Способ получения четвертичных аминоалкилтиолов

 

Изобретение касается четвертичных аммониевых соединений, в частности получения четвертичных аминоалкилтиолов общей формулы HS-A-R,, где А - этилен, неили замещенньй С , алкилом, циклогексилен; R,- неили замещенньй низшим алкилом, оксиалкилом , тиоалкилом, алкоксилом пиридиний , имидазолиний, одновременно замещенный алкилом и тио(низпмм) алкилом морфолиний, или тиоморфолиний, которые замещены низшим алкнлом; противоион хлора CH,SCO)jO СН, -S(0)f J CF,,S(0),jO , - полупродуктов для синтеза производных карбапенема, обладающих антибактериальной активностью . Цель изобретения - создание новых полупродуктов для синтеза указанных полезных веществ. Процесс ведут обработкой необходимой кислотой (с значениями X®) соответствующего R,-содержащего соединения с последукяпим введением сульфида ф-л R -CH-CHj-S; S(rOj где Rj - низший алкип или водород, при 50-100°С, лучше в присутствии неполярного растворителя - бензола, ксилола, толуола или метиленхлорида Когда.жидкостями являются исходные вещества, процесс ведут без растворителя. Целевые вещества получают с высоким выходом (до 90-100%). 1 з,п. ф-лы. § W 4 4 to О vl to

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЩЕЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Н ПАТЕНТМ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР пО ДелАм изОБРеТений и ОткРытий (21) 3867695/23-04 (62) 3711600/23-04 (22) 19.03.85 (23) 07.03,84 (31) 471378 (32) 08. 03. 83 (33) US (46) 30. 11.88. Бюл. N 44 (71) Бристоль-Мейерэ Компани (US} (72) Пьер Декстрейз (СА) (53) 547.821.3.07 (088.8) (56) Азлиярова М.А., Абдувахабов А.А.

Синтез тиоэфиров морфолиновых и пипеколиновых производных. — Докл.

АН Узбекской .ССР, 1981, У 3, 34-6. (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ЧЕТВЕРГИЧНЦХ

АИИНОАЛКИЛТИОЛОВ (57) Изобретение касается четвертичных аммониевых соединений, в частности получения четвертичных аминоалкилтиолов общей формулы HS-А-К,. X®, где

А — этилен, не- или замещенный С,-С— алкилом, циклогексилен; R, — не- или замещенный низшим алкилом, оксиалкилом, тиоалкилом, алкокснлом пириди,„SU „„1442072 A 3 (51)4 С 07 D 213/02 233/60 ний, имидазолиний, одновременно замещенный алкилом и тио(низшим)алкилом морфолиний, или тиоморфолиний, кото- рые замещены низшим .алкилом; Х - про(3 тивоион хлора СН,S(0) О", СН -и-С Н 8(0), СУ 8(0) О, полупродуктов для синтеза производных карбапенема, обладающих антибактериальной активностью. Цель изобретения — создание новых полупродуктов для синтеза указанных полезных веществ. Процесс ве. дут обработкой необходимой кислотой (с значениями Х ) соответствующего

К,-содержащего соединения с последующим введением сульфида ф-л R,--СН-СН -S;

S Q, где R, — низший апкил или водород, при 50-100 С, лучше в присутствии неполярного растворителя— бензола, ксилола, толуола или метиленхлорида. Когда. жидкостями являются Я исходные вещества, процесс ведут без растворителя. Целевые вещества получают с высоковы выходом (до 90 = 100X). з.п. ф-лы.

1442072

Изобретение относится к способу получения новых четвертичных аминоалкилтиолов Аормулы

HS-А-R X

t (1) 5

Я вЂ” А — Rz

СОО 30 где А и К, имеют указанные значения, обладающих антибактериальной активностью.

Цель изобретения — разработка спо35 соба получения четвертичных аминоалкилтиолов — новых промежуточных соединений в синтезе производных карбапенема, проявляющих антибактериальное действие.

Пример 1. Получение 1-(2-меркаптоэтил)пиридиний метансульфоната.

В суспензию пиридиний метансульфоната в пиридине, полученную при помощи добавления по каплям метан(моно)- 45 сульфокислоты (1,95 мп, 0,03 моль) в пиридин (8,0 мп, 0,099 моль) при охлаждении, добавляют сульфид этилена (1,96 мп, 0,033 моль). Полученную смесь перемешивают при 55 С 16 ч и концентрируют при пониженном давлении до густого сиропа, который смешивают с несколькими миллилитрами воды.Раствор сливают на верхнюю часть колонны (40х16 см) из р-бондапэка С-18, которая элюируется водой.

Лиофилизацией соответствующих фракций получают g,5 r (91X) бесцветного сиропа. где А — циклогексилен или этилен, незамещенный или замещенный низшим С„-С -алкилом, R; -незамещенный,или замещенный 10 низшими алкилом, оксиалкипом, тиоалкилом или алкокси группой пиридиний, имндазолий ,или одновременно замещенный низшим алкилом и тио(низший)- 15 алкилом морфолиний или тиоморАолиний, N-замещенные низшим алкилом;

X — противоион, выбранный из группы содержащей С1О, СН, БО 20 з °

СНз-4 0)-$оз,cz,во, «, « ющихся промежуточными соединениями в синтезе производных карбапенема общей формулы

ИК (пленка) „„... см ": 23002600 (широкий, SH) 1635 (пиридиний);

1490, 1200 (сульфонат); 1068, 1060, 1045, 791, 780.

Н ЯМР (ДМСО - d ) д! ч. на млн:

2,32 (3Н, с., СН,SO -); 2,61, 2,70, 2,73, 2,82 (1Н, В часть А В системы, SH) 3,07 (2Н, м. Pc D О, 3,08 (2Н,т, J = 6,5 Гц)), СН S (4,76) 2Н, т., Т =

6,5 Гц, СН ) 8,19 (2Н, м., Hm пиридиния); 8,6 (tH, м., Но пиридиния);

9,08 (2Н, д.д., J = 6,8 Гц, J = 1 4 Гц, Но пиридиния) .

УА (Н,О) Л„„,, нм. 206 (E 5230);

258 (F 3760) .

М е т о д А. 1-(2-Меркаптоэтил)пнрицинийхлорид.

Водный раствор неочищенного 1-(2меркаптоэтил) пиридиний метансул ьфоната (9,4 r 0,04 моль) сливают на верхнюю часть колонны (2,5õ41 см) из Пермутита S-1 С1 . Колонна элюируется водой со скоростью 0,5 мл/мин. Соответствующие Аракции соединяются. . ЛиоАипизацией получают желтоватый сироп (7,0 г,1007), который используют на следующей стадии.

Н ЯМР (В О) d, ч. на мпн: 3,22 (2Н, м., СН 8); 4,88 (м., СН ); 8 18 (2Н, м. Hm пиридиния); 8 7 (1Н м.

Hp пиридиния); 9,0 (2Н, м., Но пиридиния °

M е т о д Б. В предварительно охлажденный (ледяная ванна) пиридин (5,6 мп, 70 ммоль) добавляют хлоргидрат пиридина (4,05 г, 35 ммоль) и сульфид этилена (2,1 мл, 35 ммоль) .

Смесь нагревают до 65 С и перемешивают 75 мин, в результате чего получают двухфазную систему. Более легкую ôàзу удаляют. Оставшееся масло промывают простым эфиром (5x10 мл) и обрабатывают глубоким вакуумом. Получают искомое соединение (90-1007), которое используют на следующей стадии, Пример 2. Получение 1-(2-меркаптоэтил)-3,5-диметилпиридиний метансульфоната.

В суспензию 3,5-лютидиний метансульфоната в 3,5-лютидине, полученную при помощи добавления метан(моно)сульфокислоты (0,65 мп, 0,010 моль) в холодный 3,5-лютидин (2,51 мп, 0,022 моль), добавляют сульфид этилена (0,655 мп, 0,011 моль). Полученную смесь перемешивают в атмосфере азота при 55 С 24 ч, охлаждают до 23 C и разбавляют водой (5 мл) и простым

14420 эфиром (5 мп) . Органический слой отделяют, а водный раствор промывают простым эфиром (бх4 мп). Следы простого эфира удаляют под вакуумом, а

5 раствор наносят на верхнюю часть колонны (2,5x6,0 см) из р -бондапэка

С-18. Колонна элюируется водой.

Лиофилизацией соответствующих фракций получают бесцветный сироп 1р (2,4 г, 917.) .

ИК (пленка) a „„„„„„,,,,см ; 2520 (SH);

1628 (пиридиний); 1600, 1495, 1325, 1305, 1283, 1200 (сульфонат); 1040, 938, 765, 680. Н SIMP (ДИСО-d+) У, ч.на мпн:

2,31 (ЗН, с., СНз ЯОэ ) s 2m 47 (6Н, с., СН на пиридинии); 2,57, 2,66, 2,69, 2,78 (1Н, В часть А В системы, SH);

3,06 (2Н, м. Cc D О добавкой (2Н, т., 20 .Т = 6,5 Гц)1, СН S); 4,65 (2Н, J = 6,5 Гц, СН М ); 8,34 (1Н, с., Hp

7 . пиридиния); 8,79 (2Н, с., Но пиридиния) . уф (H,O) a„„„с, нмй 271 (K 4860) °

Вычислено,X: С 44,09, Н б,бб, N 5, t4; S 23,54.

С, Н 1пИОз Зт. О, 5 Нр 0

Найдено, Х: C 44,26, Н 6,49, N 517, S 24,18. 30

Пример 3. Получение 3-оксиметил-1-(2-меркаптоэтил)пиридиний трифторметансульфоната.

Трифторметан(моно)сульфокислоту

L (1,327 мп, 0,015 моль) добавляют по каплям в 3-пиридинметанол . (2,91 мл, 0,030 .моль), а затем в смесь добавляют сульфид этилена (0,89 мп, 0,015 моль). Полученную в результате смесь нагревают (масляная ванна) до 4р

50-70 С в атмосфере азота в течение

20 ч. Реакционную смесь затем переносят в Н20 (15 мл) и экстрагируют при помощи СН Сl, (5х5 мл). Водную фазУ концентрируют под вакуумом, а затем наносят на колонну обращенно-фазовой хроматографии С, . Элюированием водой и выпариванием соответствующих фракций получают серо-желтое масло, которое подвергают хроматографии, в ре-. зультате чего получают почти бесцветное масло.

После сушки под вакуумом (Р20,) получают искомый продукт (4,50 r, 94X) в виде вязкого масла. 55

ИК (пленка) ) „„„,, см ; 3450 (с„, 0H); 2560 (очень широкий, SH). Н ЯМР (d -ацетон) d, ч. на мпн:

9,10-8,05 (м., 4Н, ароматический);

72

501 (т., J = 55 Гц, 2Н, NСН );

4,93 (с., 2Н, -СН,OH); 4,43 (широкий с., 1Н, -ОН); 3,43-3,18 (м., 2Н, 8-СН ); 2,34-2, 10 (м., 1Н, SH) .

Пример 4. Получение 4-оксиметил-1-(2-меркаптоэтил)пиридиний трифторметансульфоната.

В раствор 4-пиридинметанола (1,635 г, 0,015 моль) в 10 мл СН,С1, при 0 С в атмосфере азота по каплям добавляют трифторметан(моно} сульфо-. кислоту (1,327 мл, 0,015 моль). Желтовато-коричневое масло быстро отделяется. В эту смесь добавляют дополнительный эквивалент 4-пиридинметанола (1,635 r, 0,015 моль) и растворитель удаляют при пониженном давлении, в результате чего получают масло.

В это масло добавляют сульфид этилена (0,891 мл, 0,015 моль) и полученную в результате однородную смесь нагревают (масляная ванна) до примерно 60 С 3 ч. Затем реакционную смесь переносят в 15 мл воды и водный раствор промывают при помощи СН2С1, (5x5 мл) .

После удаления остаточного органического растворителя под вакуумом водный раствор сливают на колонну обращенно-фазовой хроматографии Сд .

В результате элюирования водой и последующего выпаривания соответствующих фракций получают масло, которое затем сушат под вакуумом над Р20 .

Получают искомый продукт (4,64 r

97X) в виде бесцветного масла.

ИК (пленка) „„„,, см . 3455 (с., ОН); 2565 (очень широкий, SH} .

"Н ЯМР (d,— àöåòîí) d ч.на мпн.:

9,07, 8,18 (ARq, J = 6,8 Гц, 4Н, ароматический); 5, 03 (с., 2Н, СН ОН);

4,96 (т., J = 6,5 Гц, 2Н, N-СЙ );

4,09 (широкий с., 1Н, -ОН); 3,5-3,1 (м., 2Н, S-СН ); 2,25 (широкий с., 1Н, -SH) .

Пример 5. Получение 1-(2меркаптоэтил) -2-метилпиридиний метансульфоната.

В суспензию 2-метилпиридиний Метансульфоната в 2-метилпиридине, полученную в результате добавления метан(моно)сульфокислоты (0,65 мп, 0,010 моль) в холодный 2-метилпиридин (2, 17 мл, 0,022 моль), добавляют сульфид этилена (0,655 мп, 0,011 моль).

Реакционную смесь перемешивают в атмосфере азота при 55 С 21 ч, охлаждают до 23 С и разбавляют водой

420? 2 6

5 14 (5 мл) . Водный раствор промывают простым эфиром (бх4 мл}, обрабатывают под вакуумом с целью удаления следов органических растворителей и сливают на верхнюю часть колонны (2,5х10,0 см из р -бондапэка С-18. Колонну элюируют водой и соответствующие фракции подвергают лиофилизации.

Получают 2,13 r (8SX) искомого соединения.

ИК (пленка) м „„„„, см, 2520 ($Н);

1623 (лиридиний); 1574, 1512, 1485, 1412, 1195 (сульфонат); 1038.

Н ЯМР (ДМСО-dg+ D О) d, ч,на млн:

2,37 (3Н, с., СН,SO,- ); 2,83 (зн, с., СН пиридиния), 3,09 (2Н, J = 6,9 Гц, СН, $); 4, 71 (2H, т., J = 6,9 Гц, СН N ); 7,93 (2Н, ме, Нш пиридиния)у

8,44 (1Н, м., Hp пиридиния); 8,89 (1Н, м., Но пиридиния).

УФ (Н О) Лм««с 266 (Е 3550) нм

Пример 6. Получение 1-(2меркаптоэтил) -4-метилпиридиний метансульфоната.

В суспензию 4-пиколиний метансульфоната в 4-пиколине, полученную при помощи добавления метан(моно) сульфокислоты (0,65 мл, 0,010 моль) в 4пиколин (2,14 мл, 0,022 моль), при охлаждении добавляют сульфид этилена (0,655 мл, 0,011 моль) . Реакционную смесь перемешивают в атмосфере азота при 55 С 24 ч, охлаждают до 23 С и разбавляют водой (5 мл) и простым эфиром (10 мл) . Органический слой отделяют, а водный слой промывают простым эфиром (5х5 мл) и наносят на верхнюю часть колонны (2,5х10 см) из А -бондапэка С-18 после предварительного удаления при пониженном давлейии следов простого эфира.

В результате элюирования смесью из 15Х ацетонитрила и 85Х воды колон ны получают после лиофилизации соответ ствующих фракций бесцветный сироп (2,66 г, 100X).

