 847 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Производственно-полиграфическое предприятие, r. Ужгород, ул. Проектная, 4

Способ дифференциальной диагностики гломерулонефрита и пиелонефрита

Способ определения индивидуальной чувствительности к фотохимиотерапии при псориазе // 1411673

Изобретение относится к медицине , касается дерматологии, предназначено

Способ диагностики фаз острого перитонита // 1394144

Изобретение относится к медицине , точнее к неотложной хирургии, предназначено для диагностики и лечения острого перитонита

Способ определения активности соласодиндегидрогеназы // 1388811

Изобретение относится к биохимии , касается медицины, биотехнологии , энзимологии, токсикологии

Способ диагностики язвенной болезни двенадцатиперстной кишки // 1388810

Способ прогнозирования неблагоприятного течения острого вирусного гепатита и геморрагической лихорадки с почечным синдромом // 1379740

Реактив для турбидиметрического определения липазы // 1367867

Изобретение относится к клинической биохимии, а именно к реактиву для определения липазы особенно турбидиметрическим методом

Способ определения активности химотрипсина или трипсина в кале // 1367866

Изобретение относится к биохимии, точнее к медицинской энзимологии, предназначено для определения активности трипсина иди химотрипсина в кале при диагностике хронического nanjc- реатита

Способ прогнозирования приживления аутотрансплантата при слухоулучшающих операциях // 1354116

Изобретение относится к медицине , а именно к отохирургии при слухоулучшающих операциях

Способ диагностики злокачественного новообразования // 1347709

Изобретение относится к медицине и касается диагностики злокачественных новообразований разной локанизации

Способ оценки эффективности замещения костного матрикса при трансплантации в ходе оперативного лечения костной опухоли // 2101708

Изобретение относится к медицине, а именно к ортопедии

Способ прогнозирования осложненного течения острого панкреатита // 2102764

Изобретение относится к области медицины, а именно к прогнозированию течения острого панкреатита

Способ дифференциальной диагностики клинических форм бруцеллеза у людей // 2103687

Изобретение относится к медицине, а, именно, к диагностике бруцеллеза цитохимическими методами

Способ оценки состояния больного // 2103692

Изобретение относится к медицине, а именно к клинической биохимии и может быть использовано для диагностики и прогнозирования состояния больного в послеоперационном периоде и при развитии острого воспалительного процесса

Синтетические олигопептиды, специфически взаимодействующие с антителами к вирусу гепатита с, способы диагностики hcv- инфекции (варианты) // 2104284

Изобретение относится к медицине, молекулярной биологии и вирусологии и представляет собой биологически активные соединения - синтетические олигопептиды, соответствующие аминокислотным остаткам (а

Способ ранней диагностики послеродового эндометрита // 2104529

Изобретение относится к медицине, а именно к акушерству и гинекологии, и может быть использовано для ранней доклинической диагностики послеродового эндометрита, одного из гнойносептических постгестационных заболеваний

Способ прогнозирования развития цилиохориоидальной отслойки после внутриглазной операции // 2104548

Изобретение относится к медицине, а именно к офтальмологии, и может найти применение после внутриглазных операций для своевременного принятия профилактических мероприятий

Способ диагностики атрофического эндобронхита // 2104549

Способ определения эффективности иммуноцитотерапии у больных с опг-гестозами // 2105311

Изобретение относится к медицине, в частности к акушерству, и может найти применение в оценке эффективности терапии гестозов

Способ оценки завершенности формирования соединительнотканного рубца у больных, перенесших инфаркт миокарда // 2105983

Изобретение относится к медицине, а именно к кардиологии, и может быть использовано для установления завершенности патологического процесса при инфаркте миокарда (ИМ)