ИК (пленка) „,« -, см- ; 2500 ($Н);

1640 (пиридиний); 1572, 1520, 1478, 1200 (сульфонат); 1040, 833 и 768. Н ЯМР (ДМСО-d ) J ч. на млн:

231 (ЗН, с., СН$0 ); 262 (с., СН пиридиния ); 2, 2-2, 9 (4Н, SH, СНз ридиния); 3,04 (2Н, м., СН S}, 4,68 (2Н, т., J = 6,4 Гц, CH„N 8,01 (2Н, д., J — 6,6 Гц, Hm пиридиния), 8,89 (2Н д.,j = 6,6 Гц Но пиридиния)

УФ (Н,О) Л„„„,, нм: 256 (41 0);ó

221 (Е 7544) .

Пример 7. Получение 4-метилтиопиридина, 4-Меркаптопирндин (5,55 г, 50,0 ммоль, Элдрич) растворяют в кипящем абсолютном EtOH (50 мл). Нерастворимый материал удаляют филь.ррацией через целит.. Фильтрат нагревают с целью повторного растворения.

Когда он нагревается до 50 С, в него одной порцией добавляют метил иодид (3, 17 мл, 51,0 ммоль; Элдрич). Смесь охлаждают с целью кристаллизации.

В результате фильтрации твердого вещества получают 6,77 r (26,7 ммоль, 53,57} искомого соединения в виде иодгидрата.

Н ЯМР (9 0) J, ч. на млн: 2,70 (ЗН, с., -SCH ); 7 65 7 77 8 35 8 48 (4Н, тип: А В,, ароматический Н$).

ИК (нуйол) 4 м«... см . 1615, 1585 (ароматич ес кий); 780.

УФ (H 0) "м«,с > HM;227 (Е 2,02х

x10 ); 298 (K 1,64х10 ) .

Иодгидрат (6,33 г, 25,0 ммоль) растворяют в Н О (40 мл), а нерастворимый материал удаляют и промывают водой (10 мл). В фнльтрат добавляют при 0-5 С таблетку NaOH (5 г) и экстрагируют при помощи Et, О (Зх25 мл), насыщая водный слой хлористым натрием. Соединенные органические экстракты промывают соляным раствором (х2), сушат (Mg$0 ) и выпаривают.

Получают 2,92 г (23,4 ммоль, 50Z) искомого соединения в виде масла. H ЯМР (СВС1 ) с, ч.на млн: 2,48 (ЗН, с., -$СН ); 7,03-7,13-8,38-8,48 (4Н, тип А В, ароматический -HS).

ИК (пленка) „„, „, см ; 1580; 800.

Пример 8. Получение 1-(2меркаптоэтил)-3-метоксилиридиний метансульфоната.

В предварительно охлажденный (5 С) 3-метоксипиридин (698 мг, 6,4 ммоль) по каплям добавляют метан(моно)сульфокислоту (0,216 мл, 3,05 ммоль) и сульфид этилена (0,19 мл, 3,2 ммоль). Затем смесь нагревают до

60 С и выдерживают прн этой температуре в течение 18 ч, охлаждают до 20 С, разбавляют водой (10 мл) и промывают простым эфиром (Зх10 мл). Водную фазу обрабатывают под глубоким вакуумом в течение 15 мин, а затем сливают на обращенно-фазовую хроматографическую колонну С,, Соединение элюнруют водой. Соответствующие фракции соединяют и выпаривают под глубоким вакуумом.

2410 (широкий

7 14420

Получают искомый тиол (61,6 мг, 76, З ) .

ИК (СН Сl ) |„,»,, см ; 2550 (очень широкий, SH); 1620, 1600, 1585 (м., ароматический).

Н Я1Р (ДИСО-d<) д", ч. на млн:

8,90-7,90 (4Н, м., ароматический С-Н);

4,72 (2Н, т., J = 6,6 Гц, СН М );

4,01 (ÇH, с., ОСН ); 3,6-3,0 (м., скрытый СН S) 2,66 (1Н, д.д,, J =

= 9,5 Гц, J = 7,5 Гц, SH); 2,31 (ЗН, со у СН БО ) °

Пример 9. Получение 3-метилтио-1-(2-меркаптоэтил)пиридиний хлорида.

В раствор 3-метилтиопиридина (2,00 г, 0,016 моль) в 10 мл простого эфира добавляют 15 мл 1 н. раствора НС1 и смесь помещают на 2р вибратор. Водную фазу отделяют, промывают 10 мл простого эфира и затем выпаривают. Остаточный хлоргидрат затем сушат под вакуумом (Р О ), в результате чего получают белое твер- 25 дое вещество. В твердый хлоргидрат добавляют 3-метилтиопиридин (1,88 г, О, 015 моль) и сульфид этилена (0,89 мл, 0,015 моль) . Полученную смесь нагревают (масляная ванна) до 55-65 С в Эр атмосфере азота в течение 15 ч. В результате получают слегка мутную маслянистую жидкость, которую переносят в 125 мл воды и затем промывают при помощи СН2С12 ° Водный раствор концент 35 рируют до примерно 25 мл. В него добавляют несколько капель ацетонитрила для гомогенизации смеси. Полученный водный раствор наносят на обращеннофазовую хроматографическую колонну 4р

С„ . Элюированием водой и последующим выпариванием соответствующих фракций получают искомый продукт (2,66 г, 80 ) в виде серо-желтого вязкого масла.

ИК (пленка) |„„„, -SH) см . Н ЯМР (dg-ДИСО + П,О) l, ч.на мл н: 8, 88-7, 88 (м., 4Н, ар оматич еский); 4,70 (т., J = 6,5 Гц, 2Н, бр

lN CH ); 3,08 (асимметричный, т., Л = 6,5 Гц, 2Н, S-СН,); 2,64 (с., ЗН, S-Me) .

Пример 10. Получение 1-(2меркаптоэтил)-2,6-диметилпиридиний метансульфоната.

Смесь 2,6-диметилпиридина (19,2 мл, 0,165 моль) и метан(моно)сульфокисло72 8 ты (3,27 мл, 0,050 моль) перемешивают в течение 15 мин, подвергают взаимодействию с этиленсульфидом (4,17 мл, 0,070 моль) и перемешивают при 100 С в атмосфере азота. После охлаждения до 25 С реакционную смесь разбавляют простым эфиром (45 мл) и водой (30 мл).

Два слоя разделяют ° Органический слой экстрагируют водой (2х5 мл). Водные слои соединяют, фильтруют через про-. кладку целита, промывают простым эфиром (2х15 мл), обрабатывают под вакуумом с целью удаления следов органических растворителей и сливают на верхнюю часть колонны (3,0х12 см) и р -бондапэка С-18. В результате элюирования смесью 3% ацетонитрила и

97 воды получают после лиофилизации соответствующих фракций 2,5 г неочищенного искомого соединения в виде сиропа, который подвергают очистке при помощи жидкостной хроматографии высокого давления (p -бондапэк С-18), в результате чего получают 0,90 r (7 ) искомого соединения.

ИК (пленка) | „,„,, см ". 2520 (SH)

1640 и 1625 (пиридиний); 1585, 1490, 1200 (сульфонат) . Н ЯИР ОРСО-d<+ D О) о", ч.на млн:

2,36 (ЗН, с., СН, БО ); 4,62 (2H, м., СН, N "); 7, 74 (2Н, м., Hm пиридиния);

8,24 (1Н, м., Hp пирщтиния).

У (Н,O) макс 272 (E 4080) нм.

Пример 11. Получение 2-метилтио-3-метил-1-(2-меркаптоэтил)имидазолий трифторметансульфоната.

Трифторметан(моно)сульфокислоту (1,38 мл, 0,015 моль) добавляют по каплям в 2-метилтио-1-метилимидазол (4,0 r, 0,03 моль) при 0 С в атмосфере азота. Затем добавляют сульфид этилена (0,9 мл, 0,015 моль) и смесь нагревают до 55 С в атмосфере азота и выдерживают при этих условиях в течение 24 ч. Реакционную смесь растирают в порошок с простым эфиром (x3), а остаток переносят в ацетон, фильтруют и выпаривают. В результате получают продукт (4,2 г, 82K) в виде полукристаллического твердого вещества, который используют без последующей очистки.

ИК (пленка) |„ „, 2550 (очень широкий, SH) см Н ЯИР (d -ацетон) с|, ч.на млн:

7,97 (С,-2Н), 4,66 (т., J = 7 Гц, 2Н, метилен); 4,17 (с., ÇH, N-Me);

3,20 (gm, J = 7 Гц, J = 9 Гц, 2Н, 9 14420 метилен); 2,72 (с., ÇH, S-Me); 2,20 (т., J = 9 Гц, iH, -SH).

Пример 12. Получение 3-амино-1-(2-меркаптоэтил)пиридиний хлори5 да.

3-Аминопиридин (1,50 г, 0,016 моль) помещают в 15 мл 1н. метанолового раствора НС1. Полученный раствор выпаривают, в результате чего получают 1р хлоргидрат в виде масла. В это масло добавляют 3-аминопиридин (1,32 г, 0,015 моль) и сульфид этилена (0,89 мл, 0,015 моль). Полученную смесь нагревают (масляная ванна) до 60-65 С в 15 атмосфере азота; в течение 2 ч. Добавляют еще один эквивалент сульфида этилена (0,89 мл, 0,015 моль) и нагревание продолжают при 55-65 C в течение 65 ч. Реакционную смесь про- 20 мывают СН С1,, а затем переносят в воду (25 MI). Водный раствор наносят на обращенно-фазовую хроматографическую колонну Cto и элюируют водой.

Выпариванием соответствующих фрак- 25 ций получают искомый продукт (1,26 r, 44%) в виде бесцветного вязкого масла.

ИК (пленка) „„, 3180 (NH ) см ". H SIMP (с1 -ДМСО) J, ч.на млн:

8, 19-7, 59 (м., 4Н, ар оматический); 30

459 (т., J=6 2Ãö, 2Н, NCH);

3,5 (широкий с., 2H, -NH ); 3,20-2,77 (м., ÇH).

II р и м е р 13. Получение dl-1(2-меркапто-2-метилэтил)пиридиний

35 метансульфоната, dl-1-(2-меркапто-1- . метилэтил)пиридиний метансульфоната, Метан(моно)сульфокислоту (1,95 мп, 0,030 моль) медленно добавляют в холодный пиридин (7,83 мп, 0,097 моль) . 4p

Полученную в результате смесь перемешивают при 40 С в течение 15 мин, обрабатывают dl-пропиленсульфидом (2,59 мп, 0,033 моль) и перемешивают при 60 С в атмосфере азота в течение 45

90 ч. Пиридин удаляют под вакуумом; остаток смешивают с водой и подвергают очистке при помощи хроматографии (жидкостная хроматография высокого давления, бондапэк,С-18). Соот- gp ветствующие фракции соединяют и подвергают лиофилизации, в результате чего получают dl-1-(2-меркапто-2метилэтил)пиридиний метансульфонат (1, 14 r, 15 ) в виде бесцветного сиропа.

ИК (пленка) 4„„к,, см "; 2520 (SH);

1640 (пиридиний); 1180 (с., СН SO );

1040 (СН,SO, ).

72 10

Н ЯМР (ДМСО-д ) д, ч.на млн: 1,35 (д, 1 = 6,8 Гц, ЗН, СН,CHS) 2,30 (с., ЗН, СН SO, )»90 (д., J = 8,5 Гц, 1Н, SH) 3, 2-3, 7 (м., CHSH) 4, 52 (д.д., J,„, = 12 9 Гц, J = 8,4 Гц, СНСН И ) у 4,87 (д,д., 1 „„„= 12,9 Гц, J = 6,0 Гц, СНСН И ); 8,0-8,4 (м.;

2Н, Hm пиридиния); 8,5-8,8 (м., 1H, Hp пиридиния); 9,04 (д.д., J = 1,4 Гц, J = 6,7 Гц, 2Н, Но пиридиния). (НгО)Лм кс, нм 208 (5267);

259 (Е 3338) .

Вычислено, : С 37,38; Н 6,71;

N 4,91; $ 22,47.

Найдено, : С 37,49; Н 6,85;

N 4,86; S 22,09.

Получают также dl-1-(2-меркапто1-метилэтил)пиридиний метансульфонат (0 8? г, 11 ) в виде бесцветного сиропа.

ИК (пленка) 4„»„,, см : 2500 (SH); 1628 (пиридиний); 1180 (сульфонат); 1035 (сульфонат). Н ЯМР (ДМСО-d<) d, ч. на млн:

1,69 (д., J = 6,8 Гц, ÇH, CH CHN");

2,3 1 (c., ЗН, Сй, $О, -); 3,0-3,3 (м., 2Н, СН S); 4,2-5,2 (м., 1Н, CHN );

8,0-8,4 (м., 2Н, Hm пиридиния);

8,5-8,8 (м., 1Н, Hp пиридиния); 9,09,? (м., 2Н, Но пиридиния).

НгO) > мкс, нм 209 (с 4987)

258 (Е 3838) .

Вычислено, %: С 39 11; 6,56;

N 5,07.

С Н, ИОз$г 1,5 НгО

Найдено, .: С 39,13; И 5,92;

N 5,20.

Пример 14. Получение dl-1(2-мерк ап то-1-цикл ог е ксил ) 2-мер капто-1-циклогексил) пиридиний метансульфоната.

Метан(моно)сульфокислоту (0,65 мп, 0,01 моль) добавляют по каплям в пиридин (2,42 мл, 0,03 моль) при охлаждении. Смесь перемешивают в атмосфере азота 10 мин, обрабатывают

dl-циклогексенсульфидом (1,377 r, чистота 85%, 0,0102 моль) и перемешивают при 72 С в течение 25 ч. Избыток пиридина удаляют под вакуумом, а следы отгоняют с использованием воды. Остаток смешивают с водой и подвергают хроматографии через колонну из бондапэка С-18 (5х13 см) с использованием 0-2% ацетонитрила в воде в качестве элюируюшего растворителя. тем остаточный органический растворитель удаляют под вакуумом. Полученный в результате водный раствор нанасят на колонну обращенно-фазовой хро" матаграфии С,»", которую затем элюируют водой, смесью 5 ацетонитрила и ВО» ды и смесью 10 ацетонитрила и воды.

В результате выпаривания соответствещество, которое сушат под вакуумом (Р Оу) °

Получают искомый продукт (1,92 r, 41%) .

ИК (КВг)1„„„,2560 (-SH) см Н ЯМР .(d -ацетон) с » ч. на млн:

4,25-3,6 (м., 8H); 3,49 (с., ЗН, N-Me); 3,35-2,7 (м., 5H).

Пример 18. A. Пара-нитробенэил- (PNB) -3-(2- (1-пиридиний) этилтио 56 d — P - (R) -аксиэ тил )-7-оксо -1-азабицикло (3. 2. О) г епт-2-ен-карбоксилат хлорид.

Раствор PNB 6d — (1-(R)-оксиэтнл 5.3, 7-диоксо-1-азабицикло (3.2. О) гептан2-карбокснлата (6,09 г, 17,5 ммоль) в ацетонитриле (20 мп) охлаждают до

+5 С в атмосфере азота и обрабатыва20 ют последовательно диизопропипэтиламиследовательно раствором неочищенного

1- (2-меркаптоэтил) пиридиний хлорида (4,3 r, 24 ммоль) в N,N-диметилформамиде (1,0 мл) и по каплям диизопропилэтиламином (3,65 мл, 21,0 ммоль).

Реакционную смесь перемешивают при температуре О С в течение 1 ч, охлажделяют фильтрацией и промывают холод-" ным (-30 С) ацетонитрилом. Получают искомое соединение (5,77 r, 65X).

ИК (нуйол) М„„,, см ; 330 (ОН), 1775 (C=O p-лактама); 160 (С=О PNB сложного эфира), 1630 (пиридиний), 1605 (фенил-PNB сложного эфира), 1515 (NO )» 1335 (NO ) е H ЯМр ()IMCO-dg) d, ч.на мпн:

1,17 (ÇH, д., J = 6»1 Гц, СН СНОН);

3,2-3,75 (5Н,.Н 4, H-6, СН Я)» 3,754,5 (2Н, Н-5, СНз СНОН); 4,92 (2Н, Полученный в результате желто-коричневый раствор нагревают (масляная ванна) до 50-60 С в атмосфере азота и выдерживают при этих условиях в течение 18 ч.. Летучие материалы затем

I1 1442072 I2

После лиофилиэации получают бес- удаляются под вакуумом, а полученное цветный сироп (1,57 r, 53 ). остаточное масло переносят в 10 мл

ИК (пленка) 1„„„, » см -", 2500 (SH); воды. Водный Раствор промывают про1625 (пиридиний); 1 190 (ЯО - ) . стым диэтиловым эфиром (Зх5 мп) . За"Н SIMP (ДМСО-d ) Ф, ч.на мпн: 1,22,5 (м., 8Н, Н циклогексила); 2 32 (с., ЗН, СН $0 ); 2,82 (д., J

= 9,8 Гц, SH) 3,0-3,5 (м., 1Н, CHSH);

4,2-4,9 (м., 1Н, CHN+); 8,0-8,3 (м., 10

2Н, Hm пиридиния); 8,4-8,8 (м., 1Н, Hp пиридиния); 8,9-9,3 (м., 2Н, Но пиридиния) .

УФ (Н О) р„,„, » нм: 214 (Е 5365); s x фракций получают белое твердое

258 (E 3500). 15

Вычислено, : С 46,88; Н 6,88;

N 4;56.

Найдено, : С 46,61; Н 6,46;

N 4,65.

Пример 16. Получение N-метил-N-(2-меркаптоэтил)тиоморфолиний метансульАоната.

В предварительно охлажденный (ледяная ванна) N-ìåòèëòèoìîðôoëéí (5,00 r, 42, 7 ммоль) добавляют метан(моно)сульфокислоту (1,47 мп, 20,5 ммоль) и сульфид этилена (1,30 мл, 21,4 ммоль). Смесь нагревают до 65 С и поддерживают эту тем- 30 пературу в течение 24 ч. Смесь разбавляют водой (25 мл) ° Водный раствор промывают диэтиловым простым эфиром (Зх25 мл), обрабатывают под вакуума- нам (3,65 мл, 2 1,0 ммоль) и дифенилмом и сливают на колонну обращенно- 35 хлорфосфатом (4,34 мл, 21,0 ммоль). фазовой хроматографии из силикагеля. Полученную в результате смесь перео

Соединение элюируют водой. Соответ- мешивают в течение 30 мин при 5 С, :ствующие фракции собирают и выпарива- охлаждают до -5 С и обрабатывают поют, в результате чего получают тиол в виде масла (4,80 г,,86 ). 40

ИК (пленка) „,„„, : 2550 (очень широкий, SM) см ". Н ЯИР (ДИСО-d<), ч.на мпн:

3,25-2,95 (6Н, м., СН,М®); 3,32 (ÇH, с., CH Ф); 3,20-2,65 (7H, м., СН 3» 45

SH) 2,32 (ЗН, с., СН SO3). дают до -30 С и перемешивают еще в

Пример 17, Получение 1-метил- течение 15 мин. Твердое вещество от1-(2-меркаптоэтил) морфолиний триАтор метансульфоната.

В N-метилморАолин (3,29 мп, я0

0,030 моль) добавляют по каплям трифторметан(моно)сульфокислоту (1,327мп, 0,015 моль) при 10 С, а затем сульфид этилена (0,89 мп, 0,015 моль). (OH); 1755 (С р-лактама); 1630 (пиридиний), 1590 (кярбоксилат), 13 14420 широкий т., 3 = 6,5 Гц, СН,N ); 5,18 (1H, д., J = 4,9 Гц, OH) 5,37 (центр

ABq, J„1, = 14,2 Гц, CH в PNB); /,69 (2Н, д., J = 8,7 Гц, Но в PNB);

8,24 (д, 1 = 8,7 Гц, Hm в PNB);

8,0-8,4 {4Н, Hm в PNB, Hm пиридиния);

8,66 (1Н, м., Hp пиридиния); 9,17 (2Н, широкий, д., J = 5,5 Гц, Но пиридиния).

Фильтрат и промывочную жидкость соединяют и разбавляют простым эфи.ром (150 мп). Верхний слой деканти,руется, а смолу растворяют в воде ! (40 мл), содержащей достаточное коли- 15 чество ацетонитрила для того, чтобы получить раствор, который сливается на верхнюю часть колонны (Зх10 см) из р -бондапэка С-18. Затем колонну элюируют смесью из 10Х ацетонитрила 20 и 90 воды (150 мп) и смесью из 50Х ацетонитрила и 50 . воды (100 мл).

Соответствующие фракции соединяют и лиоАилизуют после удаления под вакуумом ацетонитрила. 25

Получают желтоватый порошок.

ЯМР-спектр порошка указывает на присутствие искомого с оединения, смешанного с некоторым количеством PNB

3- 2-(1-пиридиний)этилтио3-6 o(— f1- 30 (R)-оксиэтнл 3-7-оксо-1-asабицикло(3,2,0)гепт-2-ен-2-карбоксилат дифенилфосфата (2:i). Порошок растворяют в воде (в минимальном количестве) и пропускают через колонну (1,5х21 см) из пермутита $-1СГ с водой. Лиофилизацией соответствующих фракций получают 1,8 г (20 ). искомого соединения °

Б. PNB 3- f2- (1-пиридиний) этил- 40 тио1-6 4 — L1-(R)- îêñîýòèë )-7 -оксо-1азабицикло (3 ° 2. О) гепт-2-ен-2-карбоксилат дифенилАосАат.

Раствор PNB 6 — (1-(R)-оксиэтил)3, 7-диоксо-1-азабицикло (3,2. О) гептан- 4g

2-карбоксилата (0,174 r, 0,50 ммоль) в ацетонитриле (2 мп) охлаждают до

О С в атмосфере азота и обрабатывают последовательно диизопропилэтиламнном (О, 105 мл, 0,60 ммоль) и дифенил- В0 хлорфосфатом (0,124 мл, 0,60 ммоль).

Полученный в результате раствор перемешивают в течение 30 мин при 0 С и обрабатывают последовательно раствором 1-(2-меркаптоэтил)пиридиний метансульфоната (0,170 г, 0,72 ммоль) в ацетонитриле (0,6 мп) и диизопропилэтиламином (О, 105 мп, 0,60 ммоль) .

Реакционную смесь перемешивают при

72 14

О С в течение 15 мин, разбавляют холодной (О С) водой. (7 мп) и сливают на верхнюю часть колонны (1,5х6,4 см) из -бондапэка С-18. Колонна элюируется смесью ацетонитрила (25 - 50 ) в воде (75 -50 ). Соответствующие

Аракции соединяют и лиофилизуют после удаления под вакуумом ацетонитрила.

Получают желтоватый порошок 0,33 r (92 ) .

ИК (КВг) „„,, см . 3600-3000 (ОН); 1765 (С=О р-лактама); 1690 (С=О PNB сложного эфира); 1625 (пиридиний)р 1585 (фенил); 1510 (КО );

1330 (NO ); 885 (NOð).

H ЯМР (ДМСО-dq), ч.на млн:

1, 16 (3H, д., J = 6, 2 Гц, СН, СНОН); 4,87 (2H, широкий т., J = 6,6 Гц, СН,$);

5,37 (центр ABq Т л, ь= 14 3 Гц, CH в РМВ) is 6, 7-7,5 (фенил); 7,68 (д., 3 = 8 8 Гц, Ho a PNB); 8,23 (д., J

= 8 8 Гц, Нт в РИВ); 8,0-8 3 (м Hm пиРидиииЯ}; 8,4-8,8 (1Н, Hp пиридинин); 9,09 (2Н, д.д., Л = 6,7 Гц, Х = 1,3 Гц, Но пиридиния), В. 3-(2-(1-пиридиний) этилтио J-6 1—

t 1- (R) -оксиэтил 3-7-оксо-1-азабицикло(3.2.0)гепт-2-ен-2-карбоксилат.

Метод А. В раствор PNB 3-(2-(1пнридиний)этилтио)-64<1 †(R)-окси-этил3-7-оксо-1-азабицнкло(3.2.0)гепт2-ен-карбоксилат дифенилфосфата (О, 16 r, 0,22 ммоль) в "мокром" тетрагидроАуране (10 мп) добавляют простой эфир (10 мп) ° буфер с рН 7,4, калиевый фосфатный буфер моноосновного гидрата окиси натрия с рН 7,4 (16 мп, 0,05 M) и 10Х-ный палладий на древесном угле (О, 16 г). Полученную смесь гидрогенизуют при давлении

2,812 кг/см в течение 1 ч при 25 С.

Две Аазы разделяются. Органическую фазу экстрагируют водой (2х3 мп).

Водные растворы соединяют, промывают простым эфиром (2х10 мп) и сливают на верхнюю часть колонны (1,5х6,2 см) из -бондапэка С-18 после удаления под вакуумом следов органических растворителей. Элюированием колонны водой получают после лиофилизации соответствующих фракций желтоватый порошок (0,062 г, 84 ), ИК (KBr) 4 „, „, см : 3700-3000

144?0 H HMP (I) ()) d ч.на млн: 1,22 (3Н, д., Л = 6,4 Гц, СН СНОН), 2,92 (д., t = 9, 1 Гц, Н-4), 2,97 (д., Л

= 9,1 Гц, Н-4); 3,20 (д.д., Л =

2,5 Гц, 1 = 6,1 Гц, Н-6), 3,44 (т,, Л = 6,0 Гц, СН S) 3,93 (д.д., J =

= 9,1 Гц, J = 2,5 Гц, Н-5), 4,82 (т., T = 6,0 Гц, СН Н+); 8,04 (м., Hm пиридиния); 8,5 (м., Hp пириди 1р ния), 8,82 (д.д., Л = 3,2 Гц, Л =

1,1 Гц, Но пиридиния).

УФ (Н О) Л„„„,, нм: 259 (5800)

296 (E 7030).

13,5 ч (измеряют при кон- 16 центрации 10 4М в фосфатном буфере с рН 7,4 при 36,8 С).

Метод Б. В раствор хлорида PNB

3-).2-(1-пиридиний) этилтио )-6 a(— 1(R) -ок сиз тил )-7-оксо-1-аз абицикл о- 2р (3.2.0) гепт-2-ен-2-карбоксилата (5,77 r 11,4 ммоль) в калиевом фосфатном буфере моноосновного гидрата окиси натрия (170 мл, 0,2 М, рН 7, 22), добавляют тетрагидрофуран (30 мп), 25 простой эфир (30 мп) и 10Х-ный палладий на древесном угле (5,7 г). Полученную смесь гидрогенизуют при 22 С при добавлении ?,812 кг/см в течение 1 ч и фильтруют на прокладке це-. Э0 лита. Прокладку промывают водой (2х15 мл). Фильтрат и промывочную жидкость соединяют и разбавляют простым эфиром (100 мп). Водную фазу отделяют, промывают простым эфиром (3x100 мп) и сливают на верхнюю часть колонны (4,5х20 см) из р -бондапэка

С-18 после удаления под вакуумом всех органических растворителей. Элюированием колонны водой, а затем 40 смесью 1 -ного ацетонитрила в воде получают после лиофилизации соответствующих фракций 2,48 г (65 ) искомого соединения в виде желтоватого порошка. Аналитические данные идентич-45 ны приведенным для соединения, полученного методом А.

Пример 19. А. PNB 3-(2-Ц(3,5-диметилпиридиний)этилтио) -бo(— (1-(R)-оксиэтил )-7-оксо-1-азабицик- gp ло(3.2.0)гепт-2-ен-2-карбоксилат дифенилфосфат.

В холодный (О С) 1)аствор РИВ 6 Ы— 1-(R)-оксиэтил)-3,7-диоксо-1-азабицикло(3.2.0)rептан-2-карбоксилата (0,5?3 r, 1,50 ммоль) в ацетонйтриле (6,0 мл) в атмосфере азота добавляют диизопропилэтиламин (0,314 мл, 1,8 ммоль), а затем дифенилхлорфос72 )ь фат (О, 373 г, 1,8 ммоль) . Реакционную смесь перемешивают в течение

30 мин и обрабатывают раствором

1- (2-мер кап тоэтил) -3, 5-диметилпир идиний метансульфоната (0,493 r, 1,87 ммоль) в ацетонитриле (1,9 мп), а затем диизопропилэтиламином (0,314 мл, 1,8 ммоль). Реакционную смесь перемешивают при 0 С в течение ч, разбавляют холодной (О С) водой (26 мл) и сливают на верхнюю часть колонны (7,0х3,5 см) из р-бондапэка С-19. Элюированием колонны смесью (25-50Х) ацетонитрила и (7550 ) воды после лиофипизации соответствующих фракций получают 1,01 г (90Х)искомого соединения в виде желтоватого порошка.

ИК (KBr) v см : 3700-3100 (ОН); 1778 (С=О р -лактама); 1700 (С=О PNB сложного эфира); 1635 (пиридиний); 1595 (фенил); 1521 (NO );

1335 (NO ); 895 (NO ) . Н ЯМР (ДМСО-d<) d, ч.на млн:

1,16 (ЗН, д., J = 6,1 Гц, СНСНОН);

2,43 (с., СН на пиридиний); 4,75 (2Н, м., СН М ); 5,38 (центр ABq, J ь = 14,3 Гц, СН в PNB); 6,6-7,5 (10Й, м., фенил); 7, 70 (2Н, д., Л

= 8,7 Гц, Но в PNB); 8,0-8,5 (3Н, м., Hp пиридиния, Hm в PNB); 8,82 (2Н, с., Но пиридиния), (H 0) Л макс HM: 270 (E 11570)

306 (Е 7343).

Вычислено, Х: С 58,03; Н 5,26;

N 5,48; S 4,18.

Найдено, Х: С 57,98; Н 5,05;

N 5,?2; S 4,34.

В. 3-) 2- (1- (3, 5-диметилпиридиний) Jэтилтио )-б o(— Г1- (R) -оксиэтил)-7-оксо1-азабицикло (3. 2. О) гепт-2-ен-2-карбоксилат.

В раствор PNB 3-(2- (1-(3,5-диметилпиридиний)) этилтио I-6 Ы- l1-(R) -оксиэтил J-7-оксо-1-азабицикло (3. 2. О) гепт2-ен-2-карбоксилат дифенилфосфата (0,600 г, 0,80 ммоль) в мокром" тетрагидрофуране (36 мл) добавляют простой эфир (36 мл), калиевый фосфатный ,буфер моноосновного гидрата окиси натрия (0,05 М, рН 7,4, 44 мл) и

10Х-ный палладий на древесном угле (0,60 г?. Полученную смесь гидрогенизуют при давлении 2,812 кг/см

28 С в течение 1,25 ч. Органический слой отделяют и экстрагируют буфером (2x5 мл). Водные слои соединяют, 42072 l8

»

25

35

45

17 14 фильтруют через прокладку целита, промывают простым эфиром (40 мл), обрабатывают под вакуумом для удаления следов органических растворителей и сливают на верхнюю часть колонны (2,5x10»0 см) из р -бондапэка С-18.

Элюированием колонны водой и лиофилизацией соответствующих фракций получают искомое соединение 0,186 г (643) в виде желтоватого порошка.

ИК (KBr) 1„,„, » см- : 3700-3100 (OH) 1760 (С=О р-лактама); 1595 (карбоксилат). Н ЯМР (D О) d » ч.на мпн: 1,21 (ЗН, д., J = 6,3 Гц, СН СНОН); 2,45 (6Н, с,, СН пиридиния); 2,81 (д., J = 9,2 Гц, Н-4); 2,96 (д., J = 9,2 Гц

Н-4)» ;3,22 (д д., J = 2 6 Гц, J =

= 6,2 Гц, H-б); 3,40 (т., J = 6,2 Гц, СН S) 3,,84 (д.д., J 9,2 Гц, 3 =

2, 6 Гц, Н-5); 4, 15 (м., СН СНОН);

4,71 (т., J =6,2Гц, СНЫ ); 8,21 (1Н, с., Hp пиридиния); 8,46 (2Н, с., Но пиридиния) .

УФ (Н 0) Л„„,„ » нм: 279 (E 8345)»

296 (Е 7714) .

Ыв+ 40,7 (С 0,53, НрО)» — 16,9 ч, измерено при концентрации

10 4 М в фосфатном буфере с рН 7,4 при 36,8 С) °

Пример 20, А. PNB (5R, 68)3- j2-(3-оксиметилпиридинио)этилтио3— б- Г1 †(R)-оксиэтил 3- 7-оксо-1-азабицнкуто(3,2.0j гепт-2-ен-2-карбоксилат.

В раствор PNB (5R, 6Б)-6-C1-(R)оксиэтил1-3, 7-диоксо-1-азабицикло(3.2."О) гептан-2-карбоксилата (О, 174 r»

0,50 ммоль) в 2 мп сухого ацетонитрила добавляют диизопропилэтиламин (0,096 мп, 0,55 ммоль) при 0 С в атмосфере азота. Затем по каплям добавляют дифенилхлорфосфат (О, 114 мп, 0,55 ммоль). Реакционную смесь перемешивают при 0 С в течение 30 мин, Затем добавляют раствор 3-оксиметил1-(2-меркаптоэтил)пиридиний трифторметансульфоната (0,223 r» 0,70 ммоль) в 0,50 мп ацетонитрила и диизопропилэтиламин (0,122 мп, 0,70 ммоль) °

После выдерживания при 0 С в течение

30 мин реакционную смесь концентрируют под вакуумом, а полученную в результате желтую смолу переносят в воду (для ускорения растворения смолы добавляют .достаточное количество ацетонитрила) . Этот раствор наносят на колонну обращенно-фазовой хроматографии С-18, элюируют смесью 157 ацетонитрила в Н O. В результате лиофилизации соответствующих фракций получают продукт (0,305 r» 81X) в виде твердого вещества бежевого цвета.

HK (КВт) „„,„, » см : 3420 (широкий, ОН), 1775 (СО р -лактама); 1695 (-СО РМВ), H ЯМР (d -ацетон) d, ч.на млн:

9,44-7, 72 (м., 8Н, ароматический);

7, 22-6, 91 (м., 10Н, дифенилфосфат);

5, 53, 5,27 (ABq, J = 14 Гц, 2Н, бензиловый)1 5,04 (т., J 7,4 Гц, 2Н, N-СН ); 4,75 (с., 2Н, СН ОН), 4,5-3,1 (M » 8Н)» 1»21 (д, J = 3H, СНМе) .

Б. (5R, 6S) -3-Г2-(3-Оксиметилпиридинио) этилтио )-6- (1- (R) -оксиэтил )-7оксо-1-аэабицикло (3. 2. О) гепт-2-ен-2карбоксилат.

В раствор PNB (5R, 6S)-3-Г2-(3оксиметилпиридинио)этилтио7-6- Г1 †(R)— оксиэтил )-7-оксо-1-азабицнкло(3.2.0)гепт-2-ен-2-карбоксилат дифенилфосфата (0,145 г, 0,194 ммоль) в 10 мп

ТГФ, содержащего 5 капель воды, добавляют 6,0 мл фосфатного буфера (0,05 М, рН 7,4), 0,145 г 107-ного палладия на древесном угле и 10 мп простого эфира. Смесь гидрогенизуют (вибратор Парра) при давлении

2,812 кг/см в течение 1 часа, а затем фильтруют через прокладку целита.

Фнльтровальную лепешку промывают небольшим количеством воды и простого эфира, а затем водную фазу отделяют и экстрагируют простым эфиром (х3).

Водный раствор затем охлаждают до

0 С, а его рН обеспечивают на уровне 7,0 при помощи буфера с рН 7,4, После удаления остаточных летучих (материалов под вакуумом водный раствор наносят на колонну обращенно-фазовой хроматографии С-18, которую эатем элюируют водой. В результате лиофилизации соответствующих фракций получают продукт (36 мг, 517) в виде светло-желтого твердого вещества.

В результате очистки с использованием обращенно-фазовой жидкостной хро- матографии под высоким давлением получают чистый продукт (31 мг, 41X) в виде твердого вещества.

ИК (KBr) 4 см : 3300 (широкий, ОН); 1755 (p -лактам CO); 1590 (-СО -) . Й ЯМР (D О) д, ч. на мпн: 8,787,94 (м., 4H, ароматический); 4,83

1442072

20 (т, = 6,0 Гц, 2Н, N-СН ); 4,83 (с., 2Н, СН OH); 4, 16 (д., кв., J =

= .1 = 6,2 Гц, 1Н, Н-1 ); 3,98 (д.т., Л = 9,1 Гц, J = 2,6 Гц, 1Н, Н-5);

3,75-3,20 (м., ЗН), 3,20-2,65 м, 2Н);

1,22 (д., J = 6,4 Гц, ЗН, СНИе).

УУ (Н n) Ъ,„,, нм: 294 (Е 7614);

266 (f 6936). й, (рН 7,4, 36,8 С) = 14,0 ч.

II р и м е р 21. А. PNB (5R, 6S)3- (2- (4-оксиметилпиридинио) этилтио 16- (1- (R) -оксиэ тил )-7-оксо-1-азабицикло (3. 2. О) г епт-2-ен-карбоксилат дифенилфосфат.

В раствор PNB (5R, 6S)-6-(1-(R)оксиэтил )-3,7-диоксо-1-азабицикло(3.2.0)гептан-2-карбоксилата (0,348 г, 1,0 ммоль) в 5 мп сухого ацетонитрила при 0 С в атмосфере азота добавляют по каплям диизопропилэтиламин (0,191 мп, 1,1 ммоль), а затем дифенилхлорфосфат (0,228 мп, 1,1 ммоль).

Полученный раствор желтовато-золотистого цвета перемешивают при О С в течение 40 мин. В этот раствор добавляют раствор 4-оксиметил-1-(2-меркаптоэтил)пиридиний трифторметансульфоната (0,447 r 1,4 ммоль) в 1 мп ацетонитрила, а затем диизопропилэтиламин (0,191 мл, 1,1 ммоль). Красновато-черную смолу отделяют из реакционной смеси. После вьщерживания в течение 20 мин при О С реакционную смесь фильтруют и концентрируют под вакуумом. Остаток переносят в минимальный объем смеси ацетонитрил - .вода (1:1) и заем наносят на колонну обращенно-фазовой хроматографии Сш .

В результате элюирования смесью

25%-ного ацетонитрила в воде и последующей лиофилизации соответствующих фракций получают продукт (0,353 r

47%) в випе твердого вещества кремового цвета.

ИК (КВг) q„àêñ, см : 3240 (широкий, ОН); 1775 (СО р -лактама); 1695 (-СО PNB) . Й ЯМР (d -ацетон) д, ч.на млн:

-9,24-7,84 (м., 8Н, ароматический);

7,4-6,9 (м., 10H, дифенилфосфат) 1

5,52, 5,24 (АВс1, J = 14 Гц, 2Н, бензиловый}; 5, 15-4,80 (м., 4Н); 4, 453,05 (м., 7Н); 1,35 (д., 3 = 6,6 Гц, ЗН, СНМе).

Б ° (5R, 6S)-3- t2-(4-оксиметилпиридинио)-этил 7-6- (1-(R)-оксиэтил)-7оксо-1-азабицикло(3.2.0)гепт-2-ен-2карбоксилат.

Смесь PNB (5R, 65)-3-(2-(-4-оксиметилпиридинио)этилтио7-6- Г1-(R)— оксиэтил7-7-оксо-1-азабицикло(3.2.0) гепт-2-ен-2-карбоксилат дифенилфосфата (0,348 r, 0,465 ммоль) и 10%-ного палладия на древесном угле (0,35 г) в 11 мп фосфатного буфера (0,05 М, рН 7,4), 5 мл ТГФ и 10 мп простого

10 эфира гидрогенизуют при давлении

2,812 кг/см в течение 1,25 ч. Затем смесь фильтруют через прокладку целита, а водную фазу промывают простым эфиром (х3). Затем рН водного раст15 вора обеспечивают на уровне 7,0 при помощи дополнительного количества буфера с рН 7,4. После удаления остаточных летучих материалов под вакуумом водный раствор наносят на ко20 лонну обращенно-фазовой хроматографии С, ° В результате элюирования смесью 2% ацетонитрила в воде и последующей лиофилизации получают желто-коричневое твердое вещество. Этот

25 материал подвергают хроматографии (С, -обращенная фаза (Н,О)), в результате чего получают искомый продукт (0,060 r, 36%) в виде светложелтого твердого вещества.

30 ИК (KBr} „,„.-, см : 3400 (широкий, ОН); 1755 (СО р -лактама); 1590 (-СО -) . Й ЯМР (D О) У, ч.на мпн: 8,73, 7,96 (ABq, J = 6,8 Гц, 4Н, ароматиЗ5 ческий); 4,93 (с., 2Н, СН ОН); 4,77 (т., J = 6,0 Гц, ?Н, N-СН ), 4,15 (д., кв., 1 = J = 6,3 Гц, 1Н, Н-1 );

396 (дт., 1 = 92 Гц, Л = 26 Гц, 1Н, Н-5); 3,65-3,20 (м., 3H); 3,1340 2,62 (м., 2Н), 1,21 (д., Л=6,3 Гц, ЗН, СНИе) .

УФ (Н О) A „„,, нм: 295 (Е 6880);

256 (Е 5595); 224 (Е 8111) ., z (рН 7,4, 36;8 С) = 14,5 ч.

45 Пример 22. А, PNB 3-(2-Г1(2-метилпиридиний) 7 этилтио %-6 М вЂ” (1(R) -оксиэ тил 1-7-оксо-1-аз аб ицикло(3.2.0) гепт-2-ен-2-карбоксилат дифенилфосфат.

50 В холодный (О C} раствор PNB

6 a — Г1-(R)-оксиэтил7-3,7-диоксо-1азабицикло(3.2.0)гептан-2-карбокси-, лата (0,523 г, 1,50 ммоль) в ацетонитриле (6 мп) в атмосфере азота

55 добавляют диизопропилэтиламин (0,314 мп, 1,80 юдоль), а затем дифенилхлорфосфат (0,373 мп, 1,80 ммоль) .

Реакционную смесь перемешивают в течение 30 мин при О С и обрабатывают

Пример 23. А. 1-(2-Меркаптоэтил) -4-метилпиридиний пара-толуолсульфонат.

В суспензию пара-толуол(моно)сульфокислоты (1,72 r, 0,01 моль) в бензоле (6,5 мл) добавляют 4-пиколин (1, 17 мл, 0,012 моль). Полученную в результате смесь перемешивают в атмосфере азота при 23 С в течение

30 мин, обрабатывают. сульфидом этилена (0,65 мп, 0,011 моль) и перемешивают при 75 С в течение 24 ч. Еще добавляют сульфид этилена (0,65 мл, 0,011 моль) и перемешивание продолжают еще в течение 24 ч при 75 С.

Реакпионную смесь охлаждают до 23 С и разбавляют водой (5 мл) и простым эфиром (8 мп). Водный слой отделяют и промывают простым эфиром (Зх8 мл).

Следы органических растворителей удаляют под вакуумом,а соединение подвергают хроматографии на р -бондапэке С-18 с использованием воды в качестве элюирующего растворителя, в результате получают 2,94 r (90%) искомого соединения в виде бесцветного сиропа.

ИК (пленка) „„... см: 2510 (SH); 1640 (пиридиний); 1595, 1582, 1475, 1200 (сульфонат); 1031, 1010, 818., 21 14420 раствором 1-(2-меркаптоэ тил) -2-метилпиридиний метансульфоната (О, 530 г, 2,16 ммоль) в ацетонитриле (18 мп), а затем диизопропилэтиламином (0,314 мп, 1,8 ммоль) . Реакционную

5 смесь перемешивают при 0 С в течение ч, разбавляют холодной (О С) водой (26 мп) и сливают на верхнюю часть колонны (3,5х7,0 см) из р -бондапэка 10

С-18. В результате элюирования колонны смесью 25% ацетонитрила — 75% воды и смесью 50% ацетонитрила — 50% воды получают после лиофилизации соответствующих фракций 1,06 г (96%) искомого соединения в виде желтоватого порошка.

ИК (KBr) „,„,, см : 3650-3100 (ОН); 1770 (С=О р -лактама); 1695 и

1690 (С=О PNB сложного эФира)3 1630 щ (пиридиний); 1595 (фенил); 1518 (NO,);

1335 (NO ), 890 (NO ). Н ЯМР (ДМСО, d<) Р, ч.на мпн:

1,15 (ÇH, д., д = 6,1 Гц, СН СНОН);

2,87 (с., СН, пиридиния); 3,6-4,4 26 (2Н, м., Н-5, СН СНОН); 4, 75 (2Н, м., СН И ); 5 37 (центр ABq, J =

14 Гц, СНг РИВ)» 6,5-7,4 (10H, ме» фенил); 7,70 (2Н, д., J = 8,8 Гц, Но в PNB) 8,0 (2Н, м., Hm пиридиния) 30

8,24 (2Н, д., J = 8,8 Гц, Нтп в PNB), 8, 50 (iH, м., Hp пиридиния); 8,95 (1Н» IIIHpoKHH д» J = 6» 1 Гц Но пи ридиния) . (HãО) Л„,„, » »нм: 265 (s 11990) 35

314 (Е 8020).

В. 3- 2-(1-(2-метилпиридиний)1этилтио -6 4 — (1-(R)-оксиэтил 1-7-оксо-1азабицикло(3 2.0)гепт-2-ен-карбоксилат. 40

В раствор РИВ 3-(2-(1-(2-метилпиридиний)3этилтио)-6 ot — (1-{К)-оксиэтил -7-оксо-1-азабицикло(3.2.0)гепт-2-ен-2-карбоксилат дифенилфосфата (0,66 г 0,90 ммоль) в мокром 45 тетрагидрофуране (34 мл) добавляют простой эфир (34 мл), калиевый фосфатный буфер моноосновного гидрата окиси натрия (0,15 М, f6»5 мп, рН 7,22) и 10%-ный палладий на древесном угле (0,66 r). Полученную смесь гидрогенизуют при давления

2,812 кг/смг при 23 С в течение

1,25 ч. Органический слой отделяют и зкстрагируют буфером (2хб мл), Водные слои соединяют, фильтруют через прокладку целита, промывают простым эфиром (40 мп), обрабатывают под вакуумом с целью удаления следов

72 22 органических растворителей и сливают на верхнюю часть колонны (2,5х10 см) р -бондапэка С-18. В результате элюирования колонны водой и лиофилизации соответствующих фракций получают искомое соединение (0,098 r» 3 1%) в виде желтоватого порошка.

ИК (КВс) ма с, см : 3650-3 100 (OH) 1755 (С=О Р -лактама); 1630 (пиридиний); 1595 (карбоксилат).

Н ЯМР (Р,О), ч.на млн: 1,20 (ЗН, д., J = 6,3 Гц, СН CHOH); 2,83 (с ° ° СН пиридиния)» 2,7-3,1 (5H»

Н-4, СН пиридия); 3, 1-3,7 (ЗН, м., СН S Н-б), 3,90 (д.д., J = 9, 1 Гц, J = 2,6 Гц, Н-5); 3, 1 (м., СН, CHOH);

4,78 (т...Т = 6,2 Гц, СН N+); 7,8 (2Н, м., Hm ; 8,3 (1Н, м., Hp пиридиния); 8,65 (1Н, м., Но пиридиния).

Уф (Нг0) 3м кс» нм: 268 (Е 9350);

296 (Е 8840) .

ГМ + 41 (С 0,5, Нго) (г = — 15,0 ч (измерено при концентрации

10 М в Фосфатном буфере с рН 7,4 при 36,8 С) . — 8,8 Гц, Hm PNB); 8,92 (2Ц, д., 1

= 6,5 Гц, Но пиридиння).

УФ (H О) Л,„„,с, нм: 262 (Е 10835);

3 i 1 (Е 9670) .

Вычислено, X: С 56,84; Н 5,17;

N 5,52; S 4,21.

Найдено, X: С 56,89; Н 5, 13;

10 N 519; S 441.

В. 3- (2- (1-> (4-метилпиридиний) 3 э тилтио )-6 г(— 1 — (К) -оксиэтил )-7-оксо-1азабицикло (3. 2. О) гепт-2-ен-2-карбоксилат.

15 В раствор PNB 3-(?-(1-(4-метнлпиридиний) этилтио -6 a — (1-(R)-оксиртил1-7-оксо-1-азабицикло(3.2.0)гепт2-ен-2-карбоксилат дифенилфосфата (0,587 г, 0,80 ммоль) в "мокром" тет20 рагидрофуране (30 мп) добавляют простой эфир (30 мп), калиевый фосфатный буфер моноосновного гидрата окиси натрия (0,15 М, 14, 7 мл, рН 7,22) и

iOX-ный палладий на древесном угле (0,59 r) . Полученную в результате смесь гидрогенизуют при давлении

2,812 кг/см при 23 С в течение 1,25ч.

Органический слой отделяют и экстрагируют буфером (2хб мп). Водные экстЗ0 ракты соединяют, фильтруют через прокладку целита, промывают простым эфиром (Зх20 мп), обрабатывают под вакуумом с целью удаления следов органических растворителей и сливают на

З5 верхнюю часть колонны (2,5х10 см) из

Р -бондапэка С-18. В результате элюирования водой и лиофилизации соответствующих фракций получают О, 136 r (497) искомого соединения в виде жел40 товатого порошка.

ИК (КВг) .)„„„„ см : 3700-3000 (ОН); 1770 (С=О р-лактама); 1642 (пиридиний); 1592 (карбоксилат). Н ЯМР (D О) d, ч.на мпн: 1,19

45 (ЗН, т °, .1 = 6,3 Гц,СН CHOH); 2,59 (ЗН, с., СН пиридиния3; 2,84 (д., J = 9 1 Гц, Н-4); 2,90 (д., 1 =

= 9,t Гц, Н-4); 3,0-3,6 (ЗЦ, м., СН S, Н-6); 3,86 (д.д., Л = 9, 1 Гц,.

50 J = 2,6 Гц, Н-5); 4,12 (м, СН СНОН);

4,5-4,9 (СН,N перекрытый HOD); 7,80 (2Н, д., Л = 6,6 Гц, Hm пиридиния);

8,58 (2Н, д, J. = 6,6 Гц, Но пиридиния) . уф (Н,О),Л,„„, нм: 256 (Е 5510);

262 (Е 5360);ð 296 (E 7,50) .

p + 20,8 (С 0,48, Н 0), t1,„12,8 ч (измерено при концентрапии

23 1442072 ?4 H ЯМР (ДМСО, 4 ) /, ч.на мпн:

2,29 (3H, с., СН пиридиния); 2,61 (с., СН Р); 2,4-2,8 (4H, Н, СН, P);

3,03 (2Й, м. (добавление D О дает т., 3 = 6,4 Гц, в 3,04 (СН Я); 4,68 (2Н, т., J = 6,4 Гц, СН N ); 7 11, 7,49 (4Н, 2д,, J = 7,9 Гц, фенил);

8,00 (2Н, д., Л = 6,5 Гц, Нш пиридиния); 8,89 (2Н, д., J = 6,5 Гц, Но ц иридиния).

Уф (Н О)л„„,„, нм: 256 (E" 4315);

222 (E- 17045).

Б. PNB 3-(2- ft-(4-метилпиридиний)1этиптио j-6 4 — (1-(R) -оксиэтил )-7-оксо1-азабицикло (3. 2.0) гепт-2-ен-2-карбоксилат дифеннлфосфат.

В холодный (О С) раствор PNB б о(— Ct - (R) -окс иэ тил 3-3, 7-ди оксо-1азабицикло (3 . 2 ° О) гептан-2-карбоксилата (О, 522 г, 1, 5 ммоль) в ацетонитриле (6 мп) в атмосфере азота добавляют диизопропилэтиламин (0,314 мп, 1,8 ммоль) а затем дифенилхлорфосфат

У (0,373 мп, 1,9 ммоль) . Реакционную смесь перемешивают в течение 45 мин и обрабатывают по каплям раствором

1- (2-мер кант о э тип) -4-метилпир иди ний метансульфоната (0,539, 2,16 ммоль) в ацетонитриле (1,8 мя), а затем диизопропилэтиламином (0,314 мп, t,8 ммоль). Реакционную смесь перемешивают при 0 С в течение 1 ч, разбавляют холодной (О С) водой (24 мп) и сливают на верхнюю часть колонны (2,5x&,5 см) из р-бондапэка С-18 °

В результате элюирования колонны сначала смесью 257 ацетонитрила-757 . воды (100 мп), затем смесью 507. ацетонитрила-507 вода (100 мп) и лиофилизации соответствующих фракций получают 0,91 г (83X) искомого соединения в виде желтоватого порошка.

ИК (KBr) „,„,, см : 3700-2800 (ОН); 1770 (С-О р -лактама); 1700 (С=О PNB сложного эфира); 1640 (пиридиний); 1595 (фенил);, 1520 (NO );

890 (NO ); 1340 (NÎ ).

Н ЯМР (ДИСО, d <) t ч.на млн:

1,16 (ÇH, д., J =, 6,2 Гц, СН CHOH);

2 61 (с., СН пиридиния); 3 1-3,7 (ЗН, м., Н-б, СН, 8); 3, 7-4,4 (2Н, м., Н-5, СН СНОН); 4,79 (2Н, широкий т., J =6,3 Гц, СН И); 5,17 (д., J=

4,9 Гц, OH); 5,37 (центр ABq, J = бб — 14,1 Гц, СН, в PNB);ð 6,7-7,4 (10Н, м., фенил); 7, 69 (2Н, д., J = 8,8 Гц, Но в PNB}; 8,00 (2Н, д., J = 6,5 Гц, Нт пиридиния); 8,23 (?H, д., T =

25 14

10 < M в фосфатном буфере с рН 7,4 при 36,8 С).

Пример 24. А. 4-Метилтио-N(2-меркаптоэтил)пиридиний метансульфонат.

4-Метнлтиопиридин (2,75 г, 22,0 ммоль) медленно. добавляют в метансульфокислоту (0,65 мп, 10,5 ммоль) при охлаждении в ледяной ванне (реагенты дистиллируют перед испапьзованием). В это твердое вещество добавляют сульфиц этилена (дистиллированный перед использованием) (0,66 мл, 11,0 ммоль, Элдрич) и смесь нагревают до 50-60 С, которую поддерживают в течение 21 ч. В течение реакции твердое вещество переходит в раствор. После охлаждения реакционную смесь растворяют в воде (5 мл) и промывают Е О (5х4 мп) . Мутный водный слой фильтруют через целит, а фил ьтр а т п од в ер г ают очис тке при п омощи обращенно-фазовой хроматографической колонны на силикагеле (С мик18 робондапэк, 10 r) которая элюируется водой, Собирают фракции обьемом 10 мп, Фракции 2 и 3 соединяют и вновь подвергают очистке при помощи обращенно-фазовой колонны для хроматографии. Фракция 2 дает 1,258 r (4,48 ммоль9 выхрд

4296 ) искомого соединения в виде вяз кого масла.

Н ЯМР (ДМСО-d6 CFT-20) d, ч.на мпн: (3H, с., МеЯО ); 2, 72 (ЗН, с ° 9

-SMe); 2968 (1Н, м., SH); 2,9-3,2 (Зн, м., -сн s-); 4,59 (2н, т99 J — 6,4 Гц, -СЙ И®); 7,97 (2Н, g, J = — 7, 2 Гц, ароматический -HS) 8, 72 (2Н, g., J = 7,2 Гц, ароматический

-HS) .

ИК (чистый) „„,, см- : 16309

1200 (широкий, -SOP ); 785 и 770.

В. Хлорид (5R) PNB 3-(2-(4-метилтиопиридино)этилтио3-(6S)- f(1R)оксиэтил)-7-оксо-1-азабицикло(3.2.0)гепт2-ен-2-карбоксилата.

В раствор (5R) PNB 3,7-диоксо-(6S) ((1К)-оксиэтил)-1-азабицикло(3.2.0)— гептан-(2R)-карбоксилата (475 мг, 1,36 ммоль) и диизопропилэтиламина (0,24 мл, 1,4 ммоль) в СН CN (5 мп) добавляют при 0-5 С в атмосфере азота дифенилхлорфосфат (0,29 мп,, 1,41 ммоль). Смесь перемешивают при

0-5 С в течение 30 мин. В эту смесь

42072 26 добавляют маслянистую суспензию 4-метилтио-N-(2-меркаптоэтил)пиридиний метансульфоната (678 мг, 1,45 ммоль; чистота 60 ) в СН CN (1,5 мл), а затем диизопропилэтиламин (0,24 мл, 1,4 ммоль). Смесь перемешивают при

0-5 С в течение 1 ч, Сразу же после добавления основания образуется жел10 товатый осадок. Осадок выделяют фильтрацией и промывают холодным

СН CN (3 мп), в результате чего получают 413 мг желтоватого твердого вещества, которое растирают с 10 . МеОН

15 в воде (5 мп).

Получают 341 мг (0,618 ммоль9

4594%) искомого соединения в виде бельис кристаллов„, т.пл. 118-120 С. Н ЯМР (ДМСО-d69 CFT 20) сР9 ч.

20 на мпн: 1,16 (ЗН, д., J = 6,1 Гц, 1 -СН ), 2, 72 (ЗН, с., -$СН ); 3, 13, 7 (5H, м); 3, 7-4,3 (2Н, м); 4, 71 (2Н, т., J = 6,3 Гц, -СН Р); 5 15 (1Н, д., J = 4,9 Гц, ОН); 5,20-5,3525 5,40-5 ° 55 (2Н, АВп СОгСН2 Аг)99 7,70 (2Н, g. J = 8,8 Гц, нитрофенил-HS);

7,97 (2Н, g., J == 7,01"ц, пиридиноHS) 8,25 (2Н, g„ J = 8,8 Гц, нитрофенил-HS); 8,76 (2Н, g99 3 = 7, 1 Гц, 30 пиридино-Н).

ИК (нуйол) VA,„,, см : 3250 (ОН);

1775 (p -лактам),", 1700 (сложный эфир);

1625 (пиридинио).

УФ (абс. EtOH) AM «, нм: 308 (4, 47x10") ° с,+ 24,8 (С 0,5, MeOH) .

Вычислено, : С 50 56; Н 4,95;

N 7937.

С Н NOSC1ИО

40 Найдено,,: С 50,63; Н 4,72;

N 6,89.

В. (5R)3-(2-(4-Метилтиопиридино)этилтио)-(6S)- ((1К)-оксиэтил )-7-оксо"

1-азабицикло(3,2.0)гепт-2-ен-2-карбо45 ксилат. (5R) PNB 3- (2- (4-.метилтиопиридинио) этилтио)- (6S} -((1К) -окс из тил 3-7оксо-1-азабицикло (3 . 2. 0) г епт-2-ен-2карбоксилатхлорид (380 мг, 0,688 ммоль)

50 растворяют в ТГФ (31,5 мп) и фосфатном буфере рН 7940 (31,5 мл, 0,05 М, Фишер) и разбавляют при помощи Et 0 (31,5 мл) . Этот раствор смешивают с

10%-ныл Pd-С (380 мг, Енгельхард) и гидрогенизуют при давлении 2,461 кг/см на вибраторе Парра при комнатной температуре в течение 1 ч. Водный слой фильтруют через целит с целью удаления катализатора, а затем прокладку

7? 28

ИК (нуйол) > „„,, см . 3320 (м., ОН); 1780, 1765 (с., C=0 (З-лактама), 1700, 1695 (и., C=0 сложного эфира);

1520 (с., НО, ) Н ЯМР (ДМСО-d ) с ", ч.на млн:

9,01 (1Н, широкий с., Н-3 ароматический); 8,75 (1Н, широкий д., J =

= 5,4 Гц, Н-6 ароматический); 8,357, 9 5 (4Н, м., Н-ароматический); 7, 70 (2Н, д., J = 7,7 Гц, Н-ароматический); 5,37 (2Н, центр в ABq, J = 13 Гц, СН PNB); 5,17 (1Н, д., J = 4,9 Гц, ОН), 4,87 (2Н, т., J = 6,3 Гц, СН -+!

4,35-3,75 (2Н, м., Н-5 и Н-1 ); 4,00 (ЗН, с., ОСН,), 3,56 (часть т °, = 6,3 Гц, СН ); 3,5-3,20 (ЗН, м., Н-б, Н-3); 1, 16 (ЗН, д., J = 6, 1 Гц, СН CH0) .

Б. 3-(2- (3-Метокси-1-пиридиний)этилтио J-6 a(- 1 -(R)-оксиэтил1-7оксо-1-азабицнкло (3.2. О) гепт-2-ен-2карбоксилат.

Раствор PNB 3-(2-(3-метокси-1-пиридинийхлорид) этилтио 7-6 с -(1 -(R)— оксиэтил J-7-оксо-1-азабицикло (3 ° 2.0)— гепт-2-ен-2-карбоксилата (600 мг, 1,12 ммоль) в ТГФ (25 мл), простом эфире (25 мл) и фосфатном буфере с рН 7,4 (0,1 М, 25 мл) гидрогенизуют на вибраторе Парра с использованием

10Х-ного PdvC (1,1 r) в течение 1 ч при давлении 2,812 кг/см . Смесь разбавляют простым эфиром и водную фазу фильтруют через нагружейную 52 фильтровальную бумагу. Водный слой промывают простым эфиром (2x20 мл), обрабатывают под вакуумом и сливают на обращенно-фазовую хроматографическую колонну на силикагеле. Искомое соединение элюируют водой, содержащей 2 и 5Х ацетонитрила. Соответствующие фракции соединяют и подвергают лиофилизации, в результате чего получают желтое твердое вещество, которое вновь подвергают очистке при помощи жидкостной хроматографии высокого давления.

Получают пенем карбоксилат (150 мг, 387) .

ИК (нуйол) „„, см- : 1750 (с., С=О р-лактама); 1580 (с., карбоксилат) .

Н ЯМР (D О) d, ч.на млн: 8,558 ° 30 (2Н, м., Н-2, ароматический

Н-6); 8,17-7,75 (2Н, м., Н-Ç, Н-4 ароматический); 4,77 (2Н, т., Л =

= 5,9 Гц, СН Ф )»10 (1Н, часть 5 линий, J = 6,3 Гц, Н-1 ); 3,97 (ÇH, 40

27 14420 целита промывают водой (2х5 мл) . Фильтрат и промывочную жидкость соединяют и промывают при помощи Et О (2хЗО мл) .

Водный слой обрабатывают под ваку5 умом с целью удаления органических растворителей, очищают на обращенно, фаз олой хроматографической колонне (С„микробондапэк, 13 r, Уотерз Ассосиэйтс) и элюируют водой. Фракции 10 (поглощение в УФ-спектре в диапазоне

307 нм) собирают (примерно 1 л) и в результате лиофилизации получают

127 мг (0,334 ммоль, 48,5X) искомого соединения в виде желтого порошка.

"Н ЯМР (D 0, CFT-20) d, ч.на млн:

1,20 (ÇH, д., J = 6,4 Гц, 1 -СН );

2,64 (ÇH, с., -БСН ); 2, 81 (2Н, м., -SCH; 3,19 (1Н, дед» 1 а-1 =

= 6,1 Гц, Jg = 2,6 Гц, 6-Н); 3,32 20 (2Н, д.д,, 7 = 11 Гц, Л = 5,5 Гц, 4Н);

3,92 (1Н, д.д., J = 9,2 Гц, J =

2,6 Гц, 5-H) 4, 1 (1Н, м., 1 -Н);

4,61 (2Н, т., J = 5,9 Гц, -СН Н );

7,70 (2Н, g Л = 7,1 Гц, ароматичес- 25 кий -HS) 8,40 (2Н, g J = 7, 1 Гц, ;ароматический -HS).

HK(KBr диск) с) „, см : 3400 (OH); 1750 (р -лактам); 1630 (пирйдиний), 1590 (карбоксилат). 30

УФ (Н О) Л „„„нм: 231 (Е 9800);

307 (Е ? 5000) .

ГЫ2п+ 3,14 (С 0,5, Н,О).

Пример 25. А. PNB 3- (2- (3метокси-1-пиридинийхлорид) этилтио f 35

6 o(— (4 -(R)-оксиэтил -7-оксо-1-азабицикло (3 . 2 . 0) г епт-2-ен-2 -кар бок сил ат.

Холодный (О С) раствор PNB 6 c(-(1— (R)-оксиэтил)- 3,7-диоксо-1-азабицикло(3.2.0)гептан-2-карбоксилата (1,04 г, 3 ммоль) в ацетонитриле (t2 мл) обрабатывают по каплям диизопропилэтиламином (0,63 мл, 3,6 ммоль) и дифенилхлорфосфатом (0,75 мл, 3,6 ммоль) и перемешивают при О С 45 в течение 30 мин. Полученный фосфат обрабатывают 1-(2-меркаптоэтил)-3метоксипиридиний метансульфонатом (1,14 г, 4,30 ммоль) в СН CN (7 мл) и диизопропилэтиламином (0,63 мл, 50

4,30 ммоль), перемешивают в течение

30 мин, и охлаждают до температуры

-10 Ñ, которую поддерживают в течение 30 мин. Твердое вещество, которое выпадает в осадок из смеси, выделяют фильтрацией, промывают холодным ацетонитрилом (2. мл) и сушат, в результате получают искомое соединение (1,32 г, 82X).

29 14420 с., OCH, ); 3,85, 3,82 (2 линии, часть д.т, 1 = 2,6 Гц, часть Н-5); 3,42 (2Н, т., 3 = 5,9 Гц, СН -S) 3,25 (1Н, д.д., J = 6,1 Гц, J = 2,6 Гц, Н-6); 2,99-2,60 (2Н, 6 линии, часть

Н-4); 1,20 (ЗН, д., J = 6,4 Гц, CH,) ..

УФ (Н О, С 0,05) Д ллсюкс, нм: 290 (E 105173; 223 (Е 6643).

t

Пример 26. А. PNB (5R, 6S)3-(2-(3-Метилтиопиридино)этилтио3-6,: — Е1-(R) -оксиэтил)-7-оксо-1-азабицикло(3.2.0)гепт-2-ен-2-карбоксилат хлорид,15

Раствор PNB (5R, 6S)-6- 1-(R)-оксиэтил 3-3,7-диоксî-1-азабицикло(3.2.0)гептан-2-карбоксилата(0,522 r, 1.,50 ммоль) в 7 мп сухого ацетонитрила охлаждают до 0 С, затем по каплям Zp добавляют диизопропилэтиламин (0,287 мп, 1,65 ммоль). В полученный желто-коричневый раствор добавляют по каплям дифенилхлорфосфат (0,342 мл, 1,65 ммоль) и реакционную смесь вы- Z5 держивают при 0 С в течение 30 мин.

Затем добавляют диизопропилэтиламин (0,313 мл, 1,80 ммоль) и раствор 3метилтио-1-(2-меркаптоэтил)пиридиний хлорида (0,398 r, 1,80 ммоль) в ЗО

0,70 мл сухого ДМФ. Примерно через

1 мин после окончания добавления осадок отделяют от реакционной смеси и затем охлаждают до -10 С (эта температура поддерживается в течение 35

10 мин), в результате чего получают твердую массу оранжевого цвета. Это твердое вещество растирают с ацетонитрилом, остаток отделяют фильтрацией, промывают ацетонитрилом, затем 40 ацетоном и сушат под вакуумом. Получают продукт (0,455 r, 55 ) в виде твердого вещества кремового цвета.

Собранный фильтрат выпаривают, в ре зультате чего получают желтое масло,которое переносят в минимальный объI о ем ацетонитрила и охлаждают до 0 С

{эту температуру поддерживают в течение 30 мин). /

В результате фильтрации этой сме" си получают дополнительно 0,139 r продукта в виде светло-жеЛтого твердого вещества. Общий выход составляет 0,594 г (72 ).

ИК (KBr) 9„,„-, см . 3345 (широкий, -ОН); 1770 (CO p -лактама); 1680 (-СО РИВ) „ Й ЯМР (Й -ДМСО) сР, ч. на млн:

8,98-7,96 (м., 4H, пиридиний аромати72 Зо ческий); 8,20-7,65 (ABq, J = 7,0 Гц, 4Н, ар оматический PNB) 5, 53-4,80 (м., 4Н); 4,3-3,6 (м., 2H); 3,6-3,25 (м., 6Н), 2,66 (с., ЗН, S-Ме); 1,16 (д., J = 6,0 Гц, ЗН, CHMe) .

B. (5R 6S) -3- 2-(3-Метилтиопиридино) этилтио )-6- f f - (R) -оксиэтил 1-7оксо-1-азабицикло (3. 2. О) гепт-2-ен-2карбоксилат.

В смесь PNB (5R, 6S)-3-(2-(3-метилтиопиридинил)этнлтио j-6-(1-(R) оксиэтилj-7-оксо-1-азабицикло(3.2.0)гепт-2-ен-2-карбоксилат хлорида (0,551 г, 1,0 ммоль) и 10 -ного палладия на древесном угле (0,55 г) в 25 мл фосфатного буфера (0,05 М, рН 7,4) добавляют 5 мп ТГФ и 25 мл простого эфира. Эту смесь гидрогенизуют (вибратор Парра) при давлении 2,812 кг/см2 в течение 1 ч.

Реакционную смесь фильтруют через целит и фильтровальную лепешку промывают водой и простым эфиром. Водную фазу отделяют и промывают дополнительным количеством простого эфира (х3). После удаления остаточных органических растворителей под вакуумом водный раствор охлаждают до

0 С и рН обеспечивается на уровне

7,0 при помощи насыщенногo водного раствора NaHCO . Этот раствор сразу же наносят на обращенно-фазовую хроматографическую колонну С . В результате элюирования водой и последующей лиофилизации соответствующих фракций получают 0,25 r ярко-желтого твердого вещества. Этот материал вновь подвергают очистке при помощи обращенно-фазовой жидкостной хроматографии высокого давления, в результате чего получают искомый продукт (О 210 r, 55 ) в виде светло-желтого твердого вещества, ИК (КВг) «с, см - : 3400 (широкий -ОН); 1755 (СО,р-лактама); 1590 (-СО ) . Й ЯМР (D 0) с, ч. на млн: 8,607,76 (м., 4Н, ароматический); 4,76 (т., т = 5,8 Гц, 2H, N-CH ); 4,13 (д.кв., J = J = 6,3 Гц, 1Н, H-1 );

3,95 (д.т., Т = 9,0 Гц, J = 2,8 Гц, 1Н, Н-5); 3,45-2„75 (м., 5H); 2,59 (c., ЗН, S-Ме); 1,20 (д., T = 6,4 Гц, ЗН, CHNe).

УФ (Н,о) Л„„„,,: 296 (8509);

2?3 (E 13005); 231 (E 11576) нм.

t д (рН 7,4, 36,8 С) = 20 ч.

3I 14420

Пример 27. А. PNB 3-(2- (1(2,6-дифенилпиридиний)) -этилтио)-6 a — (1-(R)-оксиэтил )-7-оксо-1-азабицикло(3.2.0)гепт-2-ен-карбоксилат дифенилфосфат.

В холодный (О С) раствор PNB 6 o(—, (1-(R)-оксиэтил )-3, 7-диоксо-1-азабицикло(3.2.0)гептан-2-карбоксилата (0,658 г, 1,89 ммоль) в ацетонитри- 10 ле (6 мл) в атмосфере азота добавляют диизопропилэтиламин (0,394 мл, 2,26 ммоль) и дифенилхлорфосфат (0,468 мл, 2,26 ммоль) . Реакционную смесь перемешивают 30 мин и обрабаты- 1 вают раствором 1-(2-меркаптоэтил)—

2,6-диметилпиридиний метансульфоната (0,720 г, 2, 73 ммоль) в ацетонитриле (3 мл), затем диизопропилэтиламином (0,394 мл, 2,26 ммоль) . Реакционную 20 смесь перемешивают при 0 С в течение

2 ч, разбавляют холодной (О С) водой (27 мл) и сливают на верхнюю часть колонны (2,5х9,0 см) из р -бондапэка

С-18. В результате элюирования смесью 25 ацетонитрил — вода и лиофилизации со-. ответствуюших фракций получают 0,92 г (657) искомого соединения.

ИК (КВт) g, см : 3700-3000 (ОН); 1765 (C=Î р -лактама); 1690 (C=O.ÇÎ сложного эфира PNB) 1620 (пиридиний);

1590 (фенил); 1517 (NO ); 1330 (NO,);

880 (NO ).

Н ЯМР (ДМСО-d ) d, ч,на млн: 1,15 (ЗН, д, J=б 2Гц, СНСНОН); 2 73,7 (1 1Н, СН S 2-СН пиридиния, Н-4, Н-6): 3,7-4,4 (2Н, СЙ СНОН, Н -5);

4, 7 (2Н, м,, СН, Ф); 5, 14 (1Н, д., J = 4, 5 Гц, OH); 5 37 (центр в ABq, J = 132 Гц, СН в PNB); 6775 40 (10H, м., фенил), 7,5-8,7 (7H, пиридиний, атомы Н в PNB) .

У@ (Н О) Ь„„,„,, нм: 274 (E 1415Р);

319 (E 9445) .

Б. 3-12- (1-(2, 6-Диметилпиридиний))- 4S этилтио j-6 — (1-(R)-оксиэтил j-7-оксо-

1-азабицикло (3.2. О) гепт-2-ен-2-карбоксилат.

В раствор PNB 3-(2- (1-(2,6-диметилпиридиний))-этилтио )-б (— (1-(R) б0 оксиэтил )-7-оксо-1-азабицикло(3.2.0)гепт-2-ен-2-карбоксилат пийенилфосфата (0,80 r 1,07 ммоль) в "мокром" тетрагидрофуране (42 мл) добавляют простой эфир (42 мл), калиевый фосфатный буфер моноосновного гидрата окиси натрия (0,15 М, рН 7,22, 21 мл) и 10Х-ный палладий на древесном угле (0,80 г). Полученную смесь гидрогени72 32 зуют в течение 1 ч при давлении

2,812 кг/смг при 23 С и фильтруют через прокладку целита. Два слоя разделяют, а органический слой экстрагируют буфером (Зх8 мл). Водную фазу соединяют, промывают простым эфиром (50 мл), обрабатывают под вакуумом с целью удаления следов органического растворителя и сливают на верхнюю часть колонны (3,0x10,2 см) из -бондапэка С-18..В результате элюирования колонны смесью 57. ацетонитрила — 95X воды и лиофилизации соответствующих фракций получают искомое соединение (0,246 г, 637) в виде желтоватого порошка.

ИК (КВг)

"H ЯМР (Р О) д, ч. на млн: 1,23 (3Н, д., Л = 6,4 Гц, СН СНОН); 2,53,5 (11Н, Н-4, Н-б, СН S, 2CH пирилиния); 3,8-4,4 (2Н, СЙ,СНОН, H-5);

4,5-4,9 (СНгН® HOD); 7164 и 7,74 (2Н, .А часть A, системы, Hm пиридиния); 8,07, 8,16, 8,18 и 8,27 (1Н, В часть А В системы, Hp пиридиния).

Уф (Н,O)лидке, нм: 277 (Е 9733);

300 (Е 8271), (а(1,+ 50,7 (С 0,48, Н О).

Вычислено, Х: С 55 51; Й 6,47;

N 7,19.

С ВН гИ О Я 1,5 НгО

Найдено, Х: С 55,14; Н 6,23;

N 6,46.

Пример 28. А. PNB (5R, 68)3-(2-(2-метилтио-3-метилимидазо-лио)этилтио)-б- (1 (R) -оксиэтил)-7-оксо1-азабицикло (3. 2. 0) гепт-2-ен-2-карбоксилат дифенилфосфата.

В раствор PNB (5R, 6S)-6-(1-(R)оксиэтил )-3, 7-диоксо-1-азабицикло(3,2.0) гептан-2-карбоксилата (1,40 г, 4,0 ммоль) в 50 мл сухого ацетонит-рила при 0 С в атмосфере азота по каплям добавляют дииэопропклэтиламин (0,76 мл, 4,4 ммоль), а затем дифенилхлорфосфат (0,91 мл, 1,4 ммоль) .

После перемешивания реакционной смеси при комнатной температуре в течение 1 ч добавляют диизопропилэтиламин (0,76 мл, 4,4 ммоль), а затем добавляют по каплям раствор 2-метилтио-3-метил-1-(2-меркаптоэтил)имидазолий трифторметансульфоната (2,0 r, 5,9 ммоль) в 5 мл ацетонитрила, Реакционную смесь выдерживают при ком33 . 14420 натной температуре в течение 1,5 ч, а затем концентрируют под вакуумом, в результате чего получают смолу, Эту смолу переносят в воду и наносят на

5 обращенно-фазовую колонну С . В результате элюирования водой, а затем смесью из 20% ацетонитрила и воды и смесью 30% ацетонитрила в воде после лиофилизации соответствующих фракций 10 получают искомый продукт (0,90 r, 30%) в виде светло-желтого твердого вещества.

ИК (КВг) I <+, см- : 3380 (широкий, ОН); 1770 (СО ь -лактама). 15 Н ЯМР (d -ацетон) d, ч. на мпн:

8,35 (широкий с., 1Н); 8,24, 7,78 (ABq, J = 8,8 Гц, 4Н, ароматический);

7,89 (широкий с., 1Н); 7,25-6,91 (м., 10Н, дифенилфосфат); 5,50, 5,25 (ABq, 20

J = 12 Гц, RH, бензиловый); 4,754,27 (м., ЗН); 4,03 (с., ÇH, N-Me);

4 1 5-2,75 (м,, 8Н), 2,59 (с., ЗН, S-Ме); 1,22 (д ., J = 6,2 Гц, ÇH, -CHMe) . 25

Б. (5R, 6S) -3-(2-(2-Метилтио-3 метилимидазолио) этилтио 1-6- (1-(R)— оксиэтил1-7-оксо-1-азабицикло(3,2,0)гепт-2-ен-2-карбоксилат.

В раствор РЫВ (5К, 6S)-3-(2-(2-метилтио-3-метилимидазолио) этилтио )-бf1-(R)-оксиэтил -7-оксо-1-азабицикло(3.2.0)гепт-2-ен-2-карбоксилат дифенилфосфата (1,20 r, 1,56 ммоль) в смеси 70 мп ТГФ, 70 мп простого эфира и 31 мл фосфатного буфера (0,05 М, рН 7,4) добавляют 1,2 г

10%-ного палладия на древесном угле.

Эту смесь гидрогенизуют (Парр) при . 40 давлении 2,46 1 кг/см2 втечение 55мин.

Реакционную смесь фильтруют через целит, а фильтровальную решетку промывают водой и простым эфиром. Водную фазу отделяют, охлаждают до О С, рН 45 обеспечивают на уровне 7,0 при помощи насыщенного водного раствора

NaHC0 . После удаления остаточных органических растворителей под вакуумом водный раствор наносят íà ohpa- 50 щенно-фазовую хроматографическую колонну С, . В результате элюирования водой, а затем смесью 8% ацетонитрила-в Н,0 после лиофилизации соответствующих фракций получают 0,25 г твердого вещества. Этот материал вновь подвергают очистке при помощи обращенно-фазовой жидкостной хроматографии высокого давления.

72 34

Получают искомый продукт (0,114 г, 19%) в виде не совсем белого твердого вещества.

ИК (КВт) „,„„,., см : 3420 (ОН);

1750 (СО р-лактама); 1590 (-СО, ) .

Н ЯМР (D О) У, ч.на млн: 7,58. (с., 2Н) g 4,52 (т., Л = 6 Гц, 2Н);

4,28-3,82 (м., 2Н); 3,90 (с °, ÇH, N-Ме); 3,40-2,87 (м., 5H) 2,40 (с., 3H, S-Ме); 1,20 (д., J = 6,4 Гц, ЗН, -CHMe). (H2О) Я оюкс, нмй 297 (E. 7572);

262 (Е 6259) gð 222 (Е 7955) нм.

Пример 29. А. PNB (5R, 6$)3-Г2-(3-аминопиридинио) этиптио1-6(1- (R) -оксиэ тил )-6-окс о-1-аз а бицикло(3.2.0) гент-2-ен-2-карбоксилат дифенилфосфат.

В раствор PNB (5К, 68)-6-(1-(R)— оксиэтил)-3,7-диоксо-1-азабицикло(3.2.0)гептан-2-карбоксилата (0,696 r, 2,0 ммоль) в 10 мп сухого ацетонитрила при 0 С в атмосфере азота по каплямдобавляют диизопропилэтиламин (0,382 мп, 2,2 ммоль, затем дифенилхлорфосфат (0,456 мп, 2,2 ммоль) . После перемешивания при 0 С в течение 30 мин добавляют раствор 3-амино-1-(2-меркаптоэтил) пиридииий хлорида (0,475 г, 2,5 ммоль) в

1 мп сухого ДМФ, затем дополнительное количество диизопропилэтиламина (0,435 мп, 2,5 ммоль). Реакционную смесь выдерживают при 0 С в течение

1,5 ч, а затем концентрируют под вакуумом. Полученную в результате смолу переносят в смесь ацетоннтрил— вода (1:1) и наносят на обращеннофазовую хроматографическую колонну

С . В результате элюирования водой, затем смесью 20% ацетонитрила в во18 де и последующей лиофилизации соответствующих фракций получают искомый продукт (0,730 г, 50%) в виде твердого вещества бежевого цвета.

ИК (КВг) 1„, cM : 3330 (широкий, OH).; 3180 (широкий, ИН ); 1770 (C0 р -лактама); 1690 (-СО PNB) .

Н ЯМР (d6-ДМСО), ч.на мпн:

8,29-7,63 (м., 8 ароматический);

7,2-6,7 (м., 10Н, дифенилфосфат);

5,47, 5, 18 (ABq, J = 14 Гц, 2Н, бензиловый); 4,73-4,45 (и., 3H); 4,23,8 (м,, 1H) 3,6-2,6 (м., 8H) 1, 15 (д., J = 6,2 Гц, 3H, CHMe}.

Б. (5R, б S) -3- (2- (3-аминопиридинио) этилтио16-(1-(R) -оксиэтил l-735

14420 оксо-1-азабицикло (3.2. 0) гепт-2-ен-, 2-карбоксилат.

В смесь PNB (5R, 6S)-3-(2-(3-аминолиридинио) -этилтио f-6- (1- (R) -окси5 этил -7-оксо-1-азабицикло (3. 2 ° О) гепт2-ен-2-карбоксипат дифенилфосфата (0,730 r, 1,0 ммоль) и 10%.-ного палладия на древесном угле (0,7 r) в

25 мп фосфатного буфера (0,05 М, 10 рН 7,4) добавляют 8 мл ТГФ и 20 ип простого эфира. Затем эту смесь гидрогенизуют (Парр) при давлении

2,812 кг/см в течение 1 ч. Полученную смесь фильтруют через прокладку целита, а фильтровальную лепешку промывают водоч и простым эфиром. Водную фазу отделяют, промывают простым эфиром (х2), а затем остаточные летучие материалы удаляют под вакуумом.

Водный раствор сразу наносят на обращенно-фазовую хроматографическую колонну С,, которую элюируют водой.

В результате лиофнлизации соответствующих фракций получают 0,45 г не

25 совсем белого твердого вещества.

Этот материал вновь подвергают очистке при помощи обращенно-фазовой жидкостной хроматографии высокого давления.

Получают искомый продукт (О, 123 r, 35%) в виде твердого вещества цвета слоновой кости.

ИК (КВг) q „„„,, см : 3340 (широкий); 1750 (широкий, СО р -лактама); 35

1580 (шнрокий, -CO 2). Н ЯМР (D О) с, ч.на млн: 8,077,59 (м., 4Н, ароматический); 4,61. ,(т., J = 5,8 Гц, 2Н, N CH ); 4,14 (д., кв,, J = J = 6,3 Гц, 1Н, Н-1 ); 40

397 (дт., J = 92 Гц, J = 26 Гц, 1Н, Н-5); 3,38 (т., J = 5,8 Гц, 2Н, Я-СН ); 3,24 (д.д., J = 6,0 Гц, J =

= 2,6 Гц, 1Н, Н-6); 3,17-2,57 (м,, 2Н, Н-4); 1,21 (д., J = 6,3 Гц, ЗН, 45

СНМе) .

УФ (Н20) Л лдкс ъ нмй 299 (Е 7949);

256 (Е 8822) .

t,t (pH 7,4, 36,8 С) = 18,5 ч.

Пример 30. А. (5R, 6S) PNB

3- (1-(R,S)метил-2-(1-пиридиний)-этилтио )-6- (1-(R)-оксиэтил)-7-оксо-1азабицикло(3.2.0)гепт-2-ен-2-карбоксилат дифенилфосфат.

В холодный (О С) раствор (5R9 6S)

PNB 6- (1-(R)-оксиэтил 1-. 3,7-диоксо-1азабицикло(3.2.0)гептан-2-карбоксила" та (0,523 г,1,5 ммоль) в ацетонитри72 36 ле (6 мл) в атмосфере азота добавляют диизопропилэтиламин (0,314 мл, 1,8 ммоль), а затем дифенилхлорфосфат (0,373 мп, 1,8 ммоль). Реакционную смесь перемешивают в течение

30 мин и обрабатывают раствором 1(2-меркапто-2-метилэтил)пиридиний метансульфоната (0,539 г, 2, 16 ммоль) в ацетонитриле (2 мп) и дииэолропилэтиламином (0,314 мл, 1,8 ммоль).

Реакционную смесь перемешивают при

0 С в течение 1. ч, разбавляют холодной водой (О С) (24 мл) и подвергают хроматографии на бондапэке С-18, имеющем форму колонны (2,5х8,5 см) с использованием 25-50% ацетонитрила в воде в качестве элюирующих растворов.

Получают 1,07 г (97%) искомого со-. единения в виде желтоватого порошка после лиофилизации;

ИК (KBr) 4„„,, cM : 3700-3100 (ОН); 1770 (C=Op-лактама); 1695 (С=О

PNB сложного эфира); 1630 (пиридиний);

1590 (фенил); 1518 (NO ); 1348 (ХО );

885 (NO ) °

Н ЯМР (ДИСО-d<) J, ч,на млн: 1,14 (д., J = 6,1 Гц, ЗН, СН СНО); 1,33 (д., J = 6,4 Гц, ЗН, СН,CHS) 4,6-5,0 (м., СН,И+); 5,14 (д., J = 5,2 Гц, 1Н, ОН); 5,37 (центр ABq, J = 12,4 Гц, 2Н, СН в РИВ); 6,6-7,5 (м., 10Н, фенил фосфата); 7,69 (д., 3 = 8,7 Гц, 2Н, Но в PNB); 8,0-8,4 (м., 4Н, Hm, PNB, Hm пиридиния); 8,4-8,8 (м., 1Н, Hp пиридиния); 9,08 (д., J = 5,6 Гц, 2Н, Но пиридиния), УФ (Н О) Л „,, нм: 263 (Е 13325);

308 (Е 8915) .

Вычислено, %:

С5752;Н510;N559;S427. 36 36И О с

Найдено, %: С 57,76; Н 4,96;

N 5,36; $ 4,35.

Б. (5R, 68)3- 1-(К)-Метил-2-(1-пиридиний)этиптио)-6- (1-(R)-оксиэтил Я7-оксо-1-азабицикло(3.2.0)гепт-2-ен2-карбоксилат.

В растворе (5R, 6S) PNB 3-(1-(R, S)метил-2-(1-пиридиний)этилтио )-6(1-(R)-оксиэтил )-7-оксо-1-азабицнкло(3.2.0)гепт-2=ен-2-карбоксилат дифенилфосфата (0,60 г, 0,82 ммоль) в

"мокром" тетрагидрофуране (33 мп) добавляют простой эфир (33 ип), калиевый фосфатный буфер моноосновного гицрата окиси натрия (17 мл, О, 15 Я, рН 7, 22) и 10%-ный палладий на дре1442072

l

УФ (Н О) Лм кс нм: 263 (F 9038);

309 (Я 6394) .

Вычислено, 7: С 59, 16; Н 5 35;

N 5,31.

Найдено, 7.: С 58,95; Н 5,15;

N 5,57.

Б. (5К, 6Б)-3- (2- Е(К или S)-(fпиридиний) )-1-(8 или S)-циклогексилтио -6- (1-(R)-оксиэтил )-7-оксо-137 весном угле (0,60 г) . Полученную смесь гидрогенизуют в течение 1 ч при давлении 2,812 кг/см и 23 С.

Два слоя разделяют. Органический слой экстрагируют водой (Зх7 мл). Водные

5 слои соединяют, фильтруют через прокладку целита, промывают простым эфиром (Зх20 мп) и подвергают хроматографии на бонцапэке С-18 в форме колониы10 (2,5х9 5 см) с использованием воды в качестве элюирующего агента, в результате чего получают 0,18 r (637) смеси диастереоизомеров. Два диастереоизомера (соединения А и Б) разделяют при 15 помощи жидкостной хроматографии высокого давления (бондапэк С-18) с использованием воды в качестве элюирующего растворителя °

Изомер с малым временем удерживания — соединение Б(0,068 г, 237), ИК (КВт) q „„,, см ": 1770 (С=О

/3 -лактама); 1633 (пиридиний); 1593 (карбоксилат) .

Н Нмр (D О) сР ч,на мпн: 1,20 (д., 25

J = 6,3 Гц, ЗН, СН,СНО); 1,42 (д., J = 6,9 Гц, ЗН, CH CHS) 2,3-3,2 (м., 3Н, Н-4, Н-6); 3,5-3,9 (м., 1Н, SCH);

3,9-4,2 (м., 2Н, H-5, СН СНО)р 4,35, 1 (ме, СН М ; 7,8-8, 2 (мур 2Нь Hm 30 пиридиния); 8,4-8,7 (м., 1Н, Hp пиридиния), 8, 7-9,0 (м., 2Н, Но пиридиния) .

УФ (Н О) 3 нм: 260 (Е 6727);

300 (Е 8245) .

ЕЫЗ2З- 39,3 (C, H 0), — 12,6 ч (измерено при концентрации

10 4 М в фосфатном буфере рН 7,4 при

36,8 С).

Изомер с более продолжительным временем удерживания — соединение А (0,081 r, 287) .

ИК (КВг) g „„,, см ; 1755 (С=О Рлактама); 1630 (пиридиний), 1590 (карбоксилат).

"Н ЯИР (D О) с, ч.на млн: 1.,18 (д., т = 6,3 Гц, ÇH, СН,CHO); 1,40 (до, Х = 7,0 Гц, ЗН, СН СН) у 2у84 (д, Х = 9,3 Гц, 2Н, Н-4); 3,26 (д.д., J= 2,7Гц, 3=5,9Гц, 1Н, Н-6), 3,4-4,2 (м., 3H> SCH> СН, СНО, Н-5);

4,2-5 1 (м., СН М ); 7,7-8,1 (м., 2Н, Hm пиридиния); 8,3-8 65 (м., iH

Hp пиридиния); 8,65-8,9 (м., 2Н, Но пиридиния) . УФ (H,0) Л м 4„, нм: 259 (Е 5694); 296 (E 6936) .

55 < 3 2з+ 96 9 (С 0 5, Н О), д

15,6 ч (измерено при концентрации

10 М в фосфатном буфере с рН 7,4 при 36,8 С).

38

П р имер 31. А,(5R, 6S) PNB

3-12- ((К или S)-(1-пиридиний))-1(R или S)-циклогексилтио)-6-Е1-(R)оксиэтил -7-оксо-1-азабицикло(3. 2.0)гепт-2-ен-2-карбоксилат дифенилфосфат.

В холодный (О С) раствор (5R, 6S)

PNB 6- L f-(R)-оксиэтил J-З, 7-диоксо-1азабицикло(3, 2.0) гептан-2-карбоксилата (1,37 г, 3,93 ммоля) в ацетонитриле (15 мп) в атмосфере азота добавля" ют диизопропилэтиламин (0,822 мл, 4,7 ммоль) и дифенилхлорфосфат (0,979 мп, 4,7 ммоль). Полученный раствор перемешивают в течение

30 мин и обрабатывают раствором

N-1-(2-меркапто-1-циклогексил)пиридиний метансульфоната (1,64 r, 5,66 ммоль) в ацетонитриле (4,7 мл), а затем диизопропилэтиламином (0,822 мл, 4,7 ммоль) . Реакционную смесь перемешивают при 0 С в течение 1 ч, разбавляют холодной (О С) водой (75 мп) и подвергают хроматографии на бондапэке С-18 с использованием 25-507 ацетонитрила в воде в качестве элюирующего растворителя.

После лиофилизации соответствующих фракций получают 1,.9 г (537) искомого соединения.

ИК (КВГ) макс, см : 3700-3000 (ОН) р 1770 (С=О р -лактама); 1700 (C=0 PNB сложного эфира); 1628 (пиридиний); 1590 (фенил) 1515 (NO,);

1345 (МО ); 880 (ХО,) Н ЯИР (D О) d, ч. на млн: 1,13 (д., J = 6,1 Гц, ÇH, СН,СНО); 1,22,5 м., 8Н, Н циклогексила); 2,73,5 (м., Н-4, Н-6, CHS); 3,5-4,4 (м., 2Н, СН СНО, Н-5); 4,4-5,0 (м., 1Н, CHN ); 5,30 (центр в АВ, J = — 12,8 Гц, СН в PNB); 6,7-7,4 (м., 10Н, фенил); 7,65 (д., J = 8,6 Гц, 2Н, Но в PNB); 7,9-8,4 (м., 4Н, Нв в PNB, Н пиридиния); 8,4-8,8 (м., 1Н, Но пиридиния); 9,0-9,4 (м., 2Н, Но пиридиния).

39

14420 азабицикло (3. 2. О) гепт-2-ен-2-карбоксилат.

В раствор (5R, 6S) PNB 3-{ 2- f(R или $)-(1-пиридиний) j1-(R нли S) циклогексилтио -6- 51-(R) -оксиэтил - -75 оксо-1-азабицикло (3. 2. О) гепт-2-ен-2карбоксилат дифеннлфосфата (1,85 г, 2,34 ммоль) в "мокром" тетрагидрофуране (96 мл) добавляют простой эфир 10 (96 мл), калиевый фосфатный буфер моноосновного гидрата окиси натрия (О, 15 М, рН 7,22, 50 мл) и 10Х-ный палладий на древесном угле (1,9 г).

Полученную смесь гидрогенизуют при

23 С при давлении 2,812 кг/см в течение 1,25 ч. Органический слой отделяют и промывают водой (3x20 мл).

Водные растворы фильтруют через прокладку целита, промывают простым эфи- 20 ром (2x60 мл), обрабатывают под вакуумом с целью удаления следов органических растворителей и подвергают хроматографии на колонне из бондапзка С-18 (4,5х9 см) с использованием 2б

О-5Х ацетонитрила в воде в качестве элюирующего растворителя. После лиофилизации получают 0,705 r (76Х) смеси диастереоизомеров. Диастереоизомеры (соединения А и Б) разделяют 30 при помощи жидкостной хроматографии высокого давления (бондапэк С-18) с использованием ацетонитрила (4Х) в воде в качестве элюирующего растворителя .

Диастереоизомер с малым временем удерживания — соединение А (0,29 г, 31Х) .

ИК (КВг) 4 маркс, см: 1750 (С=О /3- лактама); 1620 (SH, пиридиний); 1685 (карбоксилат) . Н ЯМР (D О) d, ч. на млн: 1,21 (д., J = 6,3 Гц, ЗН, СН СНО); 1,42,5 (м., 8Н, Н циклогексила); 2,53,05 (м., 2Н, H-4); 3,05-3,25 (м., 1Н, Н-6); 3,3-3,7 (м., 1Н, СН); 3,9-, 4,3 (м., 2Н, Н-5, СН СНО); 4,3-4,8 (м., CHN ); 7,8-8,2 (м., 2Н, Hm пиридиния); 8,3-8,7 (м., 1H Hp пиридиния); 8,8-9,1 (м., 2H Но пиридиния) .

УФ (Н О) Лддкс, нм: 260 (с . 7123); ,300 (K 8685) .

Е 7 Р+ .6,2 (С 0,63, Н,0), С 1(1 — 16,6 часа (измерено при концентрации 10 M в фосфатном буфере с рН

7,4 при 36,8 С) .

Вычислено, Х: С 56,59; Н 6,55;

N 6,60; S 7,55.

72 40

С 0Н N О Я 2Н О

Найдено, 7.: С 56,83; Н 6,47;

N 6,59; S 7,43.

Диастереоизомер с более продолжительным временем удерживания — соединение Б (0,35 г, 38Х).

ИК (КВг) 4„„„,, см . 750,(С=О f3 лактама); 1622 (SH, пиридиний); 1588 (ка боксилат) .

Н ЯМР (D О) с, ч. на млн: 1,19 (д, 3= 64Гц, ЗН, СНСНО); 132 5 (м., 8H, Н циклогексила ; 2, 5-3, 1 (м., 2Н, Н-4); 3,1-3,3 (м., 1Н, Н-6);

3,3-3,8 (м., 2Н, Н-5, CHS) 4, 1 (центр м. 1Н, СН СНО); 4,25-4,7 (м., 1Н, CHN ); 7,8-8, 1 (м., 2Н, Нш лиридиния);

8,3-8,7 (м., tH Ho пиридиния)," 8,759,0 (м., 2Н, Но пиридиния).

УФ (Н,О) Д „„, нм: 259 (K 5992);

296 (Е 7646) .

Ы7 + 65,3 (С 0,43, Н,О), и

20„2 ч (измерено лри концентрации

10 M в фосфатном буфере при рН 7,4 при 36,8 С) °

Пример 32, A. PNB 3-(2-(Nметилтиоморфолинийдифенилфосфат) этилтио)-6o(- (1 -(R) -оксиэтил)-7-оксо-1азабицикло (3. 2. 0) гепт-2-ен-2-карбоксилат.

Холодный (ледяная баня) раствор

PNB 60(- (1 -(R)-оксиэтил )-3, 7-диоксо1-азабицнкло (3. 2. О) г еп тая-2-карбоксилата (557 мг, 1,60 ммоль) в СН С (8 мл) обрабатывают добавлением по каплям диизопропилэтиламина (0,366 мл, 1,92 ммоль) и дифенилхлорфосфата (0,400 мл, 1,92 ммоль) и перемешивают в течение 30 мин. Реакционную смесь дбрабатывают N-метил-N- (2-меркаптоэ тил) тиоморфолиний метансульфонатом (893 мг, 2,29 ммоль) в СН,CN (4 мл) и диизопропилэтнламнно (0,336 мл, 1,92 ммоль) и перемешивают в течение

30 мин. Раствор разбавляют водой (20 мл) и сливают на колонну обращенно-фазовой хроматографии из силикагеля. Искомое соединение элюируют смесью 50Х ацетонитрила в воде ° Соответствующие фракции соединяют, обрабатывают под вакуумом в течение 2 ч и лиофилизуют.

Получают искомое соединение (1,01 r, 85X) .

HK (нуйол) "макс ь cx 1760 (c °

С=О у-лактама); 1510 (с., NO,) ..

ЯМР (ДМСО-с1 ) d, ч.на млн:

8,25 (2Н, д., J = 8,8 Гц, Н-ароматический); 7, 70 (2Н, д., J 8,8 Гц, 41 14420

H-ароматический); 7, 33-6,84 (10Н, м., Н-ароматический); 5,37 -2Н, центр

ABq, J = 14,2 Гц, СН ) 5,14 (1Н, д., J 4,5 Гц, ОН); 4,35-3,80 (2Н, м., Н-1 и Н-5); 3,75-3,45 (6Н, м., СН М ); 3,3 1 (ЗН, с., СН Н, ); 3,452,75 (9Н, м., СН S, Н-б, и Н-4);1,15 (3H, д., J = 6,2 Гц, СН ).

Б. 3-(2-(N-Метилтиоморфолиний) 10 этилтио1-6d- Г1 -(R)-оксиэтилj-7-оксо1-азабицикло(3.2.0)гепт-2-ен-2-карбоксилат.

Раствор PNB 3-(2-N-метилтиоморфолинийдифенилАосфат)этилтио16 0 в j1 — (R)-оксиэтил -7-оксо-1-азабицикло(3.2.0}гепт-2-ен-2-карбоксилата (1,31 г, 1,76 ммоль) в 0,1 М фосфатном буАере с рН 7,4 (48,8 мл), тетра. гидрофуране (20 мл) в диэтиловом 20 простом эфире (20 мп) подвергают гидрогенизации над 10Х.-ным Pd (1,5 г) на вибраторе Парра в течение 1 ч при давлении 2,812 кг/см2. Реакционную смесь разбавляют диэтиловым простым 25 эфиром (40 мн) и Фазы разделяют. Орга-. ническую фазу промывают водой (2х5 мн) .

Водные фазы соединяют, фильтруют через нагруженную 52 Аильтровальную бумагу, промывают диэтиловым простым 30 эфиром (2х20 мн) и обрабатывают вакуумом. Водный раствор сливают на колонну обращенно-Аазовой хроматографии на силикагеле и искомый карбапенем элюируют смесью 5Ж ацетонитрила в во- З5 де. Соответствующие фракции соединяют и подвергают лиофилизации.

Получают искомое соединение в виде аморфного твердого вещества (205 мг, 31X)

40 ик (нуйол) ммакс см 1750 (c ° *

C=0pi-лактама); 1590 (с., С=О). Н ЯМР (D О) d, ч.на млн: 4,253,95 (2Н, м., Н-1, Н-5) g 3,70-3,40

° (6H, м., СН Я ) р 3,35 (1Н, д,д, ° 4g

J = 6,1 Гц, J = 2,6.Гц, Н-6); 3,08 (ЗН, с., СН,N ) З,Я5-2,75 (8Н, СН S

Н-4); 1,24 (ÇH, до, J = 6,4 I öð CH ) э

УФ (Н,О, С 0,062) Я длакс, нмй 299 (10962) . я0

t = 17,7 ч (О 1 М, рН 7, фосфатный буфер, 37 С).

Пример 33. А. PNB (5R, 6S)3- (2-(1-метилморфолино) этилтио )-6— (R) -1-Оксиэтил )-7-Оксо-1-азабициклО- бБ (3.2.0) гепт-2-ен-2-карбоксилат дифенилфосАат.

В раствор PNB (5R, 6$)-б-5(R)-1оксиэтил)-3,7-диоксо-1-азабицикло72 42 (3 . 2. 0) г ептан-2-карбоксила та (О, 348 r, 1,0 ммоль) в 25 мн сухого ацетонитрила добавляют по каплям диизопропилэтиламин (0,191 мн, 1,1 ммоль), а затем дифенилхлорфосфат (0,228 мл, 1,1 ммоль) при 0 C в атмосфере азота.

После перемешивания при О С в течение 1 ч добавляют диизопропилэтиламин (0,226 мн, 1,3 ммоль) в полученный в результате энолфосфат, а затем

1-метил-1-(2-меркаптоэтил)морфолинийтрифторметансульфонат (0,373 r, 1,2 ммоль). Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 1,5 ч, а затем концентрируют под вакуумом. Остаточный материал переносят в воду и наносят затем на колонну обращенно-фазовой хроматограФии С18 .

В результате элюирования водой, а затем смесью 20Х ацетонитрила в воде и смесью 307. ацетонитрила в воде и последующей лиофинизации соответствующих фракций получают искомый продукт (0,360,г, 40X) в виде аморфного твердого вещества.

ИК (пленка) 4„„,„, см : 3300 (20Н);

1770 (СО р-лактама)g 1700 (-СО,PNB).

"Н ЯМР (d<-ацетон) с, ч.на мни:

8,25, 7,80 (ABq, J = 8,6 Гц, 4Н, ароматический); 7,4-6,8 (м., 10H, дифенилфосфат); 5,56, 5,27 (ABq, J =

14,2 Гц, 2Н, беизиловый); 4,42 (д.т., Л = Л 9,2 Гц, J = 2,7 Гц, 1Н, Н-5); 4,1-2,7 (м., 17Н); 3,40 (с., 3H, N Me); 1,22 (д., Л = 6,2 Гц, ЗН, -CHMe).

Б. (5R, 6S)-3-(2- (1-метинморАолино)этилтиоf-6- f(R)-1-оксиэтил )-7оксо-1-азабицикло(3.2.0)гент-2-ен2-карбоксилат.

В раствор PNB (5R, 6S)-3-С2-(1метилморфолино} этилтио g-6- ((R) -1оксиэтил)-7-оксо-1-азабицикло (3.2. О)— гепт-2-ен-2-карбоксилат дифеиипфосфата (0,360 r, 0,49 ммоль) в 13 мн

Фосфатного буфера (0,05 М, рН 7,4) добавляют 0,36 r 10X-ного палладия на древесном угле, 20 мн тетрагидрофурана и 20 мп простого диэтилового эфира. Эту реакционную смесь подвергают гидрогенизации (Парр) при давлении

2,250 кг/см в течение 1 ч. Смесь фильтруют через целит, а затем фильтровальную прокладку промывают водой и простым диэтиловым эфиром. Водную фазу отделяют, обеспечивая рН на уровне 7,0 добавлением фосфатного бу44

72 низшим алкилом и тио(низшим)алкилом морфолиний или тиоморфолиний, N-замещенные низшим алкилом;

Х - противоион, выбранный из группы, содержащей Cl

Ф

1. Способ получения четвертичных аминоалкилтиолов общей формулы

Составитель Г, Коннова

Редактор Л. Пчелинская Техред А.Кравчук Корректор С. Шекмар

Заказ 6298/58 Тираж 370 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб,, д, 4/5

Производственно-полиграфическое предприятие, г. Ужгород, ул. Проектная, 4

43 14420 фера с рН 7,4. После удаления остаточных органических растворителей под вакуумом водный раствор наносят на колонну обращенно-фазовой хромато5 графин С, . В результате элюирования водой и лиофилизации соответствующих, фракций получают 0,130 r аморфного твердого вещества. Этот материал подвергают повторной очистке при помощи 1О обращенно-фазовой жидкостной хроматографии высокого давления.

В результате получают чистый продукт (0,058 r, 34X) в виде аморфного твердого вещества ° 15

ИК (КВг) 4«„, см : 3420 (широкий, OH);у 1750 (CO p -лак гама); 1590 (С02 ) Н ЯМР (Р 0)сР: 4,35-2,77 (м., 17Н), 3, 18 (с, ЗН, N-Me), 1, 23 (д., J = 20

6,3 Гц, ЗН, CHMe).

УФ (Н О) Л„ „, 300 (6344) нм.

t, z (pH 7,4, 36,8 C) = 18,5 ч.

Формула изобретения 25

HS-A-RX где А — циклогексилен или этилен, незамещенный или замещенный низшим С -С -алкилом;

К„- незамещенный и замещенный низшими BJIKHBDM оксиалкилому 35 тиоапкилом или алкоксигруппой пиридиний, имидазолий, или одновременно замещенный э з отличающийся тем, что сильную кислоту, такую как хлористоводородная, метансульфокислота, паратолуолсульфокислота или трифторметансульфокислота, подвергают взаимо« действию с замешенным или незамещенным пиридином или с замещенным имидазолом,или с N-(низший)алкилзамещенным морфолином или тиоморфолином с последующим взаимодействием с сульфидом общих формул

1 у и или где К, - Н или низший алкил при 50-100 С необязательно в присутствии неполярного органического растворителя, такого как бензол, ксилол, толуол, метиленхлорид.

2. Способ по и. 1, о т л и ч аю шийся тем, что когда используют амин или сульфид жидкости или когда сульфид — жидкость, а аминтвердое вещество, растворимое в жидком сульфиде, реакцию осуществляют без дополнительного растворителя